Evaluierung der derzeit angeordneten Spendertestungen auf virale Marker
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- Martin Heintze
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1 Evaluierung der derzeit angeordneten Spendertestungen auf virale Marker 4. Sitzung der DGTI Sektion Sicherheit von Blutprodukten Lübeck - Travemünde Michael Chudy Molekulare Virologie
2 Transfusionsmedizin: Screening-Teste (Virusmarker) Verpflichtende Testung: Serologie: - HBsAg (1970) - anti-hiv (1985) - anti-hcv (1990) - anti-hbc (10/2006) NAT - HCV-RNA IU/ml per ID (04/1999) - HIV-1-RNA IU/ml per ID (05/2004) Freiwillige Testung: NAT (HBV-DNA, HAV-RNA, B19V-DNA, WNV-RNA, HEV RNA) Surrogatmarker: ALT (RL von 1968; Testung bis 2003/2004)
3 Infektionsepidemiologische Daten von Blutspendern 2010* *Offergeld et al., Bundesgesundheitsbl 55: (2012)
4 German Blood Donor Population Epidemiological Data* Prevalence (first time donor) Seroconversions (repeat donor) *Offergeld et al., Bundesgesundheitsbl 55: (2012)
5 Fälle transfusionsbedingter viraler Infektionen für den Zeitraum * HCV-NAT HIV-1-NAT Anti-HBc HCV Infektionen nach Gabe von: EK Pool-TK Apherese TK GFP Gesamt HIV Infektionen nach Gabe von: EK TK GFP Gesamt HBV Infektionen nach Gabe von: EK Pool-TK Apherese- TK GFP Gesamt *Hämovigilanzbericht des Paul-Ehrlich-Instituts, Funk et al., 2014 (Draft) 1999: keine HCV Infektionen
6 Re-evaluation of test kits 6
7 HIV Seroconversion Sensitivity 7
8 HCV Seroconversion Sensitivity - Antibody Assays 8
9 State of the art HBsAg seroconversion sensitivity 9
10 Analytical sensitivity of HBsAg-tests (gt A/adw2) 0.13 IU/ml HBsAg*) WHO study: Chudy et al. 2013; J Clin Virol 58:47-53; French study: Servant-Delmas et al. 2012; J Clin Virol 53: *CTS requirement, IVD Directive 98/79/EC 10
11 J. Clin. Microbiol. 2013, 51(11):3484. DOI: /JCM Lumipulse HBsAg-HQ assay (ChLIA); Fujirebio, Inc. Analytical sensitivity 0,005 IU/ml
12 WHO anti-hbc International Standard 12
13 Analytische Sensitivität und Spezifität CEmarkierter Anti-HBc-Teste Schmidt M, Nübling CM, Scheiblauer H, Chudy M, Walch LA, Seifried E, Roth WK, Hourfar MK. Anti-HBc screening of blood donors: a comparison of nine anti-hbc tests. Vox Sang 2006;91(3): (1000 nicht anti-hbc vorgescreente Spender; Spezifität >99,5%, einige Tests 99,7-99,9%) Scheiblauer H, Freguson M, Volkers P, Nick S. Report of the collaborative study to establish the First InternationalStandard for the detection of antibodies to hepatitis B core antigen (anti-hbc), human plasma. WHO/BS/ (Tests zeigen größere Sensitivitäts- als Spezifitätsunterschiede) Kein Bestätigungstest verfügbar
14 Bekanntmachung Veröffentlicht am Dienstag, 19. Februar 2013 BAnz AT B4 Seite 1 von 7 Paul-Ehrlich-Institut Bundesinstitut für Impfstoffe und biomedizinische Arzneimittel Bekanntmachung Abwehr von Arzneimittelrisiken Anordnung von Auflagen nach 28 zu den Zulassungen für zelluläre Blutkomponente und gefrorene Frischplasmen (Anordnung von Auflagen nach 28 Absatz 3c des Arzneimittelgesetzes [AMG] zur Risikovorsorge für die Sicherheit von Blutkomponenten zur Transfusion und von Stammzellpräparaten zur hämatopoetischen Rekonstitution: Untersuchung auf HIV, HBV und HCV) Vom 7. Januar
