Nachweis von Methicillin-resistenten S.aureus (MRSA)...3. Kultureller Nachweis...3. Nachweis von Methicillin-resistenten S.aureus (MRSA)...

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1 Inhaltsverzeichnis Nachweis von Methicillin-resistenten S.aureus (MRSA)...3 Kultureller Nachweis...3 Nachweis von Methicillin-resistenten S.aureus (MRSA)...4 Molekulargenetischer Nachweis...4 Nachweis von darmpathogenen Viren...5 Adenoviren 40/4...5 Rotaviren...5 Noroviren I/II...5 Nachweis von Clostridium difficile (Toxin A / Toxin B)...6 Nachweis von Salmonella spp...7 Nachweis von Shigella spp...8 Nachweis von Campylobacter (C. jejuni, C. coli, C. lari)...9 Nachweis von Yersinia enterocolitica...10 Nachweis von enterotoxischen E. coli (ETEC) LT/ST...11 Nachweis von shiga-ähnliches Toxin produzierende E. coli (STEC) stx 1/stx Nachweis von Escherichia coli (E. coli) O Nachweis von Vibrio cholera...14 Nachweis von gastrointestinalen Parasiten...15 Cryptosporidium (nur C. parvum und C. hominis)...15 Entamoeba histolytica...15 Giardia lamblia...15 Spa-Typisierung...16 RAPD-, ERIC-Typisierung...17 Mikrobiologische Kontrolle von Blutkomponenten...18 Trinkwasseruntersuchung...19 E.coli /coliforme Keime...19 Pseudomonas aeruginosa...20 Intestinale Enterokokken

2 Clostridium difficile...22 Legionella spp...23 Bestimmung der vermehrungsfähigen Keime (Membranfiltration)...24 Bestimmung der vermehrungsfähigen Keime (Plattengußverfahren)...25 Nachweis von Mikroorganismen (Umgebungsuntersuchung)...26 Überprüfung der Wirksamkeit von Dampfsterilisatoren...27 Überprüfung der Wirksamkeit von Heissluftsterilisatoren...28 Überprüfung von Reinigungs- und Desinfektionsgeräte (RDG) mittels Bioindikatoren..29 Überprüfung von Reinigungs- und Desinfektionsgeräte (RDGE) mittels Bioindikatoren30 Überprüfung von Reinigungs- und Desinfektionsgeräten (RDGS) mittels Bioindikatoren

3 Nachweis von Methicillin-resistenten S.aureus (MRSA) Kultureller Nachweis Kulturelle Anzucht auf chromogenhaltigem Nährmedium Methicillin-resistenter Staphylococcus aureus (MRSA) wächst in Anwesenheit von Cefoxitin auf Selektivagar und produziert durch Hydrolyse der chromogenen Substrate rosa bis hellviolette Kolonien. Das Wachstum gramnegativer Bakterien, Hefen und einigen grampositiven Kokken wird weitestgehend unterdrückt. Über Auftragskarte MRSA Screening Abstrich oder anderes Material in sterilem Gefäß (z.b. Urin, Trachaelsekret, Sputum) Abstrich, bis zu 1 ml flüssiges Material Abstrichtupfer mit Transportmedium (blaue Kappe) bzw. sterile Röhrchen bei anderen Materialien Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger Täglich von 8:00 Uhr bis 17:30 Uhr Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, oder bei Beschädigung des Transportgefäßes Untersuchungsdauer/Befundmitteilung: Frühestens nach 22 Stunden Nachweis von MRSA Kein Nachweis von MRSA 3

4 Nachweis von Methicillin-resistenten S.aureus (MRSA) Molekulargenetischer Nachweis Molekulargenetischer Keimnachweis Molekulargenetischer MRSA-Nachweis mittels real-time PCR. In der PCR wir in einem Amplifikationsschritt ein Staphylococcus aureus spezifisches Gen (orfx) und die das MecA- Gen tragende Region SCCmec erfasst, so dass ein positives Signal spezifisch für MRSA ist. Allerdings wird durch die verwendete Methode nicht das meca Gen selbst nachgewiesen. Über Auftragskarte MRSA Screening Rachenabstrich Abstrich Nasenvorhöfe Kombinierter Rachen/Nasenvorhöfe Abstriche S. aureus Isolat Abstrich Abstrichtupfer mit Transportmedium (blaue Kappe) Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags freitags um 8:00 Uhr 13:00 Uhr und 17:00 Uhr samstags, sonntags und feiertags um 10:00 Uhr und 17:00 Uhr Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, oder bei Beschädigung des Transportgefäßes Untersuchungsdauer/Befundmitteilung: Frühestens 90 Minuten MRSA-PCR negativ MRSA-PCR positiv MRSA-PCR invalid Alle Proben werden vor PCR Ansatz zur kulturellen Anzüchtung verarbeitet 4

