Inhalt des Reagenziensatzes. Gebrauchsanweisung B R A H M S PCT LIA. B R A H M S Service

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1 Neuendorfstr. 25 D Hennigsdorf Immunoluminometrischer Assay (ILMA) zur Bestimmung von PCT (Procalcitonin) in Humanserum und Plasma (Coated Tube System) Artikelnummer: 54.1 (100 Bestimmungen) B R A H M S und B R A H M S PCT sind eingetragene Marken der. Andere, in diesem Dokument benutzte Produktnamen dienen zur Identifikation und können Marken und/oder eingetragene Warenzeichen ihrer jeweiligen Unternehmen sein. Inhalt des Reagenziensatzes Reagenz Menge für 100 Best. Inhalt A 1 Flasche, lyophilisiert Tracer, lumineszenzmarkierter (Akridinium-Derivat) anti-pct-antikörper (monoklonal, Maus), blau eingefärbt, 29 ml nach Rekonstitution mit Puffer B B 1 Flasche à 29 ml Puffer, zur Rekonstitution des Tracers A, gebrauchsfertig C 2 x 50 Stück Coated tubes (Teströhrchen), beschichtet mit anti-pct-antikörper (monoklonal, Maus), gebrauchsfertig G 1 Flasche à 4 ml Nullserum (Humanserum), zur Rekonstitution der Standards bzw. Kalibratoren und Kontrollen, gebrauchsfertig W 2 Flaschen à 11 ml B R A H M S Waschlösung universal, konzentriert, 11 ml S1, S2, S3, 6 Flaschen, lyophilisiert PCT-Standards (rekombinant). Vor Gebrauch mit je 0,25 ml S4, S5, S6 Nullserum rekonstituieren. Konzentrationsbereiche: 0,08 (def.); 0,3 0,7; 1,5 2,5; 16 24; ; ng/ml Exakte Konzentrationen siehe Beipackzettel. K1, K2 2 Flaschen, lyophilisiert PCT-Kontrollen 1 und 2 (rekombinant). Vor Gebrauch mit je 0,25 ml Nullserum rekonstituieren. Konzentrationen siehe Beipackzettel. REF siehe Verfallsdatum auf dem Etikett 2 8 C Gebrauchsanweisung B R A H M S PCT LIA Datum: (Früher datierte Gebrauchsanweisungen sind ungültig.) Geschützt durch folgende Patente: USA N , N ; Europa N , No , N , N ; Deutschland N , N , N ; Japan N , N ; Australien N ; China N ZL X; Russland N ; Südafrika N 93/6042 Inhaltliche Änderungen im Vergleich zur Vorgängerversion Entfernung der PCT Mastercurve B R A H M S Service Anschrift Neuendorfstr. 25 D Hennigsdorf Zentrale Tel.: 03302/883 0 Fax: 03302/ info@brahms.de Bestellannahme Tel.: 03302/ , 700, 800 Fax: 03302/ order@brahms.de Kundenservice Tel.: 03302/ Fax: 03302/ service@brahms.de Internet B R A H M S PCT LIA Arbeitsanleitung (Version R23de) Seite 1 von 6

2 Einführung Der B R A H M S PCT LIA ist ein immunoluminometrischer Assay (ILMA) zur Bestimmung von PCT in Humanserum und Plasma. Dabei werden zwei antigenspezifische monoklonale Antikörper, die das Procalcitonin (Antigen) an zwei verschiedenen Stellen dem Calcitonin- und dem Katacalcin-Anteil binden, im Überschuß eingesetzt. Einer der beiden Antikörper ist lumineszenzmarkiert (Tracer), der andere ist auf der Innenseite der Röhrchen fixiert (Coated tube System). Im Verlauf der Inkubation reagieren beide Antikörper mit den Procalcitonin-Molekülen der Probe zu sogenannten Sandwich- Komplexen, wodurch der lumineszenzmarkierte Antikörper an die Röhrchenoberfläche gebunden wird. Nach dem Reaktionsende wird der verbleibende Tracerüberschuß durch sorgfältiges Waschen vollständig aus den Röhrchen entfernt und verworfen. Wichtige Hinweise Hinweis: Die Ergebnisse des B R A