ANA-Diagnostik bei systemischen rheumatischen Erkrankungen
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- Dörte Becke
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1 ANA-Diagnostik bei systemischen rheumatischen Erkrankungen Dr. rer. nat. Brit Kieselbach Institut für Medizinische Diagnostik Berlin - Potsdam
2 Systemische rheumatische Erkrankungen Kollagenosen Vaskulitiden
3 Systemische rheumatische Erkrankungen Kollagenosen Vaskulitiden
4 Was sind Kollagenosen? entzündlich-rheumatische Autoimmunerkrankungen systemisch, chronisch schubweiser Verlauf führen zur Schädigung von Gefäß- und Bindegewebe Befall von Organen, Gelenken, Haut und Drüsen Dysregulation des Immunsystems Bildung von Autoantikörpern (AAk) Ätiologie unbekannt
5 Undifferenzierte Bindegewebserkrankung Mischkollagenose (MCTD) (Kombination von Symptomen) Sjögren-Syndrom (Tränen-/Speicheldrüsen) Kollagenosen Systemische Sklerodermie (Verdickung/Verhärtung der Haut) Systemischer Lupus erythematodes (potentiell jedes Organ) Idiopathische Myositis (Muskulatur) PM= Polymyositis DM= Dermatomyositis MCTD = mixed connective tissue diseases
6 Allgemeinsymptome der Kollagenosen Fieber (selten über 38,5 C) Verschlechterung des Allgemeinzustandes Gewichtsverlust Arthralgien Sicca-Symptomatik Raynaud-Phänomen
7 Diagnostik bei Verdacht auf eine Kollagenose Anamnese Bildgebung BB, Urin, Kreatinin, CRP, BSG, C3, C4 ANA ANA-Differenzierung Phospholipid-AAk (ACLA, ß2-GPI-Ak, LA) ANCA Histologie
8 Diagnostik bei Verdacht auf eine Kollagenose Anamnese Bildgebung BB, Urin, Kreatinin, CRP, BSG, C3, C4 ANA ANA-Differenzierung Phospholipid-AAk (ACLA, ß2-GPI-Ak, LA) ANCA Histologie
9 Was sind ANA? ANA = Anti-Nukleäre Antikörper (AAk gegen Zellkerne) richten sich gegen jede Zelle (nicht organspezifisch) Zellkern (Nukleus) DNA Zytoplasma DNA-assoziierte Proteine (z.b. Zentromere, Histone) Kernkörperchen (Nucleolus) Enzyme Kernmembran Antikörper
10 Die ANA-Diagnostik erfolgt stufendiagnostisch. 1. Indirekte Immunfluoreszenz (IFT) Screening 2. Enzymimmunoassay (ELISA) Differenzierung, 3. Immunoblots/ Linassay Bestätigung Abb.: Euroimmun AG
11 Die ANA-Diagnostik erfolgt stufendiagnostisch. 1. Indirekte Immunfluoreszenz (IFT) Screening 2. Enzymimmunoassay (ELISA) Differenzierung, 3. Immunoblots/ Linassay Bestätigung Abb.: Euroimmun AG
12 ANA-Screening mittels Immunfluoreszenztechnik Fluorochrom-markierter Antikörper Autoantikörper (ANA) des Patienten (im Serum) Hep 2-Zellen Antigen im Zellkern humane Epitheliomzellen Typ 2 eines Larynxkarzinoms
13 ANA-Screening mittels Immunfluoreszenztechnik Euroimmun AG Ansicht im Mikroskop: positive ANA! Fluorochrom-markierter Antikörper Autoantikörper (ANA) des Patienten (im Serum) Hep 2-Zellen Antigen im Zellkern humane Epitheliomzellen Typ 2 eines Larynxkarzinoms
14 Die indirekte Immunfluoreszenztechnik (IFT) gilt als Goldstandard für den ANA-Suchtest! IFT: Festphasen-Assay: > 100 Antigene ca Antigene Quelle: Euroimmun AG ANA-IFT-Ergebnis: 1. ANA-Titer (< 1:100) 2. Fluoreszenzmuster Euroimmun AG
15 Charakteristische IFT-Fluoreszenzmuster Zellkern homogen granulär nucleolär ringförmig gepunktet Zytoplasma Mitose granulär feingranulär filamentös positiv Abb.: modifiziert nach Euroimmun AG
16 Charakteristische IFT-Fluoreszenzmuster Zellkern positiv = ANA homogen granulär nucleolär ringförmig gepunktet
17 Charakteristische IFT-Fluoreszenzmuster Zellkern positiv = ANA homogen granulär nucleolär ringförmig gepunktet ANA-Spezifität? ANA-Differenzierung!
