Agilent 1290 Infinity LC - Die neue Benchmark in der UHPLC

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1 Agilent 1290 Infinity LC - Die neue Benchmark in der UHPLC Dr. Sebastian Krahe Produktspezialist LC Agilent Technologies Agilent Forum 2011 im Bayer Forschungszentrum Aprath

2 2006 Einführung des 1200 Rapid Resolution LC In jedem 1200 RRLC steckt ein 1100/1200 Standard System! 1200 RRLC 1200 Standard LC 1. Unkomplizierte Übernahme von Standardmethoden. 2. Nutzung der Möglichkeiten von 3 und 4.6 mm sub-2-micron Säulen für LC/UV. 3. Optimierung des Systems für 2.1 mm sub-2-micron Säulen für LC/MS möglich. Stand März 2009: Über 4700 Systeme in weniger als 3 Jahren! Page 2

3 Situation 2009 Herausforderungen 8 Neue UHPLC Systeme in 5 Jahren Alle unterschiedlich Methodentransfer zwischen Systemen Unterschiedlich Leistungen (Druck x Fluss) Unterschiedliche Totvolumina Unterschiedliches Gradientenverhalten (Mischung, Steilheit) Unterschiedliche Temperaturprofile im Säulenofen Unterschiedliche Empfindlichkeiten Transfer von HPLC nach UHPLC??? Page 3

4 2009 Einführung des Agilent 1290 Infinity LC Ein Infinity LC System für: jede Methode einfach zu übertragen von jedem HPLC oder UHPLC System mit gleicher oder besserer Performance Page 4

5 Infinity Binäre Pumpe

6 Agilent 1290 Infinity Pumpe Page 6

7 1290 Infinity Binäre Pumpe Wärmeabführung Neues Kolbenmaterial: SSiC (Sintered Silicon Carbide) 1) Verbesserte Wärmeabführung 2) Nur noch eine Art Kolbendichtung für reversed und normal Phase Kapillare sorgt für Wärmeaustausch zwischen Pumpenköpfen 7

8 1290 Infinity Binäre Pumpe Minimales Totvolumen und Mixing Noise 1200 Series Laufm. A 1200 Series Laufm. B Passiver Dämpfer µl Passiver Mischer 400 µl Niedriges Noise ~ 800 µl 1290 Inifinity Laufm. A 1290 Inifinity Laufm. B Aktive Dämpfung: 10 µl Firmware Pumpe + Hardware Pumpe Jet Weaver Mixer: 35 µl + Agilent microfluidic, Multi-layer Technologie = 10 µl / 45 µl DV: 80x / 20x kleiner Niedriges Noise 8

9 1290 Infinity Autosampler 1290 Infinity FlexCube 9

10 Agilent 1290 Infinity Autosampler Page 10

11 Agilent 1290 Infinity Autosampler - bypass, Aufziehen der Probe Page 11

12 Agilent 1290 Infinity Autosampler - Waschen der Nadelaussenseite Page 12

13 Agilent 1290 Infinity Autosampler - Nadel geht in den Nadelsitz Page 13

14 Agilent 1290 Infinity Autosampler - Injektion Page 14

15 Agilent 1290 Infinity Autosampler Flow-Through Design mit reduziertem Totvolumen (80 µl) Hohe Wiederholbarkeit von kleinen und großen Injektionsvolumina ohne Wechsel der Probenschleife < μl ; < μl; < 2-20 µl (40 μl) Kein Probenverlust Max. Injektionsvolumen 20 μl, erweiterbar auf 40 μl Neuer cartride loop für einfachen Tausch der Probenschleife Verbessertes carry over Erweiterte Funktionalität mit dem Flexcube Page 15

16 Agilent 1290 Infinity Flexcube Rail für externes Ventil Spritzenpumpe Niederdruckventil Ventiloption 1 Ventiloption 2 Applikationen: Automatisches Rückspülen des Nadelsitzes Fixed loop Injektionsmodus Laufmittelauswahl... Page 16

17 Agilent 1290 Infinity FlexCube - Automatisches Rückspülen des Nadelsitzes Reduzierter carry over Verhindert blockieren des Nadelsitzes Page 17

18 1290 Infinity Thermostatted Column Compartment 18

19 1290 Infinity Therm. Column Compartment Neuer Ventilantrieb und Ventilkopf Neuer leak funnel Neuer, verlängerter HX-Träger mit 3 er Hand (nicht abgeb.) Neue Isolierung Neue Kapillarführung Modifizierter lowdisp HX Neuer dooropen sensor Neue 2PS/6PT, 2PS/10PT und 8PS/9PT Quick-Change Hochdruckventile RFID-tag, speichert Ventiltyp, Druckbereich, Anzahl Ventilschaltungen 19

20 Neue Ventile - Überblick 600 bar 1200 bar 2pos/ 6port 2pos/10port 4pos/10port 6pos/14port 8pos/ 9port 12pos/13port Standard Bio-inert Micro-flow Säulenschaltung Eluentschaltung Frationen sammeln Matrixabtrennung Detektoranwahl 1290 Infinity TCC 1290 Infinity Flexible Cube 1290 Infinity Valve Drive

21 1290 Infinity Ventilmotor Externer Ventilmotor Einfach an LC Turm oder Säulenofen über Schiene anbauen Anbau an linker und rechter Seite möglich Komplett kompartible zu den Agilent QuickChange Ventilköpfen Integrierte Stromversorgung Kompartible zu 1100/1200 Systemen Leackagesensor

22 Infinity Dioden-Array Detektor

23 Agilent 1290 Infinity DAD Spiegel Gitter Programmierbarer Spalt Deuterium Lampe Max-Light Cartridge Zelle Dioden-array Mit 1024 Elementen Page 23

