Lichtmikroskope von hund. Geschichtliches Das Mikroskop Kontrastierverfahren Stativsysteme Dokumentation

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1 Lichtmikroskope von hund Geschichtliches Das Mikroskop Kontrastierverfahren Stativsysteme Dokumentation

2 Allgemein μικρός (mikros): klein σκοπεῖν (skopein): betrachten

3 Geschichtliches Zacharias Janssen ( ): 1595: Erstes zusammengesetztes Mikroskop de.wikipedia.org, gemeinfrei

4 Geschichtliches Antoni van Leeuwenhoek ( ): Einzellinsen hoher Qualität, 270-fach, Anfärbung von Präparaten de.wikipedia.org, gemeinfrei en.wikipedia.org, CC-SA 3.0 de.wikipedia.org, gemeinfrei

5 Geschichtliches Robert Hooke ( ): Zusammengesetztes Mikroskop, schiefe Beleuchtung: Micrographia, 1665 de.wikipedia.org, gemeinfrei

6 Geschichtliches Étienne-Louis Malus ( ): Arbeiten zur Lichtbrechung und Polarisation de.wikipedia.org, gemeinfrei George Gabriel Stokes ( ): Entdeckung der Fluoreszenz, Arbeiten zur Absorption de.wikipedia.org, gemeinfrei

7 Geschichtliches Ernst Abbe ( ): 1866: Kooperation mit Carl Zeiss, 1870: Abbildungstheorie x NA Objektiv NA Kondensor de.wikipedia.org, gemeinfrei

8 Geschichtliches Paul Ehrlich ( ): Weiterentwicklung von Färbemethoden für die Immunologie de.wikipedia.org, gemeinfrei Hans Christian Gram ( ): Gram-Färbung von Bakterien Quelle unbekannt

9 Geschichtliches Frits Zernike ( ): 1930: Erfindung Phasenkontrastmikroskop, 1941: Industrielle Umsetzung (Wehrmacht), 1953: Nobelpreis für Physik de.wikipedia.org, gemeinfrei

10 Geschichtliches Marvin Minsky ( ): 1955: Konfokalmikroskop, 1956: Begriff Künstliche Intelligenz en.wikipedia.org, CC-A-3.0

11 Geschichtliches Stefan W. Hell (*1962): 2000: STED-Mikroskop, 2001: MPI Biophys. Chemie, Göttingen, 2014: Nobelpreis für Chemie de.wikipedia.org, CC-SA-3.0

12 Das Mikroskop: Wichtige Begriffe Gesamtvergrößerung Wie groß sehe ich das Objekt? Bestimmt durch Objektiv, Okular und evtl. Tubusfaktor Auflösung/Auflösungsvermögen Wie viele Einzelheiten kann ich erkennen? Wichtig: numerische Apertur Objektiv und Kondensor Kontrast Wie gut kann ich Details erkennen? Es gibt unterschiedliche Kontrastierverfahren

13 Das Mikroskop: Wichtige Begriffe P: Präparat Obj: Objektiv ZB: Zwischenbild Ok: Okular

14 Das Mikroskop: Wichtige Begriffe Gesamtvergrößerung Wie groß sehe ich das Objekt? Bestimmt durch Objektiv, Okular und evtl. Tubusfaktor M = x

15 Das Mikroskop: Wichtige Begriffe Auflösung/Auflösungsvermögen Wie viele Einzelheiten kann ich erkennen? Wichtig: numerische Aperturen Objektiv und Kondensor

16 Das Mikroskop: Wichtige Begriffe Auflösung/Auflösungsvermögen Wie viele Einzelheiten kann ich erkennen? Wichtig: numerische Aperturen Objektiv und Kondensor x NA Objektiv NA Kondensor

17 Das Mikroskop: Wichtige Begriffe Auflösung/Auflösungsvermögen Förderliche Vergrößerung des Mikroskops: M förderlich = ( ) x NA Für ein Objektiv mit NA 1,25 ist dann: M förderlich, max = 1250, erreichbar z. B. mit 100:1-Objektiv und 12,5x-Okular(en)

18 Das Mikroskop: Wichtige Begriffe Auflösung/Auflösungsvermögen Jenseits förderlicher Vergrößerung: leere Vergrößerung

19 Das Mikroskop: Wichtige Begriffe Auflösung/Auflösungsvermögen Für numerische Aperturen >1: Ölimmersion

20 Das Mikroskop: Wichtige Begriffe Korrektionsarten: Achromate Chromatische Aberration: Farblängsfehler Farbquerfehler (CVD) de.wikipedia.org, CC-SA-3.0

