Krankheitsassoziation, Antikörperprävalenz und Spezifität

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1 AI Bindegewebserkrankungen Antinukleare Antikörper binden intrazelluläre und sind serologische Marker von systemischen rheumatischen Erkrankungen. Im Gegensatz zu indirekten Immunofluoreszenztests führen ELISAs kein Screening aller antinuklearen Antikörper durch, sondern nur für diejenigen, die für Bindegewebserkrankungen spezifisch sind. im EliA Symphony: U1-snRNP (human rekombinant U1 70 kd, A und C) Sm (aufgereinigt aus humanen HeLa-Zellen) SS-A/Ro (human rekombinant 52 kd und 60 kd) SS-B/La (human rekombinant) Scl-70 (humane rekombinante Topoisomerase 1) CENP (humanes rekombinantes CENP-B) Jo-1 (humane rekombinante Histidyl-tRNA- Synthetase dsdna Antigen Desoxyribonukleinsäure (DNA) als Antigen kann entweder doppelsträngig (dsdna) oder einzelsträngig (ssdna) sein, jedoch sind nur dsdna-antikörper spezifische Marker. Für die Verwendung in Anti-DNA-Tests wird DNA aus Gewebe, aus eukaryotischen Zellen, aus Bakterien oder aus Bakteriophagen genutzt. Zirkuläre Plasmid-DNA ist eine sehr geeignete Variante, da das Risiko, Einzelstränge einzubeziehen, sehr gering ist. Bei den EliA Tests wird rekombinante Plasmid-Doppelstrang-DNA als Antigen verwendet. Krankheitsassoziation, Antikörperprävalenz und Spezifität In Abhängigkeit von der verwendeten Methode und der Krankheitsaktivität variiert die Antikörper-Prävalenz zwischen weniger als 30 % und mehr als 90 % für Systemischen Lupus erythematodes (SLE). Anti-dsDNA-Antikörper gehören zu den ARA-Diagnosekriterien für SLE. Diese Testspezifität variiert stark in Abhängigkeit von der angewendeten Methode. Bei sehr sensitiven Methoden kann Anti-dsDNA bei Uveitis, Lupus erythematodes discoides, rheumatoider Arthritis, juveniler rheumatoider Arthritis und in einer weitgefächerten Basis von Patienten gefunden werden. In diesen Fällen handelt es sich meist um Antikörper des IgM-Isotyps oder mit geringer Avidität.

2 Gute Korrelation von Anti-dsDNA-Titer und, was wichtig für die Überwachung insbesondere von -Antikörpern mit hoher Avidität ist. Ein Anstieg des Antikörper-Titers kann eine Verschlimmerung der Erkrankung vorhersagen. Quantitatives Anti-dsDNA muss bei SLE-Patienten regelmäßig gemessen werden. Verdacht auf SLE, Überwachung von SLE.. Krankheitsassoziation, Antikörperprävalenz und Spezifität Autoantigen Erkrankung und Prävalenz Klinische Bedeutung dsdna SLE: % Als spezifischer Marker bei SLE korrelieren dsdna- Antikörper mit der Erkrankungsaktivität (Überwachung) und sind als Marker für Gewebeschädigung mit einem Anstieg des Risikos für eine Nephritis bei einer Spezifität von 95 % verbunden. RNP (70 kda, A, C) Sm (B, B', D) SLE: % MCTD: 100 % SLE: % U1 snrnp Antikörper zeigen eine gute Prognose hinsichtlich der Entwicklung einer Beteiligung der Nieren, auch wenn sie in Kombination mit Sm auftreten. MCTD wird durch hohe Konzentrationen von Anti-U1 snrnp definiert. Spezifischer Marker für SLE (Spezifität

