2. Material 16. Die verwendeten Chemikalien und Lösungen wurden von folgenden Herstellern bezogen:
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- Hede Messner
- vor 7 Jahren
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1 2. Material Material 2.1. Versuchstiere Folgende Mausstämme wurden verwendet: Balb/c byj-mäuse (Balb/c) Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME, USA B6.129P2-IL10 tm1cgn -Mäuse (IL10 -/- ) Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME, USA C57 BL/6J-Mäuse (BL6) Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME, USA B6.129S2-TGFb1 tm1doe -Mäuse (TGF-β +/- ) Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME, USA Do11.10-Mäuse (Do11.10) Deutsches Rheumaforschungszentrum, Berlin 2.2. Chemikalien und Lösungen Die verwendeten Chemikalien und Lösungen wurden von folgenden Herstellern bezogen: Agarose PEQ Lab (Erlangen, D) Albumin bovin Fraction V Serva Aqua dest. laboreigene Anlage BSA SERVA (Heidelberg, D) Calciumchloride entwässert 95 % Roth Concanavalin A (ConA) (Steinheim, D) DEPC-H2O Diluent Concentrate1 (ELISA) CT Di-Natriumhydrogenphosphat (Na 2 HPO 4 ) (Darmstadt, D) DMEM Biochrom DPBS Cambrex (Verviers, B) EDTA (Darmstadt, D) Entellan Essigsäure 100 wasserfrei (Darmstadt, D) Ethanol 96 % reinst (Seelze, D) Ethanol 96 % vergällt Universitätsapotheke Halle FCS Biochrom (Berlin, D) G418 (Geneticin) Glutaraldehyd SIGMA HCL-Alkohol
2 2. Material 17 HEPES (Steinheim, D) Imject Alum Pierce (Bonn, D) Immersionsöl (Darmstadt, D) Isofluran Abbott (Wiesbaden, D) Isopropanol (Steinheim, D) K 3 Fe(CN) 6 Kaliumchlorid Kanamycin L-Glutamin Biochrom Lysepuffer Universitätsapotheke Halle Magnesiumchlorid Mercaptoethanol Methacholinchlorid (Steinheim, D) Methanol -Lösung 0,9 %ig, steril Baxter (Unterschleißheim, D) Natriumazid (NaN 3 ) (Darmstadt, D) Natriumcarbonat (Na 2 CO 3 ) (Darmstadt, D) Natriumchlorid () Applichem (Darmstadt, D) Natriumdihydrogenphosphat (NaH 2 PO 4 ) (Darmstadt, D) Natriumdodecylsulfat (SDS) (Steinheim, D) Natriumhydrogencarbonat (NaHCO 3 ) (Darmstadt, D) Natriumhydroxid (NaOH) Roth (Karlsruhe, D) Nonidet P 40 (NP40) Roche (Mannheim, D) Nutridoma Roche (Mannheim, D) Ovalbumin (OVA) (Steinheim, D) PenStrep Biochrom (Berlin, D) Pepstatin A Phenol/Chloroform Isoamyl Alkohol Proteinase K (Steinheim, D) RPMI-Medium Biochrom Salzsäure 37 % rauchend (HCl) (Darmstadt, D) Schwefelsäure (H 2 SO 4 ) (Darmstadt, D) Stickstoff (flüssig) laboreigene Anlage Streptavidin HRP R&D (Wiesbaden, D) Sucrose Thymidin Methyl Perkin Elmer Tissue Wax Einbettmittel medite
