DLA 30/2014 Nahrungsergänzungsmittel Mittel II. Auswertungs-Bericht Laborvergleichsuntersuchung 30/2014
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1 DLA Dienstleistung Lebensmittel Analytik GbR Auswertungs-Bericht Laborvergleichsuntersuchung 30/2014 Nahrungsergänzungsmittel II: Biotin, Niacin, Pantothensäure und Vitamin C in Multivitamin-Brausetabletten Dienstleistung Lebensmittel Analytik GbR Waldemar-Bonsels-Weg Ahrensburg, Germany proficiency-testing@dla-lvu.de Koordinator der LVU: Dr. Matthias Besler Seite 1 von 27
2 Inhalt 1. Einleitung Durchführung Untersuchungsmaterial Homogenität Untersuchung Ergebnisübermittlung Auswertung Bezugswert (zugewiesener Wert) Standardabweichung Ausreißer Zielstandardabweichung (für die Eignungsbeurteilung) Allgemeines Modell nach Horwitz Auswertung eines Versuchs zur Präzision Werte aus Erkenntnissen z-score z'-score Quotient Standardunsicherheit Ergebnisse Biotin (in mg/100 g) Nicotinamid (in mg/100 g) Pantothensäure (in mg/100 g) Vitamin C (als Ascorbinsäure in mg/100 g) Dokumentation Primärdaten Biotin Nicotinamid Pantothensäure Vitamin C Homogenität Analytische Methoden Biotin Nicotinamid Pantothensäure Vitamin C Verzeichnis der teilnehmenden Institute in alphabetischer Reihenfolge Verzeichnis relevanter Literatur...26 Seite 2 von 27
3 1. Einleitung Die Teilnahme an Laborvergleichsuntersuchungen (LVU) ist ein unverzichtbarer Baustein für das Qualitäts-Management-System eines jeden, mit der Untersuchung von Lebensmitteln, Futtermitteln, Kosmetik und Bedarfsgegenständen befassten Labors. Die Durchführung von Laborvergleichsuntersuchungen ermöglicht den teilnehmenden Instituten die eigene analytische Kompetenz unter realen Bedingungen nachzuweisen. Gleichzeitig erhalten sie wertvolle Daten zur Validität der durchgeführten Untersuchungsmethode. Das Ziel von DLA ist es, LVU für ausgesuchte Parameter in praxisrelevanten Konzentrationen anzubieten. Durchführung und Auswertung der vorliegenden Laborvergleichsuntersuchung erfolgten nach den technischen Anforderungen der DIN EN ISO/IEC (2010) und DIN ISO Durchführung 2.1 Untersuchungsmaterial Bei dem Untersuchungsmaterial handelt es sich um eine Mischung von zwei handelsüblichen Nahrungsergänzungsmitteln "Multivitamin-Brausetabletten" und Speisestärke von Europäischen Anbietern. Die Materialien wurden zerkleinert, gesiebt, zusammengegeben und homogenisiert. Anschließend wurde in Portionen zu ca. 25 Gramm lichtgeschützt abgepackt. Die Portionen wurden chronologisch nummeriert. Die Zusammensetzung (Verzeichnis der Zutaten) und die Gehalte an Vitaminen wurden aufgrund der Herstellerangaben berechnet und sind in Tabelle 1 bzw. 2 angegeben. Tabelle 1: Zusammensetzung der DLA-Probe Multivitamin-Tabletten Zutaten: Säurungsmittel Citronensäure, Natriumhydrogencarbonat, Maltodextrin, Stärke, Vitamin C, Rote-Bete-Saftpulver, Aroma, Süßstoff: Natriumcyclamat, Vitamin E, Niacin, Süßstoff: Saccharin- Natrium, Pantothenat,Vitamin B2, Vitamin B6, Vitamin B1, Folsäure, Biotin, Vitamin B12 Seite 3 von 27
4 Tabelle 2: Aus den Angaben der Hersteller (deklarierte Gehalte) berechnete Gehalte an Vitaminen Vitamin Gehalt pro 100 g Biotin Niacin Pantothensäure Vitamin C 0,54 mg 155 mg 58 mg 1060 mg Homogenität Die Homogenität der DLA-Probe wurde anhand einer 5 fach Bestimmung von Vitamin C mittels Enzym-UV-Test geprüft. Mit einer Wiederholstandardabweichung von 4,1 % wurde die Homogenität als hinreichend gesichert angesehen. Die Ergebnisse der Homogenitätsuntersuchung sind in der Dokumentation angegeben. Die Berechnung der Wiederholstandardabweichung der Teilnehmer wurde ebenfalls als Homogenitätskriterium für diese LVU herangezogen. Sie lag für Pantothensäure bei 3,4 % und für Vitamin C bei 1,7 % im unteren Bereich üblicher relativer Wiederholstandardabweichungen von Methoden für wasserlösliche Vitamine (13-16). Die Wiederholstandardabweichung der Teilnehmer ist für die beiden Vitamine in der Dokumentation angegeben. In der Dokumentation sind zudem die Portionsnummern graphisch den Meßwerten für Vitamin C gegenübergestellt. Es ist keinerlei Instituts-unabhängige Tendenz in den Meßergebnissen erkennbar, die Inhomogenitäten nahelegen könnte. 