Drogenteste im Speichel
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- Karsten Hafner
- vor 7 Jahren
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1 Drogenteste im Speichel Eine Alternative zum Drogenscreening im Urin? Dr. H. Ertl Agenda: 1. Ist Urin nicht genug? 2. Suche nach neue Untersuchungsmaterialien Speichel-Probennahme 5. Drogenteste im Speichel & LC-MS/MS 6. Praktische Anwendung & Nutzen 7. Fazit 1
2 Warum Speichel? Ist Urin nicht genug? Es geht um Drogenteste in der Suchttherapie und der klinischen Toxikologie wie z.b. in der Psychosomatik, Arbeits- und Betriebsmedizin: 1. Ist Urin nicht genug? (Warum Speichel?) Warum Speichel? Ist Urin nicht genug? Anlass / Zweck von Drogentesten: - z.b. Abklärung eines möglichen Konsums - z.b. Einnahmekontrolle eines Medikamentes - Durchführung: bislang meist im Urin Problem: Der Patient hat nicht immer ein eigenes Interesse an der Wahrheit bei Süchtigen und suchtkranken Menschen ist das Verdrängen Teil der Sucht(erkrankung). 2
3 Warum Speichel? Ist Urin nicht genug? Urin-Manipulationen bzw. Sicherung der Probenidentität - Vortrag Dr. Hartleb - Aussagekraft von Urin-Drogentesten ist oft fraglich: Probenidentität unsicher und Manipulationen häufig erfolgreich Neue Untersuchungsmaterialien: 2. Suche nach alternativen Untersuchungsmaterialien 3
4 Neue Untersuchungsmaterialien: Suche nach alternativen Untersuchungsmaterialien: Haar? Kapillarblut? Ja, aber äußerer Beeinflussung des Haars! zunehmend einschränkende Erkenntnisse z.b. EtG. Ja, aber viele relevanten Drogen sind in Blut nur sehr kurz nachweisbar. Schweiß, Atemluft? Wird diskutiert und z.t. auch schon verwendet. Aber: Offene inhaltliche und technischer Fragen. Speichel? Ja, aber Speichel ist biochemisch instabil... - Angaben ohne Anspruch auf Vollständigkeit! - Neue Untersuchungsmaterialien: Speichel / Oral Fluid Suche nach alternativen Untersuchungsmaterialien: Speichel? Ja, aber Speichel ist biochemisch instabil... NEU: 1. Entwicklung geeigneter Sammelsysteme (Konservierung der Probe, bessere Handhabung) 2. Etablierung sensitiver analytischer Verfahren (kleine Konzentrationen LC-MS/MS) Untersuchung von Speichel inzwischen sinnvoll als Ergänzung oder Alternative* zur Urinkontrolle Vorteil: einfache Proben-Identitätskontrolle Vorteil: einfache Proben-Identitätskontrolle, nicht-invasiv *: Speichel wurde 2011 von der EWTS (European Workplace Drug Testing Society) als Untersuchungsgegenstand mit hoher Wertigkeit anerkannt. 4
5 3. Drogen / Medikamente im Speichel Was ist Speichel? Das Produkt von Speicheldrüsen... Speicheldrüsen und deren Anteil an der Gesamtproduktion: 1: Paarige Ohrspeicheldrüse (ca. 20 %) 2: Unterkieferdrüse (ca. 70 %) 3: Unterzungendrüse (ca. 5 %) + Lippendrüsen (ca. 5 %) 5
6 1. Speichel: dünnflüssig bis zähflüssig + 2. Mundschleim: dick, zäh, fadenziehend + 3. ggf. Rückstände im Mundraum... aber nicht nur! Das was Speichel genannt wird, besteht aus: = Gemischter Speichel = Oral Fluid in diesem Vortrag bedeute Speichel stets Gemischter Speichel auch Enzyme Abbildung: Fa. Greiner, verändert 6
7 Ultrafiltrat des Blutes Transport von Drogen/Medikamenten aus dem Blut in den Speichel: K E I N K E I N E Abbildung: Fa. Greiner, verändert Übergang von Drogen/Medikamente in den Speichel: Einflußfaktoren gibt es viele, aber sie sind gut untersucht: Beeinflussung der Speichel-Sekretion: (Zusammensetzung + Volumen) - Parasympathikus - Sympathikus - Tageszeit - Alter, Lebensweise - ggf. Krankheiten - ggf. Medikation
8 Übergang von Drogen/Medikamente in den Speichel: Einflußfaktoren gibt es viele, aber sie sind gut untersucht: Interpretation ist jedoch anspruchsvoller als bei Urin Nützlich zur Interpretation bei Medikation ist v.a. die Dosis und die Zeit seit der letzten (oralen) Einnahme Cown & Huestis 2007: Interpretation of Oral Fluid Tests for Drugs of Abuse Drogen im Speichel Nachweisbarkeit von Drogen im Speichel: wie auch im Urin und im Blut ist sie vor allem: substanzabhängig! Daten aus Großbritannien N = (!) Clarke et al. 2007: Drug and Metabolite Concentrations in a Large Oral Fluid Database in the UK. 8
