Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification System GEBRAUCHSANLEITUNG FÜR PRODUKT AS1155.

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1 Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification System GEBRAUCHSANLEITUNG FÜR PRODUKT AS1155. Vorsicht Kartuschenversiegelungen können scharfkantig sein Woods Hollow Rd. Madison, WI USA In-vitro- Diagnostikum MDSS GmbH Schiffgraben Hannover, Deutschland GEBRAUCHS- ANLEITUNG FÜR PRODUKT AS1155 PRINTED IN USA. 4/13

2 Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification System Die gesamten technischen Unterlagen finden Sie im Internet unter: Bitte überprüfen Sie auf unserer Webseite, ob Sie die neueste Version dieser technischen Anleitung verwenden. Bitte wenden Sie sich an den Technischen Kundendienst von Promega, wenn Sie Fragen bezüglich der Verwendung dieses Systems haben Verwendungszweck Anwendungstechnische Grenzen des Produkts Produktkomponenten, Lagerbedingungen und Erklärung der Symbole Maxwell 16 Gerät: Einrichtung der Hard- und Firmware Entnahme und Lagerung der Proben vor der Aufreinigung Aufreinigung der viralen Gesamtnukleinsäure aus Plasma oder Serum...5 A. Vorbereitung der Lyse-Lösung...6 B. Vorbereitung der Proben für die Maxwell 16 LEV-Kartuschen...6 C. Betrieb des Maxwell 16 IVD Geräts Lagerung der eluierten Nukleinsäure Literaturangaben Fehlerbehebung...10 Dieses Gerät entspricht den wesentlichen Anforderungen der EU-Richtlinie 98/79/EG über In-vitro-Diagnostika. Das Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification System ist nur für die Verwendung in folgenden Ländern bestimmt: Belgien, Dänemark, Deutschland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Großbritannien, Irland, Italien, Luxemburg, Niederlande, Norwegen, Österreich, Portugal, Schweden, Schweiz und Spanien. 1. Verwendungszweck Das Maxwell 16 System, das aus dem Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification System (a) und dem Maxwell 16 Gerät, welches mit der Hardware für LEV (Low Elution Volume - niedriges Elutionsvolumen) konfi-guriert wurde, besteht, ermöglicht die automatisierte Aufreinigung viraler Gesamtnukleinsäure von bis zu 16 humanen Plasma- oder Serumproben. Die aufgereinigte virale Gesamtnukleinsäure wird in 50 µl Elutions-Pufferlösung elutiert und ist für eine direkte, spätere Analyse mit Standard-Amplifikations- Methoden geeignet. Zu diesen Methoden zählt eine Reihe von PCR-Tests 4/13 Seite 1

3 1. Verwendungszweck (Fortsetzung) (Polymerase Chain Reaction - Polymerase-Kettenreaktion) oder RT-PCR-Tests (Reverse Transcriptasen - Polymerase-Kettenreaktion) für die humane In-vitro- Diagnostik. Das Maxwell 16 System ist nicht zur Verwendung als Teil eines bestimmten In-vitro-Diagnostiktests bestimmt. Das Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification System ist ausschließlich zur Anwendung durch Fachpersonal bestimmt. Diagnostische Ergebnisse, die aus Gesamtnukleinsäure, die mit diesem System aufgereinigt wurden, gewonnen werden, müssen in Verbindung mit anderen Klinik- oder Labordaten ausgewertet werden. 2. Anwendungstechnische Grenzen des Produkts Das Maxwell Viral Total Nucleic Acid Purification System ist nicht zur Verwendung mit klinischen Proben von Vollblut, mit Gewebeproben oder anderen Körperflüssigkeiten als menschliches Serum und Plasma bestimmt. Es ist nicht zur Verwendung mit nicht von Menschen stammenden Proben oder für die Isolierung von Nukleinsäuren von anderen nicht-viralen Organismen bestimmt. Die Wirksamkeit des Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification System wurde mit 300 µl menschlichem Serum oder Plasma unter Verwendung von Proben von Modell-Phagen von RNA- und DNA-Viren und inaktivierten Hepatitis C-Viren (HCV) und Cytomegalie-Viren (CMV) getestet. Für die Überprüfung von Qualitätsmerkmalen, die für spätere Diagnostikanwendungen benötigt werden, ist der Benutzer zuständig. Der Benutzer kann wählen, exogene interne Kontrollen der Probe oder dem Lysat (Lösungsprodukt) hinzuzufügen. Gewisse interne Kontrollen für Nukleinsäuren mit weniger als 100 Basenpaaren werden möglicherweise mit diesem System nicht wirksam aufgereinigt. Für die Festlegung von Qualitätsmerkmalen jedweder interner Kontrollen ist der Benutzer zuständig. Jede spätere Diagnostikanwendung, bei der mit dem Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification System aufgereinigte Nukleinsäure verwendet wird, muss geeignete Kontrollen beinhalten. Die Einhaltung der EU-Richtlinie 98/79/EG über In-vitro-Diagnostika wurde nur für den Einsatz des Maxwell 16 IVD Gerät (Best.-Nr. AS3050) im Klinikmodus zusammen mit dem Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification System (Best.-Nr. AS1155) belegt und bezieht sich nur darauf. Seite 2 4/13