18 Die ANA-Differenzierung ist abhängig vom Fluoreszenzmuster! homogen granulär nucleolär Euroimmun AG Euroimmun AG dsdna-aak ggf. Crithidien-IFT ENA-AAk-Screen SLE sehr wahrscheinlich Nukleosomen-AAk Histon-AAk ssdna-aak ENA-AAk- Differenzierung SS-A, SS-B, Scl-70, U1-RNP, Sm, Jo-1 Myositis-AAk-Blot Weitere Analysen
19 ANA-Anforderung ANA ggf. ANA-Differenzierung
20 Arthralgien, Lichtempfindlichkeit, V.a. Lupus Anforderung: ANA, ANA-Differenzierung
21 Arthralgien, Lichtempfindlichkeit, V.a. Lupus Anforderung: ANA, ANA-Differenzierung Welcher ANA ruft ein homogen/granulär Muster hervor?
22 ANA, die ein homogenes Muster hervorrufen dsdna-aak SLE (30 95 % aktivitätsabhängig) Nukleosomen-AAk SLE (ca % aktivitätsabhängig) Histon-AAk SLE (50 80 %) medikamenten-induzierter Lupus (92-95 %) Sklerodermie (30 %) RA (bis 11 %) RA-Vaskulitis (bis 75 %) Felty-Syndrom (bis 79 %), juvenile RA (bis 51 %) ANA-positive undifferenzierte Kollagenosen (bis 90 %) ssdna-aak SLE, andere Kollagenosen medikamenten-induzierter LE juvenile chronische Arthritis (35-50 %) Euroimmun AG Quelle: Konrad, Schößler, Hiepe 2012
23 ANA, die ein granuläres Muster hervorrufen SS-A-AAk Primäres Sjögren-Syndrom (bis zu 96 %) Sekundäres Sjögren-Syndrom (in ca. 80 %) SLE (25-60 %) neonataler Lupus ( %) subakut kutaner Lupus ( %) Rheumatoide Arthritis (5-15 %) Sklerodermie (ca. 10 %) Euroimmun AG SS-B-AAk Primäres Sjögren-Syndrom (ca. 70 %) Sekundäres Sjögren-Syndrom (ca. 50%) SLE (ca. 25 %) neonataler Lupus (bis 70 %) subakut kutaner Lupus (ca. 80 %) Sm-AAk SLE (5 40 %) und andere. U1-RNP-AAk MCTD (100 %) SLE (13-32 %) Systemische Sklerose (bis zu 10 %) Quelle: Konrad, Schößler, Hiepe 2012
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27 Undifferenzierte Bindegewebserkrankung Sjögren-Syndrom (SjS) Kollagenosen dsdna-aak: 30-95% Sm-AAk: 5-40% Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) Mischkollagenose (MCTD) Idiopathische Myositis (PM/DM) Systemische Sklerodermie PM= Polymyositis DM= Dermatomyositis MCTD = mixed connective tissue diseases
28 Systemischer Lupus erythematodes (SLE) = chronisch-entzündliche Autoimmunerkrankung mit einer potentiellen Beteiligung aller Organe häufig junge Frauen (F>M; 9:1) Patienten bilden eine Vielzahl von Autoantikörpern (AAk) heute bessere Prognose des Krankheitsbildes bisher keine kausale Therapie möglich
29 Leitsymptome Müdigkeit, Fieber Schmetterlingserythem Sonnenempfindlichkeit Arthritis verschiedene Organmanifestationen Trüeb, Praxis 2007