21 Das Mikroskop: Wichtige Begriffe Korrektionsarten: Achromate

22 Das Mikroskop: Wichtige Begriffe Korrektionsarten: Planobjektive zur Bildfeldebnung

23 Hellfeld (HF)-Mikroskopie Kontrastreiche Präparate mit Eigenfarben Alternativ: Anfärbung (Nachteil: Zellen ) Beispiel: gefärbte Gewebeschnitte und Ausstriche Präparat wird durchleuchtet wie ein Dia Speisepilz, Eigenfarbe Schnitt Duodenum, HE Blutausstrich, Giemsa

24 Hellfeld (HF)-Mikroskopie Weitere Beispiele: Eigenfarbe Kieselalge Schimmel (Penicillium) Dünnschliff Basalt

25 Hellfeld (HF)-Mikroskopie Weitere Beispiele: Anfärbungen Herz Ratte, HE Gehirn Ratte, Nissl Chromosomen, Giemsa Spirochäten, Levaditi

26 Hellfeld (HF)-Mikroskopie Opake Präparate/Objekte: Auflichtmikroskopie

27 Langspielplatte, 40x Reifengummi, 100x Verbundmaterial, 100x Anschliff LP, 100x Hellfeld (HF)-Mikroskopie Beispiele: Auflichtmikroskopie

28 Milben in Knospen Kapillaren Nagelfalz Uhrwerk Lichtleiter Hellfeld (HF)-Mikroskopie Weitere Beispiele: Stereomikroskopie, flexible Beleuchtung

29 Phasenkontrast (PH)-Mikroskopie Kontrastschwache, dünne Präparate Anfärbung: nicht möglich/nicht erwünscht Beispiel: Untersuchung von Sputum, Harnsediment HF-Mikroskop mit speziellen Objektiven/Ringblenden

30 Phasenkontrast (PH)-Mikroskopie Für jedes Phasenobjektiv ein Lichtring!

31 Phasenkontrast (PH)-Mikroskopie Weitere Beispiele: Schleimhaut-Epithelzellen Hellfeld

32 Phasenkontrast (PH)-Mikroskopie Weitere Beispiele: Schleimhaut-Epithelzellen Hellfeld, Aperturblende geschlossen

33 Phasenkontrast (PH)-Mikroskopie Weitere Beispiele: Schleimhaut-Epithelzellen Phasenkontrast

34 Phasenkontrast (PH)-Mikroskopie Weitere Beispiele: Harnsediment

35 Dunkelfeld (DF)-Mikroskopie Kontrastschwache Präparate Anfärbung: nicht möglich/nicht erwünscht Beispiel: Untersuchung auf Spirochäten HF-Mikroskop mit spezieller Ringblende

36 Dunkelfeld (DF)-Mikroskopie Beleuchtung mit hohlem Lichtkegel

37 Dunkelfeld (DF)-Mikroskopie Beispiel: Mikroorganismen Phasenkontrast

38 Dunkelfeld (DF)-Mikroskopie Beispiel: Mikroorganismen Dunkelfeld

39 Dunkelfeld (DF)-Mikroskopie Beispiel: Nativblut (1000x, spezielles Objektiv mit Iris)

40 Dunkelfeld (DF)-Mikroskopie Weiteres Beispiel: Stereomikroskopie, flexible Beleuchtung Tierembryonen, 90x

41 Polarisations (POL)-Mikroskopie Kontrastschwache Präparate Anfärbung: nicht möglich Beispiel: Untersuchung auf Gicht; Mineralogie HF-Mikroskop mit Polarisator/Analysator

42 Analysator mit Kompensator Rot I Polarisator mit Dreh- u. Zentriertisch Polarisations (POL)-Mikroskopie Kontraste aufgrund von Doppelbrechung: Orthoskopie

43 Hellfeld Polarisations (POL)-Mikroskopie Beispiel: Kartoffelstärke Objektiv: SPL 20/0,40

44 Hellfeld Polarisations (POL)-Mikroskopie Beispiel: Dünnschliff Basalt

45 POL Polarisations (POL)-Mikroskopie Beispiel: Dünnschliff Basalt

46 POL + Rot I Polarisations (POL)-Mikroskopie Beispiel: Dünnschliff Basalt

47 Polarisations (POL)-Mikroskopie Interferenzen (hintere Objektiv-Brennebene): Konoskopie Hilfsmittel: Bertrand-Linse oder (bei Hund) Einstellfernrohr