4 3. Produktkomponenten, Lagerbedingungen und Erklärung der Symbole Produkt Größe Best.-Nr. Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification System 48 Präparate AS1155 Jedes System enthält genügend Reagenzien für 48 Aufreinigungen. Lieferumfang: C 48 Maxwell 16 LEV-Kartuschen (MCC) 20 ml Lyse-Puffer 2 1 ml Proteinase K (PK) Lösung 20 ml Nuklease-freies Wasser 50 LEV-Stößel 50 Elutions-Gefäß (0,5 ml) Lagerungsbedingungen: Produktkomponenten bei Raumtemperatur (15-30 C) aufbewahren. Das Verfalldatum auf der Produktetikette beachten. Produkt nach Ablauf des Verfalldatums nicht mehr verwenden. 30 C Sicherheitshinweise: Die Maxwell 16 LEV-Kartuschen enthalten Ethanol und Isopropanol, die beide entflammbar sind, und Guanidinhydrochchlorat und Harnstoff, beides Reizmittel und giftig. Wenn Sie mit diesen Substanzen arbeiten, tragen Sie Handschuhe und befolgen Sie die Standard-Sicherheitsverfahren. Weitere Sicherheitshinweise finden Sie im Material-Sicherheitsdatenblatt, welches unter verfügbar ist. Die Maxwell 16 LEV-Kartuschen sind auch für den Gebrauch mit potenziell infektiösen Substanzen ausgelegt. Beim Umgang mit infektiösen Substanzen sollten die Benutzer geeignete Schutzkleidung (d. h. Handschuhe und Schutzbrillen) tragen. Benutzer sollten beim Umgang mit allen infektiösen Substanzen in Verbindung mit diesem System und bei deren Entsorgung die Richtlinien ihres Instituts befolgen.! Hinweis: Wegen der Giftigkeit der im Aufreinigungsvorgang verwendeten Chemikalien und dem Vorkommen von RNasen, wird empfohlen, dass während der Vorbereitung der Proben und der Kartuschen Handschuhe getragen werden. MDSS GmbH Schiffgraben Hannover, Deutschland 4/13 Seite 3

5 Erklärung der Symbole Symbol Erklärung Symbol Erklärung In-vitro- Diagnostikum Autorisierte Vertretung 15 C 30 C 6010TB Bei 15 C - 30 C aufbewahren Woods Hollow Rd. Madison, WI USA Hersteller! Wichtig Gesundheitsschädlich. Reizmittel. <n> TB Inhalt ausreichend für n Tests Konformitätszeichen (EU) 6422MA Warnung. Biogefährdung. Warnung. Quetschgefahr. Bestellnummer Chargen-Nummer Nicht wieder verwenden 4. Maxwell 16 Gerät: Einrichtung der Hard- und Firmware Zur Verwendung des Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification Systems muss das Maxwell 16 IVD Gerät mit der LEV-Hardware eingerichtet sein. Falls das Maxwell 16 Gerät die SEV-Hardware (für Standard-Elutionsvolumen) enthält, muss es auf den Maxwell 16 LEV Hardware Kit (Best.-Nr. AS1250) umgerüstet werden. Das Umrüsten des Geräts ist sehr einfach durchzuführen. Siehe Technisches Handbuch für das Maxwell 16 IVD Gerät (Artikelnr. TM315). Seite 4 4/13