3 2. Material 18 TMB (Tabletten) (Steinheim, D) Tris Roth (Karlsruhe, D) Trizol Invitrogen Tryphanblau Tween 20 Calbiochem (Darmstadt, D) Wasserbad-Schutzmittel Wasserstoffperoxid 30 %ig ( 2 ) (Darmstadt, D) X-Galaktosidase Xylol (Darmstadt, D) Zitronensäure Applichem (Darmstadt, D) 2.3. Farbstoffe Bromphenolblau Merk Eosin (Darmstadt, D) Ethidiumbromid (Steinheim, D) Giemsa Lösung MAYERS Hämalaun (Darmstadt, D) May-Grünwald Perjodsäure (Darmstadt, D) Schiffsreagenz (Darmstadt, D) Trypanblau (Darmstadt, D) 2.4. Zellen cos7 cells XL1 blue Competent Cells Stratagene Stratagene
4 2. Material Lösungen, Puffer und Medien 2x HBS-Lösung (HEPES-buffered saline) 280 mm KCl 10 mm Na 2 HPO 4-2 1,5 mm Dextrose 12 mm HEPES 50 mm NaOH ph auf 7,1 einstellen TES-Puffer, ph 7,5 (1l) Tris-HCL (ph 7,5) EDTA (ph 7,5) 10 mm 1 mm 10 mm add 1l Detergenz-Puffer (100 ml) Tris (ph 8,3) 9,9 ml (100 mm) KCl 500 mm (0,37g) Nonidet P40 (NP40) 0,045 % (45 µl) Tween 20 0,045 % (45 µl) add 100 ml DPBS-Tween20 (1l) DPBS 1000 ml Tween µl Giemsa-Lösung Giemsa (ph 7,2) Essigsäure (konz.) 120 ml 80 ml 12 ml SOB-Medium (1l) bacto-tryptone 20 g yeast-extrakt 5 g 0,5 g KCl (250 mm) 10 ml mit NaOH auf ph 7 einstellen, autoklavieren MgCl 2 (2 M) 5 ml add 1l LB-Medium (1l ) Pepton aus Casein 10 g yeast Extract 5 g 10 g add 1l mit NaOH auf ph 5 einstellen
5 2. Material 20 Extraktionslösung 320 µl EtOH 96 % 7,6 ml konz. HCL 0,16 ml Pepstatin A (5 mg in 1 ml Methanol) 8 µl PMSF (871 mg in 25 ml Isopropanol) 670 µl Calcium-Phosphat-DNA-Präzipitations-Ansatz 219 µl 2xHBS Lösung 0,25 ml DNA (TGF-β-Vektor) 2 µg CaCl 2 -Lösung 31 µl 2.6. Puffer, Lösungen und Antikörper für ELISA Carbonat-Puffer: 150 mm Na 2 CO 3 ; 350 mm NaHCO 3 ; 20 % (w/v) NaN 3 ; ph 9,6 Citrat-Phosphat-Puffer: 0,1 M Zitronensäure; 0,2 M Na 2 HPO 4 ; ph 5,0 ELISA-Waschpuffer: PBS; 0,05 % (v/v) Tween 20 ELISA-Blockpuffer: PBS; 1 % (w/v) BSA; 5 % (w/v) Sucrose; 0,05 % (w/v) NaN3 TGF- β ELISA-Blockpuffer: PBS; 5 % (v/v) Tween 20; 5 % (w/v) Sucrose; 0,05% (w/v) NaN 3 Serum Diluent (SD): PBS; 0,1 % (w/v) BSA; 0,05 % (v/v) Tween 20 TGF-β Serum Diluent: PBS; 1,4 % (v/v) DuoSet Diluent-Konzentrat; 0,05 % (v/v) Tween 20 ELISA-Stopplösung: 2 N H 2 SO 4 ELISA-Substrat-Lösung: 1 Tablette TMB in 10 ml Citrat-Phosphat-Puffer (ph 5,0) auflösen und 2 µl 2 zusetzen Antikörper: Für die ELISA wurden Quantikine DuoSet -ELISA-Kits der Firma R&D Systems verwendet: anti-maus IL-4, anti-maus IL-5, anti-maus IL-10, anti-maus IL-13, anti-maus IFN-γ, anti-maus TGF-ß 1. Zum Nachweis von OVA-spezifischen Serum-Antikörpern wurden HRP-konjugierte Antikörper der Firma Southern Biotechnology bzw. BETHYL verwendet: Ziege anti-maus IgE, Ziege anti-maus IgG 1, Ziege anti-maus IgG 2a.
