Diagnostik von Atemwegserkrankungen

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1 Diagnostik von Atemwegserkrankungen M. Ritzmann, A. Ladinig, A. Palzer Klinik für Schweine, Veterinärmedizinische Universität Wien Tierarztpraxis Scheidegg

2 Diagnostik von Atemwegserkrankungen Abklärung nichtinfektiöser Ursachen

3 Diagnostik von Atemwegserkrankungen Erreger Pathogenität H1N1; H3N2; H1N2 Mycoplasma hyopneumoniae obligat Actinobacillus pleuropneumoniae pathogen PRRSV Pasteurella multocida Bordetella bronchiseptica fakultativ pathogen im Haemophilus parasuis Zusammenhang mit Mycoplasma hyorhinis endogenen und exogenen Chlamydia psittaci Belastungsfaktoren Streptokokken PCV2 Arcanobacterium pyogenes Sekundärerreger Staphylokokken Streptokokken

4 Diagnostik von Pneumonien - klinisch: - mit charakteristischen Symptomen z. B. APP z. B. PRRS

5 Diagnostik von Pneumonien - klinisch: - mit wenig charakteristischen Symptomen z. B. Enzootische Pneumonie, PRDC

6 Diagnostik von Pneumonien - serologisch: - Berücksichtigung maternaler Titer PRRSV bis 5 Wochen PCV2 bis 4-6 (10) Wochen Pasteurella bis 7 Wochen M. hyo bis 9 Wochen APP bis 12 Wochen HPS ca. 5 Wochen - Berücksichtigung Vakzination z. B. M. hyo, PRRS, PCV2

7 Diagnostik von Pneumonien - pathologisch-anatomische Untersuchung:

8 Diagnostik von Pneumonien - Erregernachweis: - Nasentupfer - Tonsillentupfer/-geschabsel - Serum/Plasma - Lungenbioptat - BALF - Lungengewebe

9 Diagnostik von Pneumonien - Erregernachweis: - PRRSV Lunge, BALF - PCV2 Lunge, BALF - Influenza Nasentupfer, Lunge, BALF - M. hyo Lunge, BALF - APP Lunge, BALF - Pasteurella Lunge, Tonsillartupfer, BALF - Str. suis Lunge, Gehirn, BALF - Haemophilus parasuis Lunge, Organe, BALF

10 Eigene Untersuchungen Tiere aus 95 Beständen Tiere klinisch unauffällig Tiere die Anzeichen einer Pneumonie zeigten - klinische Untersuchung - Bronchoalveoläre Lavage - Bakteriologische und molekularbiologische Untersuchung der BALF* (*Institut für Medizinische Mikrobiologie, Infektions- und Seuchenmedizin der LMU und Landeslabor Schleswig- Holstein)

11 90% Anteil positiver Proben aus BALF mittels PCR 80% 70% * Pneumonie 60% klinisch gesund 50% 40% 30% * 20% 10% * 0% M. hyorhinis M. hyopneumoniae Influenza PRCV PCV2 PRRSV-EU * p<0,05

12 Anteil positiver Proben aus BALF mittels BU 90% 80% 70% * Pneumonie 60% klinisch gesund 50% 40% 30% 20% 10% 0% α-häm. Strept. β-häm. Strept. Past. Bord. HPS APP * p<0,05

13 Mehrfachinfektionen bei Bronchopneumonien Mehrfachinfektionen nach Pneumoniegrad 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% klinisch unauffällig ggr. Pneumonie hgr. Pneumonie 5 Keime 3-4 Keime 2 Keime

14 Mehrfachinfektionen bei Bronchopneumonien 2,5 2,0 Pathologiescore 1,5 1,0 0,5 0, Anzahl nachgewiesener Erreger

15 Anteil positiver Proben (PCR) nach Altersgruppen 100% 90% a a,b; d,b p<0,05 80% Saug. Absatz d 70% Vormast Mast 60% a 50% b 40% 30% 20% b b b 10% 0% M. hyorhinis M. hyopneumoniae Influenza PCV2 PRRSV-EU

16 Anteil positiver Proben aus BALF mittels BU 100% 90% Saug. Absatz. a,b: p<0,05 80% Vormast Mast 70% a 60% 50% 40% 30% b b 20% a 10% b 0% α-häm. Strept. β-häm. Strept. Past. Bord. HPS APP

