1. Verwendete Chemikalien und Reagenzien. Alle Reagenzien und Lösungsmittel hatten HPLC- oder Analysenqualität. J.T. Baker (Phillipsburg, NJ, USA)

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1 Tabellen: 1. Verwendete Chemikalien und Reagenzien. Alle Reagenzien und Lösungsmittel hatten HPLC- oder Analysenqualität. Reagenz oder Lösungsmittel Acetonitril (AcN) Aceton der Qualität Ultra Resianalysed Essigsäure Pestizidstandards und interner Standard (Triphenylphosphat [TTP]) Hersteller Honeywell B&J (Muskegon, MI, USA) J.T. Baker (Phillipsburg, NJ, USA) Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA) Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA) Chem Service (West Chester, PA, USA) Ultra Scientific (North Kingstown, RI, USA) 2. Geräteparameter für Agilent GC/MS/MS-System GC Serie 7890 Automatischer Probengeber 7693 Automatischer Probengeber und Probenträger 5 µl-spritze (Best.-Nr ), 1 µl Injektionsvolumen Postinj Lösungsmittel A (Aceton) Waschschritte: 3 Postinj Lösungsmittel B (Acetonitril) Waschschritte: 3 Probenpumpen: 3 Trägergas Helium, konstanter Druck Einlass Multimode-Einlass (MMI) Einlasstemperatur 280 C Injektionsmodus Gepulster Splitlos-Modus Injektions-Impulsdruck 36 psi bis 1 min Spülfluss zur Splitentlüftung 50 ml/min bei 1 min Einlassdruck 18,35 psi (RT-locked) während des Laufs und 1,0 psi während Backflushing RT-Locking Chlorpyrifosmethyl bei 8,298 min Ofenprofil 100 C für 2 min, bis 150 C bei 50 C/min, bis 200 C bei 6 C/min, bis 280 C bei 16 C/min und 6 min Verweilzeit Nachbearbeitung 2 min bei 280 C Capillary Flow Technology Purged Ultimate Union (Best.-Nr. G ) verwendet für Backflushing von analytischer Säule und Einlass. Aux EPC-Gas: Helium, angeschlossen an Purged Ultimate Union. Entnahmeleitung 0,0625 Zoll AD x 0,010 Zoll ID x 100 cm, 316 Edelstahlkapillare, oben am Ofen Aux Druck 4 psi während des Laufs, 75 psi während Backflushing Analytische Säule HP-5MS UI, 0,25 mm x 15 m, 0,25 µm (Best.-Nr UI) Säulenverbindungen Zwischen Einlass und Purged Ultimate Union

2 (Best.-Nr. G ) Restriktor Inerte Fused Silica-Kapillare, 0,65 m x 0,15 mm (Best.-Nr ) Restriktorverbindungen Zwischen Purged Ultimate Union und dem MS MS Triple Quadrupol GC/MS 7000 Modus MRM Datenbank Datenbank für Pestizide und Umweltschadstoffe (Best.-Nr. G9250AA) Transferlinientemperatur 280 C Quellentemperatur 300 C Quad-Temperatur Q1 und Q2 = 150 C Solvent Delay 2,3 min Kollisionsgasfluss Helium-Quenchgas bei 2,35 ml/min, N 2 - Kollisionsgas bei 1,5 ml/min MS-Auflösung MS1 und MS2 = 1,2 amu (geringe Auflösung oder breite Einstellung) 3. Verbrauchsmaterialien Probenflaschen Braun, Beschriftungsfeld, 100 Stück (Best.-Nr ) Probenflaschenverschlüsse Blauer Schraubverschluss, 100 Stück (Best.-Nr ) Flascheneinsätze 150 µl-glaseinsatz mit Polymerfüßen, 100 Stück (Best.-Nr ) Septum Advanced Green, nicht klebend, 11 mm, 50 Stück (Best.-Nr ) Säulenferrule 0,4 mm ID, 85/15 Vespel/Graphit, 10 Stück (Best.-Nr ) Liner-O-Ringe Nicht klebender Liner-O-Ring, 10 Stück (Best.-Nr ) Capillary Flow Technology Purged Ultimate Union (Best.-Nr. G ) Innenmutter, 1 Stück (Best.-Nr. G ) SilTite Metall-Ferrule für Säulen mit 0,10-0,25 mm ID, 10 Stück (Best.-Nr ) Inerte Liner Ultra Inert deaktivierter, einseitig konischer Splitlos-Liner mit Wolle, 1 Stück (Best.-Nr ), 5 Stück (Best.-Nr )