15 PEI Stufenplan IVD - Spenderscreening Stufenplanverfahren zur Abwehr potentieller Risiken bei der Spendertestung Begründung: 1.Sensitivitätsstandard in der EU gemäß RL 98/79/EG und CTS nicht einheitlich umgesetzt Tests mit ungenügender Sensitivität auf dem Markt 2.Chargenprüfung wird nicht durchgeführt oder unterschiedlich interpretiert Auftreten von Chargenmängel 3.Anzahl und Art der CE-markierten Tests im Markt nicht bekannt, weil keine funktionierende Datenbank Maßnahme: Positivliste: Definition von Testsystemen, die den erforderlichen Sicherheitsstandard aufweisen 15
16 NAT Analytical Sensitivity and ID Detection Limit Analytische Testsensitivität 95%-Wert Amplifikation / Detektion <10 GE/Ansatz NAT (Extraktion/Amplifikation/Detektion) abhängig vom Probenvolumenäquivalent für die Amplifikation/Detektion MP-Format (bis MP96) auf Einzelspende beziehen Nachweisgrenze bezogen auf die Einzelspende HCV-NAT: IU HCV-RNA/ml HIV-1-NAT: IU HIV-1-RNA/ml (WNV-NAT): 250 Kopien WNV-RNA/ml 16
17 NAT Überprüfung der angeordneten Maßnahmen PEI-Ringversuch PEI-Stufenplan / Informationsaustausch 17
18 PEI Stufenplan NAT only / Januar 2008 Stufenplan zur Abwehr von Arzneimittelrisiken (Stufe 1) Wissenschaftlicher Informationsaustausch zum Auftreten von isoliert NAT positiven Ergebnissen beim Spender-Screening auf HIV-1- und HCV-Genom Wie viele serologisch negativ getestete Spenden wurden in (oder im Auftrag) Ihrer Einrichtung seit der verbindlichen Einführung der NAT- Testung positiv auf HCV-RNA oder HIV-1-RNA getestet? -Daten bis Dezember 2007
19 HCV and HIV1 NAT Yield* Period of Mandatory NAT Donations tested NAT Yield Cases NAT Yield cases / Donations tested Break- through Trans- missions HCV mio 92 1 / 444,000 1 HIV ** 2010** 31.4 mio 23 1 / 1,365,000 2 *Nübling et al. (2009) Transfusion 49: , mod. **PEI-Stufenplan, Stufe 1, Wiss. Informationsaustausch HIV-1 NAT-Testsysteme,
20 Vorbereitung PEI Stufenplan NAT only / 2014 (1) Stufenplan zur Abwehr von Arzneimittelrisiken (Stufe 1) Wissenschaftlicher Informationsaustausch zum Auftreten von isoliert NAT positiven Ergebnissen beim Spender-Screening im Zeitraum Jan 2008 bis Dez 2013 (= 6 Jahre) 1.Anzahl serologisch negativ / NAT-Screening (HCV- und HIV-1-RNA) positiv getesteter Spenden 2.HBV a. Anzahl serologisch (HBsAg/anti-HBc) negativ / HBV-NAT- Screening positiv getesteter Spenden b. Anzahl anti-hbc positiv / HBV-NAT-Screening positiv getesteter Spenden c. Anzahl anti-hbc positiv / HBV-NAT-Screening negativ getesteter Spenden oder kein HBV-NAT-Screening, die in der Abklärung NAT-ID positiv waren d. Angaben Testsysteme; NAT MP/ID e. HBsAg positive Spenden
21 Vorbereitung PEI Stufenplan NAT only / 2014 (2) 3. Charakterisierung NAT-positiv (HCV- und HIV-1-RNA, HBV-DNA) getesteter Spenden 4. Berücksichtigung für die Bewertung der Methoden zur Pathogenreduktion für Blutkomponenten hinsichtlich der jeweiligen Viruskonzentration im diagnostischen Fenster
22 PEI Stufenplan dual-target HIV-1-NAT Datum In-Krafttreten Jan 2015 CE-Screening Dual-target HIV-1-NAT Multiplex (Mono-target): zweite HIV-1-NAT (CE-Screening/Nonscreening /In-haus) mit anderer Zielregion CE- Non-screening / In-Haus Dual-target HIV-1-NAT Zwei HIV-1-NATs mit unterschiedlicher Zielregion
