Dr. U. Noss, Dr. A. Arzberger

Transkript

1 50. Jahrestagung Physiologie u. Pathologie der Fortpflanzung, gleichzeitig 42. Veterinär- Humanmedizinische Gemeinschaftstagung München Präimplantationsdiagnostik bei monogenen Erkrankungen und chromosomalen Aberrationen Dr. U. Noss, Dr. A. Arzberger Reproduktionsmedizin München MVZ Dr. W.Bollmann Dr. T.Brückner Dr. D.Noss Dr. U.Noss

2 50. Jahrestagung Physiologie u. Pathologie der Fortpflanzung, gleichzeitig 42. Veterinär- Humanmedizinische Gemeinschaftstagung München 2011 Erlaß des PID Gesetzes durch den deutschen Bundestag

3 50. Jahrestagung Physiologie u. Pathologie der Fortpflanzung, gleichzeitig 42. Veterinär- Humanmedizinische Gemeinschaftstagung München 2011 Erlass des PID Gesetzes durch den deutschen Bundestag 3a Praïmplantationsdiagnostik (1) Wer Zellen eines Embryos in vitro vor seinem intrauterinen Transfer genetisch untersucht (Praïmplantationsdiagnostik), wird mit Freiheitsstrafe bis zu einem Jahr oder mit Geldstrafe bestraft.

4 50. Jahrestagung Physiologie u. Pathologie der Fortpflanzung, gleichzeitig 42. Veterinär- Humanmedizinische Gemeinschaftstagung München 2011 Erlass des PID Gesetzes durch den deutschen Bundestag 3a (2) Besteht auf Grund der genetischen Disposition der Eltern oder eines Elternteiles fu r deren Nachkommen eine hohe Wahrscheinlichkeit fu r eine schwerwiegende Erbkrankheit, handelt nicht rechtswidrig, wer zur Herbeifuḧrung einer Schwangerschaft nach dem allgemein anerkannten Stand der medizinischen Wissenschaft und Technik einen Embryo in vitro vor dem intrauterinen Transfer auf die Gefahr dieser Krankheit untersucht. Nicht rechtswidrig handelt auch, wer eine Praïmplantationsdiagnostik zur Feststellung einer schwerwiegenden Scha digung des Embryos vornimmt, die mit hoher Wahrscheinlichkeit zu einer Tot- oder Fehlgeburt fuḧren wird.

5 50. Jahrestagung Physiologie u. Pathologie der Fortpflanzung, gleichzeitig 42. Veterinär- Humanmedizinische Gemeinschaftstagung München Definition des Embryos lt. Embryonenschutzgesetz (ESchG) von 1991 die befruchtete, entwicklungsfähige menschliche Eizelle vom Zeitpunkt der Kernverschmelzung an, ferner jede einem Embryo entnommene totipotente Zelle, die sich bei Vorliegen der dafür erforderlichen weiteren Voraussetzungen zu teilen und zu einem Individuum zu entwickeln vermag.

6 Präimplantationsdiagnostik (PID): genetische Untersuchung an extrakorporalen Embryonen 1. Diagnostik von Genmutationen bei schweren Erberkrankungen Hohe Wahrscheinlichkeit für schwerwiegende Erberkrankung. Schwerwiegende Schädigung des Embryos, die mit hoher Wahrscheinlichkeit zu einer Tot- oder Fehlgeburt führen wird 2. Diagnostik von chromosomalen Aberrationen ( in der Regel nicht lebensfähig)

7 Reproduktionsmedizin Bollmann Reproduktionsmedizin Brückner Noss Bollmann Brückner Noss PID-Zentrum PID-Zentrum Genetik Synlab Genetik Humane Genetik C. Nevinny Humane GenetikC.Nevinny 2010 BGH-Urteil Bloechle 2010 Gründung unseres PID Zentrums nach BGH-Urteil (Bloechle) 2011 PID-Gesetz 2011 Beginn der PID Behandlungszyklen (monogene Erkrankungen, Aneuploidien) 2015 Bayerische PID-Verordnung 2015 Zulassung als bayerisches PID-Zentrum (von insges. 4) 2015 Start Ethikkommission Bayern 2016 Verwaltungsgerichts-Urteil (Aneuploidie-Untersuchungen ohne Zustimmung der Ethikkommission nicht zulässig)