6 5. Entnahme und Lagerung der Proben vor der Aufreinigung Wenn humane Proben gehandhabt werden, wird das Einhalten der Vorsichtsmaßnahmen für möglicherweise durch Blut übertragene Krankheitserreger empfohlen. Blut in EDTA- oder ACD-gerinnungshemmenden Vacutainer -Gefäße sammeln. Heparin sollte vermieden werden, da es die spätere Amplifikation behindern kann. Die folgenden allgemeinen Empfehlungen gelten für die Vorbereitung und Lagerung von Plasma- und Serumproben (1, 2). Trennen Sie Plasma von den Zellen durch Zentrifugieren mit g bei 25 C für 20 Minuten innerhalb einer Stunde nach Entnahme der Blutprobe. Dekantieren Sie das Plasma in ein frisches Gefäß. Trennen Sie Serum von geronnenem Blut durch Zentrifugieren mit g bei 25 C für 10 Minuten. Dekantieren Sie das Serum in ein frisches Gefäß. Bewahren Sie die Plasma- und Serumproben bei 2 C - 8 C für maximal 24 Stunden auf oder frieren Sie die nicht verarbeiteten Proben innerhalb 24 Stunden bei - 20 C für maximal 5 Tage ein. Vermeiden Sie wiederholtes Auftauen und Wiedereinfrieren und bewahren Sie die Proben nicht in einem Gefrierschrank mit Abtauautomatik auf. Spezifische Entnahme- und Lagerbedingungen können - abhängig vom zu isolierenden Virus - davon abweichen. Diese Information kann in den Technischen Informationen des Analysegeräts für die nachfolgende Downstream Applikation enthalten sein. RNA-Viren sind während jedem Schritt der Probenentnahme und -verarbeitung anfällig für Zersetzung. Sorgen Sie während aller Schritte des Vorgangs für eine RNase-freie Umgebung. 6. Aufreinigung der viralen Gesamtnukleinsäure aus Plasma oder Serum! Sorgen Sie während der Verarbeitung für eine RNase-freie Umgebung. Verwenden Sie immer RNase-freie und gegen Aerosol beständige Pipettenspitzen. Um die Gefahr einer RNase-Kontamination zu vermindern, wechseln Sie ausreichend oft die Handschuhe. Der Isoliervorgang umfasst eine Proben-Lyse in einem Heizblock oder einem Wasserbad bei 56 C in Gegenwart des Lyse-Puffers und Proteinase K. Diese Behandlung entfernt den viralen Proteinmantel und deaktiviert die RNasen in der Probe. Die Proben werden dann in die Probenvertiefungen der Maxwell 16 LEV-Kartusche übertragen. Der restliche Vorgang erfolgt total automatisiert. Zur optimalen Bindung der Nukleinsäure werden paramagnetische Partikel mit der Probe vermischt und dann in verschiedenen Pufferlösungen gewaschen. Elution wird in Nuklease-freiem Wasser durchgeführt. Vom Benutzer bereitzuhaltende Materialien 1,5 ml oder 2 ml Gefäß für die Mikrozentrifuge, Nuklease-frei Gefäß für die Lyse-Lösung Auf 56 C eingestellter Heizblock oder eingestelltes Wasserbad 0.5ml Gefäss, Nuklease-frei RNase-freie, sterile und gegen Aerosol beständige Pipettenspitzen 4/13 Seite 5

