ENTWURF ÖNORM EN 15782
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- Marie Hoch
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1 ENTWURF ÖNORM EN Ausgabe: Futtermittel Bestimmung von Nicarbazin Hochleistungsflüssigchromatographisches Verfahren Animal feeding stuffs Determination of nicarbazin High-performance liquid chromatographic method Medieninhaber und Hersteller ON Österreichisches Normungsinstitut Austrian Standards Institute Heinestraße 38, 1020 Wien Copyright ON Alle Rechte vorbehalten! Nachdruck oder Vervielfältigung, Aufnahme auf oder in sonstige Medien oder Datenträger nur mit Zustimmung des ON gestattet! Verkauf von in- und ausländischen Normen und Regelwerken durch ON Österreichisches Normungsinstitut Austrian Standards Institute Heinestraße 38, 1020 Wien Internet: Fax: Tel.: Hinweis: Aufgrund von Stellungnahmen kann die endgültige Fassung dieser ÖNORM vom vorliegenden Entwurf abweichen. Stellungnahmen (schriftlich) bis an das ON. ICS Ident (IDT) mit pren 15782: zuständig ON-Komitee ON-K 205 Lebensmitteluntersuchungsverfahren
2 ENTWURF ÖNORM EN 15782:2008 Erläuterungen zum Entwurf Der vorliegende Entwurf einer Europäischen Norm EN wurde den CEN-Mitgliedern zur Abstimmung vorgelegt. Im Falle eines positiven Abstimmungsergebnisses im Sinne der CEN/CENELEC-Regeln wird dieser Entwurf zu einer EN führen. Wie alle Mitgliedsorganisationen des CEN ist das ON grundsätzlich verpflichtet, Europäische Normen in das nationale Normenwerk zu übernehmen und entgegenstehende Normen zurückzuziehen. Das ON legt hiermit diesen Entwurf eines europäischen Normungsdokumentes der Öffentlichkeit zur Information und Stellungnahme als ÖNORM-Entwurf vor. Stellungnahmen zu diesem Entwurf Hier einige praktische Hinweise, die Ihnen und dem zuständigen Komitee die Behandlung von Stellungnahmen und Änderungsvorschlägen erleichtern: Vorlage Gliederung Sprache Schrift/Formatierung Zusendung Verwenden Sie für Ihre Stellungnahmen/Änderungsvorschläge bitte das entsprechende Formular im Internet. Download unter Kommentare zu einzelnen Abschnitten oder Punkten des Entwurfs bitte in getrennten Zeilen anführen. Dies erleichtert die Zuordnung der eingelangten Stellungnahmen zu den einzelnen Abschnitten. Fachliche Stellungnahmen zu Europäischen Normen fassen Sie bitte möglichst in englischer Sprache ab. Englisch ist in den meisten europäischen Normungsgremien die gemeinsame Arbeitssprache. Redaktionelle bzw. sprachliche Änderungs-/Verbesserungsvorschläge zu deutschsprachigen Fassungen Europäischer Normen bitte (selbstverständlich) in deutscher Sprache. Verwenden Sie bitte die Schriftart Arial mit 9 pt Schriftgröße. Formate bitte nicht ändern. Die Stellungnahme senden Sie bitte per an den zuständigen Komitee- Manager (monika.hartl@on-norm.at) 2
3 EUROPÄISCHE NORM EUROPEAN STANDARD NORME EUROPÉENNE ENTWURF pren April 2008 ICS Deutsche Fassung Futtermittel - Bestimmung von Nicarbazin - Hochleistungsflüssigchromatographisches Verfahren Animal feeding stuffs - Determination of nicarbazin - Highperformance liquid chromatographic method Dieser Europäische Norm-Entwurf wird den CEN-Mitgliedern zur Umfrage vorgelegt. Er wurde vom Technischen Komitee CEN/TC 327 erstellt. Wenn aus diesem Norm-Entwurf eine Europäische Norm wird, sind die CEN-Mitglieder gehalten, die CEN/CENELEC-Geschäftsordnung zu erfüllen, in der die Bedingungen festgelegt sind, unter denen dieser Europäischen Norm ohne jede Änderung der Status einer nationalen Norm zu geben ist. Dieser Europäische Norm-Entwurf wurde vom CEN in drei offiziellen Fassungen (Deutsch, Englisch, Französisch) erstellt. Eine Fassung in einer anderen Sprache, die von einem CEN-Mitglied in eigener Verantwortung durch Übersetzung in seine Landessprache gemacht und dem Management-Zentrum des CEN mitgeteilt worden ist, hat den gleichen Status wie die offiziellen Fassungen. CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Bulgarien, Dänemark, Deutschland, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, den Niederlanden, Norwegen, Österreich, Polen, Portugal, Rumänien, Schweden, der Schweiz, der Slowakei, Slowenien, Spanien, der Tschechischen Republik, Ungarn, dem Vereinigten Königreich und Zypern. Die Empfänger dieses Norm-Entwurfs werden gebeten, mit ihren Kommentaren jegliche relevante Patentrechte, die sie kennen, mitzuteilen und unterstützende Dokumentationen zur Verfügung zu stellen. Warnvermerk : Dieses Schriftstück hat noch nicht den Status einer Europäischen Norm. Es wird zur Prüfung und Stellungnahme vorgelegt. Es kann sich noch ohne Ankündigung ändern und darf nicht als Europäischen Norm in Bezug genommen werden. EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION Management-Zentrum: rue de Stassart, CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Verfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern von CEN vorbehalten. B-1050 Brüssel Ref. Nr. pren 15782:2008 D