8 Reproduktionsmedizin Bollmann Reproduktionsmedizin Brückner Noss Bollmann Brückner Noss PID-Zentrum PID-Zentrum PID Teams Genetik Synlab Genetik Humane Genetik C. Nevinny Humane GenetikC.Nevinny Dipl. Biol. Birgit Poost M.Sc. Cornelia Hillenbrand M.Sc. Kerstin Lehr Annemarie Groß Vanessa Rau Dr. Päivi Forsblom Dipl. Biol.Jana Pricelius M.Sc.Maximiliane Kronberger M.Sc.Beate Solfrank Dipl. Biol. Claudia Bayerl Mona Stecher Daniela Streidl

9 Organisatorischer Ablauf einer PID-Behandlung

10 Organisatorischer Ablauf einer PID-Behandlung Reproduktionsmedizin Bollmann Brückner Noss PID-Zentrum Genetik Synlab C. Nevinny Stimulation Humangenetische Beratung Antragstellung Ethikkommission durch die Patientin Eizellgewinnung Blastozysten- Biopsie PID / acgh Transfer

11 Behandlungszyklus für PID

12 Behandlungszyklus für PID Zyklustag

13 Behandlungszyklus für PID FSH FSH +GnRH-Antagonist Follikulometrie+Hormonbest Tage Zyklustag

14 Behandlungszyklus für PID Ovulationstrigger FSH FSH +GnRH-Antagonist Follikulometrie+Hormonbest Tage Zyklustag

15 Behandlungszyklus für PID Ovulationstrigger FSH FSH +GnRH-Antagonist Ovum Pick-Up Follikulometrie+Hormonbest Tage h Zyklustag D 0

16 Behandlungszyklus für PID Ovulationstrigger FSH FSH +GnRH-Antagonist Ovum Pick-Up Follikulometrie+Hormonbest Tage h ICSI Embryokultur Zyklustag D 0 D+5 D+6

17 Behandlungszyklus für PID Ovulationstrigger FSH FSH +GnRH-Antagonist Ovum Pick-Up Trophektoderm-Biopsie & Blastozysten Vitrifikation Follikulometrie+Hormonbest Tage h ICSI Embryokultur Zyklustag D 0 D+5 D+6

18 Behandlungszyklus für PID Ovulationstrigger FSH FSH +GnRH-Antagonist Ovum Pick-Up Trophektoderm-Biopsie & Blastozysten Vitrifikation Follikulometrie+Hormonbest. +36 ICSI Embryokultur h Tage... PID/CGH Zyklustag D 0 D+5 D+6

19 PID-Zentrum Reproduktionsmedizin Bollmann Brückner Noss Bollmann Brückner Noss Genetik Genetik Synlab Humane Humane GenetikC.Nevinny Genetik C. Nevinny Auftau zu späterem Zeitpunkt Leerkontrolle Biopsat 1-2 µl bei - 20 C

20

21 Laseröffnung D3

22 Trophektodermbiiospie D5/6 (Doppelbiopsie)

23 Aneuploidie-Untersuchung/Translokation: Array-Hybridisierung Whole Genome Amplification (WGA) Array-Hybridisierung Biopsat Referenz aneuploides Profil euploides Profil Abweichung von der Normaldosis (log 2 -ratio) Chromosomale Lokalisation

24 Monogene Erkrankung: Karyomapping Haploblocks

25 Monogene Erkrankung: Karyomapping Whole Genome Amplification (MDA) Bead-Arra SNPs Scan mit iscan, Analyse Haploblocks

26 Präimplantationsdiagnostik bei monogenen Erkrankungen und chromosomalen Aberrationen Resultate

27 Reproduktionsmedizin Bollmann Reproduktionsmedizin Brückner Noss Bollmann Brückner Noss PID-Zentrum PID-Zentrum Genetik Synlab Humane Genetik Genetik C. Nevinny Humane GenetikC.Nevinny PID-Untersuchungen Indikationen Paare Kinder Monogene Diagnostik + acgh Balanzierte Translokationen Rez. Aborte und Implantationsversager