9 Viele Drogen/Medikamente sind chemisch Basen und in Speichel besser nachweisbar als im Blut, da sie sich im Speichel ph-wert bedingt anreichern. ( µg/l ) 6-Acetylmorphine Beispiel: Opiate, z.b. Heroin-Metabolit 6-Acetylmorphin: Abgrenzung eines Heroin-Konsums von Codein- bzw. Morphin-Einnahme im Speichel besser möglich als im Urin (+ Therapiekontrolle bei Diacetylmorphin- und Morphin retard -Therapie.) Clarke et al. 2007: Drug and Metabolite Concentrations in a Large Oral Fluid Database in the UK. Opiat-Substitution: Die Therapeutika sind gut im Speichel nachweisbar. Bei oraler Einnahme ist die Interpretation der Speichel-Ergebnisse anspruchsvoll. Verhältnis Gabeform zu Metabolit beachten! Drogen-Schnellteste: diagnostische Metabolite nicht nachweisbar! Mittel* ( µg/l ) 538 3,6 59,8 1,3 Methadon (Speichel) EDDP (Speichel) Methadon (Urin) EDDP (Urin) Mittelwert (µg/l) 538 3, Buprenorphin (Speichel) Norbupren, (Speichel) Buprenorphin (Urin) Norbupren, (Urin) Mittelwert (µg/l) 59,8 1,3 6,6 78,8 Clarke et al. 2007: Drug and Metabolite Concentrations in a Large Oral Fluid Database in the UK. / *: eigene Daten, N = 57, Speichel 9
10 Weitere chemische Basen: Amphetamine Anders: Benzodiazepine: geringe Konzentrationen! Drogen-Schnellteste ungeeignet: Cutoff zu hoch ( µg/l ) (Ecstasy) Clarke et al. 2007: Drug and Metabolite Concentrations in a Large Oral Fluid Database in the UK. Weitere chemische Basen: Kokain Anders: Cannabinoide: geringe Konzentrationen! Drogen-Schnellteste ungeeignet: Cutoff zu hoch ( µg/l ) Clarke et al. 2007: Drug and Metabolite Concentrations in a Large Oral Fluid Database in the UK. 10
11 Exkurs Pharmakologie z.b. der Psychoparmaka: Vorteil von Speichel im Vergleich zu Urin: Speichel-Konzentrationen sind ~ Blutspiegel! d.h. ~ biologischer Wirkung Speichel/Blut-Ratio: (Speichel-/Serum-Konz.) nahe 1,0 bzw. nicht schlechter als 0,1: oft > 1 d.h. mit Anreicherung: 0,9 8,5 Abbildungen: Böttcher 2013, Vortrag Retrospektive Auswertung von Patientenmessungen: Medikamenten-Konzentration im Speichel ~ Dosis-Äquivalente: Konzentration (µg/l) kritischer Bereich: - sehr große Konzentrationen - sehr kleine Konzentrationen Erwartungsbereich: Speichel-Konzentration ~ Dosis Dosis-Äquivalente (übliche Maximaldosis =: 100) 11
12 Retrospektive Auswertung von Patientenmessungen: Methadon/Polamidon im Speichel ~ Dosis-Äquivalente: Konzentration (µg/l) Dosis-Äquivalente Vergleich mit Befunden: Die roten Fälle sind stets Manipulations-Versuche, die im Speichel erkannt wurden: Es wurde kein Medikament eingenommen oder es wurde nur am Tag des Arztbesuches das Medikament eingenommen, vermutlich in der Hoffnung dass der Urintest auf Methadon durch Fremdurin bzw. die Methadon-Zugabe zum Urin leicht zu täuschen sei. Speichel-Probennahme 4. Speichel-Probennahme: Welches Speichel-Abnahmesystem? Wie kommt der Speichel ins Labor? 12
13 Speichel-Probennahme Durchführung einer Speichel-Probennahme: Bevorzugt: flüssige (!) Beprobung des Speichels d.h. Ausspülen des Mundraumes. Vorteile: - auch bei trockenem Mund* - Probengewinnung und Messung getrennt ermöglicht bessere Methoden als Schnelltests sowie Qualitätssicherung *: Schnelltests können bei trockenem Mund nicht angewendet werden. Speichel-Probennahme Durchführung einer Speichel-Probennahme (SCS System): Extraktionslösung aus Röhrchen in den Mund: für 1-2 min spülen, nicht Schlucken! Extraktionslösung in den Becher spucken. Becher eben abstellen, Vacutainer aus Becher füllen + Schwenken (Konservierung). Becher danach entsorgen. Abbildungen: Greiner Bio-One 13
