FAQ CITSens Bio. 1 Welche Vorteile habe ich, Glukose mit dem CITSens Bio Glukose Sensor zu messen?

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1 FAQ CITSens Bio 1 Welche Vorteile habe ich, Glukose mit dem CITSens Bio Glukose Sensor zu messen? Resultate zu jeder Zeit verfügbar -> keine Zeitverzögerung Keine Probeentnahme nötig Geringeres Kontaminationsrisiko da keine Probeentnahme Keine Reagenzien-Kosten verglichen zu offline Methoden Sofortiges Erkennen von Kontamination und anderen Prozessveränderungen Keine Verfälschung der Probe durch Manipulationen 2 In welcher Branche und zu welchem Zweck wird der CITSens Bio eingesetzt? Die CITSens Bio Sensoren sind zur online Überwachung der Wachstumsphasen von Zellenkulturen in der Biotechnologie gedacht. Mit den Sensoren kann Glukose, Laktat oder Glutamat gemessen werden. 3 Welche Zelllinien kann ich mit dem CITSens Bio überwachen? Sie können alle Zelllinien, die Glukose verbrauchen, mit dem CITSens Bio überwachen. (z.b.: CHO- Zellen, Hefezellen, Bakterien, etc.) 4 Kann ich den Glukose-Sensor auch ohne Beamer und ZOMOFI einsetzen? Nein, die Sensoren sind mit einer Paste beschichtet, die in Verbindung mit der Glukose im Medium Strom erzeugen. Dieser Strom wird mittels Beamer und ZOMOFI auf dem PC ausgewertet und grafisch dargestellt. 5 Wird der Sensor steril geliefert? Ja, der Sensor wird gammasterilisiert und doppelt verpackt geliefert. 6 Kann ich die Sensoren autoklavieren? Nein, die Oxidasen würden durch die Hitze des Autoklavs inaktiviert. 7 Welche Voraussetzungen muss mein PC erfüllen? Windows 2000, XP, VISTA, LINUX, MAC > 1,5 MHz Processor Min. 256 MB RAM C-CIT AG, Einsiedlerstrasse 29, CH-8820 Wädenswil _Seite 1

2 8 Für was benötige ich MySQL, Edgeware und GUI? MySQL: Datenbank, Langzeitspeicher der Daten und Experimente. Andere Datenbanken wie Oracle usw. können ebenfalls verwendet werden Edgeware: Zur Steuerung und Kommunikation mit dem ZOMOFI (Daten werden von ZOMOFI in Datenbank geschrieben) GUI: Graphical User Interface, für die Darstellung der Daten in einem Graphen und das Kalibrieren und Starten von Experimenten sowie das Exportieren von Daten in ein csv-file für Datenbearbeitungsprogramme 9 Wie viele Parameter kann ich mit einem Sensor messen? Für jeden Parameter Glukose, Laktat und Glutamat benötigen Sie je einen Sensor. 10 Wie sehe ich, welcher Parameter welchem Sensor entspricht? Die Sensoren werden mit Farb-Punkten markiert: Glukose schwarz GOD Laktat gelb LOD Glutamat blau GluOD 11 Wie viele Sensoren können pro Deckel eingesetzt werden? Pro Deckel können bis zu drei Parameter eingesetzt werden: Glukose Laktat Glutamat 12 Wie viel Medium muss mindestens im Bioreaktor sein, um Glukose, Glutamat oder Laktat zu messen? Ist von der Grösse des Bioreaktors abhängig, jedoch so viel, dass der Sensor zu jeder Zeit benetzt ist. Mindest Volumen für den Einsatz der Sensoren ist 20 ml 13 Wie spezifisch messen die CITSens Bio Sensoren? Der Glukose Sensor ist sehr spezifisch und misst nur die β-d-glukose. Der Laktat Sensor ist sehr spezifisch und misst nur L-Laktat. Der Glutamat Sensor ist sehr spezifisch und misst L-Glutamat. 14 Wird das Medium durch diffundierende Substanzen der Paste verunreinigt? Nein. Die mit Paste belegten Sensorköpfe werden mit einer Membran überzogen, welche eine Porengrösse von ca. 6 kd aufweist und somit alle grösseren Moleküle an der Diffusion hindert. Die Paste kommt nie direkt mit dem Medium und den Zellen in Berührung. C-CIT AG, Einsiedlerstrasse 29, CH-8820 Wädenswil _Seite 2

