Cellular Biophysics SS Manfred Radmacher
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- Kerstin Grosse
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1 SS Manfred Radmacher
2 Probability of a protein being synthesized by chance typical protein has 100 amino acids there are 20 different amino acids there are different amino acid sequences of this length this is: 1.3 * the probability that this protein evolved by chance is: 0.7 * so, this (and all other) proteins can't have evolved by trying out all possibilities 2
3 Gedankenexperiment let's take a protein solution at 1 mmol this is 6 * molecules per liter times the volume of the ocean: 0.7 * 4 * π (6000 km) 2 * 1500 m = 5 * ltr this is 3 * molecules on earth synthesize them newly every second (by mutation or whatever) and multiply it by the age of the universe: 10 * 10 9 years = 3 * seconds gives a total of 9 * molecules synthesized 3
4 Earth used to be a more energetic environment 4
5 Let's first recall our knowledge on DNA From: Alberts et al., Molecular Cell Biology 5
6 DNA structure From: Alberts et al., Molecular Cell Biology 6
7 Genetic Code From: Alberts et al., Molecular Cell Biology 7
8 Transsciption I From: Alberts et al., Molecular Cell Biology 8
9 Transsciption II From: Alberts et al., Molecular Cell Biology 9
10 Gen expression is regulated 10
11 DNA is organized in 23 chromosomes in humans Human Chromosomes From: Alberts et al., Molecular Cell Biology 11
12 Information content of the human chromosome 1 billion base pairs 4 nucleic acids per base = 2 bit per base pair total 2 billion bits 2 GBit = 250 MByte (1 CD-Rom) 12
13 Miller & Urey experiment proves the presence of simple organic compounds in early times on earth from: 13
14 The Miller & Urey experiment produced simple organic compounds including amino acids Molecule Name Relative Yield H-COOH formic acid 1000 H2N-CH2-COOH glycine 275 HO-CH2-COOH glycolic acid 240 H2N-CH(CH3)-COOH alanine 150 HO-CH(CH3)-COOH lactic acid 135 H2N-CH2CH2-COOH beta-alanine 65 CH3-COOH acetic acid 65 CH3-CH2-COOH propionic acid 55 CH3-NH-CH2-COOH sarcosine 20 HOOC-CH2CH2-COOH succinic acid 17 H2N-CO-NH2 urea 9 HOOC-CH2CH2CH(NH2)-COOH glutamic acid 2.5 HOOC-CH2CH(NH2)-COOH aspartic acid 1.7 From: Miller S. L., and Urey, H. C (1959). "Organic Compound Synthesis on the Primitive Earth". Science 130:
15 15
16 16
17 17
18 18
19 19
20 20
21 Experiments on Q-Beta suggest that even on a molecular scale evolution can work Bacteriophage Genome: ssrna 4517 residues encodes: coat proteins and Qβ replikase The genome itself is infectious entry: Enterobacteria phage Qβ 21
22 RNA structure of Qβ node4.html#section
23 Qβ-replikase generates and replicates without a matrix RNA Abb. 19.1: Zur Evolution einer neuen RNS-Spezies ohne Replikation einer Matrix. Sequentielles Experiment: In jedem Glas befinden sich Q -Replikase, energiereiche Triphosphate der Basen A, U, G und C, Ansammlung von RNS entsteht. Davon wird ein Bruchteil in Glas 2 gegeben, in dem nun RNS aufgrund der zugegebenen Matrizen-RNS synthetisiert wird. Der Versuch wird n-mal wiederholt. Es entsteht eine einheitliche optimale RNS. From: Sackmann "Biophysik-Skript 23
24 Qβ-replikase it is an enzyme and it generates a RNA which is similar to the RNA encoding itself 24
25 Eigen's experiments on molecular evolution From: Sackmann "Biophysik-Skript 25
26 Eigen's model of molecular evolution Derivation on board 26
27 Survival of the fittest From: Sackmann "Biophysik-Skript 27
28 Due to mutation a quasispecies survives From: Sackmann "Biophysik-Skript 28
29 Maximum length of genome Derivation on board 29
30 Maximum length of genome From: Sackmann "Biophysik-Skript 30
31 To further increase complexity the hyper-cycle could help From: Sackmann "Biophysik-Skript 31
