Kursprogramm. 1. Einführung in die Hellfeldmikroskopie (Bedienungsanleitung des Praktikumsmikroskops)
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- Daniela Albrecht
- vor 6 Jahren
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1 Kursprogramm 1. Einführung in die Hellfeldmikroskopie (Bedienungsanleitung des Praktikumsmikroskops) 2. Einführung in die wissenschaftliche Zeichentechnik 3. Präparat A: Plasmolyse der roten Speisezwiebel (Allium cepa L.) 4. Präparat B: Histochemie von Kartoffelstärke (Solanum tuberosuml.) 5. Präparat C: Pilzhyphen(Penicillium camenbertii Thom.)
2 Betreuer/innen des Praktikums: Dr. Beatrix Zaban Sascha Wetters Lukas Geschwender
3 Bitte JETZT Mikroskop aus dem Schrank holen
4 Aufbau Mikroskop
5 1. Bedienungsanleitung - Lichtmikroskop Olympus CH20 Weißer Punkt auf dem Stellrings des linken Okulars (Dioptrienausgleichsring) auf Ziffer 0 der Skala einstellen Lichteinstellung Nr. 2-3 Objekttisch mit dem Grobtrieb nach unten fahren
6 1. Bedienungsanleitung - Lichtmikroskop Olympus CH20 Objektiv mit der 10x Vergrößerung auswählen (zum Objektivwechsel immer am Revolverring drehen) Kondensor mittels Kondensortriebs ganz nach oben bewegen Kondensorblende (= Aperturblende) ca. 2/3 schließen (Kontrasterhöhung, weniger Licht)
7 1. Bedienungsanleitung - Lichtmikroskop Olympus CH20 Einstellung der Köhlerschen Beleuchtung( Köhlern ): Rechtes Okular vom Mikroskop vorsichtig abheben und mit der Öffnung nach unten auf den Tisch stellen Kondensorblende ganz öffnen (viel Licht) Blick in dentubus runder Lichtkreis Schließen der Kondensorblende bis anstelle des Lichtkreises ein 6- Eck erscheint Präparat ist nicht überstrahlt, kein Streulicht Kondensor mittels Kondensortriebs so weit nach unten bewegen bis das6-eckganzscharf zu sehen ist Rechtes Okular wieder einsetzen
8 1. Bedienungsanleitung - Lichtmikroskop Olympus CH20 Einstellung der Binokulare Beide Okulare bis zum Anschlag zusammenschieben, dann beide gleichzeitig auseinanderzeihen und beim Auseinanderziehen mit auf Fernsicht gestellten Augen hineinschauen Augen zu nah an den Okularen schwarzer Kreis wird sichtbar Augen zu weit en8ernt von den Okularen 1-2 kleine Lichtkreise erscheinen Augenabstand so wählen bis ein großer Lichtkreis sichtbar wird (Abstand ca. 2 cm Auge-Okularlinse)
9 1. Bedienungsanleitung - Lichtmikroskop Olympus CH20 Bedeutung der Zahlenangaben auf den Okularen 10x = Vergrößerung des Okulars 18 = Feldzahl (Durchmesser der Sehfeldblende in mm) Die Feldzahl dient zur Berechnung des Durchmessers des beobachteten Objektausschnitts (Dingfelddurchmesser): Dingfelddurchmesser = Tubusfaktor) Feldzahl / (Vergrößerung des Objektivs x Für das 40x Objektiv ergibt sich 18 mm / 40 x 1 und damit 0,45 mm (450 μm), d.h. das gesamte Sehfeld misst in Wirklichkeit 450 μm. Für das 10x Objektiv 1800 μm (1,8 mm) und für das 4x Objektiv 4500 μm (4,5 mm)
10 1. Bedienungsanleitung - Lichtmikroskop Olympus CH20 Bedeutung der Zahlenangaben auf den Okularen 40x = Vergrößerung des Objektives 0,65 = numerische Apertur (n sin α) Die numerische Apertur A ist eine Kenngröße für das Auflösungsvermögen α bezeichnet den Winkel zwischen der optischen Achse und dem Randstrahl des Lichtkegels, der von einem Punkt des mikroskopisches Objekts in das Objektiv einzutreten vermag. n = Brechzahl des Mediums zwischen Präparat und Objektiv (Brechungsindex von Luft = 1) 160 = Tubuslänge in mm 0,17 = Schichtdicke des Deckglases in mm (zur Kompensation der Deckglasabberation Linsenfehler
11 1. Bedienungsanleitung - Lichtmikroskop Olympus CH20 Grundregeln: Scharfstellen: immer vom Präparat weg nach oben, nie umgekehrt (Bruchgefahr!) Sauberkeit: mit einem sauberen fuselfreien Papiertuch Okular- und Objektivfrontlinsen ab und zu reinigen. Nicht mit den Fingern auf die Frontlinse der Objektive fassen. Objektivwechsel: an der Rändelschraube drehen, nicht am Objektiv festhalten (wenn es sich verzieht, stimmt die Optik nicht mehr).