6 2. Material Molekularbiologische Reagenzien fertige Systeme ( Kits ): Taq PCR-Kit Qiagen (Hilden, D) DuoSet TGF-β R&D Systems EndoFree TM Plasmid Giga Kit Qiagen Gel Purifikatio MinElut Gel Extraktionskit Qiagen Qiafilter Plasmid Endofree Giga Kit Qiagen Primer: Die für die PCR eingesetzten Oligonukleotid-Primer wurden von der Firma MWG Biotech AG synthetisiert. Sie wurden sie in Aqua dest. gelöst (100 pmol/µl), aliquotiert und bei 20 C gelagert. mil-10 antisense 3 -GCA GTC GAC TTA GCT TTT CAT TTT GAT CAT CA- 5 mil-10 sense 5 -ACA CTC GAG CAT CAT GCC TGG CTC AGC- 3 mß-actin-antisense 3 - AAA CGC AGC TCA GTA ACA GTC GCG CTA GAA -5 mß-actin-sense 5 -TGG AAT CCT GTG GCA TCC ATG AAA CTA CAT -3 mtgfß-antisense 3 - CAT GTC GAC TCA GCT GCA CTT GC- 5 mtgfß-sense 5 - CTA CTC GAG ATG GCC CTG GAT AC- 3 pires2/egfp-as GCC CTC ACA TTG CCA AAA GAC G-3 IL-10-s TGT CAT CGA TTT CTC CCC TGT G-3 Neo R1 5 AGA CAA TCG GCT GCT CTG AT 3 Neo R2 5 CAA TAG CAG CCA GTC CCT TC 3 Primer IMR031 5 GAG AAG AAC TGC TGT GTG CG 3 Primer IMR032 5 GTG TCC AGG CTC CAA ATA TAG G 3 Plasmide: Probenpuffer: Laufpuffer: pccall; pires2-egfp; ppcr Script Amp SK+ (Clontech) 1 mm EDTA; 20 % (v/v) Glycerin; 0,5 % (w/v) Bromphenolblau; 0,05 % (w/v) Xylencyanol 1 x TAE-Puffer Standard: Gene Ruler TM 1kbp DNA Ladder (Fermentas, St. Leon-Rot, D) Weitere Reagenzien CIAP-Phosphatase + Puffer Deoxyribonuclease I (DNA-se) Fermentas Pfu turbo DNA Polymerase Stratagene Plasmide Clontech Primer Oligo (dt) MWG AG Biotech Restriktionsenzyme MBI Fermentas Superscript TM II Reverse Transkriptase Promega T4 DNA Ligase MBI-Fermentas Taq DNA Polymerase ( Rekombinat) Invitrogen
7 2. Material Laborgeräte und Apparaturen Absaugsystem mit Vakuumpumpe (Darmstadt, D) Bakterien-Schüttler (Darmstadt, D) Brutschrank BBD6220 Heraeus (Gera, D) Elektrophoresegerät Consort E143 PEQ Lab (Erlangen, D) Elektrophorese-Kammer PEQ Lab (Erlangen, D) ELISA-Platten-Washer Elx 50 BIO-TEK (Bad Friedrichshall, D) Feinwaage Sartorius (Göttingen, D) Fluor-S TM Multi Imager BioRad (Bio-Rad Laboratories, Hercules, USA) Ganzkörper-Plethysmograph EMKA (Paris, F) HERA Safe Heraeus (Gera, D) Heraeus Biofuge fresco Kendro (Hanau, D) INOTECH Harvester Perkin Elmer (Freiburg, D) Kamera SPOT INSIGHT 3 Shot QE VISITRON SYSTEMS GmbH (Puchheim, D) Laminar-Air-Flow Heraeus (Gera, D) Magnetrührwerk (MR 3001) Heidolph (Kelheim, D) Multifuge 3 S-R, Rotor Sorvall Heraeus (Gera, D) PCR-Gerät MultiCycler PTC 200 Biozym (Oldendorf, D) ph-meter Qph 70 (Darmstadt, D) Power Supply peqlab (Erlangen, D) Rotations-Mikrotom MICROM (Walldorf, D) Tiefkühltruhe -80 C Heraeus (Gera, D) Ultra Microplate Reader Elx 808 BIO-TEK (Bad Friedrichshall, D) Ultraschallinhalationsgerät Schill Medizintechnik (Ulm, D) Vortexer (Bruchsal, D) Wasserbad (Darmstadt, D) Zeiss Axioskop 40 Carl Zeiss (Göttingen, D)
2. Material Material Chemikalien Radiochemikalien Restriktionsenzyme Enzyme (andere)
