ONR CEN/TS Molekularanalytische in-vitrodiagnostische
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- Sara Böhme
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1 ICS ONR CEN/TS Molekularanalytische in-vitrodiagnostische Verfahren Spezifikationen für präanalytische Prozesse für schockgefrorene Gewebeproben Teil 2: Isolierte Proteine (CEN/TS :2015) Molecular in vitro diagnostic examinations Specifications for pre-examination processes for snap frozen tissue Part 2: Isolated proteins (CEN/TS :2015) Tests de diagnostic moléculaire in vitro Spécifications relatives aux processus préanalytiques pour les tissus à congélation rapide Partie 2: Protéines extraites (CEN/TS :2015) Ausgabedatum:
2 ONR CEN/TS : Nationales Vorwort Diese in den Aufgabenbereich des Komitee 179 Medizintechnik fallende Europäische Technische Spezifikation CEN/TS wurde als ONR CEN/TS übernommen, weil die europäische Entwicklung auf diesem Fachgebiet noch in Fluss ist und weitere praktische Erfahrungen abgewartet werden sollen. Es wird gebeten, Erfahrungen und Vorschläge schriftlich Austrian Standards Institute mitzuteilen. 2
3 TECHNISCHE SPEZIFIKATION CEN/TS TECHNICAL SPECIFICATION SPÉCIFICATION TECHNIQUE August 2015 ICS Deutsche Fassung Molekularanalytische in-vitro-diagnostische Verfahren - Spezifikationen für präanalytische Prozesse für schockgefrorene Gewebeproben - Teil 2: Isolierte Proteine Molecular in vitro diagnostic examinations - Specifications for pre-examination processes for snap frozen tissue - Part 2: Isolated proteins Tests de diagnostic moléculaire in vitro - Spécifications relatives aux processus préanalytiques pour les tissus à congélation rapide - Partie 2: Protéines extraites Diese Technische Spezifikation (CEN/TS) wurde vom CEN am 6. Juli 2015 als eine künftige Norm zur vorläufigen Anwendung angenommen. Die Gültigkeitsdauer dieser CEN/TS ist zunächst auf drei Jahre begrenzt. Nach zwei Jahren werden die Mitglieder des CEN gebeten, ihre Stellungnahmen abzugeben, insbesondere über die Frage, ob die CEN/TS in eine Europäische Norm umgewandelt werden kann. Die CEN Mitglieder sind verpflichtet, das Vorhandensein dieser CEN/TS in der gleichen Weise wie bei einer EN anzukündigen und die CEN/TS verfügbar zu machen. Es ist zulässig, entgegenstehende nationale Normen bis zur Entscheidung über eine mögliche Umwandlung der CEN/TS in eine EN (parallel zur CEN/TS) beizubehalten. CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Bulgarien, Dänemark, Deutschland, der ehemaligen jugoslawischen Republik Mazedonien, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Kroatien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, den Niederlanden, Norwegen, Österreich, Polen, Portugal, Rumänien, Schweden, der Schweiz, der Slowakei, Slowenien, Spanien, der Tschechischen Republik, der Türkei, Ungarn, dem Vereinigten Königreich und Zypern. EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION CEN-CENELEC Management-Zentrum: Avenue Marnix 17, B-1000 Brüssel 2015 CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Ref. Nr. CEN/TS :2015 D Verfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern von CEN vorbehalten.
4 Inhalt Seite Europäisches Vorwort...3 Einleitung Anwendungsbereich Normative Verweisungen Begriffe Allgemeine Betrachtungen Außerhalb des Labors Anleitung zur Entnahme von Primärgewebe Angaben zum Spender der Primärprobe Informationen zur Primärgewebeprobe Angaben zur Verarbeitung der Primärgewebeprobe Transportbezogene Anforderungen Im Labor Angaben zum Eingang der Primärgewebeprobe Auswertung der Pathologie des Untersuchungsmaterials und Auswahl der Probe Kryolagerung des Untersuchungsmaterials Lagerungsbedingungen Gesamtproteinisolierung Allgemeines Verwendung handelsüblicher Kits Anwendung laboreigener Protokolle Qualitätsbewertung isolierter Proteine Lagerung des isolierten Gesamtproteins Anhang A (informativ) Quantitative Proteinanalyse als Nachweis der Veränderung der Proteinmenge während der kalten Ischämie A.1 Einleitung A.2 Beispiel A.2.1 Allgemeines A.2.2 Versuchsdurchführung A.2.3 Ergebnisse A.2.4 Weiterführende Literatur Literaturhinweise