H M S PCT LIA müssen in Zusammenhang mit allen Laborbefunden sowie dem Gesamtzustand des Patienten bewertet werden. Warnung: In diesem Reagenziensatz sind Materialien (z. B. Serum) humanen Ursprungs enthalten. Zur Herstellung werden nur Materialien verwendet, die auf HBsAg sowie HIV I/II- und HCV-Antikörper getestet und negativ befundet sind. Da trotzdem eine potentielle Infektiösität nicht ausgeschlossen werden kann, müssen bei der Handhabung von Reagenzien und Patientenproben die allgemein anerkannten Vorsichtsmaßregeln und Labortechniken eingehalten werden. Folgende Reagenzien des Kits enthalten Natriumazid in Konzentrationen < 0,1 Gew.-% als Konservierungsmittel: Puffer B und Nullserum. Verschlucken und Berührung mit der Haut oder den Schleimhäuten ist zu vermeiden. Haltbarkeit und Lagerungsbedingungen Alle Reagenzien müssen bis zur Verwendung bei 2 8 C in der Kitverpackung gelagert werden. Die auf der Kitverpackung und den Etiketten dieses Reagenziensatzes angegebenen Verfallsdaten sind unbedingt zu beachten. Die verdünnte Waschlösung ist bis zu 4 Wochen verwendbar, wenn die Lagerung bei 2 8 C erfolgt. Verkeimte Waschlösung darf nicht verwendet werden; diese ist an einer Trübung bzw. einem ph-wert < 6 zu erkennen. Der nach dem Waschen an der Röhrchenwand verbliebene Traceranteil wird durch die Messung des Lumineszenzsignals in einem dafür geeigneten Luminometer unter Verwendung der B R A H M S Basiskit LIA -Reagenzien ermittelt. Die Größe des Lumineszenzsignals () ist der PCT-Konzentration der jeweiligen Probe direkt proportional. Über die Lumineszenzsignal- Werte der mitgeführten Standards (bekannte Antigenkonzentrationen; kalibriert an synthetischem, intaktem humanem Procalcitonin) läßt sich eine Standardkurve erstellen, an der die unbekannten PCT-Konzentrationen der Patientenseren bzw. - plasmen abgelesen werden können. Die reagenzienspezifischen EG-Sicherheitsdatenblätter nach 14 GefStoffV und EG-Richtlinie 91/155/EWG erhalten Sie auf Wunsch. Bitte wenden Sie sich an unseren Kundenservice unter Tel.: 03302/ Sofern Glasflaschen im Reagenziensatz enthalten sind, weisen wir ausdrücklich auf eine eventuelle Bruch- und damit verbundene Verletzungsgefahr hin. Die Entsorgung von Reagenzien sowie aus den Testansätzen anfallender Abfälle muss unter Berücksichtigung der örtlichen behördlichen Vorschriften für Laborabfälle erfolgen. Die mit diesem Test erhaltenen Ergebnisse sollten immer im Zusammenhang mit einer klinischen Untersuchung, der Krankheitsgeschichte des Patienten und anderen Befunden ausgewertet werden, bevor bedeutende Therapiemaßnahmen eingeleitet werden. Wenn weniger als 100 Bestimmungen angesetzt werden, gelten für rekonstituierte Reagenzien folgende Lagerungsbedingungen: Die rekonstituierten Standards bzw. Kalibratoren und Kontrollen sind bei 20 C zu lagern (ein zehnmaliges Auftauen ist möglich); der rekonstituierte Tracer ist 3 Tage bei 2 8 C haltbar, ansonsten ist er bei 20 C zu lagern (ein viermaliges Auftauen ist möglich). Qualitätskontrolle Die Richtlinien der Bundesärztekammer zur Qualitätssicherung quantitativer laboratoriumsmedizinischer Untersuchungen in der jeweils aktuell gültigen Version müssen beachtet werden (siehe