12 2. Material 2.1. Material 2.1.1. Chemikalien Alle verwendeten Chemikalien wurden in höchstem Reinheitsgrad von folgenden Firmen bezogen:, Difco Laboratories, FMC Bioproducts, Gibco BRL, Merck,, Sigma
3,58 g 0,136 g. ad 100 ml
9 Anhang 9.1 Rezepturen der Puffer und Lösungen 9.1.1 Vorbereitung der Proben zur Extraktion Coon s-puffer (0,1 M, ph 7,2-7,6) Na 2 HPO 4 x 12 H 2 O KH 2 PO 4 Aqua dest. 3,58 g 0,136 g 8,77 g 9.1.2 Aufbereitung
5,6- Carboxy- Rhodamin (Rox) TIB MolBiol, Berlin Desoxynukleosidtriphosphat (dntp)
8 Anhang 8.1 Chemikalien und Reagenzien Bromphenolblau Bromma, Schweden 5,6- Carboxy- Rhodamin (Rox) TIB MolBiol, Berlin Desoxynukleosidtriphosphat (dntp) Invitrogen TM, Karlsruhe Ethanol (RNase-frei)
Dendrogramm der Primaten
Arbeitsblatt 1 Dargestellt ist ein Ausschnitt der DNA-Sequenz für das Enzym NAD- Polymerase, dass bei den Primatenarten Mensch(M), Schimpanse(S), Gorilla(G), Orang-Utan(O) und Gibbon(Gi) vorhanden ist.
Material. 3 Material. 3.1 Reagenzien
3 Material 3.1 Reagenzien Tabelle 1: verwendete Reagenzien Substrat Hersteller Firmensitz Agarose (NEEO, Ultra-Qualität) Carl Roth Karlsruhe BPB (Bromphenolblau) Merck Darmstadt DEPC (Diethylpyrocarbonat)
Material MATERIAL 3.1 Oligonukleotide
Material 13 3 MATERIAL 3.1 Oligonukleotide AGK34 LINE1 Ale1 Ale3 LIS1 LIS2 UR UL RA2 LS2 pbst7 sp6 DOP (6-MW) pcypac2-01 pcypac2-02 SD2 SA2 SA4 SD6 D11S2164 (CP5) forward D11S2164 (CP5) revers M16 forward
2 Materialien. Materialien 15. 2.1 Histondeacetylaseinhibitoren (HDIs) Sigma-Aldrich, Deutschland. 2.2 Zelllinien und Zellkultur.
Materialien 15 2 Materialien 2.1 Histondeacetylaseinhibitoren (HDIs) Substanz Butyrat Trichostatin A (TSA) Valproat Hersteller Sigma-Aldrich, Sigma-Aldrich, Sigma-Aldrich, 2.2 Zelllinien und Zellkultur
Bezeichnung Sequenz Verwendung
8 ANHANG i 8 ANHANG I Oligonukleotide Bezeichnung Sequenz Verwendung D256 5 -ATGGCAGACGGTGAGGATATTCA-3 5 Aktin AC1 (neu) D257 5 -GCCTTTGCAATCCACATCTGTTG-3 3 Aktin AC2 (neu) D98 5 -AT CC ATG GCA ATG TCA
Sigma-Aldrich Chemie GmbH, München Merck Biosciences, Darmstadt. Thermo Hybaid GmbH, Ulm Roche Diagnostics GmbH, Mannheim
3 Materialien 28 3 Materialien 3.1 Chemikalien Acrylamid Agar Agarose Ammoniumsulfat Ampicillin, Natriumsalz L-Arabinose Bradford-Reagenz Bromphenolblau Caseinhydrolysat Chloramphenicol Chloroform Coomassie-Brillant-Blau
kanr camr F trad36, lac I q lacz M15 proab/supe thi (lac-proab), λimm434 (P1)
Material 12 2. Material 2.1 Tierstämme CD-1(ICR)BR, Auszucht-Maus Dll1-Knockout-Mäuse Hühnereier, Gallus gallus Charles River, Deutschland GSF, München Geflügelanstalt, Kitzingen Brüterei Mahler, Rimpar
2 Material. Material und Methoden 17
Material und Methoden 17 2 Material Alle Chemikalien hatten mindestens den Reinheitsgrad pro analysii und wurden, sofern nicht anders angegeben, von den Firmen Sigma (München), Serva (Heidelberg) oder