12 Sachgerechter Umgang mit den Mikroskopen Regeln von Dr. Seyfried Die Mikroskope haben einen festen Platz in den Schränken achten Sie auf die Nummerierung Nehmen Sie an jedem Kurstag das gleiche Mikroskop (Eintrag in Mikroskopliste) Mikroskope nur am Stativ tragen und von unten unterstützen alle schwarzen Teile sind als Tragegriffe tabu! Am Ende des Kurses: Objektivrevolver auf mittlere Vergrößerung stellen (10x-Objektiv) schon zum Entfernen des Präparats Präparat auch wirklich entfernen Gegebenenfalls Kreuztisch reinigen (sollte aber gar nicht nötig sein) Kabel ordentlichum den Mikroskopfusswickeln. Das Kabel hat im Bereich der Objektive und des Okulartubus nichts verloren! Staubschutzhülle überstülpen Mikroskop an den richtigen Platz zurückstellen mit dem Stativ zur Schranktür Gerade Mikroskopnummernstehen immer in zweiter Reihe im Schrank, gerade Mikroskopnummern in erster Reihe Nichtbeachten der Regeln kann ernste Folgen haben, bis hin zu Schadenersatzforderungen
13 NAME IN DIE MIKROSKOPLISTE EINTRAGEN! MIKROSKOP AUF MÄNGEL ÜBERPRÜFEN! FESTGESTELLTE MÄNGEL IN DIE MÄNGELLISTE EINTRAGEN!
14 In die Anwesenheitsliste und in den Sitzplan Namen eintragen AUFPASSEN ES GEHT GLEICH ANS EINGEMACHTE
15 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen Eine wissenschaftliche Zeichnung ohne Beschriftung ist wertlos! Die Beschriftung ist die wissenschaftliche Interpretation des Beobachteten! Wichtige Details werden durch beschriftete Pfeile hervorgehoben und eingeordnet Zur Beschriftung gehört auch ein Titel mit dem Namen des Objekts (Was für eine Art, welche Familie, welche Art von Gewebe/Zellen, welche Art von Präparation) und Angaben zur Größe (Vergrößerung oder Maßstabsbalken).
