Messung des extrahierbaren Silbers aus Askina Calgitrol Ag am Schweine-Modell
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- Alwin Horst Heinrich
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1 Messung des extrahierbaren Silbers aus Askina Calgitrol Ag am Schweine-Modell ZIEL Messung der Konzentration an extrahierbarem Silber aus Askina Calgitrol Ag nach Applikation auf tiefe Hautwunden beim Hausschwein. PROTOKOLL METHODE Einem Hausschwein wurden auf chirurgischem Weg zwei kreisförmige, tiefe Wunden (2,0-2,3 cm Durchmesser; 5-7 mm tief) beigebracht. Anschliessend wurde jeweils Askina Calgitrol Ag appliziert und mit Hilfe eines Folienverbands (Askina Derm) fixiert. Vor der Behandlung (Tag 0) sowie an den Tagen 1, 3 und 7 erfolgte eine Blutprobenentnahme zur Serumgewinnung. Die Serumproben wurden mittels Atomemissions-Spektralanalyse mit induktiv gekoppeltem Plasma (ICP-OES) auf ihren Silbergehalt hin untersucht.
2 ERGEBNISSE Unter diesen Studienbedingungen waren die Silberkonzentrationen zu allen Erhebungszeitpunkten (Tag 1, 3 und 7) vergleichbar. Die höchste Konzentration mit 0,008 ppm wurde am Tag 7 gemessen. Im Vergleich zu den durchschnittlichen Silber-Blutspiegeln beim Menschen ist diese Konzentration als unerheblich einzustufen. Proben Vor Behandlung Silberkonzentration in ppm (parts per million) in µg/g NN Tag 1 0,005 Tag 3 0,002 Tag 7 0,007-0,008 Nachweisgrenze 0,001 NN = nicht nachweisbar SCHLUSSFOLGERUNG Askina Calgitrol Ag führt nicht zu einer signifikanten Konzentrationserhöhung der Silberionen im Blutserum.
3 Untersuchung zur Silbermigration aus Askina Calgitrol Ag in Schweine-Serum ZIEL Beurteilung der Silbermigration aus Askina Calgitrol Ag in Schweine- Serum über bestimmte Zeiträume. PROTOKOLL METHODE Untersucht wurden drei Chargen Askina Calgitrol Ag. Die Tests wurden jeweils in zweifacher Wiederholung durchgeführt. Von jedem Wundverband wurden Scheiben (3,9 cm Durchmesser) ausgestanzt und in 20 ml Schweine-Serum unter gleichen Bedingungen inkubiert. Nach festgelegten Zeitintervallen wurde jeweils das Schweine-Serum, in dem der Wundverband inkubiert war, filtriert (siehe Grafik A und B). A B Der Silbergehalt des Filtrats wurde mittels Atomemissions-Spektralanalyse mit induktiv gekoppeltem Plasma (ICP-OES) bestimmt und auf diese Weise der prozentuale Anteil des aus Askina Calgitrol Ag freigesetzten Silbers ermittelt. Die Wundverbandrückstände im Filterpapier wurden mit Hilfe von Mineralsäuren vollständig abgebaut und separat mittels ICP-OES auf ihren Silbergehalt hin untersucht. Auf diese Weise liess sich der prozentuale, im Wundverband verbliebene, Silberanteil ermitteln.
4 1 Aus Askina Calgitrol Ag freigesetztes Silber (ppm) - dreidimensionale Messung ERGEBNISSE Die Silberfreisetzung aus Askina Calgitrol Ag erfolgt allmählich und mit konstanter Rate. (Grafik 1) Silber (ppm) Askina Calgitrol Ag setzt relativ geringe Konzentrationen des gesamten im Wundverband verfügbaren Silbers frei. (Grafik A) Zeit (h) A Aus der Silberalginatmatrix von Askina Calgitrol Ag freigesetztes Silber B Rückstand an Silbergehalt in Askina Calgitrol Ag Freigesetztes Silber (%) Verbliebener Silberanteil (%) Zeit (h) Zeit (h) SCHLUSSFOLGERUNG Die Freisetzung von Siberionen aus Askina Calgitrol Ag erfolgt kontrolliert und nachhaltig.