30 Hinweise für Organmanifestation Nierenbeteiligung: Nephritis, Glomerulonephritis, Urinschäumen, Urinverfärbung, Beinödeme, Hypertonie Hämatologische Beteiligung: Thrombozytopenie, Leukozytopenie, hämolytische Anämie Gerinnungsstörungen: Thrombosen Lungenbeteiligung: Pleuritis Herzmanifestationen: Endokarditis, Myokarditis, Perikarditis,... Neurologische Symptome: Nervenentzündungen, Gehirnbeteiligung mit Verwirrtheitszuständen, Depressionen, Durchblutungsstörungen bis hin zu Schlaganfällen
31 SLICC Klassifikationskriterien des SLE ( Systemic Lupus International Collaborating Clinics ; nach Petri et al., 2012) Klinische Kriterien akut kutaner Lupus erythematodes (inklusive Schmetterlingserythem ) chronisch kutaner Lupus erythematodes (z. B. lokalisierter oder generalisierter diskoider LE) orale Ulzera (an Gaumen und/oder Nase) nicht vernarbende Alopezie Synovitis ( 2 Gelenke) oder Druckschmerz ( 2 Gelenke) und Morgensteife ( 30 min) Serositis (Pleuritis oder perkardiale Schmerzen, die länger als einen Tag anhalten) Nierenbeteiligung (Einzelurin: Protein/Kreatinin Ratio oder Eiweiß im 24 h Sammelurin, > 0,5 g) neurologische Beteiligung (zum Beispiel Epilepsie, Psychose, Myelitis) hämolytische Anämie Leukopenie (< 4000/μL) oder Lymphopenie (< 1000/μL) Thrombozytopenie (< /μL) Immunologische Kriterien ANA-Titer erhöht dsdna-aak Sm-AAk Phospholipid-AAk (LA, Cardiolipin-AAk und β2-glycoprotein I-AAk [IgA-, IgG- oder IgM-]; falsch-positiver VDRL [Venereal Disease Research Laboratory]-Test) erniedrigtes Komplement (C3, C4 oder CH50) direkter Coombs-Test (ohne hämolytische Anämie)
32 SLICC Klassifikationskriterien des SLE ( Systemic Lupus International Collaborating Clinics ; nach Petri et al., 2012) 4 Kriterien müssen erfüllt sein, davon muss: mind. 1 klinisches und 1 immunologisches Kriterium vorliegen oder bei positiven ANA oder dsdna-aak histologisch eine Lupusnephritis vorliegen
33 Anforderung: u.a. myokardiale AAk
34 Anforderung: u.a. myokardiale AAk
35 Anforderung: u.a. myokardiale AAk
36 SS-A-AAk: bis zu 96% SS-B-AAk: 50-70% Undifferenzierte Bindegewebserkrankung Sjögren-Syndrom (SjS) Kollagenosen SS-A-AAk: 25-60% SS-B-AAk: 25% Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) Mischkollagenose (MCTD) Idiopathische Myositis (PM/DM) Systemische Sklerodermie PM= Polymyositis DM= Dermatomyositis MCTD = mixed connective tissue diseases
37 Myokarditis häufige Manifestation bei SLE eher SLE? klinisches Gesamtbild ist entscheidend! labordiagnostisch: SS-AAk und SS-B-AAk weisen auf Sjögren-Syndrom oder systemischen Lupus erythematodes (SLE) hin Klassifikationskriterien beachten!