16 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen Präparatbezeichnung (Tafel oder Skript), Schnittebene, Präpariertechnik, Vergrößerung, Artnameund Familie Vorname, Nachname Datum HIER: Bleistiftzeichnung mit Beschriftung. Klare, nicht gestrichelte Linien verwenden. Kein Kugelschreiber oder Füller! Bitte ausreichend groß zeichnen! Wichtige Details werden durch beschriftete Pfeile hervorgehoben und eingeordnet. Platz für Zusatzinfos von Tafel, Folie, Anmerkungen oder nützliche Tipps des Kursleiters
17 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen - Layout Präparat A: Epidermis der Küchenzwiebel Name, Vorname Epidermiszelle der konvexen Außenseite eines fleischigen Schuppenblatts der Datum Küchenzwiebel (Allium cepa L. Amaryllidaceae), Frischpräparat, Flächenschnitt, Detailzeichnung einer Zelle vor und nach Plasmolyse, Einstrich-Zeichnung, Wasserpräparat, Plasmolysereagenz 1 M NaCl-Lösung, Vergrößerung 400x Klasse: Angiospermen (Bedecktsamer) Unterklasse: Monokotyledonen (Einkeimblättrige Pflanzen) Familie: Amaryllidaceae (Amaryllisgewächse) Zelle vor der Plasmolyse Zelle nach der Plasmolyse
18 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen Was bedeutet das L.??? Allium cepa L. Abk. : L. Linne`, Carl: schwedischer Naturforscher ( ) der Erstbeschreiber dieser Art Jeder Artnameeiner Pflanze besteht aus zwei Wörtern : 1. Gattungsnamen (an erster Stelle stehend) 2. Artbezeichnung (an zweiter Stelle stehend, kleingeschrieben, kursiv)
19 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen- Beschriftung Präparat A: Epidermis der Küchenzwiebel Epidermiszelle der konvexen Außenseite eines fleischigen Schuppenblatts der roten Küchenzwiebel (Allium cepa L. Amaryllidaceae), Frischpräparat, Flächenschnitt, Detailzeichnung einer Zelle vor und nach Plasmolyse, Einstrich-Zeichnung, Wasserpräparat, Plasmolysereagenz 1 M NaCl-Lösung, Vergrößerung 400x Klasse: Angiospermen (Bedecktsamer) Unterklasse: Monokotyledonen (Einkeimblättrige Pflanzen) Familie: Amaryllidaceae (Amaryllisgewächse) Epidermiszelle vor der Plasmolyse
20 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen Info zu Schnitt- Techniken
21 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen - Anfertigen von Präparaten Vorgehen Präparation Zwiebelzellenepidermis: Man bereite einen Objektträger mit einem Tropfen Wasser vor Nehme ein fleischiges Schuppenblatt der roten Küchenzwiebel mit der konvexen (nach außen gewölbten), rot gefärbten Außenseite nach oben und fertige mit einer Rasierklinge einen dünnen Flächenschnitt an, indem man den Schnitt parallel zur Oberfläche durchführe Mit einer feinen Pinzette wird die Epidermis mit der rot gefärbten Seite nach oben in einen Tropfen Wasser gelegt und vorsichtig ein Deckglas aufgelegt Achtung: Bei lufterfüllten Bereichen: seitlich neben dem Deckgläschen einen Tropfen Wasser nachgeben ohne Abnehmen des Deckgläschens, aber am Arbeitstisch und nicht dem Mikroskoptisch Bei Überschwemmung : überschüssiges Wasser mit einem kleinen Stückchen Fließtuch seitlich des Deckgläschen absaugendabei darauf achten, das sich keine lufterfüllten Bereiche bilden Falls Wassertropfen auf der Oberseite des Deckgläschens trübes mikroskopisches Bild
22 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen - Anfertigen von Präparaten Wichtig: Zuerst mikroskopiert man bei kleiner Vergrößerung (40x, d. h. man schaut durch das 4x Objektiv) Zellen ins Zentrum des Sehfelds bringen Danachdiese bei 100x (Blick durch das 10x Objektiv) und 400x (Blick durch das 40x Objektiv) Vergrößerung betrachten.
23 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? 100x Epidermiszellen
24 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? Falls Ihr Schnitt zu dick ist 100x Hypodermiszellen (Zellschicht unter der Epidermis) Kein Problem Bildebene ändern
25 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? 100x Epidermis und Hypodermis
26 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? 100x Epidermis
27 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? 400x Epidermis
28 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? 400x Epidermis
29 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? 400x Epidermis
30 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? 400x Epidermis
31 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel?