48 Fluoreszenz (FL)-Mikroskopie Extreme Spezifität: gezielter Erregernachweis Kurzwellige Anregung, langwellige Detektion (Stokes) Cy3 Grünanregung (530 nm) Rotfluoreszenz (> 580 nm)

49 Fluoreszenz (FL)-Mikroskopie Extreme Spezifität: gezielter Erregernachweis Kurzwellige Anregung, langwellige Detektion (Stokes) FITC Blauanregung (470 nm) Grünfluoreszenz (> 520 nm)

50 Fluoreszenz (FL)-Mikroskopie Mechanismus Primärfluoreszenz Sekundärfluoreszenz Immunfluoreszenz Beschreibung Eigenfluoreszenz vieler biologischer Objekte, z. B. Pollen - aber auch mancher Minerale Nach Anfärbung mit Fluorochromen, z. B. Mykoval (Chitin, Zellulose) oder DAPI (DNA) Nach Kopplung mit Fluorochrommarkierten Antikörpern, SEHR spezifisch

51 Fluoreszenz (FL)-Mikroskopie Beispiele: Hefen, Mykoval Kokken, FITC Mycobakterien, AO/Thiazinrot E.coli, DAPI

52 Fluoreszenz (FL)-Mikroskopie Hund-eigenes Färbemittel Mykoval: Pilze, Hefen, Parasiten Hautschuppe mit Dermatomykose Penicillium spp. aus Abklatschprobe Innenraum

53 Fluoreszenz (FL)-Mikroskopie Auflichtbeleuchtung (HBO) mit speziellen Filtersätzen

54 Fluoreszenz (FL)-Mikroskopie Auflichtbeleuchtung (LED) mit speziellem Filtersatz

55 Fluoreszenz-Mikroskopie: Mykosen Vorteile der Fluoreszenz-Mikroskopie: Nativpräparat: Zeitgewinn gegenüber Kultur Hohe diagnostische Sicherheit Wenig Expertenwissen nötig Abrechnung: EBM 32181: Färbung mit Fluorochromen (z. B. Acridinorange, Calcofluor weiß) auf Pilze GOÄ 4711: Lichtmikroskopische Untersuchung zum Nachweis von Pilzen im Nativmaterial nach Präparation (z. B. Kalilauge) oder aufwenigerer Anfärbung (z. B. Färbung mit Fluorochromen, Baumwollblau-, Tuschefärbung)

56 Fluoreszenz-Mikroskopie: Mykosen Anwendungsgebiete Mykoval Nativpräparate: Haut, Haar, Nägel, Schleimhautabstriche Histologische Präparate: Kombinierte Färbung Schnelldiagnostik während OPs Körperflüssigkeiten, Stuhl Gynäkologie: Hefebesiedlungen auf Schleimhäuten Mikrosporidien im Stuhl

57 Fluoreszenz-Mikroskopie: Mykosen Kombinierte Färbung Mykoval + HE Maus, Candidose der Niere, Hellfeld/Auflicht-Fluoreszenz

58 Fluoreszenz-Mikroskopie: Bier Kombinierte Färbung FAM + Cy3 Cy3 Rot: bierschädliche Bakterien

59 Fluoreszenz-Mikroskopie: Bier Kombinierte Färbung FAM + Cy3 FAM Grün: Laktobazillus brevis

60 Vergleich Kontrastierverfahren Hellfeld - Fluoreszenz

61 Vergleich Kontrastierverfahren Hellfeld - Fluoreszenz

62 Vergleich Kontrastierverfahren Hellfeld Phasenkontrast Fluoreszenz

63 Vergleich Kontrastierverfahren Hellfeld Phasenkontrast Fluoreszenz

64 Vergleich Kontrastierverfahren Hellfeld Phasenkontrast Fluoreszenz

65 Vergleich Kontrastierverfahren Hellfeld Phasenkontrast Fluoreszenz

66 Aufbau eines Mikroskops 1 8 1: Okulare und Tubus 2 2: Objektive und Revolver 3 7 3: Kreuztisch 4: Kondensor mit Aperturblende : Beleuchtung 6: Tischtrieb (x/y) 7: Fokussierung (grob/fein) 8: Stativ