5 Nachweis von darmpathogenen Viren Adenoviren 40/4 Rotaviren Noroviren I/II Multiplex-Realtime-PCR Der GPP Test wird als schnelle Screeningmethode auf pathogene Gastroenteritiserreger bei entsprechender Symptomatik des Patienten oder bei Ausbrüchen eingesetzt. Als reine Screeningmethode darf das Ergebnis nur in Kombination mit anderen Methoden wie z.b. kulturellen Medien interpretiert werden. Über Auftragskarte Multiplex PCR- Screening Stuhl Bei festen Proben erbsen- bis haselnussgroßes Stück bei flüssigen Proben min. 1 ml Sterile Stuhlröhrchen Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags donnerstags Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, bei Beschädigung des Transportgefäßes, zu wenig Material. 6 Stunden positiv negativ 5

6 Nachweis von Clostridium difficile (Toxin A / Toxin B) Multiplex-Realtime-PCR Der GPP Test wird als schnelle Screeningmethode auf pathogene Gastroenteritiserreger bei entsprechender Symptomatik des Patienten oder bei Ausbrüchen eingesetzt. Als reine Screeningmethode darf das Ergebnis nur in Kombination mit anderen Methoden wie z.b. kulturellen Medien interpretiert werden. Über Auftragskarte Multiplex PCR- Screening Stuhl Bei festen Proben erbsen- bis haselnussgroßes Stück bei flüssigen Proben min. 1 ml. Sterile Stuhlröhrchen Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags donnerstags Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, bei Beschädigung des Transportgefäßes, zu wenig Material. 6 Stunden positiv negativ 6

7 Nachweis von Salmonella spp Multiplex-Realtime-PCR Der GPP Test wird als schnelle Screeningmethode auf pathogene Gastroenteritiserreger bei entsprechender Symptomatik des Patienten oder bei Ausbrüchen eingesetzt. Als reine Screeningmethode darf das Ergebnis nur in Kombination mit anderen Methoden wie z.b. kulturellen Medien interpretiert werden. Über Auftragskarte Multiplex PCR- Screening Stuhl Bei festen Proben erbsen- bis haselnussgroßes Stück bei flüssigen Proben min. 1 ml. Sterile Stuhlröhrchen Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags donnerstags Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, bei Beschädigung des Transportgefäßes, zu wenig Material. 6 Stunden positiv negativ 7

8 Nachweis von Shigella spp Multiplex-Realtime-PCR Der GPP Test wird als schnelle Screeningmethode auf pathogene Gastroenteritiserreger bei entsprechender Symptomatik des Patienten oder bei Ausbrüchen eingesetzt. Als reine Screeningmethode darf das Ergebnis nur in Kombination mit anderen Methoden wie z.b. kulturellen Medien interpretiert werden. Über Auftragskarte Multiplex PCR- Screening Stuhl Bei festen Proben erbsen- bis haselnussgroßes Stück bei flüssigen Proben min. 1 ml. Sterile Stuhlröhrchen Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags donnerstags Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, bei Beschädigung des Transportgefäßes, zu wenig Material. 6 Stunden positiv negativ 8

9 Nachweis von Campylobacter (C. jejuni, C. coli, C. lari) Multiplex-Realtime-PCR Der GPP Test wird als schnelle Screeningmethode auf pathogene Gastroenteritiserreger bei entsprechender Symptomatik des Patienten oder bei Ausbrüchen eingesetzt. Als reine Screeningmethode darf das Ergebnis nur in Kombination mit anderen Methoden wie z.b. kulturellen Medien interpretiert werden. Über Auftragskarte Multiplex PCR- Screening Stuhl Bei festen Proben erbsen- bis haselnussgroßes Stück bei flüssigen Proben min. 1 ml. Sterile Stuhlröhrchen Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags donnerstags Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, bei Beschädigung des Transportgefäßes, zu wenig Material. 6 Stunden positiv negativ 9