32 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? Zunächst sieht man vor allem die rot gefärbte Vakuole (der rote Farbstoff gehört zu den Anthocyanen und ist unter anderem für die Rotfärbung vieler Blüten und Früchte verantwortlich) und die Zellwand. Das Cytoplasma, die Organellen (Zellkern, Mitochondrien usw.), die Plasmamembran und dietüpfel sind nicht so gut zu sehen. Zwischen Plasmamembran und Tonoplast kann man den zumeist am Rand liegenden Zellkern und den Cytoplasmasaum sehen, manchmal auch transvacuolare Plasmastränge. Der Großteil des Zellinneren ist jedoch Vakuole. Mit etwas Glück sieht man noch die Plasmaströmung im randständigen Cytoplasmasaum und den Plasmasträngen. Hier sind mit etwas Glück noch kleine Organellen zu erkennen, beispielsweise Mitochondrien (dunkel, wurstförmig), Oleosomen (dunkel, rund) und Leukoplasten (hell, eher trapezförmig). Die rot gekennzeichneten Begriffe sollen in Ihrer Zeichnung zur Beschriftung verwendet werden!
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34 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen Einstrich-Zeichnung Zellwände zwischen zwei Zellen werden nur mit einem Strich dargestellt Nur zum Skizzieren stricheln, für die Endzeichnung die Line ganz durchzeichnen!
35 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen Wichtig: Beim Zeichnen einer Zelle immer ein Stückchen Zellwand der angrenzenden Zelle einzeichnen Konvention in der Botanik Angrenzende Zelle
36 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen B. Hohmann, Mikroskopische Untersuchung pflanzlicher Lebensmittel, Behr s Verlag
37 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen
38 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen
39 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen Einschub Vorlesung Wissenschaftliches Zeichnen Beim Zeichnen unterscheidet man Gestalt und Hintergrund (Wichtiges und Unwichtiges) Unwichtiges nicht zeichnen- im Zweifelsfall Betreuerinnen befragen Eine wissenschaftliche Zeichnung ist immer auch Deutung! Wichtige Details werden durch beschriftete Pfeile hervorgehoben und eingeordnet
40 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen Einschub Vorlesung Wissenschaftliches Zeichnen
41 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen Einschub Vorlesung Wissenschaftliches Zeichnen
42 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen Einschub Vorlesung Zell-Zell-Kommunikation Pflanzenzellen sind durch Plasmodesmen miteinander verbunden. Die Zellwand hat an diesen Stellen Löcher, die lichtmikroskopisch als Tüpfel sichtbar werden Achtung: Die beiden Nachbarzellen sind an dieser Stelle nicht durch eine Membran getrennt
43 2. Einführung- wissenschaftlichen Zeichnungen Einschub Vorlesung Vakuole Das Innere von Pflanzenzellen ist fast immer durch eine große Vakuole gefüllt Das Cytoplasma, der Zellkern und die ganzen Zellorganellen werden in einen oft sehr schmalen Saum am Rand der Zelle abgedrängt Die Vakuolenmembran wird als Tonoplast bezeichnet
44 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse Aufpassen! merken Sie sich die Position der Zelle, die Sie gezeichnet haben Dieselbe Zelle nach der Plasmolyse zeichnen! Durch das 10x Objektiv schauen am Rand des Deckglases nach und nach ca.10 Tropfen 1 M NaCl-Lösung ansetzen und an der gegenüberliegenden Seite die Flüssigkeit absaugen Aufpassen, dass sich keine lufterfüllten Bereiche bilden Nun beobachten und dieselbe Zelle nach einigen Minuten noch einmal zeichnen
45 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse 100x
46 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse 100x
47 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse 400x
48 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse 400x