7 Anhang. Tabelle I: Zusammensetzung der Restriktionsansätze.
7 Anhang Tabelle I: Zusammensetzung der Restriktionsansätze. Reagenz Konzentration Volumen je Endkonzentration der Stammlösung Reaktionansatz Reaktionspuffer 10x NEB-Puffer 2 1.50 µl 1x MseI 4 U/µl 0.30
Tab. 2-1: TKZT-Zelllinien, Herkunft, histologische Eigenschaften und Referenzen
Material 28 2 MATERIAL 2.1 Zelllinien In der vorliegenden Studie wurden etablierte Zelllinien von nichtseminomatösen TKZT untersucht. Die Untersuchungen wurden zunächst an den drei Zelllinien H12.1, 2102EP
3 Materialien. 3.1 Verwendete Geräte. Begasungsbrutschrank Biolistic PDS1000/He. Coulter Counter Z1 Coulter Multisizer II
44 3 Materialien 3.1 Verwendete Geräte Gerät Babygelkammer Begasungsbrutschrank Biolistic PDS1000/He Cell Quest (Software) Counter Z1 Multisizer II Durchflußzytometer FACS-Calibur Elektrische Präzisionswaage
A- Zugabe von 180µl Pufferlösung und Proteinase K, Inkubation bei 56 C. B- Zugabe von 200µl einer zweiten Pufferlösung, Inkubation bei 70 C
3 Methoden 3.1 Extraktion der DNA aus den Paraffinschnitten 3.1.1 Extraktions-Kit Das QIAamp DNA Mini Kit- System beruht auf dem Prinzip der Auflösung der Eiweiße mit Proteinase K, DNA Bindung an eine
2 Zielstellung der Arbeit
- 16-2 Zielstellung der Arbeit Ziel der vorliegenden Arbeit ist der Nachweis von Fas, FasL und CD97 und die Ermittlung deren Expressionsgrades mittels RT PCR und Immunhistochemie beim Schilddrüsenadenom
3. Methoden Behandlungs- und Immunisierungsprotokolle. Protokoll zur präventiven Vektor-Applikation in Balb/c-Mäuse
3. Methoden 23 3. Methoden 3.1. Arbeiten im Tiermodell 3.1.1. Tiere Die Zucht und Haltung erfolgte in der Maushaltung der Medizinischen Fakultät im BioZentrum Halle. Die Tiere wurden je nach Behandlungsprotokoll
8.1. Zusammensetzung und Herstellung der verwendeten Medien für die In-vitro-Maturation, -Fertilisation und - Kultivierung
8. Anhang 8.1. Zusammensetzung und Herstellung der verwendeten Medien für die In-vitro-Maturation, -Fertilisation und - Kultivierung 1.) Spüllösung (modifizierte PBS-Lösung) modifizierte PBS-Lösung 500
2. Material und Methoden
2. Material und Methoden 2.1. Material 2.1.1. Geräte BioPhotometer 6131 (Eppendorf, Hamburg, D.) Durchlichtmikroskop BX 60 (Olympus, Hamburg, D.) Durchlichtmikroskop MZ 12 (Leica, Bensheim, D.) Feinwaage
2. MATERIAL UND METHODEN
2. MATERIAL UND METHODEN 2.1 Material 2.1.1 Proben zur DNA-Analytik Blutproben zur Gewinnung von DNA aus Leukozyten wurden uns freundlicherweise von Dr. Ramaekers, Universität Aachen, überlassen. Ein positives
2. Material und Methoden
9 2. Material und Methoden 2.1. Versuchstierhaltung und Embryonengewinnung Als Versuchstiere standen uns geschlechtsreife weibliche Hybridkaninchen (ZIKA-Hybriden, Basiszucht: Fa. Krieg, Niederwünsch)
MODUL 2.36 KLINISCHE CHEMIE UND LABORDIAGNOSTIK. TAG 6: HLA-Typisierung
