In vino veritas Allergennachweis im Wein schafft Klarheit

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1 R-Biopharm AG In vino veritas Allergennachweis im Wein schafft Klarheit Dr. Mareike Richter Bernkastel-Kues R-Biopharm AG An der neuen Bergstraße Darmstadt, Germany Risikoabschätzung Verbreitung von Allergien (Beispiel USA) FDA, 2006, Approaches to Establish Thresholds for Major Food Allergens and for Gluten in Food 1

2 1 Liter Wein enthält niedrigste auslösende Dosis* 0.12 mg Casein 1.2 mg 0.04 mg Eiweiss Protein 0.13 mg * Lowest observed adverse effect levels (LOAEL) FDA, 2006, Approaches to Establish Thresholds for Major Food Allergens and for Gluten in Food Gesetzlicher Hintergrund 2

3 Europäische Gesetzgebung EC-Directive 2000/13/EC 2003/89/EC 2005/26/EC 2006/142/EC 2007/68/EC Core statement Basis for declaration Amending Annex IIIa (list of 12 allergens) Exception for wine fining agents fish gelatine, isinglass, lysozyme, ovalbumine, milk (casein) until Amending Annex IIIa (lupine, molluscs) Permanent exception for wine fining agents fish gelatine and isinglass Extension for all others until Extension for all others until Extension for all others until Ab Hinweis Enthält auf dem Weinetikett Casein Ei (Ovalbumin) Lysozym Artikel 6 Absatz 3a in Verbindung mit Anhang IIIa der Richtlinie 2000/13/EG 3

4 Wann muss gekennzeichnet werden? Wenn Allergene im Wein vorhanden sind Wenn Allergene im Wein nicht nachweisbar sind, entfällt die Kennzeichnungspflicht? Resolution OIV/OENO 427/2010 Kriterien für Methoden zur Quantifizierung von potentiell allergenen Rückständen eiweißhaltiger Schönungsmittel im Wein 4

5 Zur Bestimmung allergener Rückstände eiweißhaltiger Schönungsmittel in Weinen sollten Nachweisverfahren wie die Sandwich- oder kompetitive, direkte oder indirekte ELISA-Technik herangezogen werden (...) Methode für Weine geeignet (verschiedene chemische Eigenschaften, Reifegrade, ) vergleichbar bei unterschiedlicher Weinherstellung Nachweiskriterien nach OIV Resolution 427/2010 LOD 0,5 mg/l (ppm) Allergen (Casein, Ovalbumin, Lysozym) LOQ 1 mg/l (ppm) 5

6 Technologie ELISA RIDASCREEN ELISA - Spezifikationen 1. Spezifität des Antikörpers Nachweis in hoch-prozessierten Lebensmitteln Niedrige Kreuzreaktivität 2. Standards / Kalibrator Kalibrierung auf standardisiertes Material / international zertifiziertes Referenzmaterial / übliche allergene Proteine 3. Extraktionseffizienz Effektiver Extraktionspuffer und Prozedur nötig Anwendbar für hoch-prozessierte Proben 6

7 Zwei ELISA Technologien existieren: Sandwich ELISA Kompetitiver ELISA Sandwich ELISA 7

8 Allergennachweis nach OIV (LOD <0,5ppm, LOQ <1ppm) Hygienekontrolle nach HACCP (0,01 ppm Ovalbumin) 8

9 Weißweine Casein Rotweine Ei Grand Cru, Winzenberg < LOQ Italy, Sicilia forte < LOQ Saraceno, Vino Bianco < LOQ Italy, Trentino 1.7 ppm Vernatsch < LOQ Germany, Cabernet Sauvignon < LOQ Baglio Fici, Vino bianco Sicilia < LOQ Italy, Cabernet Veneto < LOQ Fendo di Archia Chardonnay Sicilia < LOQ Montepulciano Abruzzo < LOQ Chardonnay < LOQ Birgi Marsala Cabernet < LOQ Obernhofer Goetheberg Germany < LOQ Rosso Puglia < LOQ Riesling Rheingau < LOQ Cantine la Rosa Merlot < LOQ Duce di Scanzano, Vino Rosso < LOQ Validierungsdaten ELISA 9

10 RIDASCREEN FAST Casein Spike (mg/l Casein) Messwert (mg/l Casein) Wiederfindung (%) Weißwein Casein Rotwein Casein Wiederfindung Casein in Wein: % RIDASCREEN FAST Lysozym Spike (mg/l Lysozym) Messwert (mg/l Lysozym) Wiederfindung (%) Weißwein Lysozym Rotwein Lysozym Wiederfindung Lysozym in Wein: % 10

11 RIDASCREEN FAST Ei/Egg Protein Rotwein Eiweiss- Extrakt* Spike (mg/l) Zielwert (mg/l Volleipulver) Messwert Wiederfindung (mg/l (%) Volleipulver) 2,0 8,4 7,4 88 6,0 25,2 19,2 76 (gekocht) 18,0 75,6 61,8 82 Volleipulver 1,5 1,5 1,3 87 (NIST 4,5 4,5 4,9 109 RM 8445) 13,5 13,5 14,1 104 Eiweiss- 1,0 4,2 4,5 107 Pulver* 3,0 12,5 13, ,0 37,4 36,5 98 Wiederfindung Ei in Wein: % * 24% Eiweiß-Anteil im Volleipulver Feldstudie Rotwein FAST Ei/Egg Protein In vino ppm veritas Pinot Noir St. Laurent ppm Volleipulver <LOQ 1.1 <LOQ 1.1 before vorher after h later 6 24 after filtration application nach 2 h sedimentation 6 h sedimentation 24 h Nach Zugabe später Sedi- Sedi- Fil- Point men- of time men- tra- tation tation tion Bottle Flasche 11

12 2011, Am. J. Enol.Vitic. 62:3 In vino veritas Workshop Angebot Allergenworkshop ( ) Allergenmanagement und HACCP ( ) 12

13 In vino veritas RIDASCREEN FAST Assays Casein ß-Lactoglobulin Ei Gliadin Erdnuss Senf und viele andere Besuchen Sie uns am Stand. 13