In vitro Studie zur Verminderung der Adhäsion von Candida albicans. Abschlussbericht

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1 In vitro Studie zur Verminderung der Adhäsion von Candida albicans Abschlussbericht Dr. G. Gröger, April 2005 Klinik der Universität Regensburg, Poliklinik für Zahnärztliche Prothetik, Direktor: Prof. Dr. G. Handel

2 In vitro Studie zur Verminderung der Adhäsion von Candida albicans Seite 2 von 5 In vitro Studie zur Verminderung der Adhäsion von Candida albicans Ziel: Der fakultativ pathogene Keim Candida albicans wird bezogen auf Zahnersatz vor allem auf Kunststoffanteilen von Prothesen und hier wiederum auf weichbleibenden Unterfütterungsmaterialien gefunden. In Abhängigkeit von der Konstitution des Patienten kann die Besiedlung der basalen Anteile von Prothesen eine Candidose und Reizung des Prothesenlagers verursachen. Mit Hilfe eines Adhäsionstests sollte geprüft werden, ob und inwieweit mit Hilfe von Reinigungs- und Desinfektionsmitteln die Menge an adhärenten Candidaorganismen verringert werden kann. Material und Methode: Es wurden Platten mit glatter, planer Oberfläche aus Typ IV-Gips hergestellt und mit Isolant isoliert. Von dem weichbleibenden Unterfütterungsmaterial Mucopren soft wurden runde Probekörper (10mmx2mm) gegen diese Gipsplatten hergestellt. Die Probekörper wurden einer thermischen Wechselbelastung (00 Zyklen 5 C/55 C H 2 0, je 2 Min) ausgesetzt und dann einem in vitro Anlagerungsversuch unterzogen. Hierbei wurden die Probekörper für 2,5h mit Candida albicans inkubiert und anschließend die Reinigungs-/Desinfektionsmittel zugesetzt. Es wurde die Chlorhexidinmundspüllösung Dynexan, die Triclosanmundspüllösung Colgate Plax und ein Produkt auf Aktivsauerstoffbasis (Blend-a-dent 2-Phasen Ultra) verwendet. Die Konzentration und die Dauer der Einwirkung richteten sich nach den Empfehlungen der Hersteller (siehe Tabelle 1). Als Kontrolle wurde für eine Gruppe gepufferte Salzlösung (PBS) eingesetzt. Anschließend erfolgte die Bestimmung der noch lebenden adhärenten Kulturen mit Hilfe einer Lumineszenzmarkierung und Bestimmung der Lumineszenzaktivität. Der Versuch wurde dreimal mit jeweils 10 Probekörpern und Kontrollen pro Gruppe durchgeführt. Hersteller Lot Nr Einwirkart Einwirkdauer Dynexan Kreussler Pharma, D CH.-B.: pur 60 s Colgate Plax Colgate-Palmolive, D 4218GB10151 pur 20 s blend-a-dent 2-Phasen Ultra Procter & Gamble GmbH, D Lösung in 200ml H 2 O 15 min Tab. 1: Materialien, Hersteller und Art der Verwendung

3 In vitro Studie zur Verminderung der Adhäsion von Candida albicans Seite 3 von 5 Ergebnisse: rel. Lumineszenzintensität N = Kontrolle (PBS) O2 (Blend-a-dent) Triclosan (Plax) Chlorhex. (Dynexan) Abb. 1: Boxplot der relativen Lumineszenzintensität der Candida-Kolonien nach 2,5h Inkubation auf gealtertem Mucopren soft (drei Versuche á 10 Proben, Mediane, 25%/75% Perzentilen) Nach Verwendung von Dynexan (Median 650) und Plax (Median 1100) war die Menge im Vergleich zur PBS Kontrolle (Median 700) statistisch nicht verändert. Die Verwendung von Blend-a-dent Reinigungstabletten verringerte die Menge an lebenden adhärenten Candida im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant.

4 In vitro Studie zur Verminderung der Adhäsion von Candida albicans Seite 4 von 5 Diskussion: Die verschiedenen Reinigungs- und Desinfektionsmittel zeigen eine unterschiedliche Effizienz: nur nach Verwendung der Prothesenreinigungstablette Blend-a-dent 2-Phasen Ultra sind fast keine Candida-Kulturen mehr nachweisbar. Die Triclosan-Mundspüllösung verursachte keine Reduktion der adhärenten Candida- Kulturen. Dies ist konform mit anderen Untersuchungen (Lefebvre, Wataha et al. 2001); (Shapiro, Giertsen et al. 2002). Die Chlorhexidin-Mundspüllösung zeigte ebenfalls keinen signifikanten Einfluss auf das Kolonisationsverhalten. Zwar ist der inhibierende Effekt von CHX auf Candida nachgewiesen (Estrela, Ribeiro et al. 2003), allerdings müssten vermutlich im Gegensatz zu den Herstellerangaben längere Einwirkzeiten - z.b. eine Stunde (Waltimo, Orstavik et al. 1999) - oder eine Kombination aus langer Einwirkzeit (15 min) und höherer Konzentrationen von z.b. 4% verwendet werden (Brace and Plummer 1993). Zusammenfassend ist festzustellen, dass die Anwendung der Prothesenreinigungstabletten zu einer zuverlässigen Abtötung der Candida-Kolonien auf Mucopren soft führte. Mündspüllösungen auf Chlorhexidin- und Triclosan-Basis sind nach den vorliegenden Ergebnissen bei den von den Herstellern vorgeschriebenen, vergleichsweise kurzen Einwirkzeiten hierzu nicht geeignet. Regensburg, Dr. G. Gröger Dipl. Ing M. Rosentritt Prof. Dr. G. Handel

5 In vitro Studie zur Verminderung der Adhäsion von Candida albicans Seite 5 von 5 Literatur: Brace, M. L. and K. D. Plummer (1993). "Practical denture disinfection." J Prosthet Dent 70(6): Estrela, C., R. G. Ribeiro, et al. (2003). "Antimicrobial effect of 2% sodium hypochlorite and 2% chlorhexidine tested by different methods." Braz Dent J 14(1): Lefebvre, C. A., J. C. Wataha, et al. (2001). "Effects of triclosan on the cytotoxicity and fungal growth on a soft denture liner." J Prosthet Dent 85(4): Shapiro, S., E. Giertsen, et al. (2002). "An in vitro oral biofilm model for comparing the efficacy of antimicrobial mouthrinses." Caries Res 36(2): Waltimo, T. M., D. Orstavik, et al. (1999). "In vitro susceptibility of Candida albicans to four disinfectants and their combinations." Int Endod J 32(6):

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