23 Risiko einer unerkannten Fensterphasenspende HIV 1 : 4,6 Millionen HCV 1 : 4,2 Millionen HBV 1 : bezogen auf die deutschen Daten des Zeitraums 2002/ Modell beruht auf die heute verpflichtend vorgeschriebenen Testverfahren (HIV-1-NAT, HCV-NAT, HBsAg) Epidemiologisches Bulletin 40/2005
24 Bekanntmachung Veröffentlicht am Dienstag, 18. März 2014 BAnz AT B6 Seite 1 von 2 Paul-Ehrlich-Institut Bundesinstitut für Impfstoffe und biomedizinische Arzneimittel Bekanntmachung über die Zulassung von Arzneimitteln Abwehr von Arzneimittelrisiken Stufe II (Neufassung: Testung auf Antikörper gegen Hepatitis-B-Core-Antigen [anti-hbc] im Blutspendewesen) Vom 7. Februar 2014 Nach schriftlicher Anhörung des Paul-Ehrlich-Instituts vom 8. August 2013 ergeht an die pharmazeutischen Unternehmer, die zelluläre Blutprodukte und therapeutische Einzelplasmen sowie allogene Stammzellzubereitungen nach 21a des Arzneimittelgesetzes (AMG) in den Verkehr bringen, folgender Bescheid Die Auflage zur Testung auf Antikörper gegen Hepatitis-B-Core-Antigen (Anti-HBc) im Blutspendewesen vom 8. Mai 2006 (BAnz. S. 4370) wird wie folgt neu gefasst:
25 HBV Data Germany HBsAg prevalence % Anti-HBc prevalence 2-3 % 767 HBV reported cases for 2010 incidence 0.9 / inhabitants Germany: HBV low-endemic BUT: Underreporting of HBV cases Asymptomatic cases HBV carriers in the emigration population
26 Stramer et al. 2011; Transfusion 52: Blood donation screening for hepatitis B virus markers in the era of nucleic acid testing: are all tests of value? BACKGROUND: ARC implemented HBV MP16-NAT (Ultrio assay; Gen-Probe/Novartis) in June 2009, in addition to existing tests HBsAg (PRISM) and anti-hbc. The value of all three tests was evaluated. RESULTS: (July 1, 2009-June 30, 2010): 699 HBV-infected donors of about 6.5 million donations 697 (99%) had reactivity to one or both serologic tests 2 WP donations, NAT only (1 per 3.23 million) 64% (444) were reactive for all three markers 477 TMA reactive donations 142 occult HBV-infected donors 121 (85%) were MP-NAT nonreactive requiring ID-PCR for detection 21 were MP-NAT reactive CONCLUSIONS: The HBV DNA positive yield rate from MP-NAT was lower than expected, likely representing the rarity of such findings even in very large studies (1 per 3.23 million). With the implementation of HBV MP-NAT, the value of maintaining anti-hbc for the detection of low-level HBV DNA positive donors was confirmed; however, HBsAg screening showed no blood safety value.
27 Lieshout-Krikke et al. 2014; Eur J Clin Microbiol Infect Dis 33: Surface antigen-negative HBV infection in Dutch blood donors Since the start of HBV DNA screening (4.4 m donations): MP480 since Jul Nov 2008 (2.1 m); MP6 since Nov 2008-Jun 2011 (2.3 m); anti-hbc since Jul 2011) Conclusion: Ratio NAT+/sero- donation: 1 per 1.1 m / 1 per 575,000 HBsAg testing may have become superfluous.
28 HBV NAT Yield WP Donation Value of MP Testing Comparison of the two studies Study US Dutch NAT yield 1 per 3.23 million 1 per 575,000 Screening test Procleix Ultrio TIGRIS cobas TaqScreen MPX/s201 Pool size MP16 MP6 Sensitivity Test IU/ml 3.7 IU/ml Per ID 167 IU/ml 22.6 IU/ml Transmission by WP donations??
