3,3'-DIAMINOBENZIDINE TETRAHYDROCHLORIDE-PLUS KIT SUBSTRATE FOR HORSERADISH PEROXIDASE

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1 Liquid DAB-Plus Substrate Kit Lot No. 3,3'-DIAMINOBENZIDINE TETRAHYDROCHLORIDE-PLUS KIT SUBSTRATE FOR HORSERADISH PEROXIDASE INTENDED USE For In Vitro Diagnostic Use. CAUTION: Not for human or animal therapeutic use. Uses other than the labeled intended use may be a violation of local law INTRODUCTION This substrate kit will produce a darker brown colored deposit than regular DAB. If the DAB Enhancer is not desired, this kit can still be used to develop a regular DAB brown colored deposit. REAGENTS PROVIDED (1) 1 dropper bottle (12 ml) of substrate buffer concentrate (20X). (2) 1 dropper bottle (12 ml) of DAB chromogen concentrate (20X). (3) 1 dropper bottle (12 ml) of concentrate hydrogen peroxide (20X). (4) 1 dropper bottle (12 ml) of concentrate DAB enhancer (20X). REAGENT PREPARATION 1. Add 1 drop (50 μl) of buffer concentrate Reagent (1) in 1 ml of distilled water. Mix well. 2. Add 1 drop of Reagent (2) and 1 drop of Reagent (3). Mix again. 3. Keep solution away from light and use within 30 minutes. 4. IF USE OF DAB ENHANCER IS DESIRED: Add 1 drop of Reagent (4) concentrate DAB enhancer to 1 ml of distilled water. Mix well. STORAGE: Store at 2-8 C RECOMMENDED GUIDELINES FOR USE 1. Incubate reagent mixture for 3-5 minutes at room temperature. Color development may be monitored under a microscope. 2. Rinse in 2-3 changes of distilled water. 3. Immerse slides in DAB enhancer for 1-3 minutes. Color development may be monitored under a microscope. 4. Rinse in 2-3 changes of distilled water. 5. Counterstain. 6. Dehydrate, clear, and coverslip. WARNING DAB is a possible carcinogen. Please take necessary precautions. Authorized Representative for IVDD 98/79/EC: Invitrogen Ltd ). By use of these products you accept the terms and conditions of all applicable Limited Use Label Licenses.

2 paquete DAB-Plus líquido Juego de sustratos PAQUETE DE SUSTRATO 3,3 -TETRAHIDROCLORURO DE DIAMINOBENZIDINA-PLUS SUSTRATO PARA LA PEROXIDASA DE RÁBANO INTRODUCCIÓN Este paquete de sustratos producirá un depósito de color marrón más oscuro que el DAB normal. Si no se quiere utilizar este intensificador del DAB, se puede usar este paquete para obtener un depósito de color marrón como con la solución de DAB normal. REACTIVOS SUMINISTRADOS (1) 1 frasco cuentagotas (12 ml) de concentrado de tampón sustrato (concentración 20x). (2) 1 frasco cuentagotas (12 ml) de concentrado de cromógeno DAB (concentración 20x). (3) 1 frasco cuentagotas (12 ml) de concentrado de peróxido de hidrógeno (concentración 20x). (4) 1 frasco cuentagotas (12 ml) de intensificador DAB concentrado (concentración 20x). PREPARACIÓN DE REACTIVOS 1. Añadir una gota (50 µl) de tampón concentrado (reactivo (1)) a 1 ml de agua destilada. Mezclar bien. 2. Añadir una gota de reactivo (2) y 1 gota de reactivo (3). Mezclar bien. 3. Mantener la solución apartada de la luz. No dejar pasar más de 30 minutos antes de su utilización. 4. SI SE QUIERE UTILIZAR EL INTENSIFICADOR DAB: Añadir una gota de reactivo (4), intensificador DAB concentrado, a 1 ml de agua destilada. Mezclar bien. ALMACENAMIENTO Guardar a 2-8ºC. DIRECTRICES DE USO RECOMENDADAS 1. Incubar la mezcla de reactivos durante unos 5 minutos a temperatura ambiente. La evolución del color puede observarse con el microscopio. 2. Enjuagar en 2 ó 3 baños de agua destilada. 3. Sumergir los portaobjetos en intensificador de 1 a 3 minutos. La evolución del color puede observarse con el microscopio. 4. Enjuagar en 2 ó 3 baños de agua destilada. 5. Proceder con la contratinción. 6. Deshidrata, limpiar y colocar el cubreobjetos. ADVERTENCIA El DAB es un posible carcinógeno. Tomar las medidas de precaución necesarias. SI TIENE ALGUNA PREGUNTA SOBRE ESTE PRODUCTO, DIRÍJASE A SU DISTRIBUIDOR LOCAL. Representante autorizado de IVDD 98/79/EC: ). By use of these products you accept the terms and conditions of all applicable Limited Use Label Licenses.

