Bestimmung von Legionellen und Anforderungen an die Probenahme

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1 Landesuntersuchungsamt für Chemie, Hygiene und Veterinärmedizin Bestimmung von Legionellen und Anforderungen an die Probenahme Anette Knor Bremer Fachtag Legionellen am

2 Gliederung Vorstellung Bremer Legionellenausbruch und Monitoring 2016 Herausforderungen beim Nachweis von Legionellen Praktische Umsetzung im Labor Regelwerke 2017 Probenahme nach UBA Untersuchung nach UBA Schlussfolgerungen 2

3 Vorstellung Landesuntersuchungsamt für Chemie, Hygiene und Veterinärmedizin Standort: im Kaffeequartier in der Überseestadt Akkreditierung nach DIN EN ISO Erlaubnis nach Schutzstufe 2 der BiostoffV Erlaubnis nach 44 IfSG Ansprechpartner Amtsleiterin Frau Berges Referatsleiter Wasser/Probenahme Herr Dr. Bohlen Prüfleiterin Mikrobiologie/Laboruntersuchung Frau Knor 3

4 Legionellenausbruch März 2016: LUA als untersuchendes Labor 03. März 2016: 1. Probenahme und Beginn der Untersuchung - 49 Betriebe, Einrichtungen und Gewässer vom LUA beprobt Einzelproben entnommen und untersucht* Hauptanteil der Proben: Kühlwasser In 130 Proben mit Legionellennachweis *März und April 2016 bis Ausbruchsende 4

5 Monitoring Juli - Dezember Proben, 40 Betriebe monatlich beprobt und untersucht Keine Ausbrüche, Rückgang der Legionellengehalte 13% 7% Juli 2016 Dezember % 15% 15% 6% 59% 5% 72% keine 100 < > * * [KbE/100ml] 5

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7 Herausforderungen beim Nachweis Zeitpunkt und Ort der Probenahme Proben mit unterschiedlichem Verschmutzungsgrad Unterschiedliche Partikelgröße Große Spannbreite der Legionellenkonzentration Systemspezifische individuelle Begleitflora Phasenzustand der Legionellen 7

8 Begleitflora und Legionellen

9 Begleitflora aus Schimmelpilzen

10 Schwärmende Begleitflora aus Kolonien Schimmelpilzen überdecken Legionellen und schwärmenden Kolonien

11 Legionellen hemmende Begleitflora 100 ml Probe Probe 1: 10 verdünnt 1:100 verdünnt nt 11

12 Phasenzustand frei in der Wasserphase im Biofilm im VBNC Zustand in Amöben 12

13 Praktische Umsetzung im Labor 13

14 Einfluss der Vorbehandlung Probe unbehandelt Probe hitzebehandelt 14

15 Regelwerke für Kühlwasser 2017 für Betreiber Untersuchungspflicht nach der 42. BImSchV - Verordnung über Verdunstungskühlanlagen, Kühltürme und Nassabscheider für das Labor Probenahme und Nachweis von Legionellen nach UBA Untersuchung nach ISO 11731: Akkreditierung im Sinne der 42. BImschV für Nutzwasser 15

16 Probenahme nach UBA Repräsentative Probe Vorgaben der DIN EN ISO sind einzuhalten Planung der Probenahme Entnahme in Strömungsrichtung vor der Bioziddosierstelle Geeignete Probenahmetechnik Konservierung der Probe / Inaktivierung des eingesetzten Biozids 16

17 Untersuchung nach UBA Nachweis der Legionellen durch Kultivierung auf GVPC Selektivmedium Parallele Anwendung der Verfahren Membranfiltration und Oberflächenverfahren Einsatz von unbehandelter, nur Hitze- und nur Säure-behandelter Probe Bestätigung der Legionellenverdächtigen Kolonien über Subkulturen Serogruppenbestimmung ab einem Legionellengehalt > KbE/100ml (bei Kühltürmen > KbE/100ml) Berücksichtigung Begleitflora bei der Ergebnisangabe 17

18 Schlussfolgerung Pflichten zur Einhaltung des Verbraucher- und Umweltschutzes geregelt in der 42. BImschV ISO 11731, 2017 und die entsprechende Empfehlung des UBA verpflichten zu einheitlicher Vorgehensweise Akkreditierung zur Untersuchung von Kühlwasser erforderlich Jede Anlage hat eine spezifische Keimflora Regelmäßige Untersuchung gibt Sicherheit 18

19 Dankeschön 19