Punktate im Hämatologielabor

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1 Punktate im Hämatologielabor Margrit Bader, Leitende BMA Hämatologie Zentrum für Labormedizin Kantonsspital Aarau AG Herbstweiterbildung 2013 labmed Sektion Ostschweiz Knochenmark-Kurs Kurs HFP labmed, Bern 05. April 2013 St. Gallen, Untersuchungsmaterial Liquor cerebrospinales Pleuraerguss Perikarderguss (Herzbeutel) Aszites Bronchoalveoläre Lavage (Spülflüssigkeit) Synovialflüssigkeit (Gelenkpunktat) 2 Präanalytik Antikoagulans EDTA (kein Heparin) Liquor in der Regel nativ (blutig EDTA) Synovialflüssigkeit (nativ für Kristalle) Untersuchung sofort innerhalb 1-2 h (Zellzerfall) Lagerung Zimmertemperatur (für Transport gekühlt) Immer zuerst makroskopische Beurteilung des Materials Für Zytologie Aufarbeitung des gesamten Materials nötig Sterile Probe für Mikrobiologie 3

2 Pathophysiologie Einstrom von Gewebsflüssigkeit in Körperhöhlen Flüssigkeitsfilm als Gleitmittel für Atem- bzw. Darm- oder Gelenksbewegung Normalerweise keine punktionsfähige Flüssigkeit Jedes Punktat ist pathologisch! Vermehrte Bildung von Gewebsflüssigkeit durch die serösen Häute Aktive Einwanderung der Zellen 4 Fragestellung Traumatischer Erguss Stauungserguss Entzündung Bakteriell Viral Autoimmunprozess Kristalle Harnsäure Calciumpyrophosphat Tumorzellen Chylus 5 Vorgehensweise Zytologische Untersuchung Makroskopische Beurteilung Zellzahl bestimmen Kammerzählung (Hellfeld/Phasenkontrast) Hämatologie-Analyser (Body fluid Modus) Zytopräparate herstellen Pappenheimfärpung (Differenzierung) Spezialfärbungen Kristalle suche (Polarisation) Weitere Untersuchungen Mikrobiologie Immunphänotypisierung Zytologie/Immunzytologie 6

3 Makroskopische Beurteilung Gerinnsel? Konsistenz? Farbe? Gelb klar Gelb trüb blutig Eitrig Bräunlich (Galle) Milchig (Lymphe) Geruch? xanthochromer Liquor Chylus (Pleurapunktat) 7 Zellzählung / Zytospinnpräparat Zweite Ebene Dritte Ebene Vierte Ebene Fünfte Ebene Neubauer- und Fuchs-Rosenthal Kammer Zytozentrifuge Eppendorf Pipetten Zytogramm 8 Sysmex XN-Serie: Bodyfluid-Modus SFL Erweitertes Zählvolumen: RBC Retikulozyten 10.2 µl BF-Material werden ausgezählt 3.5-faches Volumen im Vergleich zur Fuchs-Rosenthal Zählkammer PLT-O SSC TC-BF (WBC-BF+HF-BF) HF-BF: Makrophagen, Mesothelien, aktivierte Zellen WBC-BF: Differenzierung in PMN- und MN-Zellen RBC-BF: Zählung der Erythrozyten im separaten Messkanal Warnmeldungen bei Interferenzen, z.b. Zelltrümmer, Hochfluoreszierende Zellen SFL: Side Fluorescence SSC: Side Scatter

4 Ascites mit Bakterien Pleurarguss mit Lymphozyten Pleuraerguss mit Tumorzellen

5 Mikroskopie Kernhaltige Zellen: Granulozyten, Lymphozyten, etc.? Tumorzellen? Erythrozyten? Kristalle? Bakterien? Blutung, Kristalle und eitriger Erguss werden sofort erkannt! Vorläufige Diagnose innerhalb 5-10 Minuten!! Niedriger technischer Aufwand Wegweisend für Spezialuntersuchungen 13 Diverse Punktate: Zelltypen Neutrophile Granulozyten Eosinophile Granulozyten Basophile Granulozyten Monozyten Lymphozyten Reaktive Lymphozyten Plasmazellen Makrophagen Erythrophagen Siderophagen (Fe-Färbung) Mastzellen Erythrozyten Mesothelzellen Sonstiges Chondrozyten Hirngewebe Bakterien Pilze Parasiten Maligne Zellen Lymphom Zellen Leukämische Blasten Tumorzellen

6 Liquor cerebrospinalis

7 Liquor cerebrospinales Referenzbereich Zellzahl Lumbal 0-5 Zellen /µl (Erwachsene) Normal können Lymphozyten und Monozyten (MN) vorkommen Keine Granulozyten (PMN) Keine Erythrozyten Liquor cerebrospinalis: Zellzahl Liquor cerebrospinales

8 Liquor: Haemolysierende Streptokokken A Liquor: Neisseria meningitidis Liquor: Serratia marcescens (Drainage)

9 Liquor bei Borelieninfekt Cryptococctus neoformans bei HIV-Infekt Cryptococctus neoformans mit Lymphozyt Cryptococctus neoformans Liquor: Erythrophagen (8-12h nach Blutung)

10 Liquor: Makrophagen/Siderophagen (4-5 Tage nach Blutung) Liquor: Makrophagen, Hämatoidin-Kristalle Reaktiv Hasler-Schwarb Paula Liquor: reaktive Veränderungen

11 Liquor mit Eosinophilen (z.b. Fremdkörperreaktion) Liquor: Hirngewebe Liquor: Staphylococcus aureus (Verlauf)

12 Liquor: Staphylococcus aureus (Verlauf) Liquor: T-ALL GIORGIO DOMENICO Liquor: B-ALL

13 Liquor: reifzellige B-Zell-Neoplasie Liquor: DLBCL MEIER VERENA Liquor: myeloische Blasten

14 Liquor: Mamma-Ca Pleuraerguss Pleurapunktat

15 Pleuraerguss mit Mesothelzellen Mesothelzellen reaktiv Gleichmässiges Chromatin Gleichmässige Kernmembran runder/ovaler Kern Falls mehrkernig -gleich gross Leichte Vakuolisierung maligne Ungleichmässiges Chromatin unregelmässige Zellmembran Kern zerklüft/polymorph mehrkernig ungleich gross starke Vakuolisierung Chylothorax

16 Pleuraerguss: T-ALL Pleuraerguss: MCL-transformiert Pleuraerguss: MCL

17 Pleura Erguss: DLBCL Pleura Erguss: Tumorzellen Pleura Erguss: kleinzelliges Bronchus-Ca

18 BAL: bei Raucher BAL: Exogen-allergische Alveolitis Mastzelle Mastzelle Flimmerepithelien BAL: Asbestkörperchen

19 BAL: Pneumocystis jiroveci Ascites Ascites

20 Ascites: bakterielle Peritonitis Ascites: bei Leberzirrhose Synovialflüssigkeit

21 Synovialflüssigkeit Synovialflüssigkeit: Kristalle Harnsäure Calciumpyrophosphat Harnsäure-Kristalle

22 Calciumpyrophosphat-Kristalle Cholesterin-Kristalle