6.2 Tabellen Kapitel 2

Transkript

1 -55- SiO 2 Na 2 O CaO P 2 O 5 Tab : Zusaensetzung der einzelnen Glaskompositionen in Gewichtsprozent 45s s s Iersionsfixation in Formaldehyd nach Lillie, ph 7,4, 4 C Spülen in Leitungswasser, RT Entwässern in aufsteigender Alkoholreihe: 70, 80, 90, 9, 2x100%, RT Äther - Chloroform 1:1, RT Äther - Chloroform - Methylmetacrylat 1:1:1, RT Methylmetacrylat, RT MMA, 4 C Einlegen in MMA in verschließbare Glasröhrchen, Wasserbad, 38 C Glasröhrchen öffnen, RT 4-7 Tage 1-7 Tage 2x 1-7 Tage 2-4 Tage Tab : Aufarbeitung der lichtmikroskopischen Schnitte : jeweilige Lösung 3 Tage, danach weitere 3 Tage in frischer Lösung

2 -5-, RT 5% Silbernitratlösung, RT, RT Soda Formol, RT Leitungswasser fließend, RT 5% Na-Thiosulfat, RT Leitungswasser fließend, RT Paragon, 0 C 10 3x Tab : Modifizierte von Kossa/Paragon Färbung nach Gross und Strunz 3x5 : jeweilige Lösung 5 Minuten, danach 2 weitere Male 5 Minuten in jeweils frischer Lösung Sörensen - 1:1, RT Giemsa - Sörensen 1:1, RT Sörensen - 1:1, RT 5 40 Tab : Giemsa Färbung 4% Glutaraldehyd in 0,1M Cacodylatpuffer, ph 7,2, 4 C Entwässern in aufsteigender Alkoholreihe: 30, 50, 70, 80, 90, 9, 2x100%, RT Hexamethyldisilazane (HMDS) 2 h je x 0 Tab : SEM Aufarbeitung

3 -57-4% Glutaraldehyd in 0,1M Cacodylatpuffer, ph 7,2, 4 C 1% OsO 4 in 0,1M Cacodylatpuffer, 4 C Entwässern in aufsteigender Alkoholreihe: 70, 80, 90, 9, 2x100%, RT Propylenoxid (PO), RT PO - Epon 3:1, RT PO - Epon 1:1, RT PO - Epon 1:3, RT Epon 2 h 0-90 je x x 1-2 h Tab : TEM Aufarbeitung : jeweilige Lösung 5-15 Minuten, danach 2 weitere Male 5-15 Minuten in jeweils frischer Lösung M: Molare Lösung Tab. 2.4.: Verwendete Reagenzien Name: Formalin nach Lillie 10 x PBS (Phosphat gepuffertes NaCl) RNase-frei DEPC Wasser 1 x PBS RNase-frei 4 % Paraformaldehyd in PBS Methylmetacrylat MMA Substanzen: Formaldehydkonzentrat (Merck ) NaCl (Merck 11224) NaH 2 PO 4 (Merck 10370) Na 2 HPO 4 (Merck 10587) DEPC (Sigma D 5758) DEPC (Sigma D 5758) 10 x PBS DEPC Wasser Paraformaldehyd (Merck ) 1 x PBS RNase-frei Merck (Merck KGaA, Darmstadt, Deutschland) Methylmetacrylat Phthalsäuredibutylester (Merck ) α-α-azo-iso-butyronitril (Merck 12431) Menge: 400 ml 38 g,22 g 3,8 g 500 µl 500 ml 500 ml 500 µl 450 ml 50 ml 40 g 1000 ml 900 ml 90 ml 15 g

4 Name: 5 % Silbernitratlösung Soda Formol -58- Tab. 2.4.: Verwendete Reagenzien (forts.) 5 % Na-Thiosulfat Paragon-Lösung Giemsa Cacodylatpuffer 0,2M, ph 7,2 Cacodylatpuffer 0,1M, ph 7,2 4% Glutaraldehyd HMDS 1% Osmiumtetroxid (OsO 4 ) Propylenoxid Epon - Stalösung I Epon - Stalösung II Epon Substanzen: Silbernitrat (Merck 1512) Natrium Carbonat (Merck 392) Formaldehydkonzentrat (Merck ) Na-thiosulfat-pentahydrat (Merck 51) Toluidin-Blau (Merck 1273) basisches Fuchsin (Merck 15973) 30 % Ethanol (wäßrig) Giemsa (Merck 9204) Cacodylsäure Natriumsalz Trihydrat (Merck 82070) Cacodylsäure Natriumsalz Trihydrat (Merck 82070) Glutaraldehyd, 25% (Sigma G 5882) Cacodylatpuffer 0,2M Hexamethyldisalazane (Sigma H 4875) Osmiumtetroxid (Sigma 05500) Cacodylatpuffer 0,1M, ph 7,2 Propylenoxid (Merck 12429) Glycid Ether 100 (Serva 21045) Dodecenylbernsteinsäureanhydrid (Serva 20755) Glycid Ether 100 (Serva 21045) Methylnadic-anhydrid (Serva 29452) Epon Stalösung I Epon Stalösung II DMP-30 (Serva 3975) Menge: 5 g 5 g 75 ml 25 ml 5 ml 95 ml 0,8 g 0,2 g 21,4 g lösen, ph einstellen, auf 500 ml auffüllen 21,4 g lösen, ph einstellen, auf 1000 ml auffüllen 1 ml 34 ml 50 ml 1 g 24 ml 72 ml 2 ml 89 ml 0 ml 40 ml 1,5 ml

5 -59- und 3 Parameter Maximale Knocheneindringtiefe Knochenfläche A Knochenfläche B Anzahl der Partikel in der Vermessungszone (Gesamtanzahl) Anteil der Partikel mit Pouchformationen Umfang des Partikels Fläche des Partikels Fläche der Pouch Fläche der Spalten Auslaugungszone Knochenkontakt Osteoidkontakt Chondroidkontakt Bindegewebekontakt Längster Partikeldurchmesser Kürzester Partikeldurchmesser Einheit % des Radius n % der Gesamtanzahl % d. Partikelfl. Tab : Morphometrisch erfasste Parameter Tab.: : Übersicht qualitative Ergebnisse Lichtmikroskopie Material: 45s5 52s 55s Liegezeit: 7d Material: schwache Auslaugung, Material: schwache Auslaugung, Material: schwache Auslaugung 28d Narbengewebe, mäßig Riesenzellen; starke Taschenbildung Narbengewebe, mäßig Riesenzellen; kaum Taschenbildung Narbengewebe, wenig Riesenzellen; 84d lockeres Mesenchym mit vielen Riesenzellen; peripher knöchernes kaum Taschenbildung lockeres Mesenchym mit vielen Riesenzellen; peripher knöchernes starke Taschenbildung lockeres Mesenchym mit mäßig Riesenzellen, peripher knöchernes mäßig starke Taschenbildung