1 maintrac-diagnostik Bestimmung zirkulierender Tumorzellen vor, während und nach der Therapie.
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Inhalt Seite 1. maintrac-verfahren 4 5 2. Grundlagen zur maintrac-diagnostik 6 2.1 Methodik 6 7 2.2 Dynamik der Zellzahl 8 2.3 maintrac Sensitive Erfassung epithelialer Zellen 9 Zellen Tumorzellen? 3. Einsatz der maintrac-diagnostik 11 19 3.4 maintrac Therapierelevante Eigenschaften der Tumorzellen 16 3.6 Entscheidungshilfe am Ende der antihormonellen 3.7 Therapieansprechen in der metastasierten Situation 19 4. Probenversand 20 21 5. Zusammenfassung 22 3
maintrac-verfahren 1. maintrac-verfahren Krebs ist eine hochkomplexe, heterogene und sich schnell verändernde Erkrankung. können sich also sehr stark unterscheiden. Primärtumor zirkulierende Tumorzelle Tumorzellen dringen ins Blutgefäß ein Erythrozyten Leukozyten 4 Tumorzellen bilden Metastasen
maintrac-verfahren Diese Zellen zirkulierende epitheliale Tumorzellen (CETC) können noch Jahre nach einer Operation oder Therapie im Blut gefunden werden. Im Verlauf der Krebserkrankung ist ein Wandel der Tumorzellen möglich. maintrac ist eine hochsensitive mikroskopische Methode zur Bestimmung dieser Tumorzellen. maintrac- Basis können Patient und Arzt gemeinsam Therapieentscheidungen treffen. maintrac kann dem Patienten Über 650 Patienten wurden in klinischen Studien mit maintrac untersucht und die Ergebnisse in hochrangigen Journalen weltweit publiziert. Die Methode wird seit 2005 durchgängig in einem nach DIN EN ISO 15189 akkreditierten Labor durchgeführt. Die maintrac-diagnostik ist durchwegs validiert und unterliegt einer kontinuierlichen Qualitätssicherung. 5
maintrac-diagnostik 2. Grundlagen zur maintrac-diagnostik 2.1 Methodik Ablauf einer maintrac-untersuchung: 1 Färbung mit zierendem Antikörper Blutprobe 2 EpCAM Antikörper 3 maintrac Mikroskopie Zellen Keine Selektion Keine Extraktion Quantitative Bestimmung lebender Zellen Erhaltungstherapie mit Tamoxifen zirkulierende Tumorzellen pro ml Blut OP 0.000.000 Epi P CMF Ra Ana Tamoxifen Tramb 0 0 200 400 600 800 S. Schuster et al, DAZ, 2013, 153, 48: 50-53 4 Verlauf der Zellzahl 6
maintrac-diagnostik Während einer Chemotherapie gibt maintrac Aufschluss über deren Erfolg durch die Reduktion vitaler Tumorzellen im Blut. 1,4 Vor und während einer Therapie kann die Wirksamkeit eines Medikaments bestimmt werden. 5 Wenn die Therapie nicht ausreichend wirkt, können weitere in Frage kommende Medikamente getestet werden. Die Eigenschaften der Tumorzellen können sich während der Krankheitsentwicklung ändern. Eine Bestimmung der Charakteristika und eine zeitnahe Anpassung der Therapie ist möglich. In der Langzeitüberwachung kann ein Rezidiv frühzeitig durch den Anstieg der CETC entdeckt werden. 2,3 möglich. 7
maintrac-diagnostik 2.2 Dynamik der Zellzahl Das Wissen um die Dynamik der Zellzahl kann helfen, die Therapie optimal anzupassen. Beim Patienten kann dies Angst vor einem unbemerkten Rückfall mindern und die Lebensqualität erhöhen. Verhalten der zirkulierenden Tumorzellen Prozent der zirkulierenden Tumorzellen.000 0.000.000 0 1 0,1 0,01 1 2 3 4 5 Anzahl der Untersuchungen Verringerung der Zellzahl Gleichbleibende Zellzahl = positiver Verlauf Steigende Zellzahl 8
maintrac-diagnostik 2.3 maintrac Sensitive Erfassung epithelialer Zellen Die hohe Sensitivität von maintrac erlaubt eine nahezu vollständige und reproduzierbare Erfassung der CETC. Die Erfassung der Zellzahl stellt eine repräsentative Stichprobe der im Blut vorhandenen CETC dar. Typische lebende und tote Zellen aus einer Patientenprobe: 9
maintrac-diagnostik 2.4 maintrac-spezifität Sind alle EpCAM positiven Zellen Tumorzellen? Ausschlaggebend für die Beurteilung mit maintrac ist die Dynamik der Gesamtpopulation epithelialer Zellen, denn nur sie lässt eine Aussage über die Tumoraktivität zu. Verletzungen 2.5 maintrac Cut-Off bzw. Schwellenwert? Bei der Bestimmung der Zahl der CETC wird kein Schwellenwert angegeben. Untersuchungen haben gezeigt, dass auch kleine Tumore eine hohe Anzahl CETC ins Blut ausschwemmen können und umgekehrt. Für die Aggressivität der Tumore spielt die Dynamik der Zellzahl die Hauptrolle. Adjuvante Therapie Therapie von Metastasen
Einsatz der maintrac-diagnostik 3. Einsatz der maintrac-diagnostik Nach der Diagnose (beispielsweise von Brustkrebs) ist die etablierte Sequenz in der Therapie meist die Operation, die adjuvante Chemotherapie, wenn erforderlich Bestrahlung und bei hormonrezeptorpositiven Tumoren die Erhaltungstherapie mit Hormonblockern. 3.1 Erfolgskontrolle während der adjuvanten Chemotherapie Sinkende Zellzahl fach Geringfügige Änderungen der Zellzahl Steigende Zellzahl fache zirkulierende Tumorzellen pro ml Blut 0.000.000 FEC EC Tax 0 0 50 0 150 200 250 zirkulierende Tumorzellen pro ml Blut 0.000.000 EC Tax CMF 0 0 50 0 150 200 250 zirkulierende Tumorzellen pro ml Blut 0.000.000 FEC EC Tax 0 0 50 0 150 200 250 3 Patienten mit sinkenden Zellzahlen zum Ende der Therapie. 1 festzustellen. Tumorzellen noch aktiv sind. So können kurzfristige Therapieentscheidungen getroffen werden, die allein aufgrund der quantitativen Erfassung der CETC durch maintrac möglich sind. 11
Einsatz der maintrac-diagnostik Beispiel einer Brustkrebspatientin OP 1. Z. 2. Z. 3. Z. 4. Z. 5. Z. 6. Z. EoC Rezidiv nach 2 Jahren 0.000 zirkulierende Tumorzellen pro ml Blut.000 0 0 FEC 50 0 150 200 250 Adjuvante Therapie bei Brustkrebs rezidivfreies Überleben 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 0 300 600 900 1.200 1.500 abfallend > -fach ansteigend > -fach geringf. Änderung Logrank: p < 0,001 Studie an 88 Patienten Das Verhalten der CETC ist dabei in der Aussagekraft dem Nodalstatus oder der Tumorgröße überlegen. 1 Adjuvante Therapie bei Brustkrebs: Nodalstatus Adjuvante Therapie bei Brustkrebs: Tumorgröße rezidivfreies Überleben 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 N-Gruppe: N+ N0 Logrank: p = 0,023 Studie an 88 Patienten rezidivfreies Überleben 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 T1 v T234: T1 T234 Logrank: p = 0,123 Studie an 88 Patienten 0,0 0,0 0 300 600 900 1.200 1.500 0 300 600 900 1.200 1.500 12
Einsatz der maintrac-diagnostik 3.2 Verhalten der CETC während der neoadjuvanten Chemotherapie Eine Folge. Dementsprechend sollte eine neoadjuvante Therapie bis zur Reduktion der peripher zirkulierenden Tumorzellen fortgeführt werden. 4 Brustkrebspatientin unter neoadjuvanter Therapie Brustkrebspatientin unter neoadjuvanter Therapie Anzahl der Zellen pro ml Blut OP OP 0.000.000 0 EC Pax Rezidivfrei nach 6,4 Jahren Anzahl der Zellen pro ml Blut 0.000.000 0 EC Pax Rezidiv nach 3,4 Jahren -200-180 -160-140 -120-0 -80-60 -40-20 -2-160 -1-60 - Quelle? Quelle? Rezidivfreies Überleben neoadjuvante Therapie rezidivfreies Überleben 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 0 2 4 6 8 Jahre steigende Zellzahl sinkende Zellzahl Studie an 59 Patienten 13
Einsatz der maintrac-diagnostik 3.3 Testung von Medikamenten vor einer Chemotherapie maintrac an ihnen getestet werden. 0h 3h 6h 9h im zeitlichen Verlauf. Einfluss der Medikation an den zirkulierenden Tumorzellen 0 90 80 Wirksamkeit der Medikation an den zirkulierenden Tumorzellen [%] 70 60 50 40 30 20 0 Medikament 1 Medikament 2 Medikament 3 Medikament 4 Das Medikament 4 verfügt in diesem Fall 14
Einsatz der maintrac-diagnostik Therapie beim Ovarialkarzinom Therapie beim Ovarialkarzinom Ansprechrate in % zirkulierende Tumorzellen pro ml Blut 0.000.000 0 0 90 80 70 60 50 40 30 Carbo Pac Dez 09 Mär Jun Okt Jan 11 Apr 11 Aug 11 Ansprechrate in % zirkulierende Tumorzellen pro ml Blut 0.000.000 0 0 90 80 70 60 50 40 30 Carbo Pac Jun Okt Jan 11 Mai 11 Aug 11 Nov 11 Mär 12 20 20 0 Dez 09 Apr Aug Dez Apr 11 Aug 11 0 Jun Okt Jan 11 Mai 11 Aug 11 Nov 11 Mär 12 Chemosensitivität beim Ovarial-Karzinom rezidivfreies Überleben 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 sensitiv restistent Logrank: p 0,007 Studie an 39 Patienten 0,0 0 1 2 3 4 Jahre schlechtere Prognose. 5 15
Einsatz der maintrac-diagnostik 3.4 maintrac Therapierelevante Eigenschaften der Tumorzellen Eine Tumorzellen betreffen. kommen. Die maintrac-analyse ermöglicht eine Charakterisierung verschiedener für Therapieentscheidungen wichtiger Zelleigenschaften und erlaubt es die Therapie zielgerecht anzupassen: Hormonrezeptoren Sonstige Melan A Thomsen Friedenreich Antigen Tissue Factor 16
Einsatz der maintrac-diagnostik 3.5 Überwachung während der antihormonellen Therapie Ein Erhaltungstherapie mit Tamoxifen rezidivfreies Überleben 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 abfallende CETCs ansteigende CETCs keine Änderung Logrank: p < 0,001 Studie an 179 Patienten dem klinischen Verlauf. Ein Anstieg antihormonellen Therapie um den Faktor Rezidivgeschehen verknüpft. 0,0 0 500 1.500 2.000 2.500 der Therapie. 2 Langzeitüberwachung zirkulierende Tumorzellen pro ml Blut 0.000.000 0 0 Tam Zol Ana 200 400 600 800 der Medikation. maintrac eignet sich optimal, die Hormontherapie bei östrogenrezeptorpositiven Patientinnen zu überwachen und gegebenenfalls bei steigenden Zellzahlen geeignete Gegenmaßnahmen zu ergreifen. 17
Einsatz der maintrac-diagnostik 3.6 Entscheidungshilfe am Ende der antihormonellen Therapie bei Brustkrebs maintrac bietet für Patientinnen und Therapeuten eine Entscheidungsgrundlage, ob eine Hormontherapie nach fünf Jahren weitergeführt werden soll. 3 Zellzahlen durchaus sinnvoll sein kann. Brustkrebs unter Langzeitbeobachtung zirkulierende Tumorzellen pro ml Blut 0.000.000 0 OP FEC R Therapie mit Tamoxifen 0 200 400 600 800 1.200 1.400 1.600 1.800 CR Brustkrebs unter Langzeitbeobachtung zirkulierende Tumorzellen pro ml Blut 0.000.000 0 0 Gos Therapie mit Tamoxifen 200 400 600 800 1.200 1.400 1.600 1.800 CR Verdacht Rückfall P Nach der Therapie mit Tamoxifen: Einfluß der CETC-Dynamik rezidivfreies Überleben 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 abfallende CETCs und ohne Änderung ansteigende CETCs Logrank: p = 0,006 Studie an 36 Patienten 0 500 1.500 2.000 2.500 Tumorzellen für eine Wiederaufnahme der Therapie sprechen. 18
Einsatz der maintrac-diagnostik 3.7 Therapieansprechen in der metastasierten Situation maintrac ermöglicht in der metastasierten Situation mit Hilfe zirkulierender epithelialer Zellen die erreicht. Therapie beim Ovarialkarzinom zirkulierende Tumorzellen pro ml Blut Progress 0.000 Carbo Caelyx / Doxo Pac.000 0 Jun Jul Aug Sept Okt Nov Dez Jan 11 0 Ansprechrate in % 90 80 70 60 50 40 30 20 0 Jun Jul Aug Sept Okt Nov Dez Jan 11 Carbo = Carboplatin Pac = Paclitaxel Doxo = Doxorubicin Therapie kommt es zu einem Anstieg der Zellzahl mit Progress. Bei Eine wirksame Therapie wird an einer Verkleinerung der Metastasen gemessen. Dabei kann es, wie in der neoadjuvanten Situation, anfänglich zur Ausschwemmung von Tumorzellen kommen. Zellen kommt. 19
Status Praxisstempel 4. Probenversand DIAGNOSE & TUMORFORMEL (Wichtig) (WICHTIG) bis geplantes Ende Rezidiv (Datum): bis von von bis Medikament: Medikament: von Beginn Medikament: 150218-UA-DE Adresse Kassen-Nr. Versicherten-Nr. Betriebsstätten-Nr. Arzt-Nr. Datum Je vollständiger der Untersuchungsauftrag ausgefüllt wird, desto aussagekräftiger ist der Befund. Erfolgskontrolle unter Therapie (Verlaufskurve) Laborpreis MAINTRAC Zellzahlbestimmung CETC (circulating epithelial tumor cells) Monitoring (Verlaufskurve) in Hormontherapie oder nach Therapie Laborpreis Vor Therapiebeginn Erstuntersuchung Folgeuntersuchung Bei Therapieende nach 3 Monaten nach 6 Monaten nach 9 Monaten nach Monaten Name, Vorname geb. am M W Auftrag: maintrac Analyse - zirkulierende epitheliale Tumorzellen (CETC) Abnahmedatum: 15 ml EDTA Blut benötigt maintrac maintrac pt pn M R ER PR HER2/neu maintrac UN3373 maintrac flüssigkeitsdichte Sekundärverpackung Nur mit Patienten- Unterschrift auf Seite 2 gültig! Medizinische Rückfragen? Bitte Tel.: 0921 850200 nach Verpackungsvorschrift P650 Arbeitsgemeinschaft Transfusionsmedizinisches Zentrum Bayreuth Laborpraxis Dr. Pachmann SIMFO GmbH D-ML-13345-01-00-1714570 48 h / 12-30 C UN3373 flüssigkeitsdichte Sekundärverpackung nach Verpackungsvorschrift P650 1714570 Sender stamp and signature FREIGESTELLTE MEDIZINISCHE PROBE EXEMPT HUMAN SPECIMEN Kurpromenade 2 Laboratory Dr. med. Ulrich Pachmann Zellzahlbestimmung & Zellcharakterisierung Untersuchungsauftrag 15 ml EDTA-Blut uctions for shipping: Medikamententestung Untersuchungsauftrag 15 ml EDTA-Blut 20
Versandinformation Versand per Standardpost in Deutschland in einer Testung & Befund 21
Zusammenfassung 5. Zusammenfassung Marker für personalisierte Therapieentscheidungen dienen. Echtzeitkontrolle aus einer Blutprobe von 15 ml Quantitative Erfassung der CETC Hohe Sensitivität auch bei Patienten mit Primärtumor Verlaufs- und Erfolgskontrolle während der Tumortherapie Charakterisierung therapierelevanter Tumoreigenschaften Langzeitüberwachung auch Jahre und mehr nach einer Krebsdiagnose Klinischer Nutzen in Studien und im Alltag bewiesen 22
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