3 4. MRM-Übergänge zur Quantifizierung und Qualifizierung von 33 Pestiziden Analyte MRM 1 (Kollisionsenergie) MRM 2 (Kollisionsenergie) Methamidophos 141,0 95,0 (6) 95,0 79,0 (13) Dichlorvos 185,0 93,0 (15) 108,9 79,0 (5) Acephat 136,0 42,0 (6) 136,0 94,0 (14) Mevinphos 127,0 109,0 (10) 191,9 127,0 (10) 2-Phenylphenol 169,9 15,0 (30) 169,9 141,0 (15) Omethoat 156,1 79,0 (15) 156,1 110,0 (20) Dimenthoat 125,0 47,0 (15) 143,0 111,0 (10) Altrazin 214,9 58,0 (11) 200,0 94,1 (20) Lindan 180,8 145,0 (12) 218,8 183,0 (20) Diazinon 304,0 178,9 (15) 178,9 121,0 (28) Chlorthalonil 265,8 133,0 (53) 265,8 169,9 (28) Chlorpyrifosmethyl * 285,8 271,0 (16) 287,8 93,0 (26) Vinclozolin 211,8 172,0 (15) 211,8 145,0 (15) Carbaryl 143,9 116,0 (15) 143,9 89,0 (50) Tolclofosmethyl 264,8 250,0 (15) 264,8 93,0 (50) Dichlorfluanid 223,9 123,0 (8) 223,9 77,0 (45) Aldrin 262,8 193,0 (30) 262,8 191,0 (30) Malathion 173,0 99,0 (15) 157,9 125,0 (5) Dichlorbenzophenon 249,9 139,0 (5) 249,9 214,9 (15) Pirimiphosethyl 318,0 166,0 (12) 333,1 318,0 (5) Tolylfluanid 237,9 137,0 (15) 237,9 91,1 (50) Procymidon 282,9 96,0 (10) 282,9 67,1 (40) Endrin 262,8 193,0 (35) 262,8 191,0 (35) Ethion 230,8 129,0 (25) 230,8 175,0 (35) Endosulfansulfat 271,7 236,8 (20) 386,7 253,0 (5) DDT 234,9 165,0 (20) 236,8 165,0 (5) TPP 325,9 169,0 (30) 325,9 233,0 (27) Endrinketon 316,7 101,0 (20) 316,7 245,0 (20) Iprodion 313,8 56,0 (20) 186,9 123,0 (25) Phosmet 159,9 77,0 (30) 159,9 133,1 (20) Phosalon 181,9 138,0 (5) 366,9 182,0 (5) Permethrin 183,0 168,1 (15) 183,0 153,1 (15) Coumaphos 361,9 109,0 (15) 361,9 81,0 (35) Deltamethrin 180,9 152,0 (26) 252,8 93,0 (20) *Chlorpyrifosmethyl wurde zum RT-Locking verwendet

4 Weitere Erläuterungen Herstellung eines Blanks Die Blanks der Nahrungsmittelmatrices wurden mittels der QuEChERS AOAC- Methode extrahiert, die in einer früheren Application Note ausführlich beschrieben ist [2, 5]. Früchte und Gemüse wurden eingefroren und vor gründlicher Homogenisierung zerkleinert. Kurz zusammengefasst: 15 g der homogenen Probe (mit Ausnahme von Mehl) wurden mittels 15 ml Acetonitril mit 1 % Essigsäure extrahiert und durch Zugabe des BondElut QuEChERS AOAC-Extraktionssalzpakets in die wässrige Phase überführt. Für die Mehlprobe wurden 5 g homogene Probe mit 10 ml Wasser gemischt und über Nacht eingeweicht. Dieses Gemisch wurde dann gemäß dem QuEChERS- Verfahren extrahiert. Nach Zentrifugation wurde der Überstand mithilfe des allgemeinen Dispersions-SPE-Kits (Best.-Nr ) aufgereinigt. Nach Vortexen und Zentrifugieren wurde der Überstand als Blank der Matrix für anschließende Experimente in Probenflaschen überführt. Die einzelnen Blanks der Matrices wurden bei 4 C gelagert. Textkästchen 2 Lösungen und Standards Eine Reagenzblindlösung aus 1 % Essigsäure in AcN wurde durch Zugabe von 1 ml Eisessig zu 100 ml AcN zubereitet. Diese Lösung wurde auch als Extraktionslösungsmittel für die QuEChERS-Methode verwendet. Standardstammlösungen mit jeweils 2 mg einzelnem Pestizid pro Milliliter Aceton wurden hergestellt und bei -20 C gelagert. Diese einzelnen Pestizidstammlösungen wurden zu einem Gemisch aus 33 Pestiziden mit 20 µg/ml Aceton verdünnt und dann bei 4 C gelagert. Zur Minimierung der Matrixverdünnung in den Kalibrierstandards wurde aus dem Standardgemisch mit 20 µg/ml in der entsprechenden Leermatrix eine intermediäre Standardlösung mit 500 ng/ml frisch hergestellt. Diese intermediäre Standardlösung mit Matrix wurde dann zum Herstellen von fünf matrixangepassten Kalibrierstandards zu 1, 5, 10, 50 und 100 ng/ml und einem QC-Standard zu 10 ng/ml verwendet. Eine IS-(Interne Standard)-Stammlösung mit 2 mg Triphenylphosphat (TPP) pro Milliliter Aceton wurde hergestellt. Aus dieser IS-Stammlösung wurde eine Standardlösung mit 20 µg/ml IS Acetonitril zubereitet und bei 4 C gelagert. Allen Proben wurde dann das angemessene Volumen dieser Standardlösung zu gesetzt, um eine Konzentration von 100 ng IS pro Milliliter zu erhalten. Textkästchen 3 Geräte Alle Analysen erfolgten an einem mit einem automatischen Probengeber7693B ausgestatteten 7890 GC und einem Triple Quadrupol GC/MS-System der Serie 7000 [4]. Zur Analyttrennung und Bereitstellung eines äußerst inerten Flusswegs zum

5 Detektor wurde eine Ultra Inert GC-Säule, HP-5MS UI, eingesetzt. In Tabelle 2 sind die verwendeten Geräteparameter und in Table 4 die MRM-Übergänge von 33 Zielanalyten aufgeführt. Zur Einrichtung eines MS-Verfahrens zur Erfassung aller