17 Erregerassoziationen von Mycoplasma hyopneumoniae Pasteurella multocida Amass et al., 1994 Ciprían et al., 1988 Feenstra et al., 1994 PCV2 Opriessnig et al., 2004 Thacker, 2004 Mycoplasma hyopneumoniae PRRSV Thacker et al., 1999 Thacker et al., 2000 Thanawongnuwech et al., 2004?? Bordetella bronchiseptica Mycoplasma hyorhinis

18 Erregerassoziationen von Mycoplasma hyopneumoniae Pasteurella multocida PCV2 Mycoplasma hyopneumoniae PRRSV Bordetella bronchiseptica Mycoplasma hyorhinis Neben den beschriebenen Assoziationen können Dreierkombinationen beobachtet werden

19 Glässersche Krankheit Erreger: 1910: Zusammenhang Bakterium und fibrinöser Serositis und Polyarthritis 1922: erstmalige Isolation 1943: Haemophilus suis H. influenza suis 1969: Haemophilus parasuis Fam. Pasteurellaceae

20 Glässersche Krankheit zunehmende Bedeutung: Aufzucht 7,3% 17,4% Mast 5,4% 18,7% National Animal Health Monitoring Service USA, 2010

21 Haemophilus parasuis Serovare: - hochvirulent: 1, 5, 10, 12, 13, 14 - virulent: 2, 4, 15 - wenig virulent: 8 - avirulent: 3, 6, 7, 9, 11

22 Haemophilus parasuis Serovare: - derzeit 15 - zahlreiche nicht typisierbare Isolate - auch innerhalb eines Serovars große Varianz - regionale Unterschiede Wellenberg et al., 2010

23 Haemophilus parasuis Serovare: Italien: Niederlande: Deutschland: Serovar 1 16% 19% Serovar 2 17% Serovar 4 34% 33% 13% Serovar 5 16% 19% 9% Serovar 12 5% Serovar 13 23% 20% 14% nicht typisierbar 16% (Luppi, 2010) (Dijkman, 2010) (Strutzberg-Minder, 2010)

24 Glässersche Krankheit Pathogenese: - aerogene Infektion - krankheitsfördernd sind Transport, Umstallung, Streß - zunächst Ansiedelung im Nasen-Rachen- Raum - hohe Affinität zu serösen Häuten Morbidität: (90) % Mortalität: 10 %

25 Glässersche Krankheit chronischer Verlauf: -Kümmern -Husten - Atemnot - Lahmheiten - struppiges Haarkleid

26 Glässersche Krankheit Erstsymptome: Fieber, Anorexie, Apathie akuter Verlauf: - plötzl. Todesfälle - gefüllte Gelenke - ZNS-Symptome - Atemnot, Husten - aufgekrümmter Rücken - Schmerzäußerungen - Zyanosen

27 Nachweis von Haemophilus parasuis Theoretisch untersuchbare Probenmaterialien: Serosengewebe Serosensammeltupfer Synovia Gelenkkapsel Liquor Gehirntupfer BALF (Serum)

28 Serologie Haemophilus parasuis: Einzeltierdiagnostik Prozent HPS pos HPS neg positiv fraglich negativ

29 Mycoplasma hyorhinis als Differentialdiagnose Arthritis Mycoplasma hyosynov. Arcanobact. pyogenes Streptokokken Haemophilus parasuis Pericarditis Streptokokken Mycoplasma hyorhinis Haemophilus parasuis Pleuritis APP Pasteurella multocida Streptokokken Mycoplasma hyorhinis Haemophilus parasuis Peritonitis Arcanobact. pyogenes Streptokokken Mycoplasma hyorhinis Haemophilus parasuis

30 Nachweis Mycoplasma hyorhinis Anteil positiver Proben: - Sammeltupfer: PCR (Pleura, Peritoneum, Perikard) - klinisch/pathologisch unauffällig: (n=71): 1 % - klinisch/pathologisch auffällig: (n=72): 39 %

31 Vakzination Haemophilus parasuis prinzipiell mögliche Vakzinen: - betriebsspezifisch - handelsfertig: gesicherte Immunität gegen Serotypen 1, (4), 5, 12, 13 und 14 Impfzeitpunkt abhängig von: - Auftreten der klinischen Symptome - maternalen Antikörpern - Infektionsrisiko - Infektionsdruck