49 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse 400x
50 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse 400x
51 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? - Plasmolyse 400x
52 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse 400x
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54 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse Wenn die 1 M NaCl- Lösung durchgezogen wird, zieht sich das Zellinnere zusammen und die Plasmamembran löst sich von der Zellwand ab Dieser Vorgang heißt Plasmolyse und beruht letztendlich darauf, dass die Zelle Wasser an die salzige Umgebungslösung abgibt und dadurch kleiner wird An manchen Stellen kann man nun fadenartige Strukturen erkennen, wo der Protoplast (Zelle ohne Zellwand) offenbar an der Zellwand festhaftet Häufig haftet hier auch die Nachbarzelle auf der anderen Seite der Zellwand an sogenannte Hecht schen Fäden: zeigen die Plasmodesmen an Verbindungsstellen, die für die Kommunikation der Zellen untereinander sehr wichtig sind
55 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse Sehen Sie in Ihrem lichtmikroskopischen Bild einige Strukturen (z.b. Zellkern, Zellorganellen oder Hecht sche Fäden) nicht, so schreiben Sie dies bitte neben Ihre Zeichnung mit einer Erklärung Warum Sie es nicht sehen können bei Fragen Rücksprache mit den Tutorinnen/ Tutoren??? Beschriften Sie Ihre Zeichnung entsprechend der bereits gezeichneten Zelle vor der Plasmolyse, zusätzlich sollte in Ihrer Zeichnung noch folgendes gekennzeichnet werden
56 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse Vorgehen: Deplasmolyse Wird das Salz entfernt (d.h. man gibt tropfenweise dest. Wasser seitlich an den Rand des Deckglases und saugt an der gegenüberliegenden Seite mit einem Streifchen Filterpapier die Flüssigkeit auf) nimmt die Vakuole osmotisch Wasser auf und dehnt sie sich wieder aus. Die Zellwand verhindert das Platzen. Der osmotisch erzeugte Druck wirkt als sogenannter Turgordruck gegen die Zellwand und wird von dieser aufgefangen. Diese Kraft kann von Pflanzen genutzt werden, um zu wachsen.
57 3. Was ist zu sehen bei der Zwiebel? -Plasmolyse Einschub Vorlesung: Plasmolyse im Alltag Beim Konservieren von Nahrung nutzt man oft Entwässerung durch (Hypertonie), durch hohe Zuckerkonzentration (Konfitüren, kandierte Früchte) oder durch hohe Salzkonzentrationen (Schinken, Salzhering, Matjesfilet) Platzen reifer Kirschen oder Wurzelrüben (z.b. bei Karotten): hier führt ein zu hoher Turgor und der teilweise Abbau der Zellwand infolge der Reifung manchmal zum Platzen der Zelle Welken durch Wassermangel: Die Turgeszenz geht verloren, die Zellwände werden schlaff". Solange die Plasmamembran nicht beschädigt ist, erholt sich die Zelle wieder nach Zugabe von Wasser (Deplasmolyse)
58 zweites Präparat: Histochemie von Kartoffelstärke Handelsprodukt Kartoffelstärke
59 4. Was ist zu sehen bei der Kartoffelstärke? Handelsprodukt Kartoffelstärke Verwendung: Dickungsmittel für Soßen,Süßspeisen; Zutat für feine Backwaren
60 4. Was ist zu sehen bei der Kartoffelstärke? Präparat : Histochemie von Kartoffelstärke Stärkepulver gewonnen aus der Sprossknolle der Kartoffel (Solanum tuberosum L. Solanaceae), Trockenpräparat a ) Wasserpräparat, Detailzeichnung eines intakten Stärkekorns, Vergrößerung 400x b) Nach der Zeichnung des Stärkekorns: Zugabe von Lugol scher Lösung (KJ/J₂-Lösung) zu dem Präparat a), sofort die Stärkekörner beobachten bei 100x bzw. 400x Vergrößerung und die Veränderung beschreiben oder ein Stärkekorn farblich darstellen Klasse: Angiospermen (Bedecktsamer) Unterklasse: Dikotyledonen (Zweikeimblättrige Pflanzen) Familie: Solanaceae (Nachtschattengewächse)