7 6.A. Vorbereitung der Lyse-Lösung! Falls der Lyse-Puffer trüb erscheint oder feste Bestandteile enthält, heizen Sie ihn auf 37 C bis 56 C auf, bis sich der Lyse-Puffer klärt. Bereiten Sie wie in Tabelle 1 beschrieben für jede Proben-Charge eine frische Lyse-Lösung zu. Wir empfehlen zum Ausgleich für einen etwaigen Verlust während der Pipettierung etwa 20 % mehr Probenlösung vorzubereiten. Tabelle 1. Vorbereitung der Lyse-Lösung für 300 µl Plasma- oder Serum-Proben. Reagens Volumen für eine Probe Volumen für 16 Proben 1 Lyse-Puffer µl µl Proteinase K Lösung 30 µl 570 µl 1Die für Lyse-Puffer und Proteinase K Lösung für 16 Proben angegebenen Volumina enthalten etwa 20 % Überschuss. 2 Falls eine interne Kontrolle verwendet wird, kann sie der Lyse-Lösung hinzugefügt werden. Interne Kontrollen werden in diesem Kit nicht mitgeliefert. 6.B. Vorbereitung der Proben für die Maxwell 16 LEV-Kartuschen Die Plasma- oder Serumproben können frisch oder gefroren sein. Gefrorene Proben werden bei Raumtemperatur oder auf Eis aufgetaut und vor der Verwendung 10 Sekunden gemischt. Die für die Proben-Lyse verwendeten Gefäße für die Mikrozentrifuge müssen etikettiert werden. Es kann optional das Barcode-System verwendet werden. 1. Pipettieren Sie jede Plasma- oder Serumprobe in ein 1,5 ml oder 2 ml Gefäß mit Verschlusskappe für die Mikrozentrifuge. 2. Fügen Sie die in Abschnitt 6.A. vorbereitete Lyse-Lösung hinzu. Zu 300 µl Proben fügen Sie 330 µl Lyse-Lösung hinzu. 3. Verschließen Sie die Gefäße, und durchmischen Sie sie für 10 Sekunden. 4. Gehen Sie bei Plasmaproben weiter zu Schritt 5. Inkubieren Sie Serumproben für 10 Minuten bei Raumtemperatur (15-30 C), anschliessend gehen Sie weiter zu Schritt Bei 56 C in einem Heizblock oder Wasserbad für 10 Minuten inkubieren. Während der Inkubationszeit fahren Sie bereits mit Schritt 6 fort, um die Kartuschen vorzubereiten. Hinweis: Proben, welche Viren wie zum Beispiel Hepatitis B Viren enthalten, erfordern eine Inkubation bei 80 C, damit aufgrund der sekundär-struktur des viralen Genoms die Nukleinsäure optimal gewonnen werden kann. 6. Bevor Sie Kartuschen, LEV-Stößel und Elutions-Gefäße handhaben, wechseln Sie bitte die Handschuhe. Stellen Sie die zu verwendenden Kartuschen in das Maxwell 16 LEV-Kartuschen-Magazin (Best.-Nr. AS1251). Stellen Sie jede Kartusche so in das Magazin, dass die Etikette vom Elutions-Gefäß weg zeigt. Drücken Sie die Kartusche nach unten und lassen Sie sie einschnappen. Ziehen Sie die Versiegelung sorgfältig ab, damit kein Material davon auf der Kartuschenoberfläche zurück bleibt. Bevor Sie die Seite 6 4/13

8 Kartuschen in das Gerät stellen, stellen Sie sicher, dass das gesamte Versiegelungsband inklusive aller Klebstoffreste entfernt worden ist. Hinweise: 1. Wenn weniger als 16 Proben verarbeitet werden, richten Sie die Reagenzienkartuschen auf der Plattform mittig aus. 2. Auf Teilen des Maxwell 16 LEV-Kartuschen-Magazin ausgelaufenen Proben oder Reagenzien sollten mit einer Lösung von Reinigungsmittel und Wasser entfernt werden. Dann sollte ein bakteriozides Spray oder ein bakteriozides Feuchttuch angewandt werden, und zum Schluss Wasser. Verwenden Sie auf keinem Teil des Geräts Bleichmittel. 7. Stellen Sie in die Vertiefung Nr. 8 jeder Kartusche einen LEV-Stößel. Die Vertiefung Nr. 8 ist dem Elutions-Gefäß am nächsten. 8459TA 8. Stellen Sie die 0,5 ml Elutions-Gefäße in das Maxwell 16 LEV-Kartuschen- Magazin. Fügen Sie 50 µl Nuklease-freies Wasser unten in jedes Elutions-Gefäß hinzu. Hinweise: 1. Falls Nuklease-freies Wasser seitlich auf das Gefäß gelangt, kann die Elution weniger gut ausfallen. 2. Verwenden Sie ausschließlich die mit dem Kit mitgelieferten 0,5 ml Elutions-Gefäße, da mit dem Maxwell 16 Gerät andere Gefäße möglicherweise nicht funktionieren. 8460TA 9. Übertragen Sie das Proben-Lysat in die Vertiefung Nr. 1 der Kartusche. Die Vertiefung Nr. 1 ist der Kartuschenetikette am nächsten und vom Elutions- Gefäß am weitesten entfernt. 4/13 Seite 7