Mittels laborinterner und/oder kommerziell erhältlicher Kontrollmaterialien sollten Richtigkeit und Präzision des Tests überwacht werden. So sollten z. B. die im Kit enthaltenen Kontrollen bei jedem Ansatz mitgeführt werden und deren Messergebnis innerhalb der im Beipackzettel genannten Akzeptanzbereiche liegen. Im Fall unakzeptabler Kontrollwerte wird empfohlen, das weitere Vorgehen an der in der Labordiagnostik üblichen Vorgehensweise der Ursachenermittlung und Korrektur auszurichten. B R A H M S PCT LIA Arbeitsanleitung (Version R23de) Seite 2 von 6

3 Referenzbereiche Hinweis: Der cut-off kann entsprechend der klinischen Situation variieren. Aus diesem Grund sollten die PCT-Ergebnisse immer im Kontext mit der konkreten klinischen Situation des Patienten und im Zusammenhang mit anderen Laborbefunden interpretiert werden. Die unten aufgeführten Referenzbereich stellen somit nur eine Orientierungshilfe dar. 1, 2, 3 D i a g n o s e d e r s y s t e m is c h b a k t e r i e l l e n I n f e k t i o n / S e p s i s SIRS, Sepsis, schwere Sepsis, und septischer Schock wurden entsprechend der Kriterien der ACCP/SCCM Konsensuskonferenz kategorisiert. 6 PCT < 0,5 ng/ml Lokale bakterielle Infektion ist möglich Systemische Infektion (Sepsis) ist unwahrscheinlich PCT > 0,5 und < 2ng/ml Eine systemische Infektion (Sepsis) ist möglich, aber es sind mehrere Zustände bekannt, die ebenfalls PCT induzieren (siehe unten). PCT> 2 und < 10 ng/ml Systemische Infektion (Sepsis) ist wahrscheinlich, sofern keine anderen Gründe bekannt sind PCT > 10 ng/ml Ausgeprägte systemische Entzündungsreaktion, nahezu ausschließlich infolge einer schweren bakteriellen Sepsis oder eines septischen Schocks. Vorsicht: PCT-Spiegel unter 0,5 ng/ml schließen eine Infektion nicht aus, da lokale Infektionen (ohne systemische Anzeichen) mit niedrigen PCT-Spiegeln in Verbindung gebracht werden können. Wenn die PCT Messung sehr früh nach Eintritt der Bakterien durchgeführt wurde (üblicherweise < 6 Stunden), können die Werte noch niedrig sein. In diesem Fall muß der PCT- Spiegel 6 24 Stunden später nochmals bestimmt werden. 4 Geringes Risiko für die Entwicklung einer schweren systemischen Infektion (schwere Sepsis). 6 Moderates Risiko für die Entwicklung einer schweren systemischen Infektion (schwere Sepsis). 6 Engmaschige Überwachung des Patienten ist notwendig sowohl klinisch als auch durch weitere Bestimmungen des PCT- Spiegels innerhalb von 6 24 Stunden. Hohes Risiko für die Entwicklung einer schweren systemischen Infektion (schwere Sepsis). 6 Hohe Wahrscheinlichkeit einer schweren Sepsis oder eines septischen Schocks. 6 Erhöhte PCT-Spiegel müssen nicht immer in Zusammenhang mit einer systemischen Infektion stehen: Es wurden einige wenige Situationen beschrieben, in denen PCT aufgrund nicht-infektiöser Ursachen erhöht sein kann. Dazu gehören zum Beispiel - Neugeborene < 48 Stunden alt (physiologisch erhöht) 8 - die ersten Tage nach einem größeren Trauma, einem großen chirurgischen Eingriff, Verbrennungen, Behandlung mit OKT3- Antikörpern und anderen Medikamenten, die die Freisetzung von proinflammatorischen Zytokinen auslösen, kleinzelliges Bronchialkarzinom, medulläres C-Zell-Karzinom der Schilddrüse 4, - Patienten mit dauerndem oder schwerem kardiogenem Schock, andauernden, schweren Organperfusionsanomalien. 