Verwendung der Optocam an den Mikroskopen von CIUS

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Edwina Schmitt
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1 Verwendung der Optocam an den Mikroskopen von CIUS Einführung Die digitale Mikroskopkamera Optocam ist an vielen Mikroskopen von CIUS mittels verschiedener Adapter verwendbar. Folgende Adapter stehen zur Verfügung: 1. 5mm Zwischenring (C-mount, ohne Optik) 2. Adapter C-mount/Phototubus 23mm, mit Optik: Vergrößerung 0,45x) 3. Phototubusadapter 23mm/38mm 4. Adapter C-mount/Phototubus 38mm(mit Optik: Vergrößerung 0,65x) 5. Adapter C-mount /Phototubus 38mm(ohne Optik: Vergrößerung 1x) 6. Okularadapter 23mm/30mm

2 Installation der Optocam an den folgenden Mikroskopen mit Phototubus: Reichert Univar: Phototubus vorne oben, Phototubus hinten oben (an diesem Anschluss ist auch noch eine optische Nachvergrößerung möglich [Drehknopf Hi/Lo auf der rechten Seite ganz oben]: Nikon Labophot Nikon SMZ-U Stereomikroskop Reichert Stereomikroskop Leica Konfokal-Mikroskope (derzeit nur ein Stutzen für beide Mikroskope) Leitz Fluovert Wild M400 Photomakroskop Erforderliche Adapter-Zusammenstellung zur größtmöglichen Übereinstimmung des Optocam- Bildfeldes mit dem Okular-Bildfeld: 4. Phototubusadapter 23mm/38mm 5. Phototubus des Mikroskops Alternative Adapter-Zusammenstellung (für höhere Vergrößerung im Optocam-Bildfeld gegenüber dem Okular-Bildfeld): 3. Adapter C-mount/Phototubus 38mm(mit Optik: Vergrößerung 0,65x) 4. Phototubus des Mikroskops Alternative Adapter-Zusammenstellung (für größtmögliche Vergrößerung im Optocam-Bildfeld gegenüber dem Okular-Bildfeld): 3. Adapter C-mount /Phototubus 38mm(ohne Optik: Vergrößerung 1x) 4. Phototubus des Mikroskops

3 Installation der Optocam am Reichert Zetopan mit Phototubus (23mm): Erforderliche Adapter-Zusammenstellung: 4. Phototubus des Mikroskops Installation der Optocam an Mikroskopen ohne Phototubus (Okulardurchmesser 23mm) Erforderliche Adapter-Zusammenstellung: 4. Okulartubus des Mikroskops Installation der Optocam an Mikroskopen ohne Phototubus (Okulardurchmesser 30mm) Erforderliche Zusammenstellung: 4. Okularadapter 23mm/30mm 5. Okulartubus des Mikroskops Allgemeine Verwendung der Optocam mit der Software OptoCapture: Zur Installation der Kameratreiber und der Software bitte den entsprechenden Abschnitt weiter unten beachten. Bei jedem Start von OptoCapture lohnt es sich die wichtigsten Grundeinstellungen zu überprüfen. Bitte den entsprechenden Abschnitt weiter unten beachten. USB-Kabel einstecken (nicht jeder USB-Port ist dafür geeignet, da die Optocam über USB mit Strom versorgt werden muss) Programm OptoCapture 2.2 starten (in Deutsch oder Englisch) RGB32-Auflösung festlegen (bis zu RGB x1944 = 5Megapixel). Je geringer die Auflösung, desto mehr wird das Bild beschnitten.

