Überdauerung und Nachweis von Viren in Lebensmitteln. Schrader et al., 2003

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1 Überdauerung und Nachweis von Viren in Lebensmitteln Schrader et al.,

2 Viren sind Parasiten und benötigen lebende Zellen zur Vermehrung keine Vermehrung im Lebensmittel! Viren sind keine Lebewesen! 2

3 Foodborne Viruses Virus Spezies Hülle Norovirus - Sapovirus - Hepatitis A-Virus - Hepatitis E-Virus - Rotavirus - Astrovirus - unbehüllte Viren sind umweltstabiler als behüllte! Enterovirus - Adenovirus - Frühsommer-Meningo- Enzephalitis-Virus + 3

4 Gemeldete Viruserkrankungen in Deutschland (Robert Koch Institut, Berlin) Virus Erkrankungen foodborne Norovirus % (Europa) Hepatitis A-Virus % Hepatitis E-Virus ? 2012: Norovirus Erkrankungen 2013:(41. KW) Norovirus Erkrankungen 4

5 Foodborne Viruses = Lebensmittel übertragbare Viren Virus Spezies Hülle Erkrankung Zellkultur Norovirus - Gastroenteritis Sapovirus - Gastroenteritis - Hepatitis A-Virus - Hepatitis + a Hepatitis E-Virus - Hepatitis - Rotavirus - Gastroenteritis + Astrovirus - Gastroenteritis + a Enterovirus - Poliomyelitis, Meningitis Adenovirus - Gastroenteritis + a -! + a Frühsommer-Meningo- Enzephalitis-Virus + Meningoenzephalitis + a a nicht alle Isolate sind kultivierbar; Wildstämme sind oftmals schwer zu kultivieren (Greening G.E., 2006) 5

6 Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach 64 LFGB Dez Untersuchung von Lebensmitteln Qualitativer Nachweis von Noroviren der Genogruppe I und II auf glatten, festen Oberflächen von Lebensmitteln durch real-time RT-PCR 6

7 seit November 2012 frei verfügbares Protokoll CEN/ISO TS

8 Barbara Becker, 2. Fresenius Praktikertagung Analytik & QS,

9 Forschungsprojekt Einfluss technologischer Prozesse auf die Inaktivierung und Tenazität von Norovirus in Lebensmitteln Das Forschungsvorhaben (AiF-FEI N) wurde im Programm zur Förderung der Industriellen Gemeinschaftsforschung (IGF) vom Bundesministerium für Wirtschaft und Technologie (via AiF) über den Forschungskreis der Ernährungsindustrie e.v. (FEI) gefördert. 9

10 Viren aus Lebensmitteln extrahieren Aufkonzentrierung durch Ultrafiltration (Vivaspin) Verdau freier RNA/RNase Inhibition RNA-Extraktion MS2 Extraktionskontrolle real-time RT-PCR 10

11 Reduction of human norovirus in selected food matrices during different processes and storage conditions Food product Process, treatment Process conduct/parameters NV reduction [log 10 ] ±SEM NV reduction (nominal) Frozen pizza Heating Baking in table oven, 12 min at 200 C > -4 ± Frozen pizza Freezing Storage in freezer, 14 days at -18 C -1.1 ±0.92 Mincemeat Heating Cooking in boiling liquid, 30 min at 100 C > -7 ± Mincemeat Freezing Storage in freezer, 8 days at -18 C 0.0 ±3.06 Mincemeat Cooling Storage in refrigerator, 2 days at +6 C 0.0 ±0.61 Apple Cooling Storage in refrigerator, 7 days at +11 C -0.2 ±0.76 Iceberg lettuce Cooling Storage in refrigerator, 5 days at +11 C 0.1 ±

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13 Übertragungswege Lebensmittel-assoziierter Viren primäre Kontamination von Lebensmitteln (z.b. Früchte, Muscheln) sekundäre Kontamination bei Produktion, Verarbeitung und Zubereitung Arbeitsflächen Verpackungen Maschinen Transportbänder Transportkisten Latexhandschuhe usw. 13

14 Forschungsprojekt Tenazität und Inaktivierung von humanem Norovirus auf unterschiedlichen Werkstoffen von Bedarfsgegenständen in der Lebensmittelproduktion und -verarbeitung Das Forschungsvorhaben (AiF N) wird im Programm zur Förderung der Industriellen Gemeinschaftsforschung (IGF) vom Bundesministerium für Wirtschaft und Technologie (via AiF) über den Forschungskreis der Ernährungsindustrie e.v. (FEI) gefördert. 14

15 Tenazität von hnv auf Werkstoffen real-time RT-PCR hnv kein Unterschied der Virusstabilität auf getesteten Materialen (Edelstahl, Plastik) 15

16 Humanes Norovirus (NV), Felines Calicivirus (FCV), Murines Norovirus (MNV) Wirkstoffgruppe/-basis (Aktive) Substanz Wirkstoffkonz. [V-%] Ethanol 30 %, 62 %, 70 %, 90 % 1-Propanol (n- Alkoholpräparate Propanol) 30 %, 62 %, 70 %, 90 % 2-Propanol (Isopropanol) 30 %, 62 %, 70 %, 90 % Aldehyd Glutaraldehyd 0,1 %, 0,5 % 2,5 % Natriumhypochlorit 0,01 %, 0,1 %, 1 % Aktiv-Chlor-/ Elektrolyse-Wasser Halogenverbindungen 5 %, 10 % (Chlorverbindungen) Organische Säure Peressigsäure 0,1 %, 0,5 %, 2 % Wirkstoffprüfung mit Desinfektionsmittelkomponenten Einwirkzeiten Umgebungstemperatur 0,5, 5 und 60 Min +/- 10 s 21 C und 7 C +/- 1 C 16

17 Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit! Das Forschungsvorhaben (AiF N) wurde im Programm zur Förderung der Industriellen Gemeinschaftsforschung (IGF) vom Bundesministerium für Wirtschaft und Technologie (via AiF) über den Forschungskreis der Ernährungsindustrie e.v. (FEI) gefördert. Prof. Dr. Barbara Becker, Dr. Sascha Mormann Institut für Lebensmitteltechnologie-NRW (ILT-NRW) FB4 Life Science Technologies Telefon Telefax