3 SS-A/Ro (52 kd, 60 kd) SLE: % SS: % Neonataler Lupus: > 95 % SS-B/La SLE: 5-15 % SS: % Neonataler Lupus Scl-70 Zentromer (CENP-B) Jo-1 Sklerodermie: % CREST: 50 % (andere Quellen: %) Raynaud- Krankheit: % Poly- /Dermatomyositis: 30 % 99 %) Hohes Risiko für einen neonatalen Lupus, falls die Mutter SS-A/Ro- (insbesondere wenn gegen 52 kd gerichtet) und SS- B/La-Antikörper aufweist SS-B/La-Antikörper werden fast immer in Kombination mit Anti-SSA- Antikörpern gefunden; spezifischer für Sjögren-Syndrom als Anti-SS-A/Ro Spezifischer Marker für Sklerodermie (Spezifität %) Bei Patienten mit eingeschränkter Form von Sklerodermie Patienten zeigen oft eine Beteiligung der Lunge. Patienten, die Jo-1-Antikörper aufweisen, tendieren zu einer schweren Ausprägung der Erkrankung mit einem schlechten Ansprechen der Therapie Einzelne im Profil zeigen eine gute Korrelation zur, andere wiederum nicht. Zur Überwachung wird die Messung der einzelnen Spezifitäten empfohlen.

4 Verdacht auf Bindegewebserkrankung. RibP Antigen Systemischer Lupus erythematodes (SLE) ist eine Autoimmunerkrankung, die durch die Beteiligung von mehreren Organen charakterisiert ist, was zu Invalidität und erhöhter Mortalität führt. Antikörper gegen ribsosomales P-Protein (Anti Rib-P) reagieren gegen azidische phosphorylierte Ribosomenproteine P0, P1 und P2 (mit Molekularmassen von 38, 19 bzw. 17 kda) und befinden sich in der S60 Untereinheit von Ribosomen. Anti Rib-P kann bei ca. 15 bis 20 % der Patienten mit SLE festgestellt werden. Diese sind für SLE sehr spezifisch. Daher können sie auch als Diagnosemarker für die Erkrankung genutzt werden. Weiterhin wurde auch ein Zusammenhang mit bestimmten Manifestationen von Lupus, insbesondere mit neuropsychiatrischer, renaler und hepatischer Beteiligung, beschrieben. In Abhängigkeit von Studienaufbau, Studienpopulation und unterschiedlicher Sensitivität der Tests für die Erkennung von Anti-Rib-P sind die Ergebnisse jedoch widersprüchlich in Hinblick auf das Vorhandensein solcher Beziehungen. Die EliA Rib-P Wells sind mit humanen rekombinanten ribosomalen P-Proteinen (P0, P1, P2) beschichtet. Verdacht auf SLE. Schilddrüsenerkrankungen Thyreoperoxidase-Antikörper Thyreoperoxidase (TPO) katalysiert als membranständiges Hämoprotein (MG ca. 100 kda) sowohl die Jodierung von Thyreoglobulin (TG) als auch die Kopplung zweier Dijodtyrosin- Reste im TG-Molekül zur Bildung von Thyroxin. Die eigentliche Natur des mikrosomalen Antigens" war fast drei Jahrzehnte lang unbekannt, bis Portmann et al zeigen konnten, dass das mikrosomale Antigen mit TPO identisch ist. Sensitivität und Spezifität von TPO- Antikörpertests sind stark von der Reinheit und Qualität des Testantigens und insbesondere vom Nichtvorhandensein von TG-Kontaminanten abhängig.

