PreventID H. pylori Antigen. Weiterführende Informationen Testanleitung Arztinfo Wissenschaftlicher Hintergrund

Transkript

1 Weiterführende Informationen Testanleitung Arztinfo Wissenschaftlicher Hintergrund

2 Testanleitung (für den professionellen Gebrauch) (KT11008) Verwendungszweck Der -Test ist ein immunchromatographischer chnelltest für den qualitativen Nachweis von Helicobacter pylori Antigen in humanem tuhl. ist für den professionellen Gebrauch bestimmt. Er unterstützt die Diagnose von H. pylori Infektionen und bestätigt eine erfolgreiche Eradikationstherapie ab ca. 4 bis 5 Wochen nach Abschluss der Therapie. Einleitung Mit H. pylori Infektionen hängen eine Reihe von gastrointestinalen Erkrankungen zusammen, wie zum Beispiel Zwölfingerdarm- und Magengeschwür, nicht-entzündliche Verdauungsstörungen sowie die akute und chronische Magenschleimhautentzündung (Gastritis). Neuere tudien legen auch einen Zusammenhang von H. pylori Infektion und Magenkrebs nahe; die Rolle von H. pylori und den weiteren Faktoren, die zur Entwicklung dieser Erkrankung führen, werden derzeit weiter erforscht. Testprinzip Der -Test hat auf der Testkassette zwei Markierungen für Testbande (T) und Kontrollbande (C). owohl die Testbande als auch die Kontrollbande sind nicht sichtbar, bevor eine Probe aufgetragen wird. Die Kontrollbande zeigt den korrekten Verlauf des Testverfahrens an. Die Kontrollbande erscheint immer dann, wenn der Test ordnungsgemäß durchgeführt wurde und alle Testreagenzien funktionieren. Die violette Testbande ist sichtbar, wenn eine ausreichende Menge an H. pylori Antigen in der Probe vorhanden ist. Materialien Mitgelieferte Materialien Testkassetten, einzeln verpackt Pipetten Probensammelröhrchen inkl. Pufferlösung und Probensammelstab Papier-tuhlfänger Testanleitung Anleitungen zur tuhlprobenentnahme für den Patienten Zusätzlich benötigte Materialien: toppuhr, Einmalhandschuhe Lagerung und tabilität Den Test bei Raumtemperatur oder im Kühlschrank lagern (4 30 C). Der Test reagiert empfindlich auf Feuchtigkeit und hohe Temperaturen. Deswegen den Test nicht hohen Temperaturen aussetzen und sofort nach Öffnen der Verpackung verwenden. Der Test ist nur bis zum angegebenen Verfallsdatum verwendbar. Vorsichtsmaßnahmen 1. Nur für den Einsatz zur In-vitro-Diagnostik. 2. Während der Probenbehandlung nicht essen/rauchen. 3. Möglichst Einweghandschuhe tragen und nach der Testdurchführung stets Hände waschen/desinfizieren. 4. pritzer und Aerosolbildung vermeiden. 5. Alle benutzten Einwegartikel im Restmüll entsorgen und kontaminierte Gegenstände/Oberflächen gründlich reinigen. 6. Test nicht mehr benutzen, falls die Verpackung eingerissen ist oder die Testeinheit erkennbare chäden aufweist. 7. Bei Fragen wenden ie sich bitte an die Preventis GmbH. Probenvorbereitung und Probennahme a) Geformte / feste tühle 1. Deckel des Probensammelröhrchens Abb.1a abschrauben (Abb. 1a). 2. Mit dem am Deckel befindlichen Probensammelstab in einem Durchgang an drei verschiedenen tellen in Abb. 2a die tuhlprobe einstechen (Abb. 2a). 