10 Nachweis von Yersinia enterocolitica Multiplex-Realtime-PCR Der GPP Test wird als schnelle Screeningmethode auf pathogene Gastroenteritiserreger bei entsprechender Symptomatik des Patienten oder bei Ausbrüchen eingesetzt. Als reine Screeningmethode darf das Ergebnis nur in Kombination mit anderen Methoden wie z.b. kulturellen Medien interpretiert werden. Über Auftragskarte Multiplex PCR- Screening Stuhl Bei festen Proben erbsen- bis haselnussgroßes Stück bei flüssigen Proben min. 1 ml. Sterile Stuhlröhrchen Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags donnerstags Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, bei Beschädigung des Transportgefäßes, zu wenig Material. 6 Stunden positiv negativ 10

11 Nachweis von enterotoxischen E. coli (ETEC) LT/ST Multiplex-Realtime-PCR Der GPP Test wird als schnelle Screeningmethode auf pathogene Gastroenteritiserreger bei entsprechender Symptomatik des Patienten oder bei Ausbrüchen eingesetzt. Als reine Screeningmethode darf das Ergebnis nur in Kombination mit anderen Methoden wie z.b. kulturellen Medien interpretiert werden. Über Auftragskarte Multiplex PCR- Screening Stuhl Bei festen Proben erbsen- bis haselnussgroßes Stück bei flüssigen Proben min. 1 ml. Sterile Stuhlröhrchen Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags donnerstags Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, bei Beschädigung des Transportgefäßes, zu wenig Material. 6 Stunden positiv negativ 11

12 Nachweis von shiga-ähnliches Toxin produzierende E. coli (STEC) stx 1/stx 2 Multiplex-Realtime-PCR Der GPP Test wird als schnelle Screeningmethode auf pathogene Gastroenteritiserreger bei entsprechender Symptomatik des Patienten oder bei Ausbrüchen eingesetzt. Als reine Screeningmethode darf das Ergebnis nur in Kombination mit anderen Methoden wie z.b. kulturellen Medien interpretiert werden. Über Auftragskarte Multiplex PCR- Screening Stuhl Bei festen Proben erbsen- bis haselnussgroßes Stück bei flüssigen Proben min. 1 ml. Sterile Stuhlröhrchen Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags donnerstags Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, bei Beschädigung des Transportgefäßes, zu wenig Material. 6 Stunden positiv negativ 12

13 Nachweis von Escherichia coli (E. coli) O157 Multiplex-Realtime-PCR Der GPP Test wird als schnelle Screeningmethode auf pathogene Gastroenteritiserreger bei entsprechender Symptomatik des Patienten oder bei Ausbrüchen eingesetzt. Als reine Screeningmethode darf das Ergebnis nur in Kombination mit anderen Methoden wie z.b. kulturellen Medien interpretiert werden. Über Auftragskarte Multiplex PCR- Screening Stuhl Bei festen Proben erbsen- bis haselnussgroßes Stück bei flüssigen Proben min. 1 ml. Sterile Stuhlröhrchen Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags donnerstags Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, bei Beschädigung des Transportgefäßes, zu wenig Material. 6 Stunden positiv negativ 13

14 Nachweis von Vibrio cholera Multiplex-Realtime-PCR Der GPP Test wird als schnelle Screeningmethode auf pathogene Gastroenteritiserreger bei entsprechender Symptomatik des Patienten oder bei Ausbrüchen eingesetzt. Als reine Screeningmethode darf das Ergebnis nur in Kombination mit anderen Methoden wie z.b. kulturellen Medien interpretiert werden. Über Auftragskarte Multiplex PCR- Screening Stuhl Bei festen Proben erbsen- bis haselnussgroßes Stück bei flüssigen Proben min. 1 ml. Sterile Stuhlröhrchen Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags donnerstags Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, bei Beschädigung des Transportgefäßes, zu wenig Material. 6 Stunden positiv negativ 14