5 Vergleichende Beurteilung der Hautreaktionen im Hinblick auf Erythem, Ödem und Hautverfärbung ZIEL Vergleich der Hautreaktionen mehrerer silberhaltiger Wundverbände in Bezug auf Erythem Ödem Hautverfärbung PROTOKOLL METHODE Am menschlichen Unterarm wurde die gesamte Innenseite mit 70 % Isopropylalkohol gereinigt und entfettet. Mit Hilfe von Heftpflastern wurden anschliessend zugeschnittene Stücke (ca. 6 x 12,5 mm) jeden Verbands auf die Haut appliziert. Im Falle eines Schaumgel-Produkts wurde ein Gramm Gel auf das Heftpflaster aufgebracht und anschliessend an der entsprechenden Hautstelle fixiert. Die Ellenbeuge wurde dabei ausgespart. Untersuchter silberhaltiger Wundverband Produktspezifikationen 1. Askina Calgitrol Ag - B. Braun Medical AG Silber-Alginat-Schaumstoff-Auflage, im trockenen Zustand appliziert 2. Brandwundenverband A (nanokristallines Silber) Trocken appliziert 3. Brandwundenverband A (nanokristallines Silber) Vor Applikation angefeuchtet 4. Silberhaltiger Wundverband B (nanokristallines Silber) Vor Applikation angefeuchtet 5. Silberhaltiger Wundverband B (nanokristallines Silber) Trocken appliziert 6. Silberbeschichteter Wundverband C1 Trocken appliziert 7. Silberbeschichteter Wundverband C2 Applikation nach Anfeuchtung mit 2 Tropfen entionisiertem Wasser 8. Calgitrol-Alginat-Schaumgel Silberalginat-Schaumgel Die Hautreaktionen wurden jeweils anhand einer Punkteskala von 0 bis 4 für Erythem, Ödem und allfällige Verfärbungen bewertet. Punktwert Erythem Ödem Hautverfärbung 0 keine keine keine 1 geringfügig geringfügig geringfügig 2 klar umschrieben leicht mässig 3 mässig mässig dunkel 4 hochgradig hochgradig hochgradig
6 ERGEBNISSE Untersuchter silberhaltiger Wundverband Erythem Ödem Hautverfärbung 1. Askina Calgitrol Ag - B. Braun Medical AG Brandwundenverband A (nanokristallines Silber) Brandwundenverband A (nanokristallines Silber) Silberhaltiger Wundverband B (nanokristallines Silber) Silberhaltiger Wundverband B (nanokristallines Silber) Silberbeschichteter Wundverband C Silberbeschichteter Wundverband C Calgitrol-Alginat-Schaumgel Keiner der untersuchten Wundverbände verursachte ein Erythem. Zwei Wundverbände (3 und 5) verursachten ein geringfügiges bis leichtes Ödem. Zu Verfärbungen kam es bei allen Wundverbänden, mit Ausnahme von Askina Calgitrol Ag und dem silberbeschichteten Wundverband C2. SCHLUSSFOLGERUNG Askina Calgitrol Ag verursacht keine Hautreizung, Fleckenbildung oder Hautverfärbung.
7 Messung des mikrobioziden Potentials der Askina Calgitrol Ag Silber-Schaumstoff-Auflage ZIEL Messung der mikrobioziden Wirksamkeit der Askina Calgitrol Ag Silber-Schaumstoff- Auflage (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans) PROTOKOLL METHODE Zur Visualisierung der Bakterien und zur Bewertung ihrer Wachstumsmerkmale wurden die Zellpopulationen mit Hilfe des LIVE/DEAD Baclight Bacterial Viability Kit (Molecular Probes; Invitrogen) gefärbt. Das Messkit bestand aus zwei Fluoreszenzfarbstoffen, STYO 9 (grün) und Propidiumiodid (rot), jeweils in vorbefüllten Kunststoffpipetten verpackt. Die Mikroorganismen (Candida albicans ATCC2091; Escherichia coli ATCC8739 und Staphylococcus aureus ATCC 6538P) wurden mit dem Farbstoffgemisch gefärbt und auf Askina Calgitrol Ag inkubiert. Lebende oder vitale Bakterien fluoreszieren grün. Bei Schädigung der Bakterienwand schlägt die Farbe nach rot um. Tote oder absterbende Bakterien sind daher rot gefärbt. Zu bestimmten Zeitpunkten (nach 0, 1, 2, 3, 4, 12 bzw. 24 Stunden) wurde der Wundverband mit konfokalen Leica Laserscan-Mikroskops TCS AOBS untersucht. Die lebenden (grünen) und toten (roten) Mikroorganismen wurden mit Hilfe der Image J Software ausgezählt, basierend auf jeweils 10 Bildern pro Untersuchungszeitpunkt. Die Ergebnisse zeigen die prozentuale Vitalität für jeden Untersuchungszeitpunkt. ERGEBNISSE Nach 12-stündiger Inkubation wurde bereits eine hohe Mortalität beobachtet, nach 24 Stunden waren in allen Kulturen die Zellen zu fast 100% abgestorben. Vitalität der Mikroorganismen in % auf Askina Calgitrol Ag Silber-Schaumstoff-Auflage 0 Std. 1 Std. 2 Std. 3 Std. 4 Std. 12 Std. 24 Std. C. albicans % % % % % % 0 % E. coli % % % % % % 5.43 % S. aureus 100 % 100 % % % % % 0.55 %
8 Vergleich der prozentualen Vitalität der auf Askina Calgitrol Ag Silber-Schaumstoff- Auflage inkubierten Spezies über einen Zeitraum von 24 Stunden S. aureus C. albicans E. coli Zeit (h) Die folgenden Abbildungen zeigen beispielhaft für jeden der untersuchten Mikroorganismen das Färbemuster zum jeweiligen Messzeitpunkt Auf der Askina Calgitrol Ag Silber-Schaumstoff-Auflage inkubierte Mikroorganismen (100 µl unverdünnte Suspension) 0 Std. 2 Std. 12 Std. 24 Std. C. albicans E. coli S. aureus SCHLUSSFOLGERUNG Askina Calgitrol Ag tötet Mikroorganismen innerhalb eines Zeitraums von 24 Stunden ab.
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