1. Arbeitsanleitung W3A
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- Stanislaus Schulz
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1 Schmucklilie oder Liebesblume() Fotos aus unserem Vorgarten 1. Arbeitsanleitung W3A 1. Frische Stängel in AFE gelegt 1 Tag. 2. Ein Stängel in Holundermark eingeklemmt und im HAGA-Handmikrotom geschnitten. Beim Schnitt mit 70% Ethanol befeuchtet. 3. Schnitte in 70% Ethanol einlegen (Uhrglas) 10 Minuten 4. Drei Schnitte aus einer Serie mit Stereomikroskop ausgesucht. 5. Die Schnitte in ein Uhrglas überführt, in dem die Färbung durchgeführt wird. 6. Fixiermittel auswaschen in 50%-Ethanol 5 Minuten 30%-Ethanol 3 Minuten 3 mal mit Aqua purificata auswaschen je 1 Minute 7. Färbung 2 Komponenten W3A Acriflavin/Acridinrot 5 Minuten 2 mal mit Aqua purificata auswaschen je 30 Sekunden W3A Astrablau 2% 30 Sekunden 3 mal mit Aqua purificata auswaschen je 1 Minute 8. In Isopropanol entwässert 1. Stufe 20 Sekunden 2. Stufe 20 Sekunden 3. Stufe 5 Minuten 9. Einschließen in Euparal und eine M10-Mutter auf Deckglas gelegt. 10. Objektträger für 2 Tage auf die Wärmebank gelegt. 11. Danach zum weiteren Aushärten in eine Objektträgermappe gelegt. Schmucklilie W3A AAFC FCA.doc Seite 1 von 11 Mooßen August 2012
2 2. Arbeitsanleitung W3A Schmucklilie 1---Frische Stängel liegen in AFE seit 12 Tagen. 2---Ein Stängel ohne Holundermark eingeklemmt und im HAGA-Handmikrotom geschnitten. Beim Schnitt mit 70% Ethanol befeuchtet. (50µm dick) 3---Schnitte in 70% Ethanol einlegen (Uhrglas) 10 Minuten 4---Drei Schnitte aus einer Serie mit Stereomikroskop ausgesucht. 5---Die Schnitte in ein Uhrglas überführt, in dem die Färbung durchgeführt wird. 6---Fixiermittel auswaschen in 50%-Ethanol 5 Minuten %-Ethanol 3 Minuten mal mit Leitungswasser auswaschen je 1 Minute 9---Färbung W3A 10--Acridinrot 8 Minuten davon 5 Minuten leicht erwärmt mal mit Leitungswasser auswaschen 30 Sekunden 12--Acriflavin 1% ca. 12Sekunden 13--differenziert mit 30%-Ethanol bis keine Farbwolken abgehen mal mit Leitungswasser auswaschen je 1 Minute Teile Astrablau 2% + 2 Teil Acriflavin 1% 1 Minute mal mit Leitungswasser auswaschen je 1 Minute 17--Mit viel Isopropanol entwässert Stufe sofort abgesaugt Stufe sofort abgesaugt Stufe 5 Minuten 21-- Die feuchten Schnitte vom Uhrglas auf je einen Objektträger übertragen 22--Einschließen in Euparal und eine M10-Mutter auf das Deckglas gelegt. 23--Anschließend auf die Wärmebank 2 Tage Leider entstand bei Färbung und Einschluss ein zerrissener Schnitt. Schmucklilie W3A AAFC FCA.doc Seite 2 von 11 Mooßen August 2012
3 3. Arbeitsanleitung Etzold grün AAFC 1---Frische Stängel liegen in AFE seit 14 Tagen. 2---Ein Stängel ohne Holundermark eingeklemmt und im HAGA-Handmikrotom geschnitten. Beim Schnitt mit 70% Ethanol befeuchtet. (50µm dick) 3---Schnitte in 70% Ethanol einlegen (Uhrglas) 10 Minuten 4---Drei Schnitte aus einer Serie mit Stereomikroskop ausgesucht. 5---Fixiermittel auswaschen in 50%-Ethanol 3 Minuten %-Ethanol 3 Minuten mal mit Aqua purificata auswaschen je 1 Minute 8---Jeden Schnitt auf je einen Objektträger überführt, auf dem die Färbung durchgeführt wird. 9---Färbung mit Etzold grün wässrig (AAFC) 10--Färbezeit 7 Minuten mal mit Aqua purificata spülen 1 Minute 12--Mit viel Isopropanol entwässert Stufe 30 Sekunden Stufe 3 Minuten Stufe 5 Minuten 16--Einschließen in Euparal und eine M10-Mutter auf das Deckglas gelegt. 17--Anschließend auf die Wärmebank 2 Tage 4. Arbeitsanleitung Etzold blau FCA 1---Frische Stängel liegen in AFE seit 14 Tagen. 2---Ein Stängel ohne Holundermark eingeklemmt und im HAGA-Handmikrotom geschnitten. Beim Schnitt mit 70% Ethanol befeuchtet. (50µm dick) 3---Schnitte in 70% Ethanol einlegen (Uhrglas) 10 Minuten 4---Drei Schnitte aus einer Serie mit Stereomikroskop ausgesucht. 5---Fixiermittel auswaschen in 50%-Ethanol 3 Minuten %-Ethanol 3 Minuten mal mit Aqua purificata auswaschen je 1 Minute 8---Jeden Schnitt auf je einen Objektträger überführt, auf dem die Färbung durchgeführt wird. 9---Färbung mit Etzold blau wässrig (FCA) 10 Färbezeit 7 Minuten mal mit Aqua purificata spülen 30 Sekunden 12 2 mal mit 30%-Ethanol spülen je 30 Sekunden 13--Mit viel Isopropanol entwässert Stufe 1 Minute Stufe 3 Minuten 16--Einschließen in Euparal und eine M10-Mutter auf das Deckglas gelegt. 17--Anschließend auf die Wärmebank 2 Tage Schmucklilie W3A AAFC FCA.doc Seite 3 von 11 Mooßen August 2012
4 1. Arbeitsanleitung W3A Zeiss 1,0 / 0,04 DP56b 01 B01PL#Pi1AxPaPi.jpg 2. Arbeitsanleitung W3A Zeiss 1,0 / 0,04 DP56e 01 B01PL#Pi1AxPa.jpg Schmucklilie W3A AAFC FCA.doc Seite 4 von 11 Mooßen August 2012
5 3. Arbeitsanleitung Etzold grün AAFC Zeiss 1,0 / 0,04 DP57a 01 B01PL#Pi1AxPaPi.jpg 4. Arbeitsanleitung Etzold blau FCA Zeiss 1,0 / 0,04 DP58a 01 BM01PL#Pi1AxPa.jpg Schmucklilie W3A AAFC FCA.doc Seite 5 von 11 Mooßen August 2012
6 1. Arbeitsanleitung W3A Zeiss 2,5 / 0,08 DP56b 02 B02PL#Pi1AxPaPi.jpg 2. Arbeitsanleitung W3A Zeiss 2,5 / 0,08 DP56e 02 B02PL#Pi1AxPa.jpg Schmucklilie W3A AAFC FCA.doc Seite 6 von 11 Mooßen August 2012
7 3. Arbeitsanleitung Etzold grün AAFC Zeiss 2,5 / 0,08 DP57a 02 B02PL#Pi1AxPaPi.jpg 4. Arbeitsanleitung Etzold blau FCA Zeiss 2,5 / 0,08 DP58a 02 B02PL#Pi1AxPa.jpg Schmucklilie W3A AAFC FCA.doc Seite 7 von 11 Mooßen August 2012
8 1. Arbeitsanleitung W3A Müller 4 / 0,1 DP56b 03 B04PL#Pi1AxPaPi.jpg 2. Arbeitsanleitung W3A Müller 4 / 0,1 DP56e 03 B04PL#Pi1AxPa.jpg Schmucklilie W3A AAFC FCA.doc Seite 8 von 11 Mooßen August 2012
9 3. Arbeitsanleitung Etzold grün AAFC Müller 4 / 0,1 DP57a 03 B04PL#Pi1AxPaPi.jpg 4. Arbeitsanleitung Etzold blau FCA Müller 4 / 0,1 DP58a 03 B04PL#Pi1AxPa.jpg Schmucklilie W3A AAFC FCA.doc Seite 9 von 11 Mooßen August 2012
10 1. Arbeitsanleitung W3A Müller 10 / 0,25 achromat DP56b 04 B10AC#AxPaPi.jpg 2. Arbeitsanleitung W3A Müller 10 / 0,25 achromat DP56e 04 B10AC#Pi1AxPa.jpg Schmucklilie W3A AAFC FCA.doc Seite 10 von 11 Mooßen August 2012
11 3. Arbeitsanleitung Etzold grün AAFC Müller 10 / 0,25 achromat DP57a 04 B10AC#AxPaPi.jpg 4. Arbeitsanleitung Etzold blau FCA Müller 10 / 0,25 achromat DP58a 04 B10AC#Pi1AxPa.jpg Schmucklilie W3A AAFC FCA.doc Seite 11 von 11 Mooßen August 2012
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