3 Equipement Liquide DAB-Plus Equipement de Substrat EQUIPEMENT DE 3,3'- DE TETRAHYDROCHLORIDE-PLUS DIAMINOBENZIDINE SUBSTRAT DE PEROXYDASE POUR RAIFORT INTRODUCTION Cet équipement de substrat produira un dépôt de couleur plus marron que celle normale du DAB. Si l'amplificateur DAB n'est pas désiré, l'équipement peut toujours être utilisé pour développer un dépôt DAB de couleur marron normale. REACTIFS FOURNIS (1) 1 bouteille compte-gouttes (12 ml) de concentré de substrat de tampon (20X). (2) 1 bouteille compte-gouttes (12 ml) de concentré de chromogène DAB (20X). (3) 1 bouteille compte-gouttes (12 ml) de concentré de peroxyde d'hydrogène (20X). (4) 1 bouteille compte-gouttes (12 ml) de concentré d'amplificateur DAB (20X). PREPARATION DES REACTIFS 1. Ajouter 1 goutte (50 μl) du Réactif (1) du concentré tampon à 1 ml d'eau distillée. Bien mélanger. 2. Ajouter 1 goutte du Réactif (2) et 1 goutte du Réactif (3). Mélanger à nouveau. 3. Garder la solution loin de la lumière et utiliser la dans les 30 minutes qui suivent. 4. SI L'UTILISATION DE L'AMPLIFICATEUR DAB EST DESIRE: Ajouter 1 goutte du Réactif (4) de l'amplificateur concentré DAB à 1 ml d'eau distillée. Bien mélanger. STOCKAGE Garder à 2-8 C. DIRECTIVES D'UTILISATION RECOMMANDEES 1. Incuber le mélange réactif pour ~5 minutes à température ambiante. Le développement des couleurs peut être régulé au microscope. 2. Rincer 2-3 fois dans de l'eau distillée. 3. Plonger les lames dans l'amplificateur DAB pour 1-3 minutes. Le développement des couleurs peut être régulé au microscope. 4. Rincer 2-3 fois dans de l'eau distillée. 5. Coloration de contraste. 6. Déshydrater, clarifier et couvrir. AVERTISSEMENT DAB peut être carcinogène. Merci de prendre les précautions nécessaires. SI VOUS AVEZ DES QUESTIONS SUR CE PRODUIT CONTACTEZ VOTRE DISTRIBUTEUR LOCAL Représentant Autorisé pour IVDD 98/79/EC: ). By use of these products you accept the terms and conditions of all applicable Limited Use Label Licenses.