3. Das Probensammelröhrchen mit der am Probensammelstab befindlichen Probe verschließen (Abb. 3a). Abb. 3a 4. Die tuhlprobe mit dem Puffer im tuhlprobenröhrchen gründlich durchmischen. Dafür entweder 15 ekunden lang einen Vortex verwenden oder unmittelbar vor dem Test 30 ekunden Abb. 4a lang kräftig schütteln (Abb. 4a). b) Flüssige oder halbfeste tühle 1. Die beiliegenden Pipetten verwenden, um eine tuhlprobe aufzuziehen Abb. 4: Probenvorbereitung und Probennahme (Abb. 1b ). 2. Das Probensammelröhrchen aufschrauben, 5 6 Tropfen der gesammelten tuhlprobe hineintropfen (Abb. 2b) und wieder verschließen (Abb. 3b). 3. Die tuhlprobe mit dem Puffer im tuhlprobenröhrchen gründlich durchmischen (Abb. 4b). Dafür entweder 15 ekunden lang einen Vortex verwenden oder unmittelbar vor dem Test 30 ekunden lang kräftig schütteln. Testdurchführung 1. Testkassette aus der Verpackung entnehmen und auf eine flache, trockene Oberfläche legen (Abb. 6). 2. pitze des Probensammelröhrchens abbrechen (Abb. 5). 3. Probensammelröhrchen umdrehen, über die Testkassette halten (Abb. 6) und 2 bis 3 Tropfen in das Probenauftragsfenster tropfen lassen. Bei korrekter Funktion des Tests wird das Ergebnisfenster in der Mitte der Testkassette unmittelbar von einer violetten Farbfront durchlaufen. 4. Das Ergebnis nach 10 Minuten auswerten. päter als 20 Minuten nicht mehr auswerten. Abb. 5 Abb. 6 tuhlprobe Ergebnisfenster Probenauftragsfenster Vorsicht: Die angegebene Interpretationszeit basiert auf einer Auswertung des Tests bei einer Raumtemperatur von C. Bei deutlich niedrigeren Raumtemperaturen ist die Zeit entsprechend zu verlängern. Abb.1b Abb. 2b Abb. 3b Abb. 4b pitze hier abbrechen

3 Testanleitung (für den professionellen Gebrauch) Testinterpretation 1. Im Ergebnisfenster (Mitte der Testkassette) erscheint auf der linken eite eine farbige Bande als Kontrolle für den korrekten Testablauf (C = Kontrollbande). 2. Rechts im Ergebnisfenster wird das Testergebnis durch das Erscheinen bzw. Nicht- Erscheinen einer weiteren farbigen Bande (T = Testbande) angezeigt. Positives Ergebnis Die Anwesenheit der beiden Banden C (links) und T (rechts) im Ergebnisfenster der Testkassette zeigt ein positives Ergebnis an, unabhängig vom Zeitpunkt des Erscheinens der beiden Banden (Abb. 7a). Achtung: Allgemein gilt, je höher die Konzentration des Antigens in der Probe, desto stärker erscheint die Testbande (T). Ist die Konzentration an H. pylori Antigen in der Probe gering und nahe der ensitivitätsgrenze des Tests, so ist die Testbande schwach gefärbt. Negatives Ergebnis Die alleinige Anwesenheit der violetten Kontrollbande (C) links im Ergebnisfenster zeigt ein negatives Ergebnis an (Abb. 7b). Ungültiges Ergebnis Wenn nach der Testdurchführung keine violette Kontrollbande (C) im Ergebnisfenster sichtbar wird (auch bei Erscheinen der Testbande rechts), ist der Test ungültig (Abb. 7c). Einige Ursachen für ungültige Testergebnisse sind: der Test wurde nicht ordnungsgemäß durchgeführt oder das Verfallsdatum ist überschritten. Es empfiehlt sich, die Probe mit einem neuen Test erneut zu testen. Achtung: Ein positives Ergebnis wird sich nicht verändern, sobald es nach 10 Minuten erscheint. Um Fehler bei der Auswertung zu vermeiden, sollte der Test jedoch nicht später als nach 20 Minuten Inkubationszeit abgelesen werden. Grenzen des Tests Der Inhalt dieses Tests ist für den qualitativen Nachweis von H. pylori Antigen bestimmt. 