32 Vakzination Haemophilus parasuis maternale Antikörpertiter gegen Haemophilus parasuis: 1,8 1,6 1,4 Ratio-Value 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0, Lebensalter Betrieb 1 Betrieb 2 Betrieb 3 Betrieb 4 in den meisten Betrieben ab 2. LW negativ

33 Vakzination Haemophilus parasuis Infektionszeitpunkte Haemophilus parasuis: 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% Saug. Absetz Vormast Mast 10% 0% M. hyorhinis M. hyopneumoniae HPS

34 Vakzination Haemophilus parasuis Impfschemata: produktionsorientiert: Sauen 8 5 sowie 3 2 Wochen ante partum und/oder Ferkel ab Alter von 7 Tagen zweimalig im Abstand von 2 Wochen

35 Vakzination Haemophilus parasuis Impfschemata: Jungsauen vor Auslieferung Jungsauen 2 x Abstand 4 Wochen zusätzlich 14 Tage ante partum

36 PRRS im Jahr 2000 im Jahr erhebliche ökonomische Bedeutung - erhebliche ökonomische Bedeutung - vielfältiges klinisches Bild - vielfältiges klinisches Bild - zwei Stämme: -EU-Stamm - US-/NA-Stamm - zwei Genotypen: - Genotyp I - Genotyp II - Virulenzunterschiede zwischen Isolaten - Virulenzunterschiede zwischen Isolaten - neue Erkrankungsformen? - SAMS - neue Erkrankungsformen? -PHFD

37 PRRS - zunehmende Bedeutung? - neue Stämme? - Diagnostik - Bekämpfungsstrategien

38 Porcine High Fever Disease (PHFD) HP-PRRS: highly pathogenic - China seit 2006 Ausbruch 2006 in China Tiere betroffen Todesfälle - Vietnam seit Philippinen seit Rußland August 2007 (eradikiert?)

39 Porcine High Fever Disease (PHFD) Klinik: - hohes Fieber -Aborte - resp. Symptome -Anorexie -Apathie - ZNS-Symptome alle Altersklassen betroffen Mortalität Ø 20% (bis zu 100%) hohe Übereinstimmung der Stämme

40 Porcine High Fever Disease (PHFD) Isolate aus China VR-2332 Tian et al., 2007

41 Porcine High Fever Disease (PHFD) Wu et al., Isolate aus China (SD-Isolate, Shandong) - 3 ähnlich wie VR-2332 (99,3-99,5%) - 7 Isolate Übereinstimmung 87,6-88% wie VR-2332

42 Porcine High Fever Disease (PHFD) - gute Erfahrungen mit Ingelvac PRRSV MLV - Feldebene - Infektionsversuche Fang, 2009, Zhang, 2009, Ao, 2009

43 PRRSV - Diagnostik - Enzym-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) - Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) - Immunoperoxidase Monolayer Assay (IPMA) - Serumneutralisationstest (SNT) - In situ Hybridisierung (ISH) - Immunhistochemie (IHC) - RT-PCR (Reverse Transcription-PCR) - Real-time PCR - Virusisolation (VI)

44 PRRSV - Bekämpfung - Sanierung Vakzination - Lebendvakzinen -EU-Typ -US-Typ - inaktivierte Vakzinen - Eliminierung - Eradikation

45 PRRSV - Elimination -Test & Removal für PRRSV weniger geeignet - Depopulation - Repopulation - Nursery Depopulation - Rollover - Herdenschließung - Eingliederung negative Tiere

46 PRRSV - Elimination - Kombinationen: - Nursery Depopulation + Vakzination Sauen - Parity Segregation: bislang kaum Erfahrung

47 PRRSV - Elimination - Modified Rollover Vakzination der gesamten Herde 2 x im Abstand von 3-4 Wochen Schließung der Herde für 4-9 Monate Integration PRRS negativer Tiere/ Entfernung PRRS positiver Tiere Monitoring

48 Schlussfolgerung PRRS - Diversität im regionalen Auftreten - weitere Entwicklung unklar - gezielte Diagnostik notwendig - Bekämpfungsstrategien auf Betriebssituation anpassen

49 Zusammenfassung Diagnostik - klinische Untersuchung hinweisend aber oft nicht ausreichend - weiterführende Untersuchungen notwendig - meist liegen Infektionen mit mehreren Erregern vor - jede Erkrankung erfordert eine spezifische Herangehensweise - oftmals Kombination aus verschiedenen Untersuchungsmethoden notwendig