28 1. Monogene Erkrankungen (Veränderung eines Gens),

29 1. Monogene Erkrankungen (Veränderung eines Gens), Anzahl der behandelten Paare 27

30 1. Monogene Erkrankungen (Veränderung eines Gens), Anzahl der behandelten Paare 27 Autosomal dominant Vererbung 50% Autosomal rezessiv Vererbung 25% X-Chrom.rezessiv Verbung 50% Töchter (Mutter Konduktorin ) Marfan Syndrom Hered. nephrot. Syndrom Muskeldysplasie Duchenne Chorea Huntington Cystische Fibrose Hydrozephalus angeboren Morbus Recklinghausen Spinale Muskelatrophie Fragiles X Myotone Dystrophie Leukenzephalopathie Hämophilie A Osteogenesis imperfecta Morbus Krabbe Hämophilie B Retinoblastom Spondylodysostose Kennedy Desease CPVT (Catecholaminerge polymorphe ventrikuläre Tachycardie) supravalvuläre Aortenstenose Morbus Tay Sachs pontocerebeläre Hypoplasie

31 1. Monogene Erkrankungen (Veränderung eines Gens), n % Biopsierte Blastozysten 179 Biopsie ohne Resultat 3 1,7% Blastozysten betroffen 65 36,3% Blastozysten nicht betroffen ,0% Kein acgh 19 Nicht beurteilbar 8 Blastozysten euploid 52 56,5% Embryotransfers 43 Klin. Schwangerschaften 23 53,5% pro Transfer Aborte 5 21,7% pro klin. Schwangerschaft Geburten (+Grav>12 Wo) 17 39,5 % pro Transfer Geburten pro Paar 63,0 % pro Paar Kinder 14

32 2. Balanzierte Translokationen

33 2. Balanzierte Translokationen 45 XX (13;14)

34 2. Balanzierte Translokationen Anzahl der behandelten Paare 51 Chromos. Translokation männlich Robertson (13/14,13/15,14/21) (6x) 1/15 13/14 12/21 1/20 2/12 2/19 1/21 1/17 1/2 19/20 2/14 2/9 3/6 3/7 6/8 7/10 8/9 Chromos. Translokation weiblich 9/14 2/5 (3x) 5/6 Robertson (13/14) (5x) 2/13 11/13 11/22 12/17 15/16 2/15 4/14 5/14 5/18 7/12 10/18 7/9 Bei 3 Paaren bei beiden eine Translokation

35 2. Balanzierte Translokationen n % Biopsierte Blastozysten 354 Biopsie nicht beurteilbar 19 5,4% Blastozysten aneuploid ,2% Aberration auf Translokation zurückzuführen ,2% Blastozysten euploid ,8% Embryotransfers 85 Klin. Schwangerschaften 41 48,2 % pro Transfer Aborte 5 12,2 % pro klin. Schwangerschaft Geburten (+Grav>12 Wo) Geburten pro Paar Kinder ,4 % pro Transfer 70,6 % pro Paar

36 3. V.a. chromosomale Aberration rez. Aborte mit Aneuploidie IVF Implantationsversager

37 3. V.a. chromosomale Aberration ( rez. Aborte, IVF Implantationsversager ) n % Biopsierte Blastozysten 629 Biopsie nicht beurteilbar 47 7,4 % Blastozysten aneuploid ,3 % Blastozysten euploid ,7 % Embryotransfers 164 Klin. Schwangerschaften Aborte Geburten (+Grav>12 Wo) Geburten pro Paar 90 54,9 % pro Transfer 19 21,1 % pro klin. Schwangerschaft 69 42,1 % pro Transfer 66,4 % pro Paar Kinder 60

38 Alle PID Zyklen

39 Alle PID Zyklen Anzahl der Paare 182 n % Alter der Patientin 35,5 Untersuchte Blastozysten 1162 Embryotransfers 292 Transferierte Embryos 308 Embryos pro Transfer 1,06 Klinische Schwangerschaften ,7% Aborte 29 18,8% Geburten (+Grav>12 Wo) ,8% Geburten pro Paar 67,0% Zwillingsgeburten 6 (1xDrillinge) Kinder 107

40 Welchen Stellenwert hat möglicherweise die Euploidie-Kontrolle grundsätzlich bei Behandlungen der Assistierten Reproduktion (ART)?