32 Analogy to Laser Hermann Haken mode selection "Versklavung von Moden" From: Sackmann "Biophysik-Skript 32
33 Der Laser als Beispiel für die Evolution von Eigenzuständen eines Lasermedium 2 Niveau System (Energieniveaus des Lasermediums) hf I Linienbreite des Übergangs Adsorption spontane Emission stimulierte Emission f Spektrallinie f Besetzungsinversion: N 2 > N 1 entnommen aus: Richter, P., Evolution - eine Folge von Phasenübergängen. Physik in unserer Zeit, : p entnommen aus: Kneubühl, F.K. and M.W. Sigrist, Laser. 3 ed. Teubner Studienbücher. 1991, Stuttgart: Teubner. 33
34 Der Laser als Beispiel für die Evolution von Eigenzuständen eines Resonator: nur stehende Wellen sind stationär (Rückkopplung!) Resonator I f f Moden (Eigenschwingungen): L = nc/2f n ; n = 0, 1, 2,... entnommen aus: Kneubühl, F.K. and M.W. Sigrist, Laser. 3 ed. Teubner Studienbücher. 1991, Stuttgart: Teubner. 34
35 Der Laser als Beispiel für die Evolution von Eigenzuständen eines Resonator Intensitätsverteilungen von TEM-Moden eines konfokalen Resonators mit kreisförmigen Spiegeln entnommen aus: Kneubühl, F.K. and M.W. Sigrist, Laser. 3 ed. Teubner Studienbücher. 1991, Stuttgart: Teubner. 35
36 Der Laser als Beispiel für die Evolution von Eigenzuständen eines Modenselektion im Resonator I Spektrallinie Moden des Resonators f nur die Moden des Resonators die innerhalb der Spektrallinie liegen können verstärkt werden -> Modenselektion (Rückkopplung) entnommen aus: Sackmann, E., Vorlesungsskript Biophysik (3. Auflage). 1992, Technische Universität: München. 12.
37 Der Laser als Beispiel für die Evolution von Eigenzuständen eines Vergleich mit Eigenschen Selektionsgleichungen (siehe Vorlesung Dieter Braun) - Lasermoden - stimulierte Emission (nur wenn eine Mode schon da ist kann sie sich verstärken) - Modenkopplung - Spezies - Replikation (Autokatalyse) - fehlerhafte Replikation ermöglicht Übergang zu anderer Spezies entnommen aus: Richter, P., Evolution - eine Folge von Phasenübergängen. Physik in unserer Zeit, : p
38 Der Laser als Beispiel für die Evolution von Eigenzuständen eines entnommen aus: Richter, P., Evolution - eine Folge von Phasenübergängen. Physik in unserer Zeit, : p
39 Laser theory Derivation on board 39
40 Versklavung von Moden Experiment 40
41 41
42 42
43 Rybozymes: Hammerhead rybozyme shows enzymatic activity Figure 1 Mechanism of RNA-catalysed selfcleavage. a, General mechanism of ribonucleases and small self-cleaving ribozymes. The 2 -hydroxyl adjacent to the scissile phosphate is activated for nucleophilic attack by abstraction of its proton. Concurrently, a proton is donated to stabilize the developing negative charge on the leaving group oxygen. b, Secondary structure of the hammerhead ribozyme. Nucleotides important for catalytic activity are indicated; the cleavage site is indicated by an arrow. c, Crystal structure of the hammerhead ribozyme. Coordinates are from ref. 14. The nucleotides flanking the scissile bond are shown in gold. Nature 418, (11 July 2002); doi: /418222a The chemical repertoire of natural ribozymes JENNIFER A. DOUDNA* AND THOMAS R. CECH 43
44 Hairpin Rybozymes Figure 3 Structure of the hairpin ribozyme. a, Secondary structure of the hairpin ribozyme; conserved, functionally important nucleotides are shown explicitly. Dots indicate non-canonical base pairings. b, Crystal structure of a precursor form of the hairpin ribozyme. Nucleotides flanking the scissile bond are shown in gold, whereas the grey structure is the U1a RNA-binding-domain protein and its cognate RNA-binding site, engineered into the construct to assist crystallization. Nature 418, (11 July 2002); doi: /418222a The chemical repertoire of natural ribozymes JENNIFER A. DOUDNA* AND THOMAS R. CECH 44
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