5 Der ImmunoCAP Thyroid Peroxidase Test verwendet humanes rekombinantes TPO, das in eukaryotischen Zellen produziert wird (Baculovirus/Sf9-System). Krankheitsassoziation, Antikörperprävalenz und Spezifität Hashimoto-Thyroiditis (91-99 %) Morbus Basedow (71-97 %) Primäres Myxödem (40-70 %) Post-partum-Thyreoiditis (60 %) Subakute Thyroiditis (de Quervain) (sehr selten) Endokrine Orbitopathie (47 %) Struma simplex (25 %) Schilddrüsenkrebs (5 %) Kann auftreten bei organspezifischen Autoimmunerkrankungen auf, einschließlich perniziöser Anämie, Morbus Addison, Typ-I Diabetes mellitus, polyglanduläre endokrine Ausfallsyndrome etc. Gesunde Personen (5-15 %, höher bei älteren Personen, meist aber bei geringen Titern) Neue Tests haben Sensitivitäten und Spezifitäten von >95 %. Negative Tests können eine Diagnose von Thyreoiditis nahezu ausschließen. Quantitativ besteht bei Personen mit höheren Autoantikörperkonzentrationen eine Neigung dazu, eher für Hypothyreoidismus anfällig zu sein. Bei Verdacht auf Thyreoiditis Bei Schwangerschaft bei Frauen mit Familienanamnese mit thyroiden oder autoimmunbezogenen Problemen Antikörperisotyp Thyroglobulin-Antikörper Thyreoglobulin (TG) ist eine großes 670 kda Globulärglycoprotein bestehend aus zwei identischen disulfid-gekoppelten Untereinheiten. Der Großteil des Schilddrüsenjods ist mit diesem Prohormon, das eine wichtige Rolle in der Biosynthese der Schilddrüsenhormone T3 und T4 spielt, assoziiert. Etwa 75 % des Gesamtproteingehaltes des Schilddrüsenfollikels bestehen aus Thyreoglobulin. Aufgrund des hohen TG-Gehalts der Schilddrüse können mittels herkömmlicher Aufreinigungstechniken eine gute Qualität und Reinheit des Antigens erreicht werden.

6 Der ImmunoCAP Thyreoglobulin Test ist mit Thyreoglobulin beschichtet, das aus menschlichen Schilddrüsen aufgereinigt wurde. Krankheitsassoziation, Antikörperprävalenz und Spezifität Hashimoto-Thyreoiditis (60-85 %) Morbus Basedow (30-80 %) Primäres Myxödem (20-30 %) Post-partum-Thyreoiditis (30 %) Subakute Thyroiditis (de Quervain) (sehr selten) Endokrine Orbitopathie (24 %) Struma simplex (4 %) Schilddrüsenkrebs (2-15 %) Perniziöse Anämie (27 %) Morbus Addison (28 %) Diabetes mellitus (20 %) Gesunde Personen (4-8 %, höher bei älteren Personen, meist aber bei geringeren Titern) Autoantikörper zu TG und TPO bieten einen wertvollen Ausschlusstest für Patienten mit einer Schilddrüsenerkrankung, da mehr als 98 % der Thyreoiditis-Patienten über Autoantikörper für eines oder beide dieser verfügen. Negative Tests können eine Diagnose von Thyreoiditis nahezu ausschließen. Primärer Risikofaktor für zukünftige autoimmune Schilddrüsen-Dysfunktion. Eine Änderung der TG-Antikörperkonzentrationen kann nützliche Informationen bei postoperativen Patienten mit differenziertem Schilddrüsenkarzinom liefern; ein Anstieg dieser Antikörper kann ein Rezidiv oder Metastasen anzeigen. Bei Verdacht auf Thyreoiditis Nach Operation eines differenzierten Schilddrüsenkarzinoms Antikörperisotyp Vaskulitis und Anti-GBM-zugehörige Erkrankungen PR-3-Antikörper