4 Patienten mit normalen Werten: PCT Konzentrationen im Serum oder Plasma gesunder Personen betragen mit diesem Assay < 0,3 ng/ml, und liegen somit unter der Bestimmungsgrenze des Assays. Die Bestimmung normaler Werte mit einem hoch sensiblen Assay zeigten, dass normale Werte unter 0,05 ng/ml liegen. 7 Bibliographie 1. Müller B. et al.: Calcitonin precursors are reliable markers of sepsis in medical intensive care unit. Crit. Care Med. 2000, 28(4): Harbarth S. et al.: Diagnostic value of procalcitonin, interleukin-6 and interleukin 8 in critically ill patients admitted with suspected sepsis. Am. J. Resp. Crit. Care Med. 2001, 164: Brunkhorst F.M. et al.: Procalcitonin for early diagnosis and differentiation of SIRS, sepsis, severe sepsis and septic shock. Intensive Care Med. 2000, 26(suppl.2): Meisner M.: Procalcitonin (PCT) A new, innovative infection parameter. Biochemical and clinical aspects. Thieme Stuttgart, New York 2000, ISBN: Meisner M. et al.: Procalcitonin Influence of temperature, storage, anticoagulation and arterial or venous asservation of blood samples on procalcitonin concentrations. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1997, 35 (8): American College of Chest Physicians/Society of Critical Care Medicine: Definitions for sepsis and organ failure and guidelines for the use of innovative therapies in sepsis. Crit Care Med 1992, 20: Morgenthaler N. et al.: Detection of procalcitonin (PCT) in healthy controls and patients with local infection by a sensitive ILMA. Clin Lab (5-6): Chiesa C. et al.: Clin Infect Dis (1998), 26: : Reliability of Procalcitonin Concentrations for the Diagnosis of Sepsis in Critically III Neonates. B R A H M S PCT LIA Arbeitsanleitung (Version R23de) Seite 3 von 6

4 Assaycharakteristika Verdünnung (mit Standardkurve) Probe Verdünnung gemessene Konzentration [ng/ml] 1 unverdünnt 1:2 1:4 1:8 1:16 2 unverdünnt 1:2 1:4 1:8 1:16 3 unverdünnt 1:2 1:4 1:8 1:16 30,9 15,1 7,08 3,5 1,63 errechnete Konzentration [ng/ml] 30,2 28,3 28,0 26,1 Mittelwert 28,2 482,0 247,0 125,0 62,2 32,2 494,0 500,0 497,5 515,2 Mittelwert 501,7 6,14 3,01 1,59 0,72 0,35 6,0 6,4 5,8 5,5 Mittelwert 5,9 Wiederfindung (%) Die Linearität von gelösten Proben ist im gesamten Konzentrationsbereich akzeptabel. Präzision Die analytische Assaysensitivität liegt bei ca. 0,1 ng/ml. Die funktionelle Assaysensitivität kleinster Meßwert, der mit einer Präzision von max. 20 % Interassayvarianz gefunden wird beträgt ca. 0,3 ng/ml. Die aliquoten Anteile von 14 über den Messbereich verteilten Proben wurden 20 Tage von 4 verschiedenen Testern unter Verwendung verschiedener Reagenzchargen in Duplikaten getestet. Die Profile der Gesamt- und der Testverlaufpräzision (Mittelwert der PCT Konzentration CV %) sind wie folgt: Gesamtpräzision Testverlaufpräzision Mittelwert CV % CV % (ng/ml) 00/20 0,54 13,4 4,0 00/21 2,61 8,7 3,1 Probe 1 0,14 16,6 10,0 Probe 2 0,43 13,9 6,3 Probe 3 1,00 9,6 4,0 Probe 4 2,46 7,9 3,4 Probe 5 2,44 9,6 4,3 Probe 6 2,17 9,5 3,3 Probe 7 4,92 8,9 2,5 Probe 8 14,1 7,1 2,4 Probe 9 43,2 5,3 2,7 Probe 10 