15 Nachweis von gastrointestinalen Parasiten Cryptosporidium (nur C. parvum und C. hominis) Entamoeba histolytica Giardia lamblia Multiplex-Realtime-PCR Der GPP Test wird als schnelle Screeningmethode auf pathogene Gastroenteritiserreger bei entsprechender Symptomatik des Patienten oder bei Ausbrüchen eingesetzt. Als reine Screeningmethode darf das Ergebnis nur in Kombination mit anderen Methoden wie z.b. kulturellen Medien interpretiert werden. Über Auftragskarte Multiplex PCR- Screening Stuhl Bei festen Proben erbsen- bis haselnussgroßes Stück bei flüssigen Proben min. 1 ml. Sterile Stuhlröhrchen Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation, ggf. Antibiotikatherapie, klinische Diagnose sowie anfordernde Kostenstelle und Kostenträger montags donnerstags Fehlender Zuordnung der Proben, da unbeschriftet, bei Beschädigung des Transportgefäßes, zu wenig Material. 6 Stunden positiv negativ 15

16 Spa-Typisierung spa Typ (z.b. t032) Klassische PCR mit anschließender Sequenzierung und Analyse des PCR- Produktes Das S. aureus Protein A-Gen (spa) enthält eine repetetive Sequenz, die mit konservierten Primern zuverlässig amplifiziert werden kann. Die Repeats haben üblicherweise eine Länge von 24 Basenpaaren und ihre Anzahl schwankt zwischen 1 und 20. Mit Hilfe dieses genetischen Fingerabdrucks können unterschiedliche S. aureus Stämme unterschieden werden. Die durch Sequenzierung erhaltene Sequenz des spa-gens kann mit einer zentralen Datenbank verglichen werden Extern über ärztl. Mitarbeiter Intern über Datei Typisierung Übersicht Bakterienkultur 1-2 frische Bakterienkolonien entfällt. Anzucht aus der Stammsammlung Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation dienstags Mischkultur min. 4 Tage 16

17 RAPD-, ERIC-Typisierung Polymerase-Kettenreaktion RAPD (random amplification of polymorphic DNA/ zufällig vervielfältigte polymorphe DNA) ist eine spezielle Form der PCR. Es werden kurze Primer mit einer Länge von 8-12 nt verwendet, die zufällig erzeugt wurden. Durch das Bandenmuster in der Elektrophorese lassen sich dann erste Rückschlüsse auf den Verwandtschaftsgrad der getesteten Proben ziehen, ohne eine aufwendige Sequenzierung durchzuführen. Die ERIC (enterobacterial repetitive intergenic consensus) PCR ist eine zweite schnelle Methode um einen genetischen Fingerabdruck zu erstellen. Hierbei werden Primer eingesetzt, die in einer repetitiven Sequenz binden, die im Bakteriengenom hoch konserviert sind. Extern über ärztl. Mitarbeiter Intern über Datei Typisierung Übersicht Bakterien-Isolat 1-2 frische Bakterienkolonien entfällt. Anzucht aus der Stammsammlung Patientendaten, Abnahmedatum und Uhrzeit, Lokalisation 1 x wöchentlich Mischkultur 1 Tag Die Bandenmuster der getesteten Isolate werden miteinander verglichen. Bei identischen Bandenmustern mit mind. zwei eingesetzten Primern besteht eine hohe Wahrscheinlichkeit, dass es sich bei den untersuchten Stämmen um nahe verwandte oder identische Stämme handelt. Die Bewertung erfolgt in Abhängigkeit der epidemiologischen Zusammenhänge. 17

18 Mikrobiologische Kontrolle von Blutkomponenten Kultureller Nachweis Wenn die zu untersuchende Probe Mikroorganismen enthält, wird durch die mikrobielle Umsetzung der Substrate im Kulturmedium Kohlendioxid produziert. Wird durch Wachstum von Mikroorganismen CO 2 produziert, so zeigt der Sensor am Boden jeder Kulturflasche einen Farbumschlag von Blaugrün zu einer helleren Färbung. Eine Leuchtdiode (LED) wirft Licht auf den Sensor. Die Lichtreflektion wird von einem Photodetektor gemessen. Auftragskarte Hygiene Umgebung Erythrozytenkonzentrat gefrorenes Frischplasma gefrorenes Frischplasma nach Lagerung Baby-Beutel Thrombozytenkonzentrat thrombozytenreiches Plasma autolog. Transfusionszwischenfall 4-10 ml pro Blutkulturflasche Blutkulturflasche aerob, anaerob Probenehmer, Datum, Uhrzeit Konservennummer od. Spendernummer montags - freitags fehlende Zuordnung min. 7 Tag Kein Nachweis von aeroben Bakterien und Pilzen. Kein Nachweis von anaeroben Bakterien Nachweis von aeroben Bakterien Nachweis von Pilzen Nachweis von anaeroben Bakterien 18