1. Die ensitivität des Tests hängt von der korrekten tuhlprobenentnahme ab. 2. Antimikrobiotika, Protonenpumpenhemmer und Wismut Präparate sind dafür bekannt, H. pylori-aktivitäten zu unterdrücken und können zu falschnegativen Ergebnissen führen. In solchen Fällen sollte der Test 2 Wochen nach Absetzen der Präparate wiederholt werden. 3. Proben, die aus wässrigem tuhl ohne oder nur sehr geringen festen Anteilen bestehen, können falsch negative Ergebnisse aufweisen. Obwohl der Test sehr zuverlässig H. pylori Antigen nachweist, können seltene Fehler auftreten. Bei fragwürdigen Ergebnissen müssen weitere klinisch verfügbare Tests durchgeführt werden. Wie bei allen diagnostischen Tests soll eine abschließende Befundung nicht aufgrund eines einzigen Resultats erstellt werden, sondern erst nach der vollständigen Abklärung des Krankheitsbildes durch den Arzt. Literatur 1. Marshall BJ, Warren J.R. (1984) Unidentified curved bacillus in the stomach of patients with gastritis and peptic ulceration. Lancet 1(8390): Peterson WL (1991) Helicobacter pylori and peptic ulcer disease. N Engl J Med 324: Mcguigan JE (1988) Peptic ulcer and gastritis. In Harrison s Principles of Internal Medicine, 12th Edition, 1988, Chapter 238, Podolsky I, Lee E, Cohen K, Paterson, WL (1989) Prevalence of C. Pylori in healthy subjects and patients with peptic diseases. Gastroenterology uppl:a394.abstract. 5. Graham DY et al. (1987) Campylobacter pylori detected non-invasively by the 13 C-urea breath test. Lancet 329 (8543): Talley NJ et al. (1991) erodiagnosis of Helicobacter pylori: comparison of enzyme-linked immunosorbent assays. J Clin Microbiol 29: Abb. 7a Abb. 7b positiv negativ Abb. 7: Testinterpretation Abb. 7c pezifität und Kreuzreaktivitäten Zur Bestätigung der pezifität des Tests wurden drei unterschiedliche Chargen des Tests verglichen. Folgende Analyte wurden getestet: Proben mit Triglycerid Konzentrationen bis zu 500 mg/ml, Bilirubin Konzentrationen bis zu 10 mg/100ml, hämolysierte Proben mit Hämoglobin Konzentrationen bis zu 10 mg/ml, saure Phosphatase aus Prostata in Konzentrationen bis zu 1000 miu/ml und Albumin in Konzentrationen bis zu 20 mg/ml. Alle diese Proben wurden analysiert und zeigten keine Beeinflussung oder Kreuzreaktivität mit dem Test. ungültig Kurzanleitung für die Durchführung des Die tuhlprobe mithilfe des Probensammelröhrchens und des Probensammelstabs sammeln. Das Probensammelröhrchen kräftig schütteln, um die tuhlprobe gut im Puffer zu verteilen. Vor Gebrauch die Testkassette aus der Verpackung entnehmen. Das Probensammelröhrchen aufrecht halten, während ie die pitze abbrechen. Aus dem Probensammelröhrchen 2 3 Tropfen in das Probenauftragsfenster reintropfen lassen, möglichst ohne feste Partikel. Das Ergebnis nach 10 Minuten ablesen. Vertrieb durch: Preventis GmbH tubenwald-allee 8a Bensheim, Germany Fon: Fax: info@preventis-online.de Verwendete ymbole: Temperaturbegrenzung In-vitro-Diagnostikum: nur zur Anwendung außerhalb des Körpers Artikelnummer Gebrauchsanweisung beachten Inhalt ausreichend für <n> Prüfungen tand: Hersteller Chargennummer Verwendbar bis Nicht zur Wiederverwendung MPC INTERNATIONAL.A. 26, Boulevard Royal 2449 Luxembourg, Luxembourg