7 Antineutrophile zytoplasmische Antikörper (ANCA) können zytoplasmische ANCA (canca) und perinukleare ANCA (panca) unterteilt werden. Das Hauptantigen für die canca-reaktivität ist das Enzym Proteinase 3 (PR3). PR3 ist ein kationisches Protein bestehend aus 228 Aminosäureresten, das zur Trypsin- Familie der Serin-Proteasen gehört. PR3 ist nur bei Primaten und Menschen exprimiert und hat verschiedene Funktionen, darunter die Proteolyse von Elastin, Hämoglobin, Fibronektin, Laminin und Kollagen Typ IV, antimikrobielle Aktivitäten etc. PR3 in Phadia-Tests wird aus Humanneutrophilen aufgereinigt. Bei EliA PR3 S (sensitive) ist das Antigen auf die Wells mit einer Ankertechnik aufgebracht, wodurch die Sensitivität des Tests wesentlich erhöht wird. Krankheitsassoziation, Antikörperprävalenz und Spezifität Wegener-Granulomatose (abhängig von : ca. 50 % bei inaktiver Erkrankung, fast 100 % in der aktiven Generalisierungsphase der WG), Spezifität >95 % Mikroskopische Polyangiitis (kleiner Prozentsatz) Churg-Strauss-Syndrom (10-30 %) Polyarteritis nodosa (8-10 %). Idiopathische halbmondförmige Glomerulonephritis (30 %) Im Allgemeinen treten Anti-MPO und Anti-PR3 nicht gemeinsam beim gleichen Patienten auf. Die Erkennung von c-anca mit klarer PR3-Aktivität ist zu 99 % spezifisch für eine nekrotisierende Vaskulitis der kleinen Gefäße. Verdacht auf idiopathische systemische Vaskulitis, die unter folgenden Umständen auftritt: Vorhandensein von sichtbaren vaskulären Läsionen, z.b. Purpura, nekrotische Fingerspitzen etc. Vorhandensein von mehr oder weniger typischen Symptomen, z.b. von nekrotisierenden Entzündungen der oberen Luftwege (WG), Hypereosinophilie mit nicht allergischem Asthma (Churg-Strauss-Syndrom) etc. Schnell fortschreitende Glomerulonephritis Vorhandensein von Symptomen und Anzeichen einer Entzündung, z.b. Fieber, erhöhte Konzentration von ESR und C-reaktivem Protein etc., ohne bestimmbare Ursache oder Lokalisation Antikörperisotyp MPO-Antikörper

8 Antineutrophile zytoplasmische Antikörper (ANCA) können zytoplasmische ANCA (canca) und perinukleare ANCA (panca) unterteilt werden. Das Hauptantigen für die panca-reaktivität ist das Enzym Myeloperoxidase (MPO). MPO ist in den azurophilen Granula der Neutrophile vorhanden und ein Markerenzym dafür. Es katalysiert die Produktion von hypochloriger Säure, die wirksam phagozytierte Bakterien und Viren abtötet. MPO macht fast 5 % des Gesamtproteins eines neutrophilen Granulozyts aus. Es ist ein kovalent verknüpftes Dimer mit einem Molekulargewicht von ca. 140 kda. MPO in Phadia-Tests wird aus Humanneutrophilen aufgereinigt. Antikörperspezifität und -prävalenz Idiopathische nekrotisierende und halbmondförmige Glomerulonephritis ohne Immundeposits (= pauci-immun) (bei ca. 65 %) Mikroskopische Polyangiitis (45 %) Churg-Strauss-Syndrom (ca. 60 %) Wegener-Granulomatose, WG (10 %) Polyarteritis nodosa (ca. 15 %) Goodpasture-Syndrom (ca %) SLE (ca. 8 %), aber häufiger bei medikamentös induziertem Lupus Im Allgemeinen treten Anti-MPO und Anti-PR3 nicht gemeinsam beim gleichen Patienten auf. Die Erkennung von p-anca mit klarer MPO-Aktivität ist zu 99 % spezifisch für eine nekrotisierende Vaskulitis der kleinen Gefäße. Im Gegensatz dazu sind p-anca mit negativer oder gering positiver MPO-Reaktivität nicht mit einer Vaskulitis assoziiert. A.Wiik, Dänemark, schlägt vor, dass Letztgenannte anstelle von ANCA in neutrophil-spezifische Autoantikörper umbenannt werden, um so eine Fehlinterpretation der Ergebnisse zu vermeiden (Carette S., 2004, J Rheumatol 31:792-4). Das relative Risiko für ein Rezidiv steigt mit der ANCA-Positivität. Risikofaktor für Rezidiv bei ANCA positiv 10% ANCA zunehmend 19% Abbruch der Behandlung 2,4 % Relatives Risiko Tabelle: ANCA-Persistenz oder -Anstieg muss die Therapieentscheidung beeinflussen. (Daten aus einer Präsentation von Jayne J in Genf 2002) ANCA-Titer sind höher während der aktiven Erkrankung als bei einer Rückbildung. Verdacht auf idiopathische systemische Vaskulitis, die unter folgenden Umständen auftritt:

9 Vorhandensein von sichtbaren vaskulären Läsionen, z.b. Purpura, nekrotische Fingerspitzen etc. Vorhandensein von mehr oder weniger typischen Symptomen, z.b. von nekrotisierenden Entzündungen der oberen Luftwege (WG), Hypereosinophilie mit nicht allergischem Asthma (Churg-Strauss-Syndrom) etc. Schnell fortschreitende Glomerulonephritis Vorhandensein von Symptomen und Anzeichen einer Entzündung, z.b. Fieber, erhöhte Konzentration von ESR und C-reaktivem Protein etc., ohne bestimmbare Ursache oder Lokalisation GBM-Antikörper Die Hauptfunktion der Glomerulumbasalmembran (GBM) der Niere ist die Ultrafiltration des Bluts. Typ-IV-Kollagen ist ein typischer Bestandteil der GBM, verfügt über selbstaggregierende Eigenschaften und bildet eine Matrix, in der die anderen Basalmembranmoleküle integriert sind. Typ-IV-Kollagen bildet Trimere, die aus drei Untereinheiten von Alphaketten bestehen. Da die Antikörper auf Epitope der sogenannten "nichtkollagenen Domain" (NCI-Domain), die sich in Inneren des Proteins in seiner nativen Struktur befinden, ausgerichtet sind, besteht kein Erfordernis zur Nutzung eines denaturierten Antigens zur Erkennung von GBM-Antikörpern. EliA GBM gehört zu den ersten Tests, die die humane rekombinante NCI-Domain der Kollagen IV Alpha 3-Kette verwenden. Antikörperspezifität und -prävalenz Schnell fortschreitende Glomerulonephritis (mit oder ohne Lungenblutung) (15 %) Goodpasture-Syndrom (eines von drei spezifischen Kriterien) ANCA-assoziierte Vaskulitiden Beim Goodpasture-Syndrom ist es wichtig, die Therapie einzuleiten bevor die Nierenschädigung zu weit fortgeschritten ist. Eine schnelle Erkennung ist daher zwingend notwendig und kann mittels der Anwendung von empfindlichen Tests bestätigt werden. Relativ hohe Antikörpertiter können bei Patienten mit klarem klinischen Rückgang bestehen bleiben und nur langsam über ein Jahr zurückgehen. Eine Nierentransplantation sollte im Allgemeinen so lange verschoben werden, bis die Antikörpertitration negativ ist, um so ein Rezidiv der Erkrankung beim Transplantatempfänger zu vermeiden. Verdacht auf Goodpasture-Syndrom

10 Patienten mit Glomerulonephritis Positive ANCA-Ergebnisse Vor Nierentransplantation: Indikation eines hohen Risikos für akutes Nierenversagen (schlechte Prognose) Zöliakie Gewebetransglutaminase-Antikörper Gewebetransglutaminase gehört zu einer Familie von kalziumabhängigen Enzymen, die eine Bildung der Quervernetzung zwischen Proteinen katalysieren. ttg ist in den menschlichen Organen weit verbreitet und ist mit den Fasern assoziiert, die weiche Muskelzellen und Endothelzellen im Bindegewebe umgeben. ttg spielt eine Rolle im extrazellulären Matrixaufbau und den Gewebereparaturmechanismen. Weizengliadine können als Substrat für die Transglutaminasereaktionen dienen. Celikey verwendet humane rekombinante Gewebetransglutaminase, die in den eukaryotischen Zellen produziert wird (Baculovirus/Sf9-System). Krankheitsassoziation, Antikörperprävalenz und Spezifität Zöliakie Klinische Sensitivität: 96 % Klinische Spezifität: 99 % Anti-Gewebetransglutaminase-Antikörper können in der Überwachung der Diäteinhaltung genutzt werden, wobei die Titer bei mehr als 70 % der behandelten Patienten mit Zöliakie negativ sind. Verdacht auf Zöliakie Antikörperisotyp IgA oder Ein IgA-Mangel ist besonderes bei der Diagnose der Zöliakie zu beachten. Anti-tTG- Antikörper sind so charakteristisch für Zöliakie-Patienten mit IgA-Mangel wie IgA anti-ttg- Antikörper für Patienten mit normalen Serum-IgA-Werten.