4 pren 15782:2008 (D) ÖNORM ENTWURF Inhalt Vorwort Anwendungsbereich Kurzbeschreibung Reagenzien Geräte Probenahme Vorbereitung der Untersuchungsprobe Durchführung Berechnung und Auswertung Präzision Untersuchungsbericht...8 Anhang A (informativ) Ergebnisse eines Ringversuchs...9 Literaturhinweise Seite Vorwort Dieses Dokument (pren 15782:2008) wurde vom Technischen Komitee CEN/TC 327 Futtermittel Probenahme- und Untersuchungsverfahren erarbeitet, dessen Sekretariat vom NEN gehalten wird. Dieses Dokument ist derzeit zur CEN-Umfrage vorgelegt. Dieses Dokument wurde unter einem Mandat erarbeitet, das die Europäische Kommission und die Europäische Freihandelszone dem CEN erteilt haben, und unterstützt grundlegende Anforderungen der EG- Richtlinien. 2
5 ÖNORM ENTWURF pren 15782:2008 (D) 1 Anwendungsbereich Diese Europäische Norm legt ein Verfahren zur Bestimmung der zusätzlichen Anwendung von Nicarbazin in Futtermitteln und Vormischungen (maximale Konzentration 2,5 % Nicarbazin) mittels Hochleistungsflüssigchromatographie fest. Nicarbazin ist ein 1 : 1 äquimolares Gemisch aus 4,4 -Dinitrocarbanilid (DNC) und 4,6-Dimethyl-2-pyriminol (HDP). Nicarbazin wird gewöhnlich unter Verwendung von DNC als der Target- Bestandteil bestimmt. In diesem Verfahren wird der DNC-Anteil von Nicarbazin bestimmt. Die Bestimmungsgrenze beträgt 20 mg/kg. Die Nachweisgrenze beträgt 0,5 mg/kg. ANMERKUNG werden. Eine niedrigere Bestimmungsgrenze lässt sich erreichen, jedoch muss sie durch den Anwender validiert 2 Kurzbeschreibung Die Proben werden mit einem Acetonitril-Methanol-Gemisch extrahiert. Bei Futtermitteln wird zusätzlich Wasser hinzugefügt. Ein Aliquot des Extraktes wird mit einer Reserve-Phase des isokratischen HPLC- Verfahrens untersucht, die den 4,4 Dinitrocarbanilid-Anteil bei einer Wellenlänge von 350 nm misst. 3 Reagenzien Wenn nicht anders festgelegt, sind nur Reagenzien von anerkannter Analysenreinheit zu verwenden. 3.1 Wasser, elektrischer Widerstand > 10 MOhm cm Acetonitril, HPLC-Reinheit. 3.3 Methanol, HPLC-Reinheit. 3.4 Extraktionslösemittel. 500 ml Acetonitril (3.2) sind mit 500 ml Methanol (3.3) zu mischen. Das Lösemittel ist gründlich mit einem Magnetrührwerk und einem Magnetrührer zu mischen. 3.5 Eluent für die Flüssigchromatographie. 650 ml Acetonitril (3.2) sind mit 350 ml aufbereitetem Wasser (3.1) zu mischen. Die Lösung ist gründlich mit einem Magnetrührwerk und einem Magnetrührer zu mischen und vor der Verwendung zu entgasen (z. B. mit Helium). 3.6 Nicarbazin-Referenzstandard, z. B. Eli Lilly (Liverpool, Vereinigtes Königreich). 3.7 Standardlösungen Nicarbazin-Standard-Stammlösung, 100 µg/ml 10 mg auf 0,1 mg abgewogener Nicarbazin-Referenzstandard (3.6) sind in 100 ml Extraktionslösemittel (3.4) aufzulösen. Um das Auflösen zu unterstützen, wird eine Behandlung mit Ultraschall (sonifizieren) für 5 min empfohlen. Die Lösung ist gut zu durchmischen. Diese Lösung ist für 24 h stabil, wenn sie bei gedämpften Licht bei Umgebungs- oder unter gekühlten Lagerbedingungen (siehe ANMERKUNG in 9.2) aufbewahrt wird. ANMERKUNG 1 Die Löslichkeit des Nicarbazin-Referenzstandards in dem Extraktionslösemittel ist kritisch. Die Nicarbazinkonzentrationen in den vorbereiteten Stammlösungen müssen bei der Anwendung eines Küvetten-Spektralphotometers wie folgt überwacht werden. Eine Lösung von 10 µg/ml ist durch Verdünnen der vorbereiteten Standard- Stammlösung (3.7.1) mit Acetonitril herzustellen. Ein UV/VIS-Spektrum zwischen 220 nm und 450 nm ist unter Verwendung eines Methanol-Acetonitril-Gemisches (5 : 95, V/V) als eine Referenzlösung aufzuzeichnen. Die zwischen 340 nm und 350 nm gemessene maximale Extinktion sollte zwischen einer Spanne von ± 5 % des Standardwertes liegen. Der Standardwert sollte in dem firmeneigenen Laboratorium durch Herstellung einer Standard-Stammlösung in doppelter Ausfertigung und Überwachung der UV/VIS-Spektren, wie oben beschrieben, festgestellt werden. Der Standardwert ist das mittlere Ergebnis der Duplikate. 3
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