Hellmut Jork, Werner Funk, Walter Fischer, Hans Wimmer Dünnschicht- Chromatographie: Reagenzien und Nachweismethoden Band la Physikalische und chemische Nachweismethoden: Grundlagen, Reagenzien I
Inhalt Teil I Methoden der Detektion 1 Einleitung 3 2 Physikalische Methoden der Detektion 9 2.1 Allgemeines 9 2.2 Nachweis absorbierender Substanzen 9 2.2.1 Visuelle Detektion 9 2.2.2 Fluoreszenz- und Phosphoreszenz-Indikatoren 10 2.2.3 Photometrische Absorptionsmessungen 17 2.2.3.1 Geräte 17 2.2.3.2 Meßprinzipien 30 2.2.3.3 Quantitative Auswertung 34 2.3 Nachweis fluoreszierender Substanzen 37 2.3.1 Allgemeines 37 2.3.2 Visuelle Detektion 38 2.3.3 Fluorimetrische Messungen 38 2.4 Nachweis von radioaktiv markierten Substanzen 40 2.5 Zerstörungsfreie Detektion mit Hilfe anderer physikalischer Verfahren. 42 2.5.1 Spektrale Phänomene 42 2.5.2 Benetzungs- und Löslichkeitsphänomene 42 2.5.3 Säure-/Base-Eigenschaften 45 2.5.4 Iod-Behandlung 46 3 Chemische Methoden der Detektion 55 3.1 Prächromatographische in-situ-derivatisierung 56 3.1.1 Oxidation und Reduktion 58 3.1.2 Hydrolyse 62 3.1.3 Halogenierung 64 3.1.4 Nitrierung und Diazotierung 66 3.1.5 Veresterung und Veretherung 68 3.1.6 Hydrazon-Bildung 71 3.1.7 Dansylierung 72 3.1.8 Sonstige prächromatographische Derivatisierungen 75
X Inhalt 3.2 Postchromatographische Detektion 77 3.2.1 Besprühen 81 3.2.2 Tauchen 82 3.2.3 Bedampfen 86 3.2.4 Reagenz im Fließmittel 88 3.2.5 Reagenz im Sorbens (Stationäre Phase als Reagenz) 88 3.2.6 Sprüh- und Tauchfolgen 90 3.2.7 Nachbehandlung 90 3.2.7.1 Trocknen der Chromatogramme 91 3.2.7.2 Einwirkung von Wärme 92 3.2.7.3 Stabilisierung angefärbter und fluoreszierender Zonen 98 3.3 Biologisch-physiologische Methoden der Detektion 109 4 Dokumentation und Hinweise für den Praktiker 119 4.1 Vorbereitung der Chromatographie 119 4.1.1 Qualität der Lösungsmittel 119 4.1.2 Wahl der stationären Phase 121 4.1.3 Vorwaschen der Schicht 123 4.1.4 Auswahl des Kammersystems 124 4.2 Protokollieren am Chromatogramm 131 4.3 Fixierung des visuellen Chromatogramm-Eindrucks 133 4.3.1 Neatan-Konservierung 134 4.3.2 Dokumentation durch Abzeichnen, Photokopieren oder Photographieren 134 4.4 Dokumentation nach in-situ-auswertung mit Computern 138 Teil II Reagenzien in alphabetischer Reihenfolge Alizarin-Reagenz 143 Aluminiumchlorid-Reagenz 147 4-Aminoantipyrin-Kaliumhexacyanoferrat(III)-Reagenz 151 4-Aminobenzoesäure-Reagenz 154 2-Aminodiphenyl-Schwefelsäure-Reagenz 157 4-Aminohippursäure-Reagenz 160 4-Aminohippursäure-Phthalsäure-Reagenz 163 Ammoniak-Dampf-Reagenz 166 Ammoniumthiocyanat-Eisen(III)-chlorid-Reagenz 170 Amylose-KaliumiodatAiodid-Reagenz 173
Inhalt XI Anilin-Aldose-Reagenz 176 Anilin-Diphenylamin-Phosphorsäure-Reagenz 179 Anilin-Phosphorsäure-Reagenz 185 Anilin-Phthalsäure-Reagenz 188 8-Anilinonaphthalin-l-sulfonsäure-Ammoniurnsalz-Reagenz 191 Anisaldehyd-Schwefelsäure-Reagenz 195 p-anisidin-phthalsäure-reagenz 199 Anthron-Reagenz 202 Antimon(III)-chlorid-Reagenz 206 Antimon(V)-chlorid-Reagenz 210 Berberin-Reagenz 213 2,2'-Bipyridin-Eisen(III)-chlorid-Reagenz 216 Blei(Il)-acetat, basisch-reagenz 219 Blei(IV)-acetat-Dichlorfluorescein-Reagenz 222 Blei(lV)-acetat-Fuchsin-Reagenz 226 Bratton-Marshall-Reagenz 230 Brenzkatechinviolett-Reagenz 235 Bromkresolgrün-Bromphenolblau-Kaliumpermanganat-Reagenz 238 Bromkresolpurpur-Reagenz 241 fert.-butylhypochlorit- Reagenz 244 7-Chlor-4-nitrobenzo-2-oxa-l,3-diazol-Reagenz 248 2,6-Dibromchinon-4-chlorimid-Reagenz 252 2,6-Dichlorchinon-4-chlorimid-Reagenz 256 2,6-Dichlorphenolindophenol-Reagenz 261 2,5-Dimethoxytetrahydrofuran-4-(Dimethylamino)-benzaldehyd-Reagenz.. 265 4-(Dimethylamino)-zimtaldehyd-Salzsäure-Reagenz 269 2,4-Dinitrophenylhydrazin-Reagenz 273 Diphenylborsäure-2-aminoethylester-Reagenz 277 Diphenylborsäureanhydrid-Reagenz 281 Diphenylborsäureanhydrid-Salicylaldehyd-Reagenz 284 Echtblausalz B-Reagenz 288 Eisen(III)-chlorid-Perchlorsäure-Reagenz 294 Fluorescamin-Reagenz 298 Formaldehyd-Schwefelsäure-Reagenz 303 8-Hydroxychinolin-Reagenz 307 Isonicotinsäurehydrazid-Reagenz 311
XII Inhalt Kaliumhexacyanoferrat(III)-Ethylendiamin-Reagenz 315 Kaliumhexacyanoferrat(III)-Natronlauge-Reagenz 318 Kupfer(II)-acetat-Phosphorsäure-Reagenz 321 Kupfer(II)-nitrat-Reagenz 324 Kupfer(II)-sulfat-Reagenz 327 Mangan(II)-chlorid-Schwefelsäure-Reagenz 331 2-Methoxy-2,4-diphenyl-3(2H)-furanon-Reagenz 335 3-Methyl-2-benzothiazolinonhydrazon-Reagenz 338 Molybdatophosphorsäure-Reagenz 342 l,2-naphthochinon-4-sulfonsäure-perchlorsäure-formaldehyd-reagenz... 346 Ninhydrin-Collidin-Reagenz 349 4-(4-Nitrobenzyl)-pyridin-Reagenz 354 Perchlorsäure-Reagenz 359 Peroxid-Reagenz 363 1,2-Phenylendiamin-Trichloressigsäure-Reagenz 367 o-phthalaldehyd-reagenz 371 Pikrinsäure-Perchlorsäure-Reagenz 376 Pinakryptolgelb-Reagenz 379 QuecksiIber(I)-nitrat-Reagenz 383 QuecksiIber(II)-salz-Diphenylcarbazon-Reagenz 386 Rhodamin B-Reagenz 390 Rhodamin 6G-Reagenz 393 Salzsäure-Dampf-Reagenz 397 Schwefelsäure-Reagenz 402 Silbernitrat-Natronlauge-Reagenz 407 Tetracyanoethylen-Reagenz 410 Tetrazolblau-Reagenz 414 Trichloressigsäure-Reagenz 418 Trinitrobenzolsulfonsäure-Reagenz 421 Vanadium(V)-Schwefelsäure-Reagenz 424 Vanillin-Kalilauge-Reagenz 428 Vanillin-Phosphorsäure-Reagenz 431 Wasserstoffperoxid-Reagenz 435 Zirkon(IV)-oxidchlorid-Reagenz 438
Inhalt XIII Firmenverzeichnis 443 Namens-Reagenzien und Reagenz-Akronyme 445 Register 447