Onkologie in Klinik und Praxis Diagnostik in der Virologie. Institut für Virologie der Medizinischen Universität Wien
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1 Onkologie in Klinik und Praxis 2006 Diagnostik in der Virologie Therese Popow-Kraupp Institut für Virologie der Medizinischen Universität Wien
2 Virusdiagnostik bei Immunsuppression Abklärung akuter Infektionen: Erstinfektion Endogene Reinfektion (Reaktivierung) Exogene Reinfektion/Superinfektion Überwachung latenter Infektionen: Preemptive Testung auf CMV, EBV, ADV bei schwerer Immunsuppression
3 Klinische Manifestation von Herpesvirusinfektionen (außer Infektionen in der Schwangerschaft) Virus Primärinfektion Reaktivierung Krankheitsbild Anteil symptomatischer Infektionen Immungesunde Immunsupprimierte HSV-1/-2 Gingivostomatitis, Herpes genitalis meist asymptomatisch Herpes labialis/ Herpes genitalis gereralisierte Infektion VZV Varizellen 30-60% symptomatisch Herpes zoster Herpes zoster multiplex EBV Infektiöse Mononukleose Kinder: meist asympt., Erwachsene: 50% sympt. asymptomatisch oder unbekannt Lymphome CMV Infektiöse Mononukleose meist asymptomatisch asymptomatisch schwere Allgemeininfekt. HHV-6 Exanthema subitum meist asymptomatisch asymptomatisch oder unbekannt schwere Allgemeininfekt. HHV-7 Exanthema subitum meist asymptomatisch asymptomatisch oder unbekannt (schwere Allgemeininfekt.) HHV-8 leicht grippaler Infekt meist asymptomatisch unbekannt Kaposi Sarkom Lymphome nach B. Gärtner u. N. Müller-Lantzsch 2002
4 PCR/4 Labordiagnose: HSV/VZV Virusnachweis a) direkt im klinischen Material: Nicht Virus-spez. aber rasch: Lichtmikroskopie Elektronenmikroskopie Virus-spez. : IF, NS-Amplifikation (PCR) b) Anzucht in Gewebekultur und Identifizierung : IF, NS-Amplifikation (PCR) Antikörpernachweis Fragestellung: Erstinfektion: KBR, Elisa (IgM u. IgG), Reinfektion : KBR, Elisa (IgG) Immunität : Elisa (IgG)
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7 Quantifizierung zirkulierender VZV-DNS: Frühe Diagnose disseminierter Infektionen Fall: Patient mit kutanem Lymphom : generalisiertes varizelliformes Exanthem : VZV-IgG IgG-AK:positiv, VZV-IgM IgM-AK:negativ VZV-DNS im Plasma: 3,2 x 10 4 cpm/ml : IS-Cocktail (anti-cd20) VZV-IgG IgG-AK:positiv, VZV-IgM IgM-AK:negativ VZV-DNS im Plasma: 2,7 x 10 2 cpm/ml Präemptives Screening?? Zu definieren: Patienten, Risikofaktoren u. Intervall
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10 CMV: Klin. Manifestationen und Labordiagnose Klin. Manifestationen: Meist klin inapparent; selten Fieber, Myalgie, Lymphadenopathie Bei Immunsuppression: Fieber, Leukopenie, Thrombozytopenie, Organmanifestationen (Hepatitis, Pneumonitis, Kolitis etc.) Labordiagnose: Differentialblutbild: atyp. Lymphozyten Leberfunktionsproben: erhöhte TA Virusspez. AK: IgM, IgG; IgG-AK-Aviditätstest Bei Immunsuppression: Virusspez. DNA quant. in Serum / Plasma
11 Risikofaktoren für eine CMV- Erkrankung Primärinfektion Immunsuppressive Therapie (z.b.: Anti-CD3 AK) Lymphozytopenie Moderate bis schwere Graft-versus versus-host Disease Nachweis von CMV - DNS im peripheren Blut Nachweis einer hohen Viruslast im peripheren Blut
12 CMV: Labordiagnose bei immunsupprimierten Patienten Empfohlene Vorgehensweise bei pos. PCR-Befund: > copies / ml: Therapie < copies / ml: Kontrolluntersuchung innerhalb von einer Woche (Kinetik) Bei KMT bzw. bei D+ / R-: Erster pos. DNA-Wert, Kontrolluntersuchung nach 72 Stunden (Kinetik) Hemakurs/21
13 EBV: Klin. Manifestationen und Labordiagnose Klin. Manifestationen: Fieber, Lymphadenopathie, Pharyngitis, Exanthem, Hepatosplenomegalie etc. Bei Immunsuppression: PTLD Labordiagnose: Differentialblutbild: atyp. Lymphozyten 3% Leberfunktionsproben: erhöhte TA Virusspez AK: anti.vca IgM, IgG, IgA, anti-ebna IgG Bei Immunsuppression: Virusspez. DNA quant. im Serum / Plasma