34,2 7,1 2,5 Probe 11 66,6 5,7 2,8 Probe ,7 3,2 Wiederfindung Seren mit verschiedenen PCT-Konzentrationen wurde eine festgelegte Menge PCT zugesetzt. Die Wiederfindungswerte wurden als in einem akzeptablen Bereich ( %) befunden. Kalibrierung Die Standards werden als festgelegte PCT-Konzentrationen geliefert, der Bereich liegt zwischen 0, ng/ml. Die Konzentrationen für Kalibratoren wurden durch Sequenzierung von N-terminaler Aminosäure (Edmann-Methode) und durch Massenanalyse validiert. Das verwendete Material ist rekombinante menschliche PCT. Störende Substanzen: Die in der untenstehenden Tabelle aufgelisteten Serumbestandteile wurden im B R A H M S PCT LIA getestet. Das Testverfahren befolgt CLSI EP7-P, Störwirkungstests in der klinischen Chemie. Die aufgelisteten Konzentrationen wurden als ohne Auswirkung auf die Testgenauigkeit befunden. Einfluss von Medikamenten Ein Einfluss von antibiotischen chemischen Medikamenten, gefäßaktiven Medikamenten, Analgetika, Antikoagulantien, oder Diuretika auf die PCT-Messung wurde nicht beobachtet (siehe unten). Medikamente, die zu einer massiven Freisetzung von Zytokinen führen, wie etwa OKT3-Antikörmper, können unabhängig von einer Infektion zu einem Anstieg von PCT führen. Störende Substanz: Bilirubin (konjugiert) Triglycerid Hämoglobin Protein (Albumin) Imipenem Cefotaxim Vancomycin Dopamin Noradrenalin Dobutamin Heparin Furosemid Kalzitonin Katacalcin a-cgrp* ß-CGRP* Kalzitonin Lachs Kalzitonin Aal *Kalzitonin genverbundenes Peptid High dose hook effect Konzentration, bis zu der keine Interferenzen auftreten 40 mg/dl 643 mg/dl 500 mg/dl 1 g/dl 1,18 mg/ml 90 mg/dl 3,5 mg/ml 13 mg/dl 2 µg/ml 11,2 µg/ml 8000 U/l 2 mg/dl 8 ng/ml 30 ng/ml 30 ng/ml 30 ng/ml 30 µg/ml 30 µg/ml Der High Dose Hook -Effekt kommt bei immunometrischen Assay-Symstemen vor. Er bedeutet, dass bei sehr hohen PCT- Konzentrationen (über 900ng/ml nach Kalibrieren) fälschlicherweise niedrige PCT Ergebnisse angezeigt werden. Wenn ein PCT-Ergebnis über dem höchsten Standard liegt, sollen die Proben mit dem im Assay-Kit enthaltenen Verdünnungsserum (Nullserum) verdünnt werden. Der Test sollte nochmals durchgeführt werden, um die korrekte PCT-Konzentration zu erhalten. Doch selbst ohne diese Verdünnung wären alle Ergebnisse der Konzentrationswerte, die durch die verschiedenen Assay-Methoden erhalten wurden, im Bereich der höheren PCT- Konzentrationen angesiedelt, welche die Diagnose der Sepsis erlauben würde. B R A H M S PCT LIA Arbeitsanleitung (Version R23de) Seite 4 von 6

5 Testbeschreibung Inkubationsschema 1. Numerieren Teströhrchen (a, b) S1 S6 K1, K2 P1 etc. 2. Pipettieren Standards µl 20 Kontrollen µl 20 Patientenproben µl Pipettieren Tracer µl Inkubieren 1 h 1 h 15 min bei RT (18 25 C) schütteln ( U/min) 5. Dekantieren Teströhrchen mit 1 ml Waschlösung befüllen und dekantieren. 6. Waschen Jedes Teströhrchen viermal mit je 1 ml Waschlösung befüllen und jeweils dekantieren. Röhrchen anschließend 5 10 min auf Zellstoff über Kopf abtropfen lassen. 7. Einsortieren Teströhrchen im Luminometer einordnen. 