9 6.C. Betrieb des Maxwell 16 IVD Geräts Siehe Technisches Handbuch für das Maxwell 16 IVD Gerät (Artikelnr. TM315). 1. Schalten Sie das Maxwell 16 IVD Gerät ein. Das Gerät fährt hoch, zeigt die Versionsnummer der Firmware, führt eine Selbstdiagnose aus und bringt alle beweglichen Teile in die Ausgangsposition. 2. Überprüfen Sie, ob der Ausgangsbildschirm LEV anzeigt und ob die LEV-Hardware vorhanden ist. Zum Fortfahren auf Run / Stop drücken. 3. Geben Sie den Benutzer und den PIN Code ein, falls diese Option aktiviert ist. 4. Im Bildschirm Protokolle wählen Sie Viral. 5. Im nächsten Bildschirm überprüfen Sie, ob die richtige Methode und der richtige Benutzer ausgewählt wurden. Zum Fortfahren wählen Sie Run / Stop. 6. Wenn Sie über den Bildschirm aufgefordert werden, öffnen Sie die Türe und wählen dann Run / Stop. Warnung: Quetschgefahr. 7. Befolgen Sie die Anleitung am Bildschirm für die Eingabe über den Barcode-Leser, falls diese Option aktiviert wurde. 8. Stellen Sie das Maxwell 16 LEV-Kartuschen-Magazin mit den vorbereiteten Kartuschen auf die Plattform des Maxwell 16 IVD Geräts. Stellen Sie sicher, dass das Magazin so in das Maxwell 16 IVD Gerät gesteckt wurde, dass sich die Elutions-Gefäße in Richtung Türe befinden. Das Magazin passt nur in dieser Ausrichtung in das Gerät. Wenn das Magazin nicht mühelos in die Plattform gesteckt werden kann, muss die Ausrichtung des Magazins überprüft werden. Stellen Sie sicher, dass das Magazin eben auf der Plattform des Geräts sitzt. Hinweis: Halten Sie das Maxwell 16 LEV-Kartuschen-Magazin an den Seiten, damit vermieden wird, dass sich Kartuschen aus dem Magazin lösen. 9. Überprüfen Sie, ob Proben den Vertiefungen Nr. 1 der Kartuschen hinzugefügt wurden, ob die Kartuschen im Magazin in das Gerät geladen werden, ob Elutions-Gefäße mit 50 µl Nuklease-freiem Wasser vorhanden sind und LEV-Stößel sich in Vertiefung Nr. 8. befinden. 10. Im Bildschirm LEV-Setup wählen Sie Run / Stop. Die Plattform fährt wieder in das Gerät hinein. Die Tür schließen. Warnung: Quetschgefahr. 11. Das Maxwell 16 IVD Gerät beginnt sofort mit dem Reinigungsdurchlauf. Der Bildschirm zeigt die ungefähre Restdauer des Durchlaufs. Seite 8 4/13