19 Trinkwasseruntersuchung E.coli /coliforme Keime Quantitativer Nachweis von E.coli und coliformen Keimen in Wasser oder anderen filtrierbaren Flüssigkeiten. Membranfiltration und anschließende Subkultur auf Selektivnährmedien Auftragskarte Hygiene Umgebung für filtrierbare Flüssigkeiten Auftragskarte Hygiene Trinkwasser für Trinkwasser Die fachgerechte Probenahme erfolgt nach Terminabsprache durch akkreditierte Probenehmer Trinkwasser Spülflüssigkeit Spülflotte Wasser aus Eismaschine Inhalationsflüssigkeit sonstige Flüssigkeiten ml Sterile Einmalgefäße 250 ml mit Inaktivierungssubstanz Natriumthiosulfat Bezeichnung der Entnahmestelle Genaue Objektbezeichnung Probenehmer, Probenahmezeit, Entnahmetemperatur montags - freitags entfällt min. 24 Stunden Kein Nachweis von E.coli oder coliforme Keime E.coli positiv coliforme Keime positiv Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 19

20 Pseudomonas aeruginosa Quantitative Bestimmung von Pseudomonas aeruginosa. Membranfiltration und anschließende Subkultur auf Selektivnährmedien Auftragskarte Hygiene Umgebung für filtrierbare Flüssigkeiten Auftragskarte Hygiene Trinkwasser für Trinkwasser Die fachgerechte Probenahme erfolgt nach Terminabsprache durch akkreditierte Probenehmer Trinkwasser Spülflüssigkeit Spülflotte Wasser aus Eismaschine Inhalationsflüssigkeit sonstige Flüssigkeiten Permeat Dialysierflüssigkeit Substitutionslösung Dialysat ml Sterile Einmalgefäße 250 ml mit Inaktivierungssubstanz Natriumthiosulfat Spezielle Entnahmesysteme im Bereich Dialyse Bezeichnung der Entnahmestelle Genaue Objektbezeichnung Probenehmer, Probenahmezeit, Entnahmetemperatur montags - freitags entfällt min. 24 Stunden Kein Nachweis von Pseudomonas aeruginosa Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 20

21 Intestinale Enterokokken Quantitative Bestimmung von intestinalen Enterokokken. Membranfiltration und anschließende Subkultur auf Selektivnährmedien Auftragskarte Hygiene Trinkwasser Die fachgerechte Probenahme erfolgt nach Terminabsprache durch akkreditierte Probenehmer Trinkwasser ml Sterile Einmalgefäße 250 ml mit Inaktivierungssubstanz Natriumthiosulfat Bezeichnung der Entnahmestelle Genaue Objektbezeichnung Probenehmer, Probenahmezeit, Entnahmetemperatur montags - freitags entfällt 48 Stunden Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 21

22 Clostridium difficile Kultureller Nachweis Identifizierung und Quantifizierung von Clostridium difficile in Flüssigkeiten mittels Membranfiltration und Direktansatz Auftragskarte Hygiene Umgebung Spülprobe aus Coloskopen 20 ml Sterile Einmalgefäße 50 ml Genaue Objektbezeichnung Probenehmer, Probenahmezeit montags - freitags entfällt min. 48 Stunden Nachweis von Clostridien Kein Nachweis von Clostridien 22

23 Legionella spp Kultureller Nachweis Identifizierung und Quantifizierung von Legionella spp. in einer Wasserprobe mittels Membranfiltration und Direktansatz Auftragskarte Hygiene Umgebung für filtrierbare Flüssigkeiten Auftragskarte Hygiene Trinkwasser für Trinkwasser Die fachgerechte Probenahme erfolgt nach Terminabsprache durch akkreditierte Probenehmer Trinkwasser Wasser aus wasserführenden Systemen ml Sterile Einmalgefäße 250 ml mit Inaktivierungssubstanz Natriumthiosulfat Bezeichnung der Entnahmestelle Genaue Objektbezeichnung Probenehmer, Probenahmezeit, Entnahmetemperatur montags - freitags entfällt min. 10 Tage Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 23