5 Europäisches Vorwort Dieses Dokument (CEN/TS :2015) wurde vom Technischen Komitee CEN/TC 140 In-vitro- Diagnostik erarbeitet, dessen Sekretariat vom DIN gehalten wird. Es wird auf die Möglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Dokuments Patentrechte berühren können. CEN [und/oder] CENELEC sind nicht dafür verantwortlich, einige oder alle diesbezüglichen Patentrechte zu identifizieren. Entsprechend der CEN-CENELEC-Geschäftsordnung sind die nationalen Normungsinstitute der folgenden Länder gehalten, diese Technische Spezifikation anzukündigen: Belgien, Bulgarien, Dänemark, Deutschland, die ehemalige jugoslawische Republik Mazedonien Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Kroatien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, Niederlande, Norwegen, Österreich, Polen, Portugal, Rumänien, Schweden, Schweiz, Slowakei, Slowenien, Spanien, Tschechische Republik, Türkei, Ungarn, Vereinigtes Königreich und Zypern. 3
6 Einleitung Die molekulare In-vitro-Diagnostik hat bedeutende Fortschritte in der Medizin ermöglicht. Weitere Fortschritte werden von neuen Technologien erwartet, mit denen die Signaturen von Nukleinsäuren, Proteinen und Metaboliten in humanen Geweben und Körperflüssigkeiten analysiert werden. Die Profile und/oder die Integrität dieser Moleküle können bzw. kann sich jedoch im Verlauf der Entnahme der Primärprobe, des Transports, der Lagerung und der Verarbeitung drastisch verändern und dadurch die Diagnostik- bzw. Forschungsergebnisse unzuverlässig oder sogar unmöglich machen, da in der anschließenden Analyse nicht die Situation im Patienten, sondern ein künstliches Molekülprofil bestimmt wird, das während des präanalytischen Verfahrens geschaffen wurde. Daher ist die Normung des gesamten Prozesses von der Primärprobenahme bis zur Proteinanalyse notwendig. Zur Bestimmung der wichtigen Einflussfaktoren wurden entsprechende Studien durchgeführt. Bei der Festlegung und Normung der einzuhaltenden Schritte während der sogenannten präanalytischen Phase für gefrorene Gewebeproben im Rahmen der Proteinanalyse stützt sich diese Technische Spezifikation auf diese Arbeiten. 4
7 1 Anwendungsbereich Diese Technische Spezifikation gibt Empfehlungen zur Handhabung, Dokumentation und Verarbeitung von aus gefrorenem Gewebe bestehendem und für die Analyse isolierter Proteine vorgesehenem Untersuchungsmaterial während der präanalytischen Phase vor Beginn der molekularen Analyse. Diese Technische Spezifikation gilt für molekulare in-vitro-diagnostische Untersuchungen (z. B. In-vitro-Diagnostik-Labore, Kunden dieser Labore, Entwickler und Hersteller von In-vitro-Diagnostika, Einrichtungen und kommerzielle Organisationen, die in der biomedizinischen Forschung tätig sind, Biobanken und Aufsichtsbehörden). Proteinprofile und Protein-Protein-Interaktionen in Geweben können sich vor und nach der Probenahme drastisch verändern (z. B. aufgrund von Geninduktion, Herabregulation von Genen, Proteinabbau). Die Mengen der Proteinspezies können sich je nach Gewebespender/Patient unterschiedlich verändern. Die Genexpression kann durch die jeweilige Behandlung oder den medizinischen Eingriff (Operation, Biopsie) oder die zur Anästhesie oder Behandlung von Begleiterkrankungen verabreichten Medikamente sowie abhängig von unterschiedlichen Umgebungsbedingungen nach der Gewebeentnahme aus dem Körper beeinflusst sein. Daher ist es äußerst wichtig, dass besondere Maßnahmen getroffen werden, um die beschriebenen Profilveränderungen und -modifikationen im Gewebe für eine anschließende Proteinanalyse möglichst gering zu halten. Gewebe, die vor dem Gefriervorgang einer chemischen Vorbehandlung zur Stabilisierung unterzogen wurden, sind nicht durch dieses Dokument abgedeckt. Des Weiteren gilt dieses Dokument nicht für eine immunhistochemische Proteinanalyse. 2 Normative Verweisungen Die folgenden Dokumente, die in diesem Dokument teilweise oder als Ganzes zitiert werden, sind für die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzte Ausgabe des in Bezug genommenen Dokuments (einschließlich aller Änderungen). EN ISO 15189:2012, Medizinische Laboratorien Anforderungen an die Qualität und Kompetenz (ISO 15189:2012, korrigierte Fassung ) ISO 15190, Medical laboratories Requirements for safety 3 Begriffe Für die Anwendung dieses Dokuments gelten die Begriffe nach EN ISO 15189:2012 und die folgenden Begriffe. 3.1 Umgebungstemperatur ungeregelte Temperatur der Umgebungsluft 3.2 analytische Phase Prozesse, die mit dem isolierten Analyt beginnen und jegliche Art von Parameterprüfung oder chemischer Bearbeitung für die quantitative oder qualitative Analyse umfassen 3.3 kalte Ischämie Zustand nach der Gewebeentnahme aus dem Körper bis zur Stabilisierung oder Fixierung 5
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