61 4. Was ist zu sehen bei der Kartoffelstärke? Präparation der Kartoffelstärke Auf einen Objektträger einen Tropfen Wasser geben Mit der Pinzette oder Präpariernadel eine kleine Prise Kartoffelstärke in diesem suspendieren Deckgläschen auflegen ; am besten schräg aufsetzen und langsam absenken Bei lufterfüllten Bereichen: seitlich neben dem Deckgläschen einen Tropfen Wasser nachgeben ohne Abnehmen des Deckgläschens Bei Überschwemmung : Überschüssiges Wasser mit einem kleinen Stückchen Fließtuch seitlich neben dem Deckgläschen absaugen- achten Sie dabei darauf, das sich keine lufterfüllten Bereiche bilden
62 4. Was ist zu sehen bei der Kartoffelstärke? Bei geschlossener Kondensorblende kann man die Schichtungslinien und das Bildungszentrum der Stärke erkennen Dieses Aussehen der Stärkekörner ist charakteristisch für die Kartoffel-Sprossknolle (Solanum tuberosum)und dient daher als Kriterium für ihre Authentizität
63 4. Was ist zu sehen bei der Kartoffelstärke? Vorgehen: Histochemie Nach der Zeichnung des Stärkekorns im Hellfeld wird ein Tropfen Lugol sche Lösung (Jod- Jodkalium-Lösung) seitlich neben dem Deckglas aufgesetzt und mithilfe eines Streifens Filterpapier durch das Präparat gezogen. Einschub Vorlesung: Was ist Histochemie? Chemie unter dem Mikroskop. Spezifische Färbemethoden: nicht nur Information über das Wo, sondern auch über das Was. Farbstoff durch bestimmte Molekülgruppen gebunden, diese dadurch sichtbar gemacht. Die klassische Histochemie beruht also auf einer spezifischen Erhöhung der Absorption für das Zielmolekül. Daneben gibt es mikroskopische Methoden, die andere spezifische Moleküleigenschaften in sichtbares Licht übersetzen.
64 4. Was ist zu sehen bei der Kartoffelstärke? Demonstration Im Dunkelfeld leuchten die Stärkekörner oft prächtig auf, im polarisierten Licht entstehen aufgrund der Schichtung (Stärke ist ein langgestreckter Dipol) charakteristische Kreuzmuster (Malteserkreuz). Bei der Diagnostik von Handelsprodukten hilfreich Stärkenachweis
65 Letztes Präparat: Schimmel (Pilzhyphen)
66 5. Was ist zu sehen bei Pilzhyphen(Penicillium camenbertii)? Präparat C: Pilzhyphen Weißschimmel (Penicillium camenberti - Eurotiaceae), Frischpräparat, Detailzeichnung von ein paar Hyphenabschnitten und 2-3 Sporen (keine Fortpflanzungsstrukturen), Einstrich-Zeichnung, Wasserpräparat, Vergrößerung 400x Familie: Eurotiaceae (Eurotiumpilze) Durchführung: 1.) Etwas Schimmelpilz mit der Pinzette und Präpariernadel vom der weißen Käseoberfläche abnehmen und in einen Tropfen Wasser überführen Achtung: nicht in die Käsemasse stechen 2.) Das Deckglas auflegen 3.) Nun mikroskopiert man zuerst bei kleiner Vergrößerung (40x) 4.) Danach bringt man das Mycel ins Zentrum des Sehfeldes 5.) Jetzt werden die Hyphen und Sporen bei 100x und 400x Vergrößerung betrachtet -.-
67 5. Was ist zu sehen bei Pilzhyphen(Penicillium camenbertii)? Schimmel ist eine Bezeichnung für oberflächlich wachsende Pilzmycelien, zumeist der Gattungen Aspergillus oder Penicillium. Häufig bilden Schimmelpilze Giftstoffe (sogenannte Mycotoxine), beim Camembert ist das natürlich nicht so Das Mycel von Penicillium camenberti besteht aus septierten fädigen (schlauchförmigen) Zellen, den Hyphen Die Fortpflanzungsstrukturen sind charakteristisch büschelig gebaut und bestehen aus perlschnurartig abgegliederten Einzelzellen (Konidien oder Sporen), die der Fortpflanzung dienen Wenn Speiseschimmel mit dem bloßen Auge sichtbar wird, ist es zumeist schon zu spät, die Entwicklung ist abgeschlossen und das Lebensmittel schon voll mit Mycotoxinen. Die bläuliche Schimmelfarbe kommt von den gefärbten Sporen. Lange davor kann man in der Probe mikroskopisch die fädigen Hyphen erkennen.
68 5. Was ist zu sehen bei Pilzhyphen(Penicillium camenbertii)?