10 Hinweise: 1. Durch Drücken der Taste Run / Stop oder Öffnen der Tür wird der Durchlauf vorübergehend unterbrochen. 2. Wenn der Durchlauf vor dessen Abschluss abgebrochen wird, wäscht das Gerät die Partikel von den Stößeln ab und versetzt die Stößel in Vertiefung 8 der Kartusche. Dabei gehen die Proben verloren. 12. Wenn der automatische Reinigungsdurchlauf abgeschlossen wurde, befolgen Sie bitte die Anweisungen am Bildschirm zur Übertragung der Daten. Detaillierte Anweisungen finden Sie im Technischen Handbuch für das Maxwell 16 IVD Gerät (Artikelnr. TM315) und im Technischen Handbuch für die Maxwell Sample Track Software (Artikelnr. TM314). 13. Wenn Sie am Ende des Verfahrens über den Bildschirm aufgefordert werden, öffnen Sie die Tür. Überprüfen Sie, ob am Ende des Durchlaufs die Stößel sich in Vertiefung Nr. 8 der Kartusche befinden. Wenn die Stößel nicht von der magnetischen Stößelstange entfernt wurden, die Stößel mit der Hand vorsichtig nach unten drücken, um sie zu entfernen. 14. Auf Run / Stop drücken, um die Plattform aus dem Gerät herauszufahren. Warnung: Quetschgefahr. 15. Entfernen Sie das Maxwell 16 LEV Kartuschen-Magazin aus dem Gerät. Entnehmen Sie die Elutions-Gefäße, welche die virale Nukleinsäure enthalten und verschließen Sie sie. 16. Zentrifugieren Sie die Elutionsgefässe bei x g für 2 Minuten. Uebertragen Sie den Ueberstand in ein frisches Gefäss (im Kit nicht vorhanden). Vermeiden Sie die Uebertragung von paramagnetischen Partikeln und jeglichen schwimmenden Teilchen. 17. Entfernen Sie die Kartuschen und Stößel aus dem Maxwell 16 LEV Kartuschen-Magazin, und entsorgen Sie gefährliche Abfallprodukte entsprechend. Reagenzienkartuschen, LEV-Stößel oder Elutions-Gefäß nicht wieder verwenden. Stellen Sie sicher, dass Proben vor dem Beginn der UV-Bestrahlung aus dem Maxwell 16 IVD Gerät entfernt wurden, damit die Nukleinsäure nicht beeinträchtigt wird. 7. Lagerung der eluierten Nukleinsäure Falls Proben nicht sofort weiterverarbeitet werden, kann die elutierte virale DNA auf Eis oder bei 4 C für bis zu 24 Stunden gelagert werden. Für eine längere Lagerung muss die Probe bei - 20 C oder - 70 C eingefroren werden. Virale RNA ist weniger stabil und sollte vorzugsweise sofort nach der Isolierung in nachfolgenden Analysegeräten getestet werden. Die elutierte virale RNA kann aber auch bei - 70 C aufbewahrt werden. Beachten Sie die Anleitungen der nachfolgenden Diagnostikanwendung wegen spezifischer Empfehlung für die Lagerung und Handhabung. 4/13 Seite 9

11 8. Literaturangaben 1. Clinical Laboratory Standards Institute (2007). Handling, transport, and storage of specimens for molecular methods. Diese Arbeit kann im Internet abgerufen werden: 2. Murray, P. R. et al. (2007) Manual of Clinical Microbiology, 9. Auflage, ASM Press. 9. Fehlerbehebung Wenn Sie Fragen haben, die hier nicht beantwortet werden, wenden Sie sich bitte an die zuständige Promega-Niederlassung oder Vertriebsstelle. Kontaktinformationen erhalten Sie unter: Symptome Ausbeute an viraler Nukleinsäure ist niedriger als erwartet (z. B. für interne Kontrollen). Ursachen und Anmerkungen Die ersten Proben waren beeinträchtigt. Stellen Sie sicher, dass die Proben gemäß den empfohlenen Richtwerten gesammelt, transportiert und gelagert wurden. Für Proben viraler RNA stellen Sie sicher, dass RNase-freie Bedingungen für die Vorbereitung der Probe und Einrichtung der Analyse, inklusive RNase-freier Pipettenspitzen, verwendet werden. Das Maxwell 16 Gerät wurde auf die falsche Methode eingestellt. Stellen Sie sicher, dass die richtige Methode Viral ausgewählt wurde. Der Verarbeitungsschritt war nicht optimal. Lyse-Puffer und Proteinase K unmittelbar vor dem Gebrauch herstellen und nicht verbrauchte Lösung entsorgen. Ausschließlich den mit diesem Kit mitgelieferten Lyse-Puffer verwenden. Unvollständige Durchmischung kann die Lyse vermindern. Die Lyse-Lösung mit der Probe wie empfohlen durchmischen. Unvollständige Protease-Behandlung, um virale Kapside zu entfernen. Kontrollieren Sie die Temperatur des Heizblocks oder des Wasserbads und inkubieren Sie für die vollständig empfohlene Zeit. Manche Viren benötigen möglicherweise eine höhere Inkubations-Temperatur. Die Zugabe von einer größeren Probenmenge als der empfohlenen kann die Ausbeute an Nukleinsäure vermindern. Überprüfen, ob der LEV-Stößel der Kartusche hinzugefügt wurde. Seite 10 4/13