41 Vergleich: Geburten nach allen Embryotransfere (n=10069)

42 Euploidie/Aneuploidie humaner Embryonen n=15169 Franiasik JM et al., Fertil Steril Mar;101(3): e1. doi: /j.fertnstert Review.

43 Welchen Stellenwert hat möglicherweise die Euploidie-Kontrolle grundsätzlich bei Behandlungen der Assistierten Reproduktion (ART)? 1. Geburten bei konventioneller ART und Transfer (im Mittel 1,9 Embryos) versus Euploidie-Kontrolle und Transfer (im Mittel 1,06 Embryos). 2. Fehlgeburten bei konventioneller ART (Transfer von 1,9 Embryos) versus Transfer von 1,06 Embryos nach Euploidie- Kontrolle 3. Merhlingsgeburten nach konventioneller ART (Transfer von 1,9 Embryos) versus Transfer von 1,06 Embryos nach Euploidie- Kontrolle 4. Altersabhängige Geburtschancen nach konventioneller ART (Transfer von 1,9 Embryos) versus Transfer von 1,06 Embryos nach Euploidie-Kongtrolle

44 Geburten (Transfer bis einschließlich 3/2016) % 25 <=39 41,9 44,7 20 >= , ,6 0 alle Transfere PID

45 Welchen Stellenwert hat möglicherweise die Euploidie-Kontrolle grundsätzlich bei Behandlungen der Assistierten Reproduktion (ART)? 1. Geburten bei konventioneller ART (Transfer von 1,9 Embryos) versus Transfer von 1,06 Embryos nach Euploidie- Kontrolle 2. Fehlgeburten bei konventioneller ART (Transfer von 1,9 Embryos) versus Transfer von 1,06 Embryos nach Euploidie- Kontrolle 3. Mehrlingsgeburten nach konventioneller ART (Transfer von 1,9 Embryos) versus Transfer von 1,06 Embryos nach Euploidie- Kontrolle 4. Altersabhängige Geburtschancen nach konventioneller ART (Transfer von 1,9 Embryos) versus Transfer von 1,06 Embryos nach Euploidie-Kongtrolle

46 Aborte % <= ,1 >= ,6 5 8,7 0 alle Tansfere PID

47 Welchen Stellenwert hat möglicherweise die Euploidie-Kontrolle grundsätzlich bei Behandlungen der Assistierten Reproduktion (ART)? 1. Geburten bei konventioneller ART (Transfer von 1,9 Embryos) versus Transfer von 1,06 Embryos nach Euploidie- Kontrolle 2. Fehlgeburten bei konventioneller ART (Transfer von 1,9 Embryos) versus Transfer von 1,06 Embryos nach Euploidie- Kontrolle 3. Merhlingsgeburten nach konventioneller ART (Transfer von 1,9 Embryos) versus Transfer von 1,06 Embryos nach Euploidie- Kontrolle 4. Altersabhängige Geburtschancen nach konventioneller ART (Transfer von 1,9 Embryos) versus Transfer von 1,06 Embryos nach Euploidie-Kongtrolle

48 Zwillinge % <= ,9 >= ,2 4,8 0 alle Transfere PID

49 Alle PID Zyklen Präimplantationsdiagnostik bei monogenen Erkrankungen und chromosomalen Aberrationen Resumee

50 Alle PID Zyklen Präimplantationsdiagnostik bei monogenen Erkrankungen und chromosomalen Aberrationen Resumee PID ist inzwischen eine sichere Methode, schwere monogene Erkrankungen des Embryos vor seinem Transfer zu diagnostizieren

51 Alle PID Zyklen Präimplantationsdiagnostik bei monogenen Erkrankungen und chromosomalen Aberrationen Resumee PID ist inzwischen eine sichere Methode, schwere monogene Erkrankungen des Embryos vor seinem Transfer zu diagnostizieren In Verbindung mit der Euploidie-Kontrolle des nicht-betroffenen Embryos sichert PID eine hohe Chance auf ein von der Erkrankung nicht-betroffenes Kind