24 Bestimmung der vermehrungsfähigen Keime (Membranfiltration) Kulturelle Anzucht Bestimmung der volumenbezogenen Zahl bestimmter vermehrungsfähiger Keime (Koloniezahl) mittels Membranfiltration Auftragskarte Hygiene Umgebung für filtrierbare Flüssigkeiten Auftragskarte Hygiene Trinkwasser für Trinkwasser Die fachgerechte Probenahme erfolgt nach Terminabsprache durch akkreditierte Probenehmer Trinkwasser Spülflüssigkeit Spülflotte Wasser aus Eismaschine Inhalationsflüssigkeit sonstige Flüssigkeiten Permeat Dialysierflüssigkeit Substitutionslösung Dialysat Bis zu 100 ml Sterile Einmalgefäße 250 ml mit Inaktivierungssubstanz Natriumthiosulfat Spezielle Entnahmesysteme im Bereich Dialyse Bezeichnung der Entnahmestelle Genaue Objektbezeichnung Probenehmer, Probenahmezeit, Entnahmetemperatur montags - freitags entfällt 48h bis 7Tage Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 24

25 Bestimmung der vermehrungsfähigen Keime (Plattengußverfahren) Kulturelle Anzucht Das Verfahren ermöglicht die quantitative Auswertung mesophiler (opt. Temp C) Bakterien und Pilze unter aeroben Bedingungen. Auftragskarte Hygiene Umgebung für filtrierbare Flüssigkeiten Auftragskarte Hygiene Trinkwasser für Trinkwasser Die fachgerechte Probenahme erfolgt nach Terminabsprache durch akkreditierte Probenehmer Trinkwasser Bis zu 100 ml Sterile Einmalgefäße 250 ml mit Inaktivierungssubstanz Natriumthiosulfat Bezeichnung der Entnahmestelle Genaue Objektbezeichnung Probenehmer, Probenahmezeit, Entnahmetemperatur montags - freitags entfällt 48h Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 25

26 Nachweis von Mikroorganismen (Umgebungsuntersuchung) Kulturelle Anzucht (Semi-) Quantitatives Verfahren zum Nachweis vermehrungsfähigen Mikroorganismen aus unbelebter Materie. Auftragskarte Hygiene Umgebung Probenahme nur durch autorisiertes Personal Abklatsch von Flächen mittels RODAC Platten Abstrich mittels Tupfer an schwer zugänglichen Entnahmepunkten Sedimentationsplatten in Räumen oder unter einer Laminar-air-flow Luftkeimsammlung mittels Ansaugung Abstrich, Abklatsch Sedimentationsplatten Abstrich, Nährmedienschalen Bezeichnung der Entnahmestelle Genaue Objektbezeichnung Probenehmer, Probenahmezeit, montags freitags bei nicht routinemäßigen Proben nur nach tel. Rücksprache entfällt 48 Stunden bis 4 Tage Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 26

27 Überprüfung der Wirksamkeit von Dampfsterilisatoren Kulturelle Anzucht Das Verfahren basiert auf der Reaktivierung von Geobacillus stearothermophilus Bakteriensporen auf Prüfkörpern. Die Prüfkörper wurden mit einer definierten Sporenkonzentration beaufschlagt Prüfsporen werden in einer semipermeablen Membran dem Sterilisationsprozess unterzogen. Prüfkörper in Suspension werden in einer Glasampulle dem Sterilisationsprozess unterzogen. Auftragskarte Hygiene- Geräteüberprüfung Die Indikatoren stellt das Institut für Hygiene zur Verfügung Indikatoren auf Filterstreifen in einer semipermeablen Membran Indikatoren (Suspension in Glasampullen) Abhängig von der jeweiligen Sterilisationseinheit des Gerätes entfällt Bezeichnung der Gerätes, Sterilisationsprogramm, Sterilgut Probenehmer, Probenahmezeit, montags - freitags Beschädigte Indikatoren. Die dem Filterstreifen umgebende Membran darf nicht geöffnet sein. beschädigte Glasampulle 7 Tage Zielorganismus vorhanden/nicht vorhanden. Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 27