67 Med-Prax 3: Das Robuste HF Für Arztpraxis und biologische Ausbildung Kompaktes, robustes Design Langlebige LED-Beleuchtung Vollständig geebnetes Bild durch planachromatische Objektive 4x, 10x, 40x, 100x Öl Ermüdungsfreies Arbeiten durch einstellbare Gängigkeit der Fokussierung Attraktiver Preis Feste Konfiguration

68 medicus plus: Das Vielseitige HF DF PH FL Für Arztpraxis, medizinisches und biologisches Labor Kompaktes, ergonomisches Design Verminderte Verletzungsgefahr durch Tischtrieb ohne Zahnstangen Vollständig geebnetes Bild durch planachromatische Objektive Einsatz von Zählkammern möglich Ermüdungsfreies Arbeiten durch einstellbaren Siedentopf-Tubus Einfache Adaptation von Kameras für die Dokumentation Vielfältiges Zubehör

69 medicus plus: Das Vielseitige FL HF Ausrüstung medicus plus Myko Zielgruppe: Dermatologen, Allergologen, Gynäkologen, Baubiologen Keine Kultivierung nötig Einfache Anfärbung des Präparats mit Mykoval Sichere Diagnose durch hohen Kontrast und hohe Auflösung Lange Lebensdauer der LED- Beleuchtung Nachrüstung des Illuminators bei vorhandenen medicus plus möglich

70 H 600: Das Universelle DF PH FL Pol Für Arztpraxis und klinisches Labor Stabiles, universell erweiterbares Mikroskopstativ Revolver für bis zu 5 Objektive Kombi-Kondensoren für schnelles Umschalten zwischen HF, DF, PH Ausrüstung für hochauflösendes Dunkelfeld verfügbar Wahlweise Halogen- oder LED- Beleuchtung, köhlerbar Einfache Adaptation von Kameras für die Dokumentation Vielfältiges Zubehör

71 H 600 LED-AFL Myko H 600 LL HP 100 H 600: Das Universelle H 600 HP LED H 600 AFL Plan 100

72 Wilovert: Das Inverse HF PH FL Für klinisches und Zellkultur-Labor Stabiles, universell erweiterbares Mikroskopstativ Revolver für bis zu 5 Objektive Kombi-Kondensoren für schnelles Umschalten zwischen HF, PH Variante für Auflicht-Fluoreszenz verfügbar Adapter für unterschiedliche Probengefäße verfügbar Einfache Adaptation von Kameras für die Dokumentation Adaptation von Mikromanipulatoren möglich

73 Wiloskop: Das Stereomikroskop HF Für Sektion, Werkstatt, Ausbildung und Schülerlabor Stufenloser Zoom: 6,7x 45x (mit 10x-Okularen) Erweiterbar mit Okularen und Vorsatzlinsen Verschiedene Stative und Beleuchtungsvarianten Einfache Adaptation von Kameras für die Dokumentation Sonderausführung mit Objekttisch für kontrastschwache Objekte (Embryonen, Nematoden)

74 Kameras für die Mikroskopie UI-1240LE-C UI-1460LE-C UI-3580SE-C Kappa Juno2 Chipgröße 1/2 1/2" 1/2 1/2,5 Sensortyp CMOS CMOS CMOS CMOS Auflösung 1280 x 1024 (1,3 MPix) 2048 x 1536 (3,1 MPix) 2560 x 1920 (5,2 MPix) 2560 x 1920 (5,2 MPix) Bildwiederholrate [fps] 25, Farbtiefe [Bit] Schnittstelle USB 2.0 USB 2.0 USB 3.0 HDMI, LAN Software ueye Cockpit -- C-Mount-Adapter 0,5x 0,5x 0,5x 0,5x Windows-Version 7,

75 ueye: Software zur Bildaufnahme

76 pixel-fox: System zur Vermessung

77 Mikroskope als Medizinprodukte Mikroskope zu Diagnosezwecken und für menschliche Proben sind In-Vitro-Diagnostika Hund-Mikroskope werden entsprechend dokumentiert Für alle Modelle liegen entsprechende Konformitätserklärungen vor, auf Anfrage erhältlich

78 Ansprechpartner Marleen Geller Dr. Jörg Haus Sales Mikroskope Produktmanager Instrumente Tel Tel Petra Hertstein-Hecker Michael Wagner Vertriebslogistik Service Mikroskope Tel Tel Webseite: