Biochemisches Grundpraktikum
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- Valentin Krause
- vor 5 Jahren
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1 Biochemisches Grundpraktikum Dr. Ellen Hornung; Tel: Einteilung der Praktikumsplätze: Eintragen in Listen am - Dienstag, , von 12:00 13:00 - Freitag, , von 10:00 11:00 im kleinen Praktikumsraum (Raum-Nr ) im GZMB (Ernst-Caspari-Haus) bei Frau Pia Meyer Vorlesung zum Praktikum Dienstag, 13:00-14:00 Hörsaal MN06 Beginn:
2 DNA Replikation ist semikonservativ
3 Replikationsgabel Eltern-DNA
4 Beide DNA-Stränge werden in 5 3 Richtung synthetisiert
5 DNA-Polymerasen katalysieren die DNA-Synthese
6 DNA-Polymerasen benötigen eine DNA-Matrize
7 DNA-Polymerasen benötigen ein kurzes RNA-Stück als Primer (RNA-Polymerase)
8 DNA Replikation Kontinuierliche Synthese Diskontinuierliche Synthese Leitstrang Folgestrang
9 DNA Polymerasen Katalysieren die Verlängerung einer Polynukleotidkette Synthese des neuen Stranges in 5 3 Deoxy-Nukleotidtriphosphate (datp, dctp, dgtp, dttp) DNA-Matrize (Templat) Metallionen (Mg 2+ )
10 Katalytische Zentrum der DNA Polymerase I von E.coli Klenow Fragment der DNA Pol I
11 DNA Polymerase III (Molekulargewicht ca Da) β2 Untereinheiten von PolIII (umklammeren die dsdna hohe Prozessivität )
12 Pol I Katalyse: 10 NTP pro Sek. Prozessivität ca. 20 Pol III Katalyse: 1000 NTP pro Sek. Prozessivität ca. > 1000
13 Exonuclease Aktivität Pol I Pol III 3 5 (Proofreading) 5 3 (Proofreading) 5 3 (Entfernen des RNA- Primer am Folgestrang)
14 Korrektur von Replikations-Fehlern
15 Proofreading (Korrekturlesen)
16 Genauigkeit der Replikation (Fidelity) ca. 1 Fehler pro10 10 Nukleotide
17 Chemische Mutagenese HNO 3 Cytosin Adenin Hypoxanthin
18 Mutation durch UV - Licht
19 DNA Reparatursysteme
20 Reparatur durch Austausch von Nukleotiden oder der Base
21 DNA Rekombination
22
23
24 Nukleinsäuren RNA
25 Typen von RNA Messenger RNA (mrna) Ribosomale RNA (rrna) Transfer RNA (trna) Small nuclear RNA (snrna) Codiert Proteine, d.h. die RNA Sequenz determiniert die Aminosäure-Sequenz bei der Protein Synthese am Ribosom Bestandteil des Ribosoms Liefert dem Ribosom aktivierte Aminosäuren Spleissen der mrna (nur in Eukaryoten)
26 Größe und relative Menge von RNA- Molekülen in E.coli
27 Bei der RNA-Synthese entsteht ein einzelsträngiges RNA-Molekül. Innerhalb eines RNA-Moleküls können sich aber doppelsträngige Bereiche bilden.
28 RNA Moleküle zeigen eine Vielfalt unterschiedlicher 3D-Strukturen
29 RNA-Synthese (Transkription von DNA) RNA-Polymerase - Synthese erfolgt in 5 3 Richtung - DNA-Templat wird kopiert - Ribonukleotid-triphosphate (NTP: ATP, GTP, UTP, CTP) - Mg 2+ Ionen - Interaktion mit Aktivator oder Repressor Proteinen reguliert die Transkription
30 Transkription mrna Templat DNA-Strang Kodierende DNA-Strang
31 RNA-Polymerasen müssen die DNA- Doppelhelix entwinden
32 RNA-Synthese
33 RNA-Polymerasen bestehen aus mehreren Untereinheiten
34 Katalytische Zentrum der RNA-Polymerase
35 Eukaryotische Zellen haben drei verschiedene RNA-Polymerasen RNA-Polymerase Transkript I 18S u. 28S rrna II mrna u. snrna III trna u. 5S rrna
36 Transkriptions-Start erfolgt durch Bindung der RNA-Polymerase an einen Promotor σ Untereinheit der RNA- Polymerase erkennt und bindet spezifisch an die Pribnow Box
37 Prokaryotische Promotor-Sequenzen
38 Transkriptions-Initiation in Eukaryoten
39 An der Transkriptions- Initiation in Eukaryoten sind mehrere Transkriptionsfaktoren beteiligt, z.b. Für RNA-Pol. II: TFIIA, B, D, E, F
40 Posttranskriptionale RNA-Prozessierung Spaltung + Modifikation G Q Spleissen + Editing U UUU
41 Prozessierung einer prä-trna
42 Modifizierte RNA-Nukleoside
43 Modifizierte RNA - Nukleoside
DNA Replikation ist semikonservativ. Abb. aus Stryer (5th Ed.)
DNA Replikation ist semikonservativ Entwindung der DNA-Doppelhelix durch eine Helikase Replikationsgabel Eltern-DNA Beide DNA-Stränge werden in 5 3 Richtung synthetisiert DNA-Polymerasen katalysieren die
Posttranskriptionale RNA-Prozessierung
Posttranskriptionale RNA-Prozessierung Spaltung + Modifikation G Q Spleissen + Editing U UUU Prozessierung einer prä-trna Eukaryotische messenger-rna Cap-Nukleotid am 5 -Ende Polyadenylierung am 3 -Ende
Es ist die Zeit gekommen, zu verstehen, wie es zur Proteinbiosynthese kommt?! Wobei jeweils eine AS von 3 Basen codiert wird..
Proteinbiosynthese Es ist die Zeit gekommen, zu verstehen, wie es zur Proteinbiosynthese kommt?! Alle Proteine, sind über die DNA codiert Wobei jeweils eine AS von 3 Basen codiert wird.. GENETISCHER CODE
Eukaryotische messenger-rna
Eukaryotische messenger-rna Cap-Nukleotid am 5 -Ende Polyadenylierung am 3 -Ende u.u. nicht-codierende Bereiche (Introns) Spleißen von prä-mrna Viele Protein-codierende Gene in Eukaryoten sind durch nicht-codierende
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Die DNA Replikation Musterstrang Neuer Strang Eltern-DNA-Doppelstrang Neuer Strang Musterstrang Exakte Verdopplung des genetischen Materials Die Reaktion der DNA Polymerase 5`-Triphosphat Nächstes Desoxyribonucleosidtriphosphat
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