MODUL 2.36 KLINISCHE CHEMIE UND LABORDIAGNOSTIK TAG 6: HLA-Typisierung Diese Anleitung bitte ausdrucken, vor dem Praktikumstag durcharbeiten und mitbringen! Inhalte der Einführungsvorlesung und der Anleitung
TCC CCA GTG AAG ACC TCC TCA GAG TCC GAC TCT. 56 C 67 siehe oben siehe oben siehe oben 56 C 66 CCG GCG CCA TTC TAT CC CGA GAA TCT GAC GCA GG 56 C 738
128 9. Anhang 9.1. Tabelle der verwendeten Primerpaare Nr. Name Sequenz 5 3 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 rcar. 981s rcar. 981s GAPDH. 682s GAPDH. 826a GAPDH. 381s GAPDH. 826a 18S-rRNA. 216s 18S-rRNA.
Primer zum Nachweis eukaryoter DNA (Kontroll-PCR) Primer Sequenz Ziel-Gen Produktgröße T a
7 Anhang 7.1 Primersequenzen Alle Oligonukleotide sind in 5-3 -Orientierung aufgelistet. 7.1.1.1.1 Primer zum Nachweis eukaryoter DNA (Kontroll-PCR) 258 s CCA TCC AAC ATC TCA GCA TGA TGA AA GCC CCT CAG
Material. Verwendungszweck WB: Western Blot FACS:Durchflusszytometrische Analyse IF: Immunfluoreszenz TZS: T-Zell Stimulation.
2 Material 2.1 Antikörper Antikörper und Bindungsmoleküle Klon Verwendungszweck WB: Western Blot :Durchflusszytometrische Analyse IF: Immunfluoreszenz TZS: T-Zell Stimulation Lieferant anti-cd16/32 mak
Klassifizierung: noch nicht abgeschlossen, Verwandtschaftsverhältnis zur Familie: Desulvovibrionaceae - Vertreter Desulvovibrio desulfuricans
AVID X / 1998 Lawsonia intracellularis Seite -1- Klassifizierung: noch nicht abgeschlossen, Verwandtschaftsverhältnis zur Familie: Desulvovibrionaceae - Vertreter Desulvovibrio desulfuricans 1. ALLGEMEINES
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2. Material und Methoden 2.1. Biopsiematerial Es wurden 25 Biopsien von 14 Patienten, die wegen eines Prostatakarzinoms orchiektomiert wurden (Alter: 52-74 Jahre, Mittel: 64 Jahre), untersucht. Die lichtmikroskopische
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- 13-2 Zielstellung der Arbeit Ziel der vorliegenden Arbeit ist der Nachweis der Matrixmetalloproteasen MMP-2 und MMP-9 und deren Inhibitoren TIMP-1 und TIMP-2 mittels RT-PCR und Immunhistochemie in malignen
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6 Anhang 85 6 Anhang 6.1 Verzeichnis häufig gebrauchter Lösungen und Puffer Alkoholreihe (30%, 70%, 90%, 100% Ethanol) Zur Vereinfachung wurde das käufliche 98,8%- Ethanol als 100%-ig gesetzt. Die entsprechenden
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Anhang. Bedeutung Bezeichnung Rs + Nukleotidsequenz (5-3 ) Mutationsprimer Asp 29 Glu
AHAG 115 Anhang Tab. 13: Konstruktion der Primer zur Generierung der EcIPDC-Mutanten. Ausgetauschte ukleotide sind unterstrichen. Das ukleotidtriplett, welches für die mutierte Aminosäure codiert, ist
HLA-READY GENE ABC Low
LOT G953085 Arbeitsprotokoll / PCR Protocol 2006-12 Test-Durchführung / -Performance Datum / Date Unterschrift / Signature Bemerkungen / Comments Probe / Sample 1 2 3 4 5 Thermocycler 1 Thermocycler 2