11 Anti-Gliadin-Antikörper EliA Gliadin DP IgA und EliA Gliadin DP - die ersten vollständig automatisierten Tests für deamidiertes Gliadinpeptid. Der Begriff "Gluten" umfasst eine umfassende Reihe von Proteinen im Endosperm der Getreidesorten Weizen, Roggen, Gerste und Hafer. Diese dienen als eine Stickstoffquelle für den keimenden Fruchtkeim und sind in Albumine, Globuline, Gluteline und die Zöliakie verursachenden Gliadine unterteilt. Gliadin (Molekulargewicht kda) ist eine Mischung aus ca. 50 Bestandteilen. Auf Grundlage der elektrophoretischen Mobilität können Gliadine in vier große Fraktionen unterteilt werden: Alpha-, Beta-, Gamma- und Omega- Gliadine. A-Gliadin, ein Bestandteil von Alpha-Gliadin mit bekannter primärer Aminosäuresequenz, enthält 32 Glutamine und 15 Proline pro 100 Aminosäurereste. Deamidierte Gliadinpeptide Die aktuelle Forschung hat gezeigt, dass Gliadinpeptide, die bei Zöliakie-Patienten die Schleimhautbarriere überwinden, durch Gewebetransglutaminase (ttg) deamidiert werden, wodurch diese weitaus immunogener werden als unbearbeitete Gliadinpeptide. Somit stellen deamidierte Gliadinpeptide spezifischere Ziele für die Antikörper gegen Gliadin, die in diesen Patienten produziert werden, dar. Die EliA Gliadin DP Tests nutzen die entsprechenden synthetischen deamidierten Gliadinpeptide, wodurch diese eine ausgezeichnete Spezifität erhalten. Krankheitsassoziation, Antikörperprävalenz und Spezifität Zöliakie = gluten-sensible Enteropathie ( % der Kinder mit Zöliakie während der aktiven Phase der Erkrankung) Andere Magen-Darm-Erkrankungen (ca. 21 %, ca. 3 % IgA) Wenn Gluten aus der Ernährung eines Patienten mit Zöliakie entfernt wird, dann sinkt der IgA-Gliadin-Antikörper-Titer schnell wieder auf normale Werte, der -Gliadin-Antikörper sinkt langsam und kann für Monate oder sogar Jahre auf einem geringen Titerwert verweilen. Während eines diagnostischen Gluten-Immunitätstests erreichen - und IgA-Gliadin- Antikörper normalerweise pathologische Werte nach einigen Wochen oder Monaten mit Glutenaufnahme. Bei Verdacht auf Zöliakie Bei einer Differentialdiagnose mit Kinder- und Erwachsenenformen der Zöliakie Bei der Nachsorge mit glutenfreier Diät Bei Verdacht auf Dermatitis herpetiformis