38 Sjögren-Syndrom häufige Autoimmunerkrankung (bis zu 2% Prävalenz) langsam fortschreitend lymphozytäre Infiltration der Speichel- und Tränendrüsen primäres oder sekundäres Sjögren-Syndrom (RA, SLE) Symptome: Mundtrockenheit verminderter Speichel-/Tränenfluss Schwellung der Speicheldrüsen Bauchspeicheldrüseninsuffizienz Euroimmun AG
39 Internationale Konsensus-Kriterien (nach Vitali et al., 2002) 1. Augensymptome: trockenes Auge, Fremdkörpergefühl, künstliche Tränen 2. Orale Symptome: trockener Mund, Speicheldrüsenschwellung, Trinken bei trockenen Speisen 3. Objektiver Nachweis trockener Augen: z.b. positiver Schirmer-Test 4. Lippen-Biopsie: Focus-Score > 1 5. Speicheldrüsenbeteligung (z.b. Szintigraphie) 6. Positive Autoantikörper gegen SS-A(Ro) u./o. SS-B(La) Primäres SjS: 4 von 6 positiv Sekundäres SjS: 3 von 6 positiv
40 Myopathie, unklare Erytheme Anforderung: ANA, ggf. ANA-Differenzierung
41 Myopathie, unklare Erytheme Anforderung: ANA, ggf. ANA-Differenzierung
42 Myopathie, unklare Erytheme Anforderung: ANA, ggf. ANA-Differenzierung
43 Undifferenzierte Bindegewebserkrankung Sjögren-Syndrom (SjS) Kollagenosen Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) Mischkollagenose (MCTD) Idiopathische Myositis (PM/DM) Systemische Sklerodermie Mi-2-AAk: 15-30% (DM) ca. 1% (PM)
44 Idiopathische Myositiden Polymyositis Dermatomyositis Einschlusskörpermyositis (IBM)
45 Idiopathische Myositiden Polymyositis Dermatomyositis Einschlusskörpermyositis (IBM)
46 Poly-/Dermatomyositis = chronisch-entzündliche Erkrankung mit vorwiegendem Befall der Muskulatur und der Haut = kann zu progredienter Bewegungseinschränkung sowie erhöhter Morbidität durch Beteiligung extramuskulärer Organe führen Symptome: proximal betone Muskelschmerzen/-schwäche Rachen- und Atemmuskulatur Gelenk-, Lungen-, Herzbeteiligung Hautveränderungen: Erytheme, Schwellung, Hautveränderungen an Knie-/ Fingergelenken (sog. Gottron-Papeln), Heliotroperythem, Teleangiektasien CK erhöht 10-50x Quelle: Euroimmun AG
47 Assoziation mit anderen Kollagenosen Assoziation mit Tumoren (ca. 15%) Histologie, Elektromyographie, Bildgebung (MRT) ANA oder zytoplasmatische Ak nachweisbar (ca. 80%) Euroimmun AG Abb.: ANA negativ, zytoplasmatische Antikörper positiv Jo-1-AAk Negative ANA schließen eine idiopathische Myositis nicht sicher aus!!!
48 ANA spielen eine entscheidende Rolle in der Myositisdiagnostik. 1. Myositis-spezifische Ak Jo-1, PL-12, PL-7,EJ,OJ, (Antisynthetase-Syndrom) Ro52 (Polymyositis, ) SRP (Polymyositis) Mi-2 (Dermatomyositis) 2. Myositis assoziierte Ak PM-Scl (Myositis, Sklerodermie, PM/Sklerodermie-Overlap) Ku (Myositis, PM/Sklerodermie- Overlap, SLE, SjS) Anforderung: Myositis-AAk-Profil
49 Raynaud-Syndrom Anforderung: ANA, dsdna-aak, SS-A-AAk, SS-B-AAk Quelle: Wikipedia
50 Undifferenzierte Bindegewebserkrankung Mischkollagenose (MCTD) Raynaud-S. Sjögren-Syndrom (SjS) Kollagenosen Systemische Sklerodermie Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) Polymyositis / Sklerodermie- Overlap Raynaud-S. Raynaud-S.
51 Undifferenzierte Bindegewebserkrankung Mischkollagenose (MCTD) Raynaud-S. Raynaud-S. Sjögren-Syndrom (SjS) Kollagenosen Systemische Sklerodermie Raynaud-S. Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) Polymyositis / Sklerodermie- Overlap Raynaud-S. Raynaud-S.
