Th1-Th2-Zytokine bei entzündlicher Herzmuskelerkrankung
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- Joseph Walter
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1 Aus der medizinischen Klinik II, Abteilung für Kardiologie und Pulmonologie des Universitätsklinikums Benjamin Franklin der Freien Universität Berlin Direktor: Univ.-Prof. Dr. med. H.-P. Schultheiss Th1-Th2-Zytokine bei entzündlicher Herzmuskelerkrankung Inaugural-Dissertation zur Erlangung der medizinischen Doktorwürde des Fachbereichs Humanmedizin der Freien Universität Berlin vorgelegt von llkay Kazak aus Torbali
2 Referent: Prof. Dr. med. H.-P. Schultheiss Koreferent: Prof. Dr. med. Th. Blankenstein Gedruckt mit der Genehmigung des Fachbereichs Humanmedizin der Freien Universität Berlin Promoviert am: 17. Mai 2002
3 gewidmet meinen Eltern und all denjenigen, besonders Vanessa, die mich während der experimentellen und schriftlichen Arbeit ertragen mußten
4 4 INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG ENTZÜNDLICHE HERZMUSKELERKRANKUNG Ätiologie und Pathogenese der Myokarditis Tiermodelle der Myokarditis Immunantwort und Herzmuskelschädigung Diagnostik der entzündlichen Herzmuskelerkrankung Histologische Befunde in Myokardbiopsien Immunhistologische Befunde in Myokardbiopsien Virusnachweis Krankheitsentitäten der entzündlichen Herzmuskelerkrankungen DAS TH1-/TH2-ZELL-KONZEPT Th1- / Th2-Zellen Effektor-Funktionen der Th-Zell-Subtypen Entwicklung von Th1- und Th2-Subtypen Entwicklung von Th1-Subtypen Entwicklung von Th2-Subtypen Th1-/Th2-Switch Th1- oder Th2 beeinflussende Faktoren Weitere Marker des Th1/Th2-Zell-Systems Klinische Beispiele für Th1- oder Th2-Muster bei humanen Erkrankungen FRAGESTELLUNG PATIENTEN UND MATERIAL PATIENTEN MATERIAL Probengewinnung für ELISA und intrazelluläre Zytokinbestimmung METHODEN ENZYMIMMUNOASSAY (EIA) Bestimmung der Zytokine IFNγ, IL-4 und IL Prinzip des Assays Assaykomponenten und Reagenzien Geräte Durchführung Auswertung Bestimmung des Zytokins IL Prinzip des Assays Assaykomponenten und Reagenzien Geräte Durchführung Auswertung Bestimmung des löslichen Oberflächenmarkers CD Prinzip des Assays Assaykomponenten und Reagenzien Geräte Durchführung Auswertung INTRAZELLULÄRE ZYTOKINMESSUNG Prinzip der intrazellulären Zytokinmessung...49
5 Inhaltsverzeichnis Reagenzien Geräte Durchführung Probengewinnung Stimulation (=Aktivierung) Oberfächenmarkierung Lyse Permeabilisierung Erster Waschschritt Intrazelluläre Markierung Zweiter Waschschritt Fixierung Analyse und Auswertung STATISTIK ERGEBNISSE IMMUNHISTOLOGISCHER BEFUND UND ZYTOKINE Immunhistologischer Befund und IL Immunhistologischer Befund und IFNγ Immunhistologischer Befund und IL-4/IL IL-4 bzw. IL-4/IL-12 und immunhistologischer Befund in der Folgebiopsie IL-4 und Entzündungspersistenz bzw. Spontanheilung CD30 und immunhistologischer Befund in der Folgebiopsie CD30 und Entzündungspersistenz VIRUSBEFUND UND ZYTOKINE Virusbefund und intrazelluläre Bestimmung von IFNγ und IL Virusbefund und IL-12 im Serum Enterovirus und IFNγ im Serum Enterovirus und IL-4 im Serum KARDIALE HÄMODYNAMIK UND ZYTOKINE Intrazelluläre Bestimmung von IFNγ und IL-4 und kardiale Hämodynamik Intrazellulär ermittelte prozentuale Anteile von CD3 + -Zellen eines Th-Zytokintyps und kardiale Hämodynamik Intrazellulär ermitteltes Zytokinmuster aller CD3 + -Zellen und Ejektionsfraktion Zytokine und Ejektionsfraktion IFNγ im Serum und Ejektionsfraktion IL-6 im Serum und Ejektionsfraktion IFNγ im Serum und LVESD BLUT AUS DEM KORONARSINUS VERSUS BLUT AUS PERIPHERER VENE DISKUSSION TIERMODELLE HUMANE MYOKARDITIS Herzentzündung und Zytokine HÄMODYNAMISCHE BEOBACHTUNGEN BLUT AUS DEM KORONARSINUS VERSUS BLUT AUS PERIPHERER VENE ZUSAMMENFASSUNG LITERATURVERZEICHNIS ANHANG...130
6 Inhaltsverzeichnis 6 I. ABBILDUNGSVERZEICHNIS II. TABELLENVERZEICHNIS III. DIAGRAMMVERZEICHNIS IV. ABKÜRZUNGEN V. LEBENSLAUF VI. DANKSAGUNG...140
Anhang 130. Viral oder immunologisch induzierte, zytokinvermittelte Myokarditis im Tiermodell 9
Anhang 130 Anhang I. Abbildungsverzeichnis Abbildung 1: Abbildung 2: Abbildung 3: Abbildung 4: Abbildung 6: Abbildung 7: Abbildung 8: Abbildung 9: Abbildung 10: Abbildung 11: Viral oder immunologisch induzierte,
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