8. Messung Messung im Luminometer durch automatische Zugabe der B R A H M S Basiskit LIA- Reagenzien 1 und 2 Probenbehandlung Es kann Serum oder Plasma verwendet werden, allerdings sollte bei der Verlaufskontrolle von Patienten immer mit gleicher Matrix gearbeitet werden. Proben, die nicht innerhalb von 24 Stunden nach Blutentnahme im Assay eingesetzt werden, müssen eingefroren und bei 20 C gelagert werden. Dreimaliges Einfrieren und Auftauen ist möglich. 5 Hinweise zur Testdurchführung Benutzen Sie keine Reagenzien, die das auf dem Etikett angegebene Verfallsdatum bereits überschritten haben. Die einzelnen Komponenten des Kits sind optimal aufeinander abgestimmt. Beim Austausch oder Mischen von Komponenten verschiedener Chargen kann die die Zuverlässigkeit der Ergebnisse nicht mehr gewährleisten. Bei großen Testserien werden Reagenzien derselben Chargenbezeichnung miteinander gepoolt. Für jede Testserie ist eine neue Arbeitskurve zu erstellen. Die Doppelbestimmung von Kalibratoren, Kontrollen und Patientenproben wird empfohlen. Die angegebene Reihenfolge der einzelnen Arbeitsschritte ist unbedingt einzuhalten. Patientenproben, deren ermittelter Konzentrationswert oberhalb des Messbereiches liegt, sind als > höchster Standard zu bewerten. Das Ergebnis darf nicht extrapoliert werden. Die entsprechende Patientenprobe sollte verdünnt und erneut getestet werden. Weitere Informationen erhalten Sie vom Kundenservice der. Testbeschreibung 1. Vorbereitungen Alle Kitkomponenten und die Patientenproben auf Raumtemperatur bringen. Standards und Kontrollen mit je 0,25 ml Nullserum (Reagenz G) rekonstituieren. Tracer rekonstituieren. Als Hilfestellung für eine ordnungsgemäße Kennzeichnung des rekonstituierten Tracers (Lot, Verfallsdatum) können unter der Artikelnummer Blankoetiketten (100 Stück) kostenlos bestellt werden. Alle flüssigen Komponenten auch die Patientenproben sind vor Gebrauch zu durchmischen (Schaumbildung vermeiden). Coated tubes beschriften (vorzugsweise a, b für Duplikate). Waschlösung herstellen: 11 ml Konzentrat mit destilliertem Wasser auf 550 ml auffüllen. Vor Verwendung anderer Waschlösungen empfehlen wir dringend, Rücksprache mit dem Hersteller oder Vertreiber zu nehmen. Luminometer in betriebsbereiten Zustand bringen (Einspülen der B R A H M S Basiskit LIA- Reagenzien). 2. Am Boden der Teströhrchen S1 a, b... S6 a, b werden je 20 µl PCT-Standard mit steigender Konzentration pipettiert, in die Röhrchen K1 a, b sowie K2 a, b werden je 20 µl Kontrollen und in die Röhrchen P1 a, b etc. je 20 µl Patientenserum oder Plasma pipettiert. Um mögliche Verschleppungen zu vermeiden, sollte für jede Probe eine neue Pipettenspitze eingesetzt werden. Hinweis Es wird empfohlen, während der Verlaufsmessung die Probenart nicht zu ändern. 3. In alle Teströhrchen werden 250 µl Tracer pipettiert. Hinweis Zur Minimierung von möglichen Verschiebungswirkungen sollte die empfohlene Arbeitszeit für die Schritte 2 und 3 insgesamt 15 Minuten betragen. 4. Die Teströhrchen werden auf einem Vibrationsschüttler kurz geschüttelt (um die Homogenität der Flüssigkeit zu gewährleisen), die mit Klebefolien abgedeckt und für 1 h 1 h 15 min bei Raumtemperatur (18 25 C) unter Schütteln (auf einem Horizontalschüttler) ( U/min) inkubiert. Unbedingt beachten: Die Inkubation soll lichtgeschützt erfolgen. Teströhrchen in keinem Fall direkter Lichteinwirkung aussetzen. 