52 Alle PID Zyklen Präimplantationsdiagnostik bei monogenen Erkrankungen und chromosomalen Aberrationen Resumee PID ist inzwischen eine sichere Methode, schwere monogene Erkrankungen des Embryos vor seinem Transfer zu diagnostizieren In Verbindung mit der Euploidie-Kontrolle des nicht betroffenen Embryos sichert PID eine hohe Chance auf ein von der Erkrankung nicht betroffenen Kindes Die Euplodie-Kontrolle bei V.a. auf chromosomale Aberrationen stellt für die Paare eine hohe Sicherheit dar sowohl für den Eintritt einer Schwangerschaft wie auch für die Vermeidung eines erneuten Abortes

53 Alle PID Zyklen Präimplantationsdiagnostik bei monogenen Erkrankungen und chromosomalen Aberrationen Resumee PID ist inzwischen eine sichere Methode, schwere monogene Erkrankungen des Embryos vor seinem Transfer zu diagnostizieren In Verbindung mit der Euploidie-Kontrolle des nicht-betroffenen Embryos sichert PID eine hohe Chance auf ein von der Erkrankung nicht-betroffenes Kind Die Euplodie-Kontrolle bei Va auf chromosomale Aberrationen stellt für die Paare eine hohe Sicherheit dar sowohl für den Eintritt einer Schwangerschaft wie auch für die Vermeidung eines erneuten Abortes Die Übertragung von nur einem Embryo (wie in den allermeisten Fällen praktiziert) garantiert zudem eine hohe Wahrscheinlichkeit auf eine Einlingsschwangerschaft

54 Alle PID Zyklen Präimplantationsdiagnostik bei monogenen Erkrankungen und chromosomalen Aberrationen

55 Alle PID Zyklen Präimplantationsdiagnostik bei monogenen Erkrankungen und chromosomalen Aberrationen Grundsätzliche und juristische Frage bleiben bestehen

56 Alle PID Zyklen Unterliegt die Trophektodermbiopsie bzw. die PID an muralen Trophoektodermzellen, die weder totipotent noch pluripotent sind, sondern Vorläuferzellen des Chorionlaeve sind, tatsächlich den Entscheidungen einer Ethikkommssion?

57 Alle PID Zyklen Unterliegt die Trophektodermbiopsie bzw. die PID an Trophoblastenzellen, die weder totipotent noch multipiotent sind sondern nur noch das Chorionlaeve bilden können, tatsächlich den zum Teil für die betroffenen Paare erniedrigenden und nicht-nachvollziehbaren Entscheidungen einer Ethikkommssion? 2. Muß die Euploidie/Aneuploidie-Untersuchung an muralen Trophektodermzellen überhaupt einer Ethikkommssion vorgelegt werden, da hierbei weder der Lebensschutz des Embryos noch ein mögliches Selektionsverbot tangiert wird (aneuploide Embryos sind bis auf wenigste Ausnahmen nicht lebensfähig)

58 Alle PID Zyklen Unterliegt die Trophektodermbiopsie bzw. die PID an Trophoblastenzellen, die weder totipotent noch multipiotent sind sondern nur noch das Chorionlaeve bilden können, tatsächlich den zum Teil für die betroffenen Paare erniedrigenden und nicht-nachvollziehbaren Entscheidungen einer Ethikkommssion? 2. Wieso muß die Euploidie/Anauploidie-Untersuchung an Trophoblastenzellen überhaupt einer Ethikkommssion vorlgelegt werden, da hierbei weder der Lebenschutz des Embryos noch ein mögliches Selektionsverbot tangiert wird (aneuloide Embryos sind bis auf wenigste Ausnahmen nicht lebensfähig) 3. Wieso mutet das PID-Gesetz und die entsprechende PID-Verordnung den Betroffenen einen Widerspruch zwischen einem Embryo im Mutterleib (Tötung für die Mutter erlaubt!) und dem Embryo extrakorporal zu, dessen Schutzwürdigkeit der Gesetzgeber offensichtlich deutlich über die Schutzwürdigkeit des intrauterinen Embryos zu stellen scheint?

59 Vielen Danke für Ihre Aufmerksamkeit Dank gilt auch all den Mitarbeiterinnen, die in unserem PID-Zentrum die Untersuchungen durchführen