12 IgA und. IgA ist spezifischer, aber weniger sensibel. ist sensibel, aber weniger spezifisch: Daher wird normalerweise die Bestimmung beider Isotypen empfohlen. Patienten mit selektivem IgA-Mangel können nur durch das Screening mit einem Antikörper der - Klasse erkannt werden. Antiphospholipid-Syndrom Cardiolipin-Antikörper Im Gegensatz zu den meisten anderen Autoantigenen ist Cardiolipin kein Protein, sondern ein Phospholipid. Phospholipide sind wichtige Bestandteile der Membranen von lebenden Zellen und von Organellen innerhalb dieser Zellen. Cardiolipin befindet sich in bakteriellen Membranen, Mitochondrien und Chloroplasten. Cardiolipin besteht aus zwei Phosphatidsäuregruppen, die jeweils mittels Phosphodiester- Bindung an eine Glycerid-Komponente befestigt sind und durch eine zentrale Glycerol- Komponente verbunden sind. Antikörper binden sich an den Komplex aus Cardiolipin und dem Cofaktor ß2-GPI. Phadia-Tests sind mit aufgereinigtem Cardiolipin beschichtet. Antikörperspezifität und -prävalenz Antiphospholipid-Syndrom (APS) (eines von zwei Laborkriterien für die Diagnose von APS) Schlaganfall (7 %), Schlaganfall bei jungen Patienten (18 %) Fehlgeburt*: 3 oder mehr aufeinander folgende Fehlgeburten (15 %), im 2. oder 3. Trimester (30 %), mit Wachstumsverzögerung und später Fehlgeburt (40 %) Sekundäres APS bei SLE (10-15 %) Bindegewebserkrankungen wie SLE (44 %), RA (4-49 %), Sklerodermie (25 %), juvenile chronische Arthritis (42 %) (Anzahl für sekundäre APS eingeschlossen) Infektionskrankheiten wie Lyme-Krankheit (32 %), Syphilis (75 %), Lepra (67 %), Tuberkulose (53 %) und einige weitere (Q-Fieber, AIDS) Epilepsie (11 %) Gesunde Personen (0-7,5 %) * Zahlen beziehen sich auf Antiphospholipid-Antikörper im Allgemeinen Hohe acl-konzentrationen sind mit einem steigenden Risiko für Thrombose oder Fetaltod verbunden. Erhöhte Antikardiolipin-Antikörperkonzentrationen kann viele Jahre vor dem Auftreten von Thrombose oder Fetaltod erkannt werden. Das Risiko für Fetaltod steigt von 6,5 % (acl-negativ) auf 15,8 % bei acl-positivität.

13 Verdacht auf Antiphospholipid-Syndrom Fetaltod Schlaganfall bei jungen Patienten Unerklärte Thrombose Im Gespräch: Migräne, Epilepsie, Chorea, Herzklappenerkrankung, Hautgeschwüre etc. wird als der häufigste und wichtigste Isotyp bei der acl-erkennung erachtet. Es wird jedoch die Messung von IgM und IgA empfohlen, da sonst einige Risikopatienten verloren gehen würden. Die klinische Assoziation von unterschiedlichen acl-isotypen wird in der Literatur kontrovers diskutiert. β2-glycoprotein I Antikörper ß2-Glycoprotein I (ß2GPI) bindet sich an negativ geladene Substanzen wie Phospholipide und Lipoproteine. Eine zunehmende Anzahl an Studien zeigt, dass ß2GPI als ein Cofaktor erforderlich ist oder sogar das "echte" Antigen für die Bindung von Antiphospholipid- Antikörpern darstellt. Die Konformationsepitope für Anti-ß2GPI entwickeln sich, wenn es mit einer Lipidmembran bestehend aus negativ geladenen Phospholipiden interagiert, oder wenn ß2GPI auf einer polyoxygenisierten Polystyrolplatte adsorbiert wird. ß2GP1 ist ein 50 kda Plasmaprotein, bestehend aus fünf homologen Motiven mit ca. 60 Aminosäuren. ß2GP1 in Phadia-Tests wird aus Humanplasma aufgereinigt. Antikörperspezifität und -prävalenz Antiphospholipid-Syndrom (APS) Ischämischer Schlaganfall (24 %) Fehlgeburt (7-14 %) Bindegewebserkrankungen wie SLE (36 %), rheumatoide Arthritis (RA), Sklerodermie, juvenile chronische Arthritis Epilepsie (18%) Gesunde Personen (sehr selten) (verfügbare Anzahl variiert stark aufgrund der unterschiedlichen Methoden und Isotypen) Hohe Konzentrationen sind mit einem steigenden Risiko für Thrombose oder Fetaltod verbunden. Fetaltod