2.2 Untersuchung An jedes teilnehmende Institut wurden in der 44. Woche 2014 zwei Portionen Untersuchungsmaterial verschickt. Das Untersuchungsverfahren wurde freigestellt. Die Untersuchungen waren durchzuführen bis spätestens 12. Dezember Ergebnisübermittlung Die Ergebnisabgabe erfolgte einheitlich mittels, an die teilnehmenden Institute übergebenen, Übermittlungstabellen (per Fax oder ). Zur statistischen Auswertung kam der abschließend berechnete Gehalt der einzelnen Vitamine als Mittelwert einer Doppelbestimmung der beiden nummerierten Proben. Abgefragt und dokumentiert wurden Einzelergebnisse, Wiederfindung und die durchgeführte Methode. Alle Teilnehmer haben fristgerecht Ergebnisse abgegeben. Seite 4 von 27
5 3. Auswertung 3.1 Bezugswert (zugewiesener Wert) Da es sich bei dem untersuchten Material nicht um zertifiziertes Referenzmaterial handelt, wird als Bezugswert (X) für die Auswertung der robuste Mittelwert der eingesandten Ergebnisse verwendet (6). Eine Prüfung der Verteilung der eingesandten Ergebnisse gab keine Hinweise für unvorhergesehene Quellen von Variabilität, wie z.b. eine bimodale Verteilung der Ergebnisse. 3.2 Standardabweichung Zum Vergleich mit der Zielstandardabweichung wird ebenfalls die robuste Standardabweichung (S x ) berechnet (6). 3.3 Ausreißer Auf Ausreißer wird mittels Mandel s-h-statistik Signifikanz-Niveau 95% geprüft (5). Ermittelte Ausreißer werden informativ genannt sofern gleichzeitig der z-score des Instituts < -2 oder > 2 ist. 3.4 Zielstandardabweichung (für die Eignungsbeurteilung) Die Zielstandardabweichung des Bezugswertes wird nach unten dargestellten, unterschiedlichen Verfahren bestimmt. Für die Eignungsbeurteilung wird, sofern ein akzeptabler Quotient S x / σ vorliegt, bevorzugt die Zielstandardabweichung des allgemeinen Modells nach Horwitz verwendet, da diese in der Regel für Auswertungen von Laborvergleichsuntersuchungen, bei denen von den Teilnehmern unterschiedliche Analysenmethoden eingesetzt werden können, geeignet ist. Die Zielstandardabweichung aus der Auswertung von Präzisionsdaten eines Versuchs leitet sich dagegen aus Ringversuchen mit vorgegebener Analysenmethode ab. Für alle Analyten wurde die Zielstandardabweichung nach Horwitz verwendet Allgemeines Modell nach Horwitz Die relative Zielstandardabweichung in % des Bezugswertes wird i.d.r. nach folgender Gleichung (Horwitz ) berechnet σ (%) = 2 (1-0,5logX) hieraus wird die Zielstandardabweichung in g bzw. mg/100 g berechnet σ = X * σ (%) / 100. Seite 5 von 27
6 3.4.2 Auswertung eines Versuchs zur Präzision Aus der Vergleichstandardabweichung σ R und der Wiederholstandardabweichung σ r eines Versuchs zur Präzision einer Methode (z.b. aus Ringversuchen nach ASU 64 LFGB) wird die Standardabweichung zwischen Laboratorien σ L berechnet: L = R 2 r 2. Aus den obigen Größen und der Anzahl der Wiederholmessungen n der laufenden Vergleichsuntersuchung wird nun die Zielstandardabweichung berechnet: = L 2 r 2 /n. Die in Tabelle 3 angegebenen Zielstandardabweichungen wurden aus den Präzisionsdaten der angegebenen Methoden berechnet. Tabelle 3: Zielstandardabweichung Auswertung eines Versuchs Methode HPLC HPLC- MS/MS Protein Binding Assay HPLC HPLC Parameter (pro 100 g) Biotin ( µg) Matrix Müsli-Pulver Milchpulver Orangensaft Hühnersuppe getr. relative Zielstandardabweichung σ 17,0 % 28,1 % 19,7 % 14,2 % Literatur EN 15607:2009 Biotin Futtermittel 7,0-20,9 % EURL (2011) Biotin Niacin (17-21 mg) Vitamin C ( mg) Angereicherte Lebensmittel Milchpulver Schokomüsli Müsli-Pulver Milchpulver Orangensaft Suppe getr. HPLC Vitamin C Fruchtsaft und Kindernahrungsmittel HPLC (Multi- Methode) Biotin, Vitamin C, Nicotinamid, Pantothensäure Multivitamin- Vormischungen 5,6-18,6 % AOAC Performance Test (in: Rychlik 2011) 3,6 % / 3,5 % 4,2 % / 4,4 % nach Säure- / enzym. Hydrolyse 17,3 % 10,0 % 19,4 % 13,5 % EN 15652:2009 EN 14130:2003 3,9-33,1 % Brause et al. (2003) < 8,0 % Heudi et al. (2005) Seite 6 von 27