4 Arztinfo Helicobacter pylori Infektion? chnelltest zum Nachweis von Helicobacter pylori Antigen in tuhl Der ist ein qualitativer immunologischer chnelltest zum Nachweis von H. pylori Antigen in tuhl. Er dient dem Nachweis einer Infektion mit H. pylori und ist sowohl zur Primärdiagnostik als auch zur Therapiekontrolle geeignet. H. pylori ist ein spiralförmiges Bakterium, das sich in der menschlichen Magenwand festsetzen kann. Durch seinen toffwechsel setzt H. pylori ätzendes Ammoniak frei, das die Magenschleimhaut schädigt und schwerwiegende Folgeerscheinungen nach sich zieht. H. pylori spielt so bei einer Reihe von gastrointestinalen Erkrankungen eine Rolle. Das Bakterium wird z.b. als ätiologischer Faktor der chronischen B-Gastritis und des nichtmedikamentös bedingten Ulcus duodeni angesehen. Zusätzlich kann eine H. pylori-infektion auch zur Entstehung eines distalen Magentumors führen. Möglichkeiten zur Diagnostik: nicht-invasive Tests sind im Kommen Die Diagnostik zum Nachweis einer Infektion mit H. pylori ist inzwischen vielfältig. Neben den invasiven Methoden wie dem histologischen Nachweis, dem mikrobiologischen Nachweis oder dem Urease-chnelltest (Biopsien erforderlich) stehen auch nicht-invasive Methoden wie der 13 C-Harnstoff-Atemtest oder der Nachweis von Antikörpern bzw. von bakteriellem Antigen zur Verfügung. Da der 13 C-Harnstoff-Atemtest relativ teuer und auch personell aufwändig ist, haben sich inzwischen Labortests zur Bestimmung von H. pylori-antikörpern im erum bzw. von -Antigen in tuhl etabliert. Was bestimmen: Antikörper oder Antigen? Wann aber sollen nun Antikörper, wann Antigene bestimmt werden? Eine Infektion mit H. pylori führt zu einer systemischen Immunantwort: Antikörper können daher nachgewiesen und zur Diagnostik genutzt werden. Nach einer erfolgreichen Eradikationstherapie wurde das Bakterium zwar abgetötet, Antikörper persistieren jedoch noch Monate bis Jahre. Aus diesem Grund ist die Bestimmung von Antikörpern nur sinnvoll bei der Primärdiagnostik. Zur Kontrolle einer Eradikationstherapie empfiehlt sich die Bestimmung von Antigen, denn das ist nach erfolgreicher Therapie zusammen mit den Bakterien aus dem Körper ausgeschieden worden und nicht mehr nachweisbar. Indikationen für eine Bestimmung von H. pylori-antigen mit dem Primärdiagnostik bei Verdacht auf eine H. pylori-infektion Kontrolle einer Eradikationstherapie (4-6 Wochen nach Beendigung der Therapie) Mit dem kann nun einfach und schnell ein H. pylori-nachweis durchgeführt werden. Ihre Patienten erhalten ein spezielles tuhlpobenröhrchen mit nach Hause und liefern dieses wieder in der Praxis ab. Die Abarbeitung des ist ganz einfach. Innerhalb weniger Minuten können ie Ihren Patienten dann das Ergebnis mitteilen.