14 Schlaganfall bei jungen Patienten Unerklärte Thrombose bei acl-negativen Patienten mit Verdacht auf APS bei acl-positiven Patienten mit möglichem APS zur Bestätigung der Diagnose Gemäß den Classification Criteria for Definite Antiphospholipid Syndrome (2006) sind und IgM die relevanten Isotpyen für die Bestimmung der Antikörper gegen Beta-2- Glykoprotein I. Trotzdem zeigt eine zunehmende Anzahl an Studien eine klinische Bedeutung von Isotyp IgA. Erkennungsmethoden Für die Antikörpererkennung muss ß2GP1 an eine Lipidmembran bestehend aus negativ geladenen Phospholipiden gebunden werden. Rheumatoide Arthritis CCP-Antikörper Detaillierte Studien zu zitrullinierten Filaggrinpeptiden durch Schellekens et al. im Jahr 1998 haben gezeigt, dass unterschiedliche RA-Patienten unterschiedliche zitrullinierte Peptide zeigen. In zyklischen Varianten dieser Peptide wird der Zitrullinrest optimal für die Antikörperbindung dargelegt. Ende 2000 wurde ein Anti-CCP-Test mit neuen zyklischen Peptiden, die sehr reaktive mit RS-Sera waren, und verbesserter Leistung als "zweite Generation der CCP (CCP2)" eingeführt und als ELISA-Test im Handel verfügbar gemacht. EliA CCP basiert auf dem CCP2-Test. Antikörperspezifität und -prävalenz Anti-CCP sind sehr spezifisch für Rheumatoide Arthritis (RA). In einer internen Studie zeigte EliA CCP eine außergewöhnliche Sensitivität von 87,8 % und eine Spezifität von 96,9 %. Mehrere Studien zeigen, dass der CCP-Test es den Klinikärzten ermöglicht, RA-Patienten effektiv von anderen RA-ähnlichen Erkrankungen zu unterscheiden, selbst dann, wenn der Rheumafaktor nicht charakteristisch ausgeprägt ist. Anti-CCP-Antikörper können sehr früh im Rahmen der RA erkannt werden. Das Vorhandensein von Anti-CCP ist mit wesentlich erhöhten Erosionswerten im Vergleich zum Rheumafaktor und anderen Parametern verbunden. Anti-CCP ist ein unabhängiger Anzeiger für radiologische Schädigung und Progression.

15 Verdacht auf rheumatoide Arthritis. Rheumafaktor Antigen Der Rheumafaktor (RF) ist ein Antikörper gegen den FC-Teil von Immunoglobulin G (), was wiederum selbst ein Antikörper ist. RF und bilden zusammen Immunkomplexe, die zum Krankheitsprozess beitragen. EliA Wells sind mit aggregiertem Kanninchen- beschichtet. Antikörperprävalent und prognostische Anwendung In Kombination mit Anzeichen und Symptomen kann der RF eine Rolle für Diagnose und Krankheitsprognose spielen und stellt somit eines der vorgeschlagenen Klassifizierungskriterien des American College of Rheumatology (ACR) dar. Ca. 80 % der Menschen mit rheumatoider Arthritis zeigen einen feststellbaren Rheumafaktor. Der RF wurde als wichtiges Anzeichen für eine schwerere Erkrankung erkannt. Die Prävalenz von RA ist bei Personen mit RF-Antikörpern von mehr als einem Isotyp, was meist eine Kombination von IgM und IgA ist, wesentlich erhöht. Spezifität Die RF-Positivität zeigt jedoch eine geringe diagnostische Spezifität, da der RF bei Patienten mit anderen Autoimmun- und Infektionserkrankungen und selbst bei einem beachtlichen Teil von normal gesunden Personen, insbesondere bei älteren Personen, vorhanden ist. RF kann auch bei hohen Titern bei den meisten Patienten mit primärem Sjögren-Syndrom erkannt werden und kann auch bei chronischer Hepatitis, jedweder chronischer viraler Infektion, Leukämie, Dermatomyositis, infektiöser Mononukleose, systemischer Sklerose und systemischem Lupus erythematodes erhöht sein. Verdacht auf rheumatoide Arthritis und Sjögren-Syndrom. IgM und IgA