gentechnischen Veränderungen Dr. Lothar Kruse

Transkript

1 Nachweis von Spezies es und gentechnischen Veränderungen Dr. Lothar Kruse

2 Impetus GmbH & Co. Bioscience KG Akkreditiert nach DIN EN ISO/IEC 17025: Jahre Erfahrung mit DNA-Analytik 19 Personen Spezialisiert auf DNA-Analytik und Mikrobiologie Seit 2003 im BioNord-Biotechnologie-Zentrum in Bremerhaven

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5 Anwendungsbeispiele Fleisch Wurst Konservenfleisch Fisch Fischkonserven Getreide Saatgut Geschlechtsbestimmung Allergene Futtermittel Knochenmehl Blutmehl Tierkörpermehl Tiernahrung Identifizierung von gentechnischen Veränderungen, Spezies und Allergenen Lecithine Öle Fette Margarine Stärken Brühwürfel Schmalz Gelatine Ketchup Vollmilch H-Milch Käse Pflanzliche u. tierische Naturfasern Schokolade Tomatenmark Cornflakes Honig Fruchtsaft Marzipan Persipan

6 Arbeitsschritte Extraktion der DNA PCR Amplifikation Interpretation der Daten 6

7 Tierische Zelle Pflanzliche Zelle

8 Nukleäre DNA

9 PCR-Zyklus 72 C Start: Template-DNA Elongation C Reaktion läuft im Thermocycler 1 Denaturierung 95 C Annealing 2

10 Screening- /Konstrukt Konstrukt- /Event Eventspezifischer Nachweis Screening CaMV 35S-Promotor nos-terminator Wirts-DNA CaMV 35S-Promotor CTP4 CP4 EPSPS-Gen nos-terminator Wirts-DNA RR Soja-35S/CTP4 RR Soja Konstruktspezifischer Nachweis Eventspezifischer Nachweis

11 PCR-Sicherheitsvorkehrungen Strikte Trennung der Bereiche DNA-Extraktion, Set-Up und Detektion Geeignetes Belüftungs-/Filtersystem Aliquotierte t Lösungen, Einmalhandschuhe, h h Filterspitzen, it Kittel etc. Intensive regelmäßige Reinigung Untersuchungen im Doppelansatz Positiv-Kontrollen Negativ-Kontrollen Inhibitions-Kontrollen t Spezies-Kontrollen Plus/Minus-Ergebnisse sse wiederholen e

12 Relevante Verordnungen für gv Lebens- und Futtermittel Laut Verordnungen 1829/2003/EG & 1830/2003/EG Nur EU-zugelassene gv Pflanzen sind verkehrsfähig - < 0,9% pro Zutat: Keine Kennzeichnung, wenn technisch unvermeidlich oder zufällig - > 0,9% pro Zutat: Kennzeichnung obligatorisch Nicht EU-zugelassene gv Pflanzen sind nicht verkehrsfähig - Lebensmittel: Nulltoleranz z.b. LL601-Reis, FP967 Leinsaat - Futtermittel: 0,1% erlaubt, wenn in der EU Zulassungsantrag gestellt wurde, irgendwo bereits eine Zulassung vorliegt und Nachweissysteme verfügbar sind - Keine Kennzeichnung tierischer Produkte (Fleisch, Eier, Milch etc.), auch wenn Futtermittel gentechnisch verändert waren - Pollen=Zutat ( ), davor und danach natürlicher Honigbestandteil - Keine Kennzeichnung von Produkten, die mit Hilfe von gv Mikroorganismen hergestellt wurden

13 Kennzeichnungsregeln für gv Lebens- und Futtermittel Laut Verordnungen 1829/2003/EG & 1830/2003/EG Bei Produkten, in denen analytisch keine gentechnischen Veränderungen nachgewiesen werden können (Zucker, Öle, hochraffinierte Lecithine, spezielle Stärkeprodukte), muss der Nachweis in der Vorstufe bzw. im entsprechenden Ausgangsprodukt geführt und entsprechend dokumentiert t werden (Rückverfolgbarkeit lt. 1830/2003/EG) Technisch unvermeidbar oder zufällig*: gv Bestandteile zugelassener GVO unter 0,9% müssen nicht deklariert werden, wenn sie zufällig oder technisch nicht zu vermeiden sind. Bei der Anwendung dieser Begriffe reicht die alleinige Einhaltung analytischer Werte nicht aus, zusätzliche Maßnahmen sind nötig. *Waiblinger et. al. 2007, DLR 103 Heft 3 p.97 *Köster, Feed Magazine, 3/2007, p.30f

14 Screening-Matrix gv-soja GVO-Soja-Events, die weltweit kommerziell angebaut werden bzw. deren Einsatz geplant ist OECD UI Kurzbezeichnung EU-Zulassung p35s tnos CTP2-EPSPS synpat bar cry1a(b/c) SAMS-HRA MON-Ø4Ø32-6 RRS I Ja MON RRS II Ja ACS-GMØØ5-3 LL-Soja-A Ja ACS-GMØØ6-4 LL-Soja-A Ja DP-356Ø43-5 DP Ja MON-877Ø1-2 MON87701 Ja BPS-CV127-9 CV127 Ja DAS DAS44406 Nein DAS DAS68416 Nein DAS DAS81419 Nein DP-3Ø DP Ja MON MON87769 Ja MON-877Ø5-6 MON87705 Ja MON-877Ø8-9 MON87708 Ja MON MON87712 Nein MON MON87751 Nein MST-FGØ72-2 FG72 Nein SYN-ØØØH2-5 SYHTØH2 Nein enthalten = + ; nicht enthalten = - Stand

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