3 15 Welche Glukose-Konzentration kann höchstens mit dem CITSens Bio Sensor gemessen werden? Die Höchstkonzentration, die mit dem CITSens Bio Glukose-Sensor gemessen werden kann, beträgt 10,8 g/l = 60 mmol/l 16 Wachsen Zellen auf der Oberfläche des Sensors und beeinträchtigt dies das Messergebnis? Auf der Oberfläche der Sensoren wachsen keine Zellen und haben dadurch auch keinen Einfluss auf die Messergebnisse 17 Wie lange kann ich die Sensoren einsetzen? Mit den CITSens Bio Sensoren können Sie während 21 Tagen Glukose und Glutamat, Laktat während 16 Tagen online, in situ messen. 18 Wie lange ist der Sensor haltbar? Die Sensoren sind während 6 Monaten im Kühlschrank bei 5 C haltbar. 19 Muss beim Anschliessen der Sensoren an den Beamer etwas beachtet werden? Beim Anschliessen der Sensoren an den Beamer muss beachtet werden, dass die glatte Seite (Seite mit dem Kleber GoD, LoD oder GluoD) der Elektrode nach oben gelegt wird. 20 Kann ich den selben Sensor von einem Bioreaktor zum Anderen übernehmen? Dies ist möglich, C-CIT AG übernimmt jedoch keine Verantwortung für die Sterilität des Sensors. 21 Kann die Messung in der Software unterbrochen oder gestoppt werden? Ein laufender Versuch kann nicht unterbrochen werden. Wird z.b. eine neue Kalibrierung benötigt, muss das Experiment gestoppt, kalibriert und anschliessend neu gestartet werden. 22 Wie oft muss ich den Sensor kalibrieren? Der Sensor sollte nach jedem feed, splitting/passage neu kalibriert werden. 23 Wie sehe ich, ob mein Sensor bereits kalibriert ist? Die CITSens Bio Software besitzt eine Statusanzeige, in der Sie sehen können, ob der Sensor bereits kalibriert wurde. 24 Wie kann ich feststellen, ob meine Sensoren auch wirklich steril sind? Jeder ausgelieferte Sensor im Deckel wird doppelt verpackt und Gamma-sterilisiert. Ein Indikatorkleber, der auf der äusseren Verpackung geklebt ist, wird sich nach dem Sterilisieren von braun zu rot verfärben. Ist der Indikator also rot, bedeutet dies, dass der Sensor sterilisiert wurde. 25 Warum muss ich vor dem Kalibrieren mindestens 8 Std. die Sensoren konditionieren? Damit der Sensor sich an die Kultivierungsbedingungen anpassen kann. C-CIT AG, Einsiedlerstrasse 29, CH-8820 Wädenswil _Seite 3

4 26 Warum müssen die Sensoren in Gebrauch immer am Beamer hängen? Der Sensor im Medium produziert Elektronen, die abgeführt werden müssen. Ist dies nicht der Fall, kommt es zu einer Produktion von Peroxid, was für den Sensor toxisch ist. 27 Darf ich den Beamer beim feeden abhängen? Ja, jedoch nicht länger als 30 Minuten, da sonst die Sensoren mit Elektronen überfüllt und so beschädigt werden. 28 Muss ich das laufende Experiment immer vor dem Passagieren/Splitten beenden? Ja, wenn der Sensor neu kalibriert werden soll. Die Sensoren, die bereits kalibriert sind, können in einem laufenden Experiment nicht nochmals kalibriert werden. 29 Muss ich den Sensor nach dem Feeden neu kalibrieren? Wir empfehlen nach jedem Feeden, Splitten und Passagieren den Sensor neu zu kalibrieren. 30 Welche Konzentration muss ich in der Software eingeben, wenn ich den Sensor nach dem Feeden neu kalibriere. Die Konzentration kann durch eine einfache Mischrechnung errechnet werden. 31 Wie kann ich feststellen, dass mein Beamer funktioniert? Die ID-Tag des Beamers muss in der Software erscheinen. Der Beamer funktioniert erst wenn ein Sensor angehängt ist. 32 Wie kann ich feststellen, dass mein ZOMOFI funktioniert? Ein grünes Lämpchen auf der Rückseite des ZOMOFI blinkt ca. alle 20 sec. auf, wenn der ZOMOFI angeschlossen ist und funktioniert. 33 Wie viele Beamer kann ich pro ZOMOFI auslesen? Es können bis 1000 Beamer mit einem ZOMOFI ausgelesen werden. 34 Brauche ich für jeden Sensor einen Beamer? Ja, da jeder Sensor mit dem Beamer zusammen kalibriert wird und so einwandfrei identifizierbar ist. 35 Wie gross darf der Abstand vom Beamer zum ZOMOFI sein? Der Abstand sollte innerhalb eines Zimmers nicht grösser als 20 Meter sein. 36 Funktionieren die Beamer auch durch einen geschlossenen Wärmeschrank? Ja, das ist kein Problem. 37 Wie oft muss ich den Akku des Beamers aufladen? Im Durchschnitt ca. alle 8 Wochen ein Mal. C-CIT AG, Einsiedlerstrasse 29, CH-8820 Wädenswil _Seite 4

5 38 Was ist eine Drift und welchen Wert muss in der Software stehen? Die Drift ist eine Signalveränderung ohne eine Konzentrationsänderung. Dieser Wert wird für die Kalibrierung benötigt. (0,5) 39 Ich erhalte mit CITSens Bio Sensoren andere Werte als mit BioProfil, ist das normal? Nein, die CITSens Bio -Werte sollten nicht mehr als 10 % von der offline Methode abweichen. Bei grösseren Abweichungen können die Kalibrierungsparameter fixglvalue und fixnavalue im File config.properties geändert werden. 40 Mit welcher Referenzmethode werden die CITSens Bio Sensoren verglichen? Die CITSens Bio Sensoren wurden mit der Referenzmethode HPLC verglichen. 41 Wie rechne ich na in g/l um? Wird automatisch durch die CITSens Bio Software errechnet. 42 Wie rechne ich mmol in g/l um? 1 mmol/l Glukose entspricht g/l 1 mmol/l Laktat entspricht g/l 1 mmol/l Glutamat entspricht g/l 43 Kann ich die gemessenen Werte auch weiter bearbeiten? Die gemessenen Werte können mit jedem beliebigen Programm (z.b. Excel, Word, etc.) weiter bearbeitet werden. 44 Edgeware nimmt Daten auf ohne Fehlermeldung, aber sie werden nicht in der CITApplication angezeigt Möglicher Fehler: Datenbank ist abgestürzt. Als root das MySQL Database query tool öffnen. Die Tabelle Experiments unter dem Schemata ZOMOFIDB öffnen. Wenn sie sich nicht öffnen lässt und Fehlercode 145 zeigt, dann ist die Datenbank abgestürzt. Fehlerbehebung: Im Database query tool den Befehl REPAIR TABLE Experiments eingeben C-CIT AG, Einsiedlerstrasse 29, CH-8820 Wädenswil _Seite 5