12 Symptome Ursachen und Anmerkungen Sicherstellen, dass alle Kartuschen vor der Verarbeitung richtig in das Magazin einrasten. Problem bei der Lagerung nach der Aufreinigung. Entfernen Sie unmittelbar nach dem Durchlauf des Maxwell 16 IVD Geräts die Eluate und lagern Sie sie bei der empfohlenen Temperatur. Unterwerfen Sie vor der weiteren Analyse die Eluate nicht mehreren Zyklen von Auftauen und Einfrieren. Interne Kontrollen für Nukleinsäuren mit weniger als 100 Basenpaaren werden möglicherweise mit diesem System nicht wirksam gereinigt. Für die Festlegung von Qualitätsmerkmalen jedweder interner Kontrollen ist der Benutzer zuständig. Schlechte Amplifikation Die Verschleppung paramagnetischer Partikel kann die Amplifikations-Reaktion stören. Entfernen Sie diese Partikel aus dem Elutions- Gefäß durch zentrifugieren. Es wurde der falsche Elutions-Puffer hinzugefügt. Verwenden Sie nur Nuklease-freies Wasser, welches mit dem Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification System mitgeliefert wird. Kreuzkontamination Für jede Probe immer ein frische Pipettenspitze verwenden, damit die Kontamination von einer Probe zur nächsten vermieden wird. Beim Hinzufügen von Lysaten zu den Kartuschen spritzen vermeiden. Für das Hinzufügen von Proben können Kartuschen aus dem Magazin entfernt werden, damit die Kontamination von benachbarten Kartuschen vermieden wird. 4/13 Seite 11

13 Symptome Virale Methode kann am Gerät nicht ausgewählt werden Stromausfall während Gerätedurchlaufs. Ursachen und Anmerkungen Überprüfen Sie, ob sich das Maxwell 16 MDx (AS3050) Gerät im LEV Modus befindet. Um die Proben nach einem Stromausfall wiederzuerlangen, muss zunächst gewährleistet werden, dass sich alle Partikel in einer der Vertiefungen der Kartuschen befinden und nicht am Stößel festhängen. Wenn der Stromausfall auftrat, als die magnetischen Partikel außen an den Stößeln festhingen, müssen die Stößel in den Vertiefungen manuell auf und ab bewegt werden, um die Partikel abzuwaschen. Die Stößel anschließend mit der Hand aus dem Gerät entfernen und den Reinigungslauf mit neuen Stößeln von Grund auf neu beginnen. (a) U.S. Pat. Nos. 7,329,488, 7,721,947 and 7,891,549 and other patents pending. 2009, 2012, 2013 Promega Corporation. Alle Rechte vorbehalten. Maxwell ist ein eingetragenes Warenzeichen der Promega Corporation. Vacutainer ist ist ein eingetragenes Warenzeichen von Becton, Dickinson and Company. Produkte können unter angemeldete oder bereits erteilte Patente fallen oder bestimmten Auflagen unterliegen. Nähere Informationen entnehmen Sie bitte unserer Website. Alle Preise und Spezifikationen können ohne vorherige Ankündigung geändert werden. Änderung von Produktansprüchen vorbehalten. Bitte wenden Sie sich an den Technischen Service von Promega oder greifen Sie auf den Promega-Onlinekatalog zu, um die neuesten Informationen über Promega-Produkte zu erhalten. Seite 12 4/13