7 3.4.3 Werte aus Erkenntnissen Die Zielstandardabweichung kann für die Eignungsbeurteilung auf einen Wert festgesetzt werden, der dem Leistungsfähigkeitsniveau entspricht, das der Koordinator für ein wünschenswertes Ziel für die teilnehmenden Laboratorien hält (6). Für die Auswertung aller Parameter wurde das Modell nach Horwitz herangezogen. 3.5 z-score Der z-score wird herangezogen zur Beurteilung der Ergebnisse der teilnehmenden Institute. Er besagt um welches Vielfache der Zielstandardabweichung ( σ ) das Ergebnis (x) des betreffenden teilnehmenden Instituts vom Bezugswert (X) abweicht (6). Die Berechnung erfolgt nach z = (x X) / σ ; die Anforderungen an die Analytik gelten im Allgemeinen als erfüllt, wenn -2 z z'-score Der z'-score kann zur Beurteilung der Ergebnisse der teilnehmenden Institute herangezogen werden, wenn die Standardunsicherheit berücksichtigt werden muss (s. 3.8). Der z'-score drückt das Verhältnis der Abweichung des Ergebnisses (x) des betreffenden teilnehmenden Instituts vom Bezugswert (X) zur Wurzel aus der Quadratsumme von Zielstandardabweichung ( σ ) und Standardunsicherheit (Ux) aus (6). Die Berechnung erfolgt nach als Zielstandardab- Im Folgenden haben wir den Ausdruck im Nenner weichung σ ' definiert. Die Anforderungen an die Analytik gelten im Allgemeinen als erfüllt, wenn -2 z' 2. Seite 7 von 27
8 3.7 Quotient S x / In Anlehnung an den Horrat-Wert kann die Bewertung einer Laborvergleichsuntersuchung als aussagekräftig gelten, wenn der Quotient von robuster Standardabweichung und Zielstandardabweichung nicht über 2 liegt. Ein über 2 liegender Wert bedeutet, dass die Präzision nicht zufriedenstellend ist, d.h., dass die Präzision aus analytischen Gründen zu variabel ist oder die festgestellte Variation höher ist als für die angewandte Methode geschätzt wurde. Somit ist eine Vergleichbarkeit der Messergebnisse nicht gewährleistet (11). In der vorliegenden Vergleichsuntersuchung lagen die Quotienten S x / σ für Biotin bei 1,7, Niacin 1,3, Pantothensäure 1,5 und für Vitamin C bei 1, Standardunsicherheit Jeder Bezugswert ist mit einer Standardunsicherheit behaftet, die von der Analysenmethode, Unterschieden der eingesetzten Analysenmethoden, dem Probenmaterial und der Anzahl der Teilnehmer (P) einer LVU beeinflußt wird. Die Standardunsicherheit (U x ) wird für die vorliegende LVU wie folgt berechnet (6). u X =1,25 S x / p Ist u X 0,3 muss die Standardunsicherheit des Bezugswertes nicht berücksichtigt werden (6). In der vorliegenden LVU wurden Quotienten zwischen 0,4 und 0,8 erhalten. Ein deutliches Überschreiten des Wertes von 0,3 ist ein Hinweis darauf, dass die Zielstandardabweichung ggf. zu gering für die Standardunsicherheit des Bezugswertes gewählt wurde. Da die Quotienten S x / σ jedoch alle unter 2,0 lagen, wurde der Zielbereich nicht nach 3.6 z'-score erweitert. Seite 8 von 27
9 4. Ergebnisse Alle folgenden Tabellen sind anonymisiert. Den teilnehmenden Instituten wird mit dem Versand dieser Auswertung ihre individuelle Auswertenummer mitgeteilt. In der oberen Tabelle sind die Kenndaten aufgeführt: Kenndaten Anzahl der Meßergebnisse Anzahl der Ausreißer Mittelwert Median Robuster Mittelwert (X) Robuste Standardabweichung (S x ) Zielkenndaten: Zielstandardabweichung zur Information Zielstandardabweichung σ ' untere Grenze des Zielbereichs (X - 2 σ ) oder (X - 2 σ ') * obere Grenze des Zielbereichs (