14 Speichel-Probennahme Transport ins Labor: möglich mit dem Laborboten oder per Post, sofern ein Abnahmesystem mit Konservierungsstoff verwendet wird, denn nativer Speichel ist enzymatisch hoch aktiv! Lagerung/Transport von Speichelproben: SCS System: zum Vergleich: Salivette: (und Speichel in Leerröhrchen) bei Raumtemperatur: 1-20 Tage nur Minuten bis Stunde gekühlt (ca. +4 C): 1-3 Wochen nur Stunden gefroren (ca. -20 C): Monate bis Jahre Monate bis Jahre Drogenteste in Speichel 5. Drogenteste in Speichel: Welche Methoden und Geräte sind geeignet? 14
15 Drogenteste in Speichel Welche Methoden und Geräte sind geeignet?? Drogenteste in Speichel Welche Methodik? Cutoff: je nach Substanz 2 bis 40 µg/l (medizin. Fragestellungen, forensisch niedriger!) LC-MS/MS. 15
16 Drogenteste in Speichel Massenspektrometrie in der Drogenanalytik: LC-MS/MS hat GC/MS als Referenzmethode abgelöst. Begriffserläuterung: LC-MS/MS = Flüssigchromatographie mit Massenspektrometrie ( Reinigung bzw. Auftrennung, dabei schonend zur Probe) MS/MS = 2-fache Massenspektrometrie: Messung, Teilung, Messung (sensitive Detektion und sichere Identifizierung) Drogenteste in Speichel Beispiel für LC-MS/MS: Kontrolle der Substitutionstherapie mit Buprenorphin (Take Home) Herausforderungen: Differenzierung Gabeform + Metabolite mehrere Signale parallel sehr kleine Konzentrationen,... (sublingual!, HWZ: 2-5 h) Metabolisierung von Buprenorphin. 16
17 Drogenteste in Speichel Drogen im Speichel im Labor Lademannbogen: 1. Multi-Targetscreening beinhaltet: Amphetamine Benzodiazepine Z-Drugs Benzodiazepin-Analoga Kokain u. Metabolite Opiate Opioide Methadon u. Metabolit immer dabei: Perianalytik: - Amylase - weitere Messungen Drogenteste in Speichel Drogen im Speichel im Labor Lademannbogen: 2. Zur Therapiekontrolle: Buprenorphin + Metabolit (quantitativ) Methadon + EDDP (quantitativ) 3. In Vorbereitung: THC diverse Medikamente, insbesondere Psychopharmaka immer dabei: Perianalytik: - Amylase - weitere Messungen 17
18 Drogenteste in Speichel Externe Qualitätskontrolle (Ringversuch): Runde 111 Runde 112 Runde 113 Runde von 8 Substanzen nachgewiesen 8 von 8 Substanzen nachgewiesen 7 von 7 Substanzen nachgewiesen 6 von 6 Substanzen nachgewiesen und zwar quantitativ: d.h. auch die Konzentration wurde korrekt bestimmt! Speichel-Drogentests: Praktische Anwendung & Nutzen 6. Drogenteste in Speichel: Praktische Anwendung & Nutzen 18
19 Speichel-Drogentests: Praktische Anwendung & Nutzen Methode inzwischen erweitert um Fentanyl + Norfentanyl 19
20 Speichel-Drogentests: Praktische Anwendung & Nutzen Weitere Beispiel-Befunde: 20.5 Perianalytik: Messungen zur Überprüfung der Echtheit und der Verdünnung der Probe vorbildlich! Speichel-Drogentests: Praktische Anwendung & Nutzen Weitere Beispiel-Befunde: vorbildlich! 20
21 Speichel-Drogentests: Praktische Anwendung & Nutzen + Urin: vorbildlich! Speichel-Drogentests: Praktische Anwendung & Nutzen Speichel: sehr wenig EDDP; viel Methadon + Urin: Urin: EDDP negativ; viel Methadon Vortäuschen einer Einnahme 21
22 Speichel-Drogentests: Praktische Anwendung & Nutzen + Urin: Urin: stark positiv, aber Speichel negativ! Die Urinprobe wurde vertauscht! Speichel-Drogentests: Fazit 7. Fazit Drogen im Speichel im Labor Lademannbogen 22
23 Speichel-Drogentests: Fazit Fazit: Drogen im Speichel im Labor Lademannbogen: sichere Probenidentität, keine Probenmanipulationen, einfache Probengewinnung, Werte ~ biologischer Wirkung mit LC-MS/MS (hohe Sensitivität + Selektivität, inkl. Metabolite) auch als Multi-Targetscreening (mit >40 Substanzen parallel, z.zt. noch ohne THC) für viele Anwendungsbereiche bereits heute eine gute Alternative zu Urin; sonst eine gute Ergänzung 23
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