24 Max-Light Cartridge Zelle Non-coated fiber (fused silica) Hohe Lichttransmission durch Total-Internal Reflection (TIR) Prinzip (~ 100 % Lichteffizienz) Hohe Empfindlichkeit bei gleichzeitig kleinem Zellvolumen Keine RI (Refractive Index) und thermischen Effekte (Laufmitteltemperatur) Non-coated fused silica, keine besonderen Pflegemaßnahmen erforderlich Eine Flusszelle für alle Applikationen Cartridge Design für einfache Handhabung Page 24

25 1290 Infinity Diode Array Detector Ultra High-Sensitivity Flusszelle mit 60 mm Pfadlänge DAD1 B, DAD1A, DAD: Signal A, 251 nm/bw:10 nm Ref 360 nm/bw:100 nm (F:\AE4-ANTHRACENE\ANTHRA-STD-CEL7.D) DAD1 B, DAD1A, DAD: Signal A, 251 nm/bw:10 nm Ref 360 nm/bw:100 nm (F:\AE4-ANTHRACENE\ANTHRA-HS-CEL07.D) mau Anthracene, 16.4 pg/µl Wasser/ACN = 30/ ml/min, 1 µl Injektion 36 C, 251 nm 4 x Höhere Empfindlichkeit Ultra High-Sensitivity Zelle (60 mm) S/N: Standard Zelle (10 mm) S/N: min 25

26 Infinitely better method transfer Agilent 1290 Infinity und Intelligent System Emulation Technology (ISET)

27 Designunterschiede bei (U)HPLC Systemen Delay Volumen (Gradientverhalten) Power range (Fluss und Druck) Extra column Volumen Temperatur Dataraten Empfindlichkeit Herausforderung: Methodentransfer zwischen Systemen daher Schwer möglich Benötigt Neuentwicklung Benötigt Revalidierung Resultat: hohe Zusatzkosten! Page 27

28 Methodentransfer zwischen Systemen - Einfluss des Delay Volumens und Mischverhalten Was passiert mit dem programmierten Gradienten? Response 90% Gradientanstieg/ Mischverhalten Programmierter Gradient 1200 Series Binär Pumpe SL 1290 Infinity Binär Pumpe 10% Delay Volumen Zeit 1200 Series 1290 Infinity Page 28

29 Gradientenunterschiede bei verschiedenen LC - Einfluss des Delay Volumens und Mischverhalten mau 200 DAD1 B, Sig=275,4 Ref=400,40 (B:\RIC\AGI...RIC DATA\1 PHARMA METOCLOPRAMIDE\WAD PHARMA\XBRIDGE D) 1200 Series LC Quatenäre Pumpe mau DAD1 C, DAD1B, DAD: Signal B, 275 nm/bw:4 nm Ref 400 nm/bw:60 nm (B:\RIC\AGI...A\GV 1PHARMA\HPLC D) 1290 Infinity LC DAD1 C, DAD1B, DAD: Signal B, 275 nm/bw:4 nm Ref 400 nm/bw:60 nm (B:\RIC\AGI...A\GV 1PHARMA\HPLC D) mau 200 Sample: 0.5% impurities in formulation (metoclopramide) 150 Xbridge C18, 150x3 mm, 3.5 µm dp, 0.45 ml/min, Eluent: A =0.25 % AmAc, B = ACN, 100 Gradient: 0-15 min; 5-57 % B 50 0 Resultat: Unterschiedliche Auflösung und Retentionszeiten Ein Peak fehlt! Page 29

30 Woraus besteht ISET? - zwei Bestandteile A. Beste Leistungsfähigkeit beim 1290 Infinity LC weiter Powerrange, geringstes Delay Volumen, herausragende Empfindlichkeit, einzigartiges Fluss- und Mischverhalten B. Der einzigartige ISET Emulation Algorithmus Volle Charakterisierung des HPLC Systems und Bildung der Emulationsfunktion F A Page 30

31 Methodtransferbarkeit beim 1290 Infinity LC - System Emulation Technologie Konzept F A Emulatiertes Systems A Auswahl des emulierten Systems per Mausklick: Agilent 1100 Series Agilent 1200 Series LC Agilent 1260 Infinity LC Agilent 1220 Infinity LC Andere Page 31

32 Intelligent System Emulation Technology - Funktionsweise (1290 emuliert 1200) mau Injektion Identische Gradienten durch Parallelverschiebung und Emulation des Gradientmischverhaltens Programmiert 1290 Gradient 1200 Gradient min Page 32

33 Pestizide mit 1200/1260/1290/1290 ISET 1100/1200 Binär 400bar 1200 RRLC 1260 Bin 600bar ISET 1290 Bin 1200bar 1290 Bin 1200bar Method: % B: % Time: 8 min Flowrate: 0.8 ml/min

34 Intelligent System Emulation Technology ISET - Nutzen Beschleunigt den Methodentransfer Emulation des Gerät der Ursprungsmethode und Transfer auf neues System per Knopfdruck Sichere Investition in 1290 Infinity Nutzen Sie Ihre bewährten Methoden problemlos auf dem 1290 Infinity System und profitieren Sie von den Vorteilen in der UHPLC durch Geschwindigkeit, Auflösung und Empfindlichkeit. Höhere Produktivität Beschleunigen Sie Ihre Methodenentwicklung mit UHPLC Leistungsfähigkeit und überprüfen Sie Ihre Methode durch ISET an anderen emulierten System so werden Methoden von UHPLC auf andere Systeme übertragbar. Page 34

35 Page 35 This information is subject to change without notice Agilent Technologies, Inc Published in Germany, July 2011

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