Forschung an ips-zellen und an hes-zellen, die durch Zellkerntransfer hergestellt wurden - biologische Aspekte -
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- Adam Lange
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1 Hans R. Schöler Max Planck Institute for Molecular Biomedicine Department of Cell and Developmental Biology Münster, Germany 8. Mai, 2014 Berlin Forschung an ips-zellen und an hes-zellen, die durch Zellkerntransfer hergestellt wurden - biologische Aspekte -
2 The Nobel Prize in Physiology or Medicine 2012 John B. Gurdon John B. Gurdon eliminated the nucleus of a frog egg cell (1) and replaced it with the nucleus from a specialised cell taken from a tadpole (2). The modified egg developed into a normal tadpole (3). Subsequent nuclear transfer experiments have generated cloned mammals (4). Shinya Yamanaka Shinya Yamanaka studied genes that are important for stem cell function. When he transferred four such genes (1) into cells taken from the skin (2), they were reprogrammed into pluripotent stem cells (3) that could develop into all cell types of an adult mouse. He named these cells induced pluripotent stem (ips) cells. ips cells can now be generated from humans, including patients with disease. Mature cells including nerve, heart and liver cells can be derived from these ips cells, thereby allowing scientists to study disease mechanisms in new ways The Nobel Committee for Physiology or Medicine The Nobel Prize and the Nobel Prize medal design mark are registered trademarks of the Nobel Foundation Illustration and layout: Mattias Karlén
3 Chromosomen der Eizelle werden entnommen und durch einen Zellkern aus dem Körper ersetzt
4 Kerntransfer und Totipotenz Befruchtung (natürliche Entwicklung) reproduktives Klonen Kerntransfer Gewinnung von ES Zellen
5 Das therapeutische Klonen beim Menschen rückt näher 6. Juni April April 2014
6
7 In den USA schlägt die öffentliche Diskussion um 21. April 2014
8 Körper-DNA ist zum reproduktiven Klonen! ungeeignet
9 Altes Gesicht - Junge DNA?
10 Die DNA unserer Körper altert Mutationsrate: tatsächliche Zunahme Mutationsrate: lineare Zunahme tatsächliche Zunahme von Tumoren Alter Ende der Garantiezeit (End of warrenty) From: Somatic cell mutations: Can they provide a link between aging and cancer? M.S. Turker. Mech. Ageing Dev.,117, 1-19 (2000)
11 Genetische Probleme: Ein Beispiel 2 Klone derselben Mutter
12
13 Die Chromosomen der Maus mit dem kurzen Schwanz haben keine offensichtlichen Veränderungen
14 Embryonale Stammzellen und reprogrammierte Zellen im Vergleich Befruchtung Einnistung (Tag 6) Alleskönner-Stammzellen im Embryo Kultivierung Künstlich hergestellte Alleskönner-Stammzellen in Kultur Embryonale Stammzellen in Kultur (Alleskönner-Stammzellen) Reprogrammierung Körperzellen
15 Unsere Erbsubstanz altert Körperzelle ips-zelle Daher hätten die ips-zellen alte DNA
16 tetraploid Pluripotency: The gold standard Procedure to generate mice from ES cells in one step Nagy & Rossant
17 Guangming Wu ips/es + 4n embryo complementation: offspring without reproduction
18 Die Umkehr von Entwicklungspotenz Pluripotente Stammzellen zelluläre Alleskönner befruchtete Eizelle 5-Tage alter Embryo Haut, Neuronen Muskel, Blut Pankreas, Lunge Spermien, Eizellen
19 Induktion von Pluripotenz induziert keine Totipotenz Entwicklungsbiologie: eine Zelle ist dann totipotent, wenn sie sich aus sich selbst heraus in geeigneter Umgebung zu einem kompletten Organismus entwickeln kann. Wieso wird nicht Totipotenz induziert? Die Eizelle muss im Vergleich zu pluripotenten Zellen groß sein, sonst wäre eine embryonale Entwicklung nicht möglich Ohne Nährzellen keine funktionsfähige Eizelle Das Zytoplasma von pluripotenten Zellen ist klein, das von Eizellen ist dagegen riesig. Oct4 wird nicht zur Totipotenz benötigt, ist aber essentiell zur Induktion von Pluripotenz Die Kulturbedingungen bestimmen welche Pluripotenz ( naive bzw. vorbestimmte Pluripotenz) induziert wird
20 Embryonale Entwicklung - Embryonale Stammzellen Zellteilung - aber kein embryonales Wachstum Befruchtung Einnistung (Tag 6) Alleskönner-Stammzellen im Embryo Die Eizelle muss im Vergleich zu pluripotenten Zellen groß sein, sonst wäre eine embryonale Entwicklung nicht möglich Kultivierung Embryonale Stammzellen in Kultur (Alleskönner-Stammzellen)
21 Das Zytoplasma von Eizellen ist riesig
22 Das Zytoplasma von pluripotenten Zellen ist dagegen klein
23 Zur Eizellbildung werden Nährzellen benötigt Wo sollen all die Nährstoffe während der Reprogrammierung denn herkommen? Nährzelle Eizelle
24 Ohne Oct4 keine Pluripotenz und keine Reprogrammierung zur Pluripotenz Februar 2009 Jeong Beom Kim Holm Zaehres Oct4 Sox2 Klf4 c-myc induzierte Alleskönner WN Nervenstamm -zelle der Maus induzierte pluripotente Stammzelle ips Kim et al., Nature 454, 2008 Kim et al., Cell 136, 2009 Kim et al., Nature 461, 2009
25 Oct4 wird dagegen nicht zur Totipotenz benötigt
26 Die Kulturbedingungen bestimmen welche Pluripotenz induziert wird Oct4 Reprogrammierungs- faktoren Sox2 Klf4 c-myc induzierte pluripotente Stammzellen ips-zellen Reprogrammierung Hautzelle Der Zustand der Pluripotenz wird gleichsam eingefroren induzierte Epiblast Stammzellen iepis-zellen
27 Mögliche Anwendungen für ips-zellen Dies ist möglich mit ips-zellen, eher nicht mit ES-Zellen Erforschung von Krankheitsaspekten in Kultur ips-zellen Entwicklung neuer Medikamente mit Krankheitsmodellen
28 Parkinson in the Dish Peter Reinhardt March 2013
29 Es ist möglich das Stadium der Pluripotenz zu umgehen, um Stammzellen zu erhalten Direkte Reprogramming von Hautzellen in Neurale Stammzellen
30 Die abnehmende Potenz der Zellen ist nun überwunden Alleskönner- Stammzellen Nerven- Stammzellen Vielkönner- Stammzellen Ausgereifte Zellen Hautzellen Leberzellen Nervenzellen
31 Süddeutsche Zeitung WISSEN! Februar 2005 Yamanaka Cocktail August 2006 Oct4 Sox2 Klf4 c-myc
32 In situ Reprogramming
33 Freitag, 8. Juni 2007, Nr. 130 / Seite 33
34 Morphologie von pluripotenten Stammzellen von einem Embryo von einer Körperzelle ES Kolonie ips Zell-Kolonie
35 Max-Planck-Institut für molekulare Biomedizin Münster
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