Bezeichnung Ursprungsgewebe Referenzen ATCC-Nummer. Caki 1 Nierenzellkarzinom Fogh and Trempe (1975) HTB46
19 2. Material 2.1. Tumormaterial und Patientengut Die verwendeten Zelllinien wurden in der Abteilung Zell- und Gewebezüchtung des Institutes für Pathologie der Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg
Anhang. 1. Verwendete Abkürzungen
A Anhang 1. Verwendete Abkürzungen ACF AM Ap r/s AS ATR ß-Gal BlaM BSA bp C-Quelle CAT CFTR cfu CI CT dntp ECA EDTA ELISA EPS HAP IS Km r/s LB LPS Mbp mcs Min MBK MHK MOI MOPS MSHA NAD OD x ORF accessory
2.1.2 Anamnese und Untersuchung der Patienten
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Klonierung und Charakterisierung des. murinen Mlc1-Gens
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2 Material und Methoden
2 Material und Methoden 2.1 Materialien 2.1.1 Chemikalien, Reagenzien und Reagenziensätze Die verwendeten Chemikalien und Reagenzien, wie z.b. Puffer, Salze, Säuren, Basen und organische Lösungen wurden
HLA-READY GENE A Low SSP HLA-A low resolution
IN VITRO DIAGNOSTICUM LOT G950085 Arbeitsprotokoll / PCR Protocol 2006-12 0123 Test-Durchführung / -Performance Datum / Date Unterschrift / Signature Bemerkungen / Comments Probe / Sample 1 5 9 13 17 2
2. Material und Methoden
2. Material und Methoden 2.1 Verwendete Materialien 2.1.1 Chemikalien und Enzyme Alle verwendeten Chemikalien wurden, sofern nicht anders angegeben, bei Sigma (München), Roth (Karlsruhe), Fluka (Buchs,
Anhang. Formalin, neutral gepuffert Formalin (37-40% Formaldehyd) Dinatriumphosphat, wasserfrei Natriummonophosphat
9.1 Anhang I (Lösungen für die Immunhistochemie) Formalin, neutral gepuffert Formalin (37-40% Formaldehyd) Dinatriumphosphat, wasserfrei Natriummonophosphat Aqua dest. 100 ml 6,5 g 4,0 g ad 1000 ml TBS:
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- m K. Folgende Zellinien wurden der Stammsammlung der Arbeitsgruppe entnommen:
MATERIAL 22 3 Material 3.1 Bakterien E. coli TOP10F (Invitrogen): F (laciqteer), mcra, Δ(mrr-hsdRMS-, mcrbc), Φ80lacZΔM15, ΔlacX74deoR, reca1, arad139, Δ(ara-leu)7697, galu, galk, rpsl, enda1, nupg E.
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Bezeichnung Sequenz- Sequenz Modifikation. 5 Thiol L 39 CGA CTG CTA AGG ATC CGA ATT TCG GAT CCT TAG CAG TCG CAC TGC AGA TAT CCA TTC
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7. Anhang. 7. Anhang. Abbildung 7.1: Aminosäuresequenz AtMYC2 im Wildtyp und in jin1. Unterschiede zwischen den Sequenzen sind rot unterlegt.
7. Anhang 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 jin1 MTDYRLQPTMNLWTTDDNASMMEAFMSSSDISTLWPPASTTTTTATTETTPTPAMEIPAQAGFNQETLQQRLQALIEGTHEGWTYAIFWQPSYDFSGASV AtMYC2 MTDYRLQPTMNLWTTDDNASMMEAFMSSSDISTLWPPASTTTTTATTETTPTPAMEIPAQAGFNQETLQQRLQALIEGTHEGWTYAIFWQPSYDFSGASV
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