Diagnostik an Blutzellen

Transkript

1 Diagnostik an Blutzellen Was ist ein Blutbild? Was ist der Hämatokrit? Wie werden Zellen im Blut Untersucht? Marker zur Identifizierung von Zellen im Blut

2 Diagnostik an Blutzellen Blut Plasma (ca. 55%) Zellen (ca. 44%) Serum Fibrin (Gerinnung) Erythrozyten Leukozyten Thrombozyten ca. 25 Billionen ca. 70 Milliarden ca. 280 Milliarden Lymphozyten Granulozyten Monozyten ca. 12,5 Milliarden ca. 26,5 Milliarden ca. 2,5 Milliarden Eosinophile Neutrophile Basophile ca. 1 Milliarde ca. 25 Milliarden ca. 280 Millionen Stabkernige (junge Neutrophile) Segmentkernige Übersegmentkernige

3

4

5 Diagnostik an Blut-Zellen Methoden manuell, mikroskopish: Blutausstrich aus Seminarbeitrag Pathobiochemie SS2014

6 Diagnostik an Blut-Zellen Methoden manuell, mikroskopish: Osmotische Resistenzbestimmung erhöht: - Thalassämien und andere Hämoglobinopathien - schwere Eisenmangelanämien - chronische Lebererkrankungen vermindert: - Kugelzellanämie - erworbene hämolytische Anämien - Benzolvergiftung (Widerstansfähigkeit der Erythrozyten gegen hypotonen NaCl-Lösung) Reagenzröhrchen mit steigender Salzkonzentration (links nach rechts) norm: 0,46-0,42 % NaCl, beginnende Lyse; 0,34-0,30 % NaCl, vollständige Lyse aus Seminarbeitrag Pathobiochemie SS2013

7 Diagnostik an Blut-Zellen Methoden Durchflußzytometrie Impedanz, Widerstand: optisch: Stromfluss Strahlengang Detektion Kapillaröffnung Durchflusszelle Elektroden

8 Diagnostik an Blut-Zellen Methoden Durchflußzytometrie (optisch) Pufferstrom mit Probe (Zellen) sideward scatter 90 Detektoren Lichtquelle Strahlengang forward scatter

9 Diagnostik an Blut-Zellen Methoden Durchflußzytometrie (Fluoreszenz; FACS ) Lichtquellen Strahlengang *1) * 1) * 1) 90 * 1) * 2) * 2) forward scatter * 1) * 2) * 2) * 1) sideward scatter * 1) Detektoren * 2) Dichroidespiegel

10

11

12 Anämie Polyglobulie Leukozytose Leukopenie Thrombozytose Thrombopenie

13 Untersuchungsprofil: Kleines Blutbild Mann Frau Erythrozyten (RBC oder ERY) 4,8-5,9 Mio./µl 4,3-5,2 Mio./µl Leukozyten (WBC oder LEUK) Mio./µl Mio./µl Thrombozyten (PLT oder THRO) Mio./µl Mio./µl Hämoglobin (HGB oder HG) g/dl g/dl Hämatrokrit (HCT oder HKT) 40-52% 37-45%

14

15

16 Mittleres Zellvolumen Mittleres Zellhämoglobin Mittleres korpuskuläre Hämoglobinkonzentration

17

18

19

20

21

22

23

24

25 Diagnostik: Weißes Blutbild (Leukozytenbestand) Zellart Zellen pro µl Blut Anteil der Leukozyten Neutrophile Granulozyten segmentkernig Neurophile Granulozyten stabkernig Eosinophile Granulozyten Basophile Granulozyten % % % % Monozyten % Lymphozyten %

26

27

28

29 Untersuchungsprofil: Differentialblutbild Eosin Y Granulozytenfärbung: unterschiedliche Anfärbung mit Methylenblau und Eosin abhängig vom ph der Pufferlösung Methylenblau

30

31 Hämatopoetische Wachstumsfaktoren Wachstumsfaktor Produziert von Molekulargewicht Interleukin-3 T-Lymphocyten kda GM-CSF T-Lymphozyten kda Endothelzellen Fibroblasten M-CSF Monocyten 70 kda (Dimer) Fibroblasten Endothelzellen G-CSF Monocyten 20 kda Fibtoblasten Erythropoetin peritubuläre kda Nierenzellen Thrombopoetin Leber-, 35 kda Nierenzellen

32

33

34

35

36 Differentialblutbild Lymphozyten Lymphozyten Granulozyten (eosinophil; basophil) Granulozyten (neutrophile) (polymorphkernige / z.b. Segmentkernige) Monozyten

37 Charakterisierung von Blutzellen - Detektion spezifischer Zellen im Blut Das CD-Klassifikationssystem Beruht auf monoklonalen Antikörpern CD = Cluster of Differentiation Zuordnungssystem mit mehreren hundert Zelloberflächenantigenen, die durch Monoklonalen Antikörper erkannt werden: CD1 bis > CD300 Mit diesen Antikörpern steht ein Werkzeug zur Verfügung, um Blutzellen näher zu identifizieren. Linienspezifische CD-Marker Differenzierungsstadien-spezifische CD-Marker

38 Charakterisierung von Blutzellen - Detektion spezifischer Zellen im Blut Das CD-Klassifikationssystem Linienspezifische CD-Marker (Beispiele): CD3: T-Lymphozyten CD19: B-Lymphozyten CD4: T-Helferzellen (Monozyten / Makrophagen) CD8: T8-Zellen (NK-Zellen) CD14: Monozyten Differenzierungsstadien-spezifische CD-Marker (Beispiele): CD34: Stammzellen (Vorläuferzellen) CD38: Aktivierungsmarker CD10: Marker von lymphoiden Vorläuferzellen (Akute Lymphoblastische Leukemie)

39