5 Arztinfo Weitere Infos zu diesem und anderen Tests senden wir Ihnen auf Anfrage gerne zu. Zu beachten ist der Einfluss medikamentöser Behandlungen auf fast alle Nachweismethoden. Vor einer H. pylori- Diagnostik sollte daher eine Medikamentenpause von mindestens 14 Tagen eingehalten werden (gilt z. B. für Proteininhibitoren [PPI], Antibiotika oder Wismutpräparate; keinen Einfluss haben dagegen Antazida, die zur Überbrückung einer PPI-Pause dienen können). Bei oberer gastrointestinaler Blutung ist die Diagnose einer H. pylori-infektion erschwert, da nahezu alle Arten der Diagnostik durch Interaktionen mit dem Blut beeinflusst werden können. Eine Kombination mehrerer Testverfahren ist in diesem Fall angezeigt. Einfache Testdurchführung des Die tuhlprobe mithilfe des Probensammelröhrchens und des Probensammelstabs sammeln. Das Probensammelröhrchen kräftig schütteln, um die tuhlprobe gut im Puffer zu verteilen. Vor Gebrauch die Testkassette aus der Verpackung entnehmen. Das Probensammelröhrchen aufrecht halten, während ie die pitze abbrechen. Aus dem Probensammelröhrchen 2 3 Tropfen (bei flüssigen oder halbfesten tühlen 5 6 Tropfen) in das Probenauftragsfenster reintropfen lassen, möglichst ohne feste Partikel. Das Ergebnis nach 10 Minuten ablesen. Testinterpretation 1. Im Ergebnisfenster (Mitte der Testkassette) erscheint auf der linken eite eine farbige Bande als Kontrolle für den korrekten Testablauf Abb. 1a Abb. 1c (C = Kontrollbande). 2. Rechts im Ergebnisfenster wird das Testergebnis durch das Erscheinen bzw. Nicht-Erscheinen positiv einer weiteren farbigen Bande (T = Testbande) Abb. 1b angezeigt. Positives Ergebnis: Die Anwesenheit der beiden ungültig Banden C (links) und T (rechts) im Ergebnisfenster der Testkassette zeigt ein positives Ergebnis an, unabhängig vom Zeitpunkt des Erscheinens der beiden Banden (Abb. 1a). negativ Abb. 1: Testinterpretation Achtung: Allgemein gilt, je höher die Konzentration des Antigens in der Probe, desto stärker erscheint die Testbande (T). Ist die Konzentration an H. pylori Antigen in der Probe gering und nahe der ensitivitätsgrenze des Tests, so ist die Testbande schwach gefärbt. Negatives Ergebnis: Die alleinige Anwesenheit der violetten Kontrollbande (C) links im Ergebnisfenster zeigt ein negatives Ergebnis an (Abb. 1b). Ungültiges Ergebnis: Wenn nach der Testdurchführung keine violette Kontrollbande (C) im Ergebnisfenster sichtbar wird (auch bei Erscheinen der Testbande rechts), ist der Test ungültig (Abb. 1c). Einige Ursachen für ungültige Testergebnisse sind: der Test wurde nicht ordnungsgemäß durchgeführt oder das Verfallsdatum ist überschritten. Es empfiehlt sich, die Probe mit einem neuen Test erneut zu testen. Achtung: Ein positives Ergebnis wird sich nicht verändern, sobald es nach 10 Minuten erscheint. Um Fehler bei der Auswertung zu vermeiden, sollte der Test jedoch nicht später als nach 20 Minuten Inkubationszeit abgelesen werden. Mai 2016 Literatur 1. Marshall BJ, Warren J.R. (1984) Unidentified curved bacillus in the stomach of patients with gastritis and peptic ulceration. Lancet 1(8390): Peterson WL (1991) Helicobacter pylori and peptic ulcer disease. N Engl J Med 324: Mcguigan JE (1988) Peptic ulcer and gastritis. In Harrison s Principles of Internal Medicine, 12th Edition, 1988, Chapter 238, Podolsky I, Lee E, Cohen K, Paterson, WL (1989) Prevalence of C. Pylori in healthy subjects and patients with peptic diseases. Gastroenterology uppl:a394.abstract. 5. Graham DY et al. (1987) Campylobacter pylori detected non-invasively by the 13 C-urea breath test. Lancet 329 (8543): Talley NJ et al. (1991) erodiagnosis of Helicobacter pylori: comparison of enzyme-linked immunosorbent assays. J Clin Microbiol 29: Preventis GmbH tubenwald-allee 8a Bensheim, Germany Fon: Fax: info@preventis-online.de

6 Wissenschaftlicher Hintergrund Eine Infektion mit H. pylori führt zu einer systemischen Immunantwort: Antikörper können daher nachgewiesen und zur Diagnostik genutzt werden. Nach einer erfolgreichen Eradikationstherapie wurde das Bakterium zwar abgetötet, Antikörper persistieren jedoch noch Monate bis Jahre. Aus diesem Grund ist die Bestimmung von Antikörpern nur sinnvoll bei der Primärdiagnostik. Zur Kontrolle einer Eradikationstherapie empfiehlt sich die Bestimmung von Antigenen, denn diese sind nach erfolgreicher Therapie zusammen mit den Bakterien aus dem Körper ausgeschieden worden und nicht mehr nachweisbar.