Sekisui Virotech GmbH ELISA Systemdiagnostik Fehlermöglichkeiten und Lösungsvorschläge

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1 Sekisui Virotech GmbH ELISA Systemdiagnostik Fehlermöglichkeiten und svorschläge Der folgende Fragenkatalog soll Ihnen helfen, schnellstmöglich die eines Problems aufzuzeigen. Wenn das Problem weiterhin bestehen bleibt, dann rufen Sie uns gerne jederzeit unter der Telefonnummer an. Wir helfen Ihnen gerne weiter! Ihr Team der Sekisui Virotech GmbH Kapitel 1 Allgemeine Hinweise Ausschließlich Virotech Reagenzien einsetzen Reagenzien vor Testansatz auf Raumtemperatur bringen Standards sowie Kontrollen sind parameterspezifisch und ausschließlich mit den im Qualitätskontrollzertifikat angegebenen Plattenchargen zu verwenden. Die angegebenen Zertifikatsbereiche (OD und VE- Angaben) der Kontrollen müssen erfüllt sein. Ansonsten ist der Testlauf ungültig und muss wiederholt werden! Kapitel 2 Testergebnisse sind zu hoch Kapitel 3 Testergebnisse sind zu niedrig Kapitel 4 schlechte Doppelbestimmungen Kapitel 5 alle Kavitäten haben eine Gelbfärbung Kapitel 6 keine Farbreaktion in den Kavitäten TS_ELISA_D_ REV 4 Seite 1 von 6

2 Kapitel 2 Testergebnisse sind zu hoch Beobachtung: Kontrollen, Standards oder Leerwert liegen oberhalb des Zertifikatsbereiches Kontamination des TMB Inkubationszeit überschritten Überprüfung der TMB Farbe (TMB muss farblos sein) Gerät: Überprüfung der Inkubationszeit Temperatur zu hoch Temperatur des Brutschrankes überprüfen Gerät: Temperatur der Inkubatoren prüfen Falsche Reagenzien Überprüfung der Reagenzien Falsche Kontrollen bzw. Standards Falscher Referenzfilter Chargenzuordnung der Kontrollen bzw. Standards beachten Überprüfung der Wellenlänge (450nm/620nm) Falsches Waschprogramm Überprüfung des Programms Schlechte Qualität des Waschpuffer verunreinigt Überprüfung der Wasseranlage Testwiederholung mit industriell abgefülltem Überprüfung des ph-wertes Haltbarkeit überprüfen: 4 Wochen bei RT TS_ELISA_D_ REV 4 Seite 2 von 6

3 Kapitel 3 Testergebnisse sind zu niedrig Beobachtung: Kontrollen oder Standards liegen unterhalb des Zertifikatsbereiches Konjugat verunreinigt Inkubationszeiten zu kurz Temperatur falsch Nur die für den Testansatz benötigte Menge Konjugat entnehmen. Nicht benötigtes Konjugat nicht zurück schütten. Geringste Menge Serum inaktivieren das Konjugat. Überprüfung der Inkubationszeit Temperatur des Brutschrankes überprüfen Gerät: Temperatur der Inkubatoren prüfen Komponente(n) abgelaufen Überprüfung der Haltbarkeiten Falscher Referenzfilter Überprüfung der der Wellenlänge (450nm/620nm) Reagenzien im Testlauf zu kalt Schlechte Qualität des Zu viel gewaschen Falsche Kontrollen bzw. Standards Reagenzien vor Testansatz auf Raumtemperatur bringen Überprüfung der Wasseranlage Testwiederholung mit industriell abgefülltem Handtestung + Washer: Überprüfung des Waschgerätes (Waschschritte und Volumen) Automatentestung: Überprüfung des Waschkamms Chargenzuordnung der Kontrollen bzw. Standards beachten TS_ELISA_D_ REV 4 Seite 3 von 6

4 Kapitel 4 schlechte Doppelbestimmungen Ungenügendes Mischen der Seren/Puffer Nicht kalibrierte Pipetten Alle Reagenzien/ Serenverdünnungen müssen vor Gebrauch geschüttelt werden Überprüfung des Pipettenvolumens Fehlerhafter Waschprozess Verschleppungen beim Pipettiervorgang Kanäle des Waschgerätes/Waschkamms reinigen Parallele Handtestung durchführen TS_ELISA_D_ REV 4 Seite 4 von 6

5 Kapitel 5 alle Kavitäten haben eine Gelbfärbung Farbe des TMB TMB ist lichtempfindlich! Es sollte farblos sein Kontaminierte Reagenzien Überprüfung der Reagenzien: Farbe, Trübung? Fehlerhafte Lagerung der Kits Uneffizientes Waschen Überprüfung des Lagerortes und der Lagertemperatur Überprüfung: des Waschgerätes, bei Automaten des Waschkamms. Bei Handtestungen ist die Platte gründlich auszuklopfen. TS_ELISA_D_ REV 4 Seite 5 von 6

6 Kapitel 6 keine Farbreaktion in den Kavitäten Waschschritt nach TMB Inkubation Kontaminiertes Konjugat Nach der TMB Inkubation darf kein Waschschritt erfolgen, sondern nur Abstoppen mit Stopplösung! Überprüfung des Konjugates (Konjugat zu gleichen Teilen mit TMB mischen: es sollte ein blau-violetter Farbumschlag erfolgen) Nur die für den Testansatz benötigte Menge Konjugat entnehmen. Nicht benötigtes Konjugat nicht zurück schütten. Geringste Menge Serum Inaktivieren das Konjugat. Fehlerhafte Lagerung der Kits Zu hohe Menge an Waschpuffer Überprüfung des Lagerortes und der Lagertemperatur Überprüfung: des Waschgerätes, bei Automaten des Waschkamms. Alle Kavitäten müssen 4 x mit µl Waschpuffer gewaschen werden. TS_ELISA_D_ REV 4 Seite 6 von 6

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