52 Euroimmun AG Abb.: Positiver ANA gegen Zentromere
53 Undifferenzierte Bindegewebserkrankung Sjögren-Syndrom (SjS) Kollagenosen Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) Mischkollagenose (MCTD) Idiopathische Myositis (PM/DM) Systemische Sklerodermie Zentromere-AAk: 60-80% (limitierte Sklerodermie) 3-12% (diffuse Sklerodermie)
54 Systemische Sklerodermie = multisystemische autoimmune Erkrankung mit Entzündung und Fibrose des Bindegewebes (v.a. Haut, Lunge, Herz, Magen-Darm-Trakt, Bewegungsapparat, Niere) Verschiedene Varianten: limitierte Systemsklerose (CREST-Syndrom) diffuse Systemsklerose Systemische Sklerose sine scleroderma Overlap-Syndrome C Calcinosis R Raynaud-Syndrom E Ösophagus- Motilitätsstörung S Sklerodaktylie T Teleangiektasie Quelle: Chighizola, Conrad, Meroni
55 Symptome Frühsymptom: Raynaud-Syndrom Sklerodaktylie (dünne, verhärtete Finger) Krallenhand Maskengesicht Teleangiektasien (bleibende Erweiterungen kleiner Hautgefäße) Calcinosis cutis Maskengesicht Teleangiektasie Sklerodaktylie, Krallenhand Calcinosis cutis Quelle: Euroimmun AG
56 Sklerodermie-spezifische ANA ANA: nucleoläre Muster (hochtitrig!) Zentromer-AAk (limitierte Systemsklerose) Scl-70-AAk (diffuse Systemsklerose) RNA-Polymerase III-AAk (Systemsklerose) U1-RNP-AAk (Overlap-Syndrome, v.a. MCTD) Euroimmun AG Euroimmun AG Euroimmun AG Zentromer-AAk Scl-70-AAk U1-RNP-AAk
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58 Undifferenzierte Bindegewebserkrankung Sjögren-Syndrom (SjS) Kollagenosen U1-RNP-AAk: 10-30% Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) Mischkollagenose (MCTD) Idiopathische Myositis (PM/DM) U1-RNP-AAk: 100% Systemische Sklerodermie PM= Polymyositis DM= Dermatomyositis MCTD = mixed connective tissue diseases U1-RNP-AAk: bis zu 10%
59 Mischkollagenose (MCTD) = Überlappungssyndrom mit Symptomen verschiedener Kollagenosen (SLE, Sklerodermie, Polymyositis) Hauptsymptome: - initial Raynaud-Syndrom - Schwellung der Hände und Finger - Sklerodermie (Sklerodaktylie) - proximale Myalgie/Muskelschwäche weitere Manifestationen: Dysphagie, Arthritis (RA-ähnlich), pulmonale Beteiligung (Lungenfibrose) Euroimmun AG
60 Undifferenzierte Bindegewebserkrankung Sjögren-Syndrom (SjS) Kollagenosen Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) Mischkollagenose (MCTD) Idiopathische Myositis (PM/DM) Systemische Sklerodermie PM= Polymyositis DM= Dermatomyositis MCTD = mixed connective tissue diseases
61 Undifferenzierte Kollagenose = oligosymptomatisch verlaufende Kollagenose, für die keine Klassifikationskriterien existieren, wahrscheinlich häufiger als SLE Häufige klinische Manifestationen: Arthralgien /Arthritis Raynaud-Syndrom Sicca-Symptomatik Leukopenie Lichtempfindlichkeit oft ANA in niedrigen Titern nachweisbar
62 ANA sind sensitiv, aber nicht spezifisch! ANA sind diagnostische Marker von Kollagenosen (Entwicklung einer Kollagenose möglich) auch nachweisbar bei: anderen Autoimmunerkrankungen (z.b. Autoimmunhepatitis) anderen Krankheitsbildern, z.b. Infektionserkrankungen und Tumoren Gesunden, v.a. Ältere (meist niedrigtitrig)
63 Nächste online-fortbildung am 09. November 2016, Uhr Immunologische Laboruntersuchung bei Tumorpatienten Referent: Dr. med. Volker von Baehr
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