4 DAB-Plus Liquido Kit Substrato PLUS KIT A BASE DI 3,3'-DIAMINOBENZIDINA TETRAIDROCLORURO SUBSTRATO PER PEROSSIDASI A BASE DI RADICE DI RAFANO INTRODUZIONE Questo kit di substrato produrrà un deposito di colore marrone più scuro rispetto al produce DAB comune. Se non si desidera l Amplificante DAB, si può ancora utilizzare questo kit per sviluppare un deposito DAB di colorazione marrone. REAGENTI FORNITI (1) Una boccetta contagocce (12 ml) di tampone substrato concentrato (20X). (2) Una boccetta contagocce (12 ml) di DAB cromogeno concentrate ( 20X). (3) Una boccetta contagocce (12 ml) di perossido di idrogeno concentrato (20X). (4) Una boccetta contagocce (12 ml) di amplificante DAB concentrate (20X). PREPARAZIONE DEL REAGENTE 1. Aggiungere 1 goccia (50 ml) di tampone concentrato Reagente (1) in 1 ml di acqua distillata. Mescolare bene. 2. Aggiungere 1 goccia di Reagente (2) e 1 goccia di Reagente (3). Mescolare di nuovo. 3. Conservare la soluzione al riparo dalla luce ed utilizzare entro 30 minuti. 4. SE SI DESIDERA UTILIZZARE L AMPLIFICANTE DAB: aggiungere 1 goccia di Reagente (4) concentrato DAB amplificante ad 1 ml di acqua distillata. Mescolare bene. CONSERVAZIONE Conservare a 2-8 C RACCOMANDAZIONI PER L USO 1. Incubare la mistura di reagenti per ~5 minuti a temperatura ambiente. Lo sviluppo del colore può essere monitorato al microscopio. 2. Risciacquare con 2-3 cambi di acqua distillata. 3. Immergere i vetrini in amplificante DAB per 1-3 minuti. Lo sviluppo del colore può essere monitorato al microscopio. 4. Risciacquare con 2-3 cambi di acqua distillata. 5. Controcolorare. 6. Deidratare, chiarificare, e aggiungere il coverslip. AVVERTENZA DAB è considerata un sospetto carcinogeno. Seguire dunque tutti gli accorgimenti raccomandati per le sostanze potenzialmente carcinogene. PER DOMANDE SUL PRODOTTO SIETE PREGATI DI CONTATTARE IL DISTRIBUTORE A VOI PIU VICINO. Rappresentante Autorizzato per IVDD 98/79/EC: ). By use of these products you accept the terms and conditions of all applicable Limited Use Label Licenses.

5 Flüssiges DAB-Plus Substrat Kit 3,3'-DIAMINOBENZIDIN TETRAHYDROCHLORID -PLUS KIT SUBSTRAT FÜR MEERRETTICH PEROXIDASE EINFÜHRUNG Dieses Substrat Kit produziert eine dunklere braun gefärbte Ablagerung als reguläres DAB. Wenn der DAB Verstärker nicht erwünscht ist, kann dieses Kit immer noch benutzt werden, um eine reguläre DAB braun gefärbte Ablagerung zu entwickeln. GELIEFERTE REAGENZIEN (1) 1 Tropfflasche (12 ml) Substrat Pufferkonzentrat (20x). (2) 1 Tropfflasche (12 ml) DAB chromogen Konzentrat (20x). (3) 1 Tropfflasche (12 ml) hydrogen Peroxyd Konzentrat (20x). (4) 1 Tropfflasche (12 ml) DAB Verstärker Konzentrat (20X). REAGENS PRÄPARATION 1. 1 Tropfen (50 μl) Pufferkonzentrat Reagens auf 1 ml destilliertes Wasser geben. Gut mischen Tropfen von Reagens (2) und 1 Tropfen von Reagens(3) hinzugeben. Erneut mischen. 3. Die Lösung fern von Licht halten und sie innerhalb 30 Minuten benutzen. 4. WENN DER GEBRAUCH VOM DAB VERSTÄRKER ERWÜNSCHT IST: 1 5. Tropfen von Reagens (4) DAB Verstärker Konzentrat auf 1 ml destilliertes Wasser geben. Gut mischen. LAGERUNG Bei 2-8 C lagern. EMPFOHLENE BENUTZUNGSRICHTLINIEN 1. Die Reagensmischung für ~5 Minuten bei Zimmertemperatur inkubieren. Farbentwicklung kann unter einem Mikroskop überwacht werden mal in gewechseltem, destillierten Wasser spülen. 3. Die Objektträger in DAB Verstärker für 1-3 Minuten tauchen. Farbentwicklung kann unter einem Mikroskop überwacht werden mal in gewechseltem, destillierten Wasser spülen. 5. Zweite Färbung. 6. Dehydrieren, klären und mit Deckglas abdecken WARNUNG: DAB ist ein mögliches karzinogen. Bitte unternehmen sie die notwendigen Vorsichtsmassnahmen. SOLLTEN SIE IRGENDWELCHE FRAGEN ÜBER DIESE PRODTE HABEN, MELDEN SIE SICH BITTE BEI IHREM ÖRTLICHEN VERTEILER Bevollmächtigter Repräsentant für IVDD 98/79/EC:, ). By use of these products you accept the terms and conditions of all applicable Limited Use Label Licenses.