29 Value of HBV NAT- / HBsAg- / anti-hbc-testing - A personal view - Acute infection Pre - SV SV Late SV Chronic inact. infection Low-level carrier/obi HBsAg healthy carrier HBV DNA /+ 2 -/+ 3 - HBsAg - + (- 4,5 ) -/+ - + Anti-HBc (- 6 ) anti-hbc total 2 ID>MP 3 ID 4 HBV gt G decreased HBsAg secretion 5 escape mutants (S gene) 6 cases 1 st anti-hbs/2 nd anti-hbc 29
30 Value of HBV NAT- / HBsAg- / anti-hbc-testing - A personal view - Acute infection Pre - SV SV Late SV Chronic inact. infection Low-level carrier/obi HBsAg healthy carrier HBV DNA /+ 2 -/+ 3 - HBsAg - + (- 4,5 ) -/+ - + Anti-HBc (- 6 ) anti-hbc total 2 ID>MP 3 ID 4 escape mutants (S gene) 5 HBV gt G decreased HBsAg secretion 6 cases: 1 st anti-hbs/2 nd anti-hbc 30
31 PEI WNV Stufenplan 31
32 WNV NAT PEI-Reference Preparation PEI-Reference WNV RNA Code 9002/14 Lineage 1 Verdünnt in humanem Negativplasma Lyophilisiert / nicht inaktiviert Resuspension in 0.5 ml (ca Kopien/ml) Kalibriert gegen kanadisches WNV-Material Geeignet für Bestimmung der analytischen Sensitivität Run Control Voraussichtlich verfügbar ab 05/
33 WNV-NAT Ringversuch ISS ISS EQA Programme WNV RNA Scheme for 2014 is officially open. The panels will be shipped according to the following timeline: From April 2014: the first WNV Panel (10 samples/panel) From September 2014: the second WNV Panel 2 (10 samples/panel) Participation is free of charge. Participant has to cover only the shipment fee. Interested German laboratories are welcome Contact by giulio.pisani@iss.it Dr. Giulio Pisani, Istituto Superiore di Sanità 33
34 Besten Dank an Julia Kreß und Micha Nübling (Mol. Virol.) Sigrid Nick und Heiner Scheiblauer (PEI-IVD) Markus Funk (PharmVig) Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit! 34
35 Herstellung und errechneter Verbrauch von Blutkomponenten von 1999 bis 2012: Meldung an das PEI gemäß TFG 21* Jahr Herstellung Einheiten x 10 6 EK TK GFP EK, TK, GFP Verbrauch* Einh. x 10 6 Herstellung Einh. x 10 6 Verbrauch* Einh. x 10 6 Herstellun g Verbrauch * Herstellung Einh. x 10 6 Verbrauch* Einh. x 10 6 Einh. x 10 6 Einh. x ,28 3,99 0,41 0,32 1,81 1,74 6,50 6, ,26 3,93 0,42 0,33 1,53 1,43 6,21 5, ,32 4,03 0,39 0,32 1,45 1,38 6,16 5, ,45 4,12 0,38 0,33 1,28 1,23 6,11 5, ,24 3,93 0,37 0,30 1,11 1,05 5,72 5, ,54 4,26 0,41 0,36 1,18 1,11 6,13 5, ,56 4,29 0,43 0,38 1,09 1,03 6,08 5, ,52 4,29 0,45 0,41 1,10 1,05 6,07 5, ,57 4,35 0,48 0,43 1,27 1,22 6,32 6, ,71 4,49 0,51 0,45 1,23 1,17 6,45 6, ,74 4,54 0,52 0,44 1,14 1,10 6,40 6, ,77 4,50 0,55 0,47 1,20 1,15 6,52 6, ,76 4,48 0,57 0,49 1,13 1,14 6,46 6, ,59 4,34 0,59 0,49 1,52 1,50 6,70 6,33 Berechnung erfolgte aufgrund der Angaben zum Verfall beim Hersteller und Anwender *Hämovigilanzbericht des Paul-Ehrlich-Instituts, Funk et al., 2014 (Draft)
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