14 Risikofaktoren für eine EBV-assoziierte post- Transplantations-Lymphoproliferative Erkrankung (PTLD) (Durchschnittliches PTLD Risiko : 1-2%) 1 Primärinfektion Anti-Thymozytenglobulin / anti-cd3 Antikörper Tacrolimus Hohe Viruslast im peripheren Blut
15 Prospektiv: PTLD - Screening vor X: Serum : EBV-VCA-IgG Ak bei Spender und Empfänger nach X: EDTA-Blut: Stationär: Basisbestimmung der EBV-DNS Ambulant: bei jedem Besuch bis 2 Jahre nach X Risikoeinschätzung Bei pos. EBV-DNA-Nachweis im EDTA-Blut: Bestätigung des pos. Ergebnis innerhalb von 1 Woche > 1000 Kopien / ml: gesteigertes Risiko für PTLD PT-LPT/22
16 HHV6: Klin. Manifestationen und Labordiagnose Klin. Manifestationen: Meist klin. inapparent; selten bei Kleinkindern Fieber, Fieberkrämpfe, Exanthem Bei Immunsuppression: Enzephalitis, Knochenmarksuppression Labordiagnose: Virusspezifische AK: IgM, IgG Virusspezifische DNA (quant.) im Liquor Bei Immunsuppression: Virusspez. DNA quant. In Serum / Plasma, Liquor Cave: ca 1% connatal infiziert und HHV6 DNA chromosomal integriert
17 Adenovirus-Infektionen Nicht-umhüllte DNS-Viren, 51 Serotypen Übertragung durch engen Kontakt (lang andauernde Ausscheidung) Breites Spektrum klinischer Symptome (Manifestationen: Auge, Atemwege, Magen-Darm Darm-Trakt) Etablierung einer latenten Infektion in unterschiedlichen Zellen (z.b.: T - Zellen) Schwere generalisierte Erkrankungen bei immun - supprimierten Patienten
18 Case fatality rates among immunocompromised patients infected with different adenovirus subgenera Patient group Overall % fatality Mean age of patients (yr) Primary BMT recipients LT recipients RT recipients Cancer patients AIDS patients * * Association of adenovirus infection with death not accurately calculable because of the presence of multiple other pathogens Hierholzer, 1992 Adeno3/18
19 Risikofaktoren für eine Adenovirus-Erkrankung Anzahl von klin.. Proben / Patient mit pos. Virusnachweis Moderate bis schwere Graft-versus versus-host Disease Immunsuppressive Therapie Lymphozytopenie Nachweis von Adenovirus DNS im peripheren Blut Nachweis eines Anstieges der Viruslast im peripheren Blut
20 Respiratorische Viren Influenza RSV Rhino Corona Adeno Parainfluenza Metapneumo Boca etc
21 Neuerkrankungen an Grippe/grippaler Infekt (x10 3 ) Influenza Saison 2003/2004 Neuerkrankungen Wien Grippe/grippaler Infekt* Virusnachweis Serologie Kalenderwoche 2004 *Hochrechnung, übermittelt vom Grippe-Informationssystem der Magistratsabteilung 15 der Gemeinde Wien Virologisch gesicherte Influenzafälle
22 Major Surveillance Studies of CRV Infections in Immunocompromised Patients CRV M.D.Anderson Cancer Center a Fred Hutchinson Cancer Center 1996 b Europ.(EBMT) Centers c RSV (%) 55 (35) 44 (35) 46 (49) PIV (%) 54 (35) 38 (30) 7 (7.5) Influenza V. (%) 47 (30) 14 (11) 39 (42) a Clin. Infect. Dis. 1996; b Am.J.Med. 1997; c Biol.Blood Marrow Transplant 2001
23 influen/19 Respiratorische Virusinfektionen: Labordiagnose A: für den Virusnachweis Untersuchungsmaterial: Nasen - Rachenabstrich Abgesaugtes Nasen - Rachensekret Bronchoalveoläre Lavage Biopsie- / Sektionsmaterial Wichtig für gute Nachweisraten: Entnahmezeitpunkt, Entnahmetechnik, Transport- und Lagerungsbedingungen B: für den AK-Nachweis: Blut / Serum
24 Gewinnen und Versenden von Untersuchungsmaterial Abstrichmaterial in geeignetem Transportmedium, oder 500µl steriler, physiologischer Kochsalzlösung. Abgesaugtes Nasen- Rachensekret, Bronchialsekret versandfertig
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