28 Überprüfung der Wirksamkeit von Heissluftsterilisatoren Kulturelle Anzucht Das Verfahren basiert auf der Reaktivierung von Bacillus subtilis Bakteriensporen auf Prüfkörpern. Die Prüfkörper wurden mit einer definierten Sporenkonzentration beaufschlagt Prüfsporen werden in einer semipermeablen Membran dem Sterilisationsprozess unterzogen. Auftragskarte Hygiene- Geräteüberprüfung Die Indikatoren stellt das Institut für Hygiene zur Verfügung Indikatoren auf Filterstreifen in einer semipermeablen Membran Abhängig von der jeweiligen Sterilisationseinheit des Gerätes entfällt Bezeichnung der Gerätes, Sterilisationsprogramm, Sterilgut Probenehmer, Probenahmezeit, montags - freitags Beschädigte Indikatoren. Die dem Filterstreifen umgebende Membran darf nicht geöffnet sein. 7 Tage Zielorganismus vorhanden/nicht vorhanden. Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 28

29 Überprüfung von Reinigungs- und Desinfektionsgeräte (RDG) mittels Bioindikatoren Kulturelle Anzucht Das Verfahren basiert auf der Rekultivierung von Enterococcus faecium ATCC 6057 von verschiedenen Prüfkörpern mit Testanschmutzung Blut. Die Prüfkörper wurden zuvor mit einer definierten Keimmenge beaufschlagt und dem thermischen Reinigungs- und Desinfektionsverfahren unterzogen. Auftragskarte Hygiene- Geräteüberprüfung Die Indikatoren stellt das Institut für Hygiene zur Verfügung Indikatoren auf Metallschrauben mit Testanschmutzung Blut 10 Schrauben +Transportkontrolle Jede Testschraube in einem sterilen Röhrchen Bezeichnung der Gerätes, Programm, Beladungsgut Probenehmer, Probenahmezeit, montags - freitags entfällt 4 Tage Zielorganismus vorhanden/nicht vorhanden Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 29

30 Überprüfung von Reinigungs- und Desinfektionsgeräte (RDGE) mittels Bioindikatoren Kulturelle Anzucht Das Verfahren basiert auf der Rekultivierung von Enterococcus faecium ATCC 6057 von verschiedenen Prüfkörpern mit Testanschmutzung RAM. Die Prüfkörper wurden zuvor mit einer definierten Keimmenge beaufschlagt und dem thermischen Reinigungs- und Desinfektionsverfahren unterzogen. Auftragskarte Hygiene- Geräteüberprüfung Die Indikatoren stellt das Institut für Hygiene zur Verfügung Indikatoren auf Metallplättchen mit Testanschmutzung RAM 3 Metallplättchen +Transportkontrolle Jedes Metallplättchen in einem sterilen Röhrchen Bezeichnung der Gerätes, Programm, Beladungsposition Probenehmer, Probenahmezeit, montags - freitags entfällt 7 Tage Zielorganismus vorhanden/nicht vorhanden Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 30

31 Überprüfung von Reinigungs- und Desinfektionsgeräten (RDGS) mittels Bioindikatoren Kulturelle Anzucht Das Verfahren basiert auf der Rekultivierung von Enterococcus faecium ATCC 6057 von verschiedenen Prüfkörpern mit Testanschmutzung RAM. Die Prüfkörper wurden zuvor mit einer definierten Keimmenge beaufschlagt und dem thermischen Reinigungs- und Desinfektionsverfahren unterzogen. Auftragskarte Hygiene- Geräteüberprüfung Die Indikatoren stellt das Institut für Hygiene zur Verfügung Indikatoren auf Metallplättchen mit Testanschmutzung RAM 4 Metallplättchen +Transportkontrolle Jedes Metallplättchen in einem sterilen Röhrchen Bezeichnung der Gerätes, Programm, Beladungsposition Probenehmer, Probenahmezeit, montags - freitags entfällt 4 Tage Zielorganismus vorhanden/nicht vorhanden Die Ergebnisse werden entsprechend den Grenz- und Richtwerten der zugrundeliegenden Verordnung/ Richtlinie beurteilt 31