69 5. Was ist zu sehen bei Pilzhyphen(Penicillium camenbertii)? Definitionen Schimmel: Jedes oberflächliche Wachstum eines Pilzes Mycel: Gesamtheit der Hyphen eines Pilzes (Hyphengeflecht) Hyphe: Einzelzellfaden (schlauchförmig), als Grundelement der Pilze, aus dem sämtliche Hyphengeflechte (Mycelien) aufgebaut sind Spore: Ungeschlechtliche Fortpflanzungszelle Konidie: Spore, die am Mycel der Pilze oft von einem besonderen Träger exogen abgeschnürt wird
70 5. Was ist zu sehen bei Pilzhyphen(Penicillium camenbertii)? Einschub Vorlesung: Pilze und Diagnostik Pilze: Aufbau aus Fäden (Hyphen) schlauchförmige Zellen Es gibt kein geschlossenes Gewebe, selbst im Fruchtkörper nicht, die Hyphen sind einfach verflochten ( Mycel), Plasmodesmen fehlen Pilze enthalten keine Plastiden, leben also von anderen Organismen (Heterotrophie) Die Zellwand besteht oft aus Chitin (Stickstoffhaltige Zuckerketten), Speicherstoff ist oft Glycogen (wie bei Tieren)
71 5.Was ist zu sehen bei Pilzhyphen(Penicillium camenbertii)? Einschub Vorlesung: Pilze und Diagnostik Sind oft in Lebensmitteln enthalten positiv oder negativ: Positiv: Pilze erzeugen oft Geschmacksstoffe, die für das Lebensmittel wichtig sind (z.b. Blauschimmelkäse). Negativ: Pilze erzeugen oft Giftstoffe, die für den Menschen schädlich sind (z.b. Brotschimmel) Wenn der Schimmel mit dem bloßen Auge sichtbar wird, ist die Entwicklung schon abgeschlossen. Die Farbe kommt von den gefärbten Sporen. Man kann jedoch schon lange davor in der Probe die fädigen Hyphen erkennen
72 Fast ist es geschafft!!! Arbeitstisch und Präparierbesteck reinigen Abfall in die Mülleimer bringen Deckgläschen in den Glasabfall werfen Objektträger abwaschen und abtrocknen und am Arbeitsplatz liegen lassen Mikroskope in den Schrank stellen Zeichnungen den Tutorinnen und dem Tutor zur Korrektur abgeben Wenn Zeichnungen nicht abgegeben werden, können leider keine Klausurpunkte vergeben werden
73 Sachgerechter Umgang mit den Mikroskopen Regeln von Dr. Seyfried Die Mikroskope haben einen festen Platz in den Schränken achten Sie auf die Nummerierung Nehmen Sie an jedem Kurstag das gleiche Mikroskop (Eintrag in Mikroskopliste) Mikroskope nur am Stativ tragen und von unten unterstützen alle schwarzen Teile sind als Tragegriffe tabu! Am Ende des Kurses: Objektivrevolver auf mittlere Vergrößerung stellen (10x-Objektiv) schon zum Entfernen des Präparats Präparat auch wirklich entfernen Gegebenenfalls Kreuztisch reinigen (sollte aber gar nicht nötig sein) Kabel ordentlichum den Mikroskopfusswickeln. Das Kabel hat im Bereich der Objektive und des Okulartubus nichts verloren! Staubschutzhülle überstülpen Mikroskop an den richtigen Platz zurückstellen mit dem Stativ zur Schranktür Gerade Mikroskopnummernstehen immer in zweiter Reihe im Schrank, gerade Mikroskopnummern in erster Reihe Nichtbeachten der Regeln kann ernste Folgen haben, bis hin zu Schadenersatzforderungen
74 Bitte: Den Praktikumsraum leise verlassen Lernzentrum
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76 Ihre Zeichnung sollte mit folgenden Begriffen beschriftet werden: Zellwand, Cytoplasma mit Zellkomponenten, Querwand (Septum), Sporen, Plasmamembran, Bruchstück einer Hyphe
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