4 Bildschirmdarstellung festlegen (mittels + oder Button/Lupe), z.b. 30% Binning festlegen: Beim Binning werden 4 zusammenhängende Pixel (2x2) zu 1 Pixel verarbeitet. Das führt zu besserer Lichtausnutzung und schnelleren Bildfolgen, jedoch wird damit auch die Auflösung herabgesetzt. Die Vergrößerung bleibt dabei gleich. > maximale Auflösung bei deaktiviertem Binning > 2592x1944 > maximale Auflösung bei 2x Binning > 1296x772 > maximale Auflösung bei 4x Binning > 648x484 Festlegen des Speicherortes für Bilder: Menü/Aufnahme/Bildfolge-Einstellungen > Zielordner wählen (oder Zahnrad-Button drücken); alternativ kann für jedes Bild durch Drücken des Disketten-Buttons ein Name und ein Speicherort angegeben werden Bildaufnahme erfolgt durch Drücken der Space-Taste Helligkeit mittels der Regler Belichtung einstellen. Empfehlenswert sind Werte bis zu maximal 1 Sekunde. Bitte hierzu den Abschnitt Grundsätzliches zur Belichtungssteuerung beachten. Verstärkung sollte minimal genutzt werden (z.b. +4), da sonst das Bildrauschen stark zunimmt. Es sollte kein Haken bei Auto-Verstärkung gesetzt sein. Zur Hilfe kann man sich das Histogramm zum Bild anzeigen lassen: Menü/Ansicht/Histogramm Weißabgleich einstellen mittels Weißabgleichsregler oder Auto-Funktion Für Videoaufnahme gibt es in unserem Labor bessere Alternativen, z.b. die Nikon 1 J1. Ist es dennoch notwendig, mit der Optocam Aufnahmen zu machen, so sind folgende Punkte zu beachten: FPS festlegen (frames per second = Bilder pro Sekunde) Je höher die Auflösung, desto geringere Bildfolgen sind möglich. Je geringer die Auflösung, desto schnellere Bildfolgen, jedoch wird das Bild dabei auch beschnitten. 2500x1900 > max. 6 fps 1920x1080 > max. 13 fps 1280x720 > max. 25fps (mit Binning 1 und 2) Videoformat: AVI Codec: Empfehlenswert ist RGB24. Er speichert unkomprimiert und bietet daher sehr gute Qualität. Die Videos haben dadurch aber eine sehr große Dateigröße. (Falls entgegen der Empfehlung ein MPEG-Codec verwendet wird, so ist zu beachten: Nur jedes x-te Bild wird in der Vorschau dargestellt, tatsächlich wird aber alles aufgenommen.) Videodatei : Speicherort für Videos festlegen

5 Grundsätzliches zur Belichtungssteuerung: Es gibt verschiedene Möglichkeiten, die Helligkeit des Bildes einzustellen. Ändert man die Helligkeit der Mikroskoplampe, so geht dies einher mit einer Veränderung der Farbtemperatur. Das bedeutet, dass in diesem Fall ein neuer Weißabgleich erforderlich ist (zur Vorgangsweise siehe unten). Die Helligkeit kann auch durch Veränderung der Belichtungszeit oder durch Verwendung eines Neutraldichtefilters (Graufilter) angepasst werden. In diesen Fällen bleibt die Farbtemperatur gleich, deshalb ist auch kein neuer Weißabgleich erforderlich. Installation von OptoCapture 1. Treiber installieren (32bit oder 64bit) 2. Kamera anstecken an Strom-USB-Schnittstelle (eventuell automatische XP-Installation abbrechen) 3. Weiter > Installation fortsetzen > Fertigstellen 4. Sprache wählen: Deutsch oder Englisch (im Bedarfsfall 2x am selben PC in beiden Sprachen installieren) Wichtige Einstellungen beim ersten Start von OptoCapture Menü/Ansicht/Symbolleistenmanager: Haken setzen bei Geräte Videoaufnahme Bildfolge Belichtung Weißabgleich In der Symbolleiste Bildfolge keinen Haken setzen bei: Bild anzeigen! > OptoCapture zeigt so unmittelbar nach der Aufnahme wieder das Live-Bild an. Andernfalls wird das eben aufgenommene Bild angezeigt. Die Automatik für Bildoptimierung ist justierbar: Menü/Gerät/Eigenschaften /Auto-Referenzparameter: Regler heller oder dunkler stellen Menü/Gerät/Einstellungen / Bildaufnahmegerät > Eigenschaften: Farbaufbesserung aktivieren Troubleshooting Beim Starten von OptoCapture wird keine Kamera gefunden > Treiber darüberinstallieren (32 oder 64 bit)

6 Die Kamera befindet sich im Live-Mode, liefert aber keine Bilder > PC ungeeignet oder derzeit verwendeter USB-Port ungeeignet (USB1 oder zu wenig Strom über den USB-Port) Es ist nicht möglich höhere Auflösungen einzustellen > Binning auf 1 stellen Download unter cius.univie.ac.at/ci_main/ci_downloads Verwendung der Optocam an den Mikroskopen von CIUS Optocam-Software (32bit, 64bit), Treiber (32bit, 64bit)

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