5. Nach Ablauf der Inkubationsphase wird zu allen Teströhrchen je 1 ml Waschlösung gegeben und anschließend dekantiert. Es ist strikt darauf zu achten, dass bei der Zugabe der Waschlösung auch der obere Teil der Röhrcheninnenwand vollständig mit Waschlösung benetzt wird. Nur auf diese Weise werden eventuelle Tracerreste, die am oberen Teil der Röhrcheninnenwand haften können, mitentfernt. B R A H M S PCT LIA Arbeitsanleitung (Version R23de) Seite 5 von 6

6 6. Danach werden alle Teströhrchen noch viermal mit je 1 ml Waschlösung befüllt (s. o. Punkt 5) und die Waschlösung jeweils dekantiert. Nach dem letzten Dekantierschritt werden die Röhrchen 5 10 min auf frischem Zellstoff über Kopf stehen gelassen, um so anhaftende Flüssigkeitsreste ablaufen zu lassen. Abschließend werden die Röhrchen nochmals kräftig auf dem Zellstoff aufgestoßen, damit letzte Flüssigkeitsreste entfernt werden. 7. Die Teströhrchen werden in der vom Messprotokoll vorgegebenen Reihenfolge in das Luminometer einsortiert. 8. Nach der automatischen Zugabe von jeweils 300 µl der B R A H M S Basiskit LIA -Reagenzien 1 und 2 werden die Lumineszenzsignale gemessen. Die empfohlene Messzeit beträgt 1 Sekunde pro Röhrchen. Die Arbeitsanleitung ist strikt einzuhalten! Der PCT- Standard ist bei jedem Assayansatz frisch anzusetzen, die Reagenzien wie beschrieben zu handhaben. Eine abweichende Handhabung der Reagenzien kann die Ergebnisse beeinflussen. In diesem Fall übernimmt keinerlei Garantien für die Gültigkeit so erzielter Ergebnisse. Auswertung Bei computergestützter Auswertung ist ein auf die gegebene Rechner-Messgerät-Kombination abgestimmtes Auswertungsprogramm (spline/unsmoothed) anzuwählen. Aus der resultierenden Standardkurve wird über die gemittelten Lumineszenzsignal-Werte der unbekannten Serumproben deren PCT-Konzentration direkt in ng PCT/ml abgelesen. Technische Unterstützung erhalten Sie beim Kundenservice der oder durch den jeweiligen Vertriebspartner bzw. Außendienstmitarbeiter. Berechnungsbeispiel Messwerte ( = Relative Light Units) eines AutoCliniLumaten LB 952 (Laboratorium Prof. Berthold, Wildbad, D). Teströhrchen (a) (b) (MW) ng PCT/ml Standard S (def.) 0,08 Standard S ,5 Standard S ,0 Standard S Standard S Standard S Patientenprobe P ,6 Die Signalwerte können je nach eingesetztem Messgerät variieren und stellen somit lediglich eine Orientierungshilfe dar. Erforderliche Geräte/Zubehör B R A H M S Basiskit LIA (bei B R A H M S Aktiengesellschaft zu bestellen) Mikroliterpipetten (20 µl, 250 µl) mit austauschbarer Kunststoffspitze Vibrationsmischer Horizontalschüttler Dispenser (5 ml) für B R A H M S Waschlösung universal, konzentriert, 11 ml destilliertes Wasser Luminometer mit zwei Injektoren Standardkurve ,01 0, PCT [ng/ml] Symbole Symbol Verwendung Symbol Verwendung Symbol Verwendung Hersteller CE-Konformitätszeichen gemäß der Directive 98/79/EC über In-Vitro- Diagnostika 50 Inhalt ausreichend für (Anzahl der) Tests, z.b. 50 Verwendbar bis Temperaturbegrenzung REF Artikelnummer/ Bestellnummer Grüner Punkt entsprechend deutscher Gesetzgebung B R A H M S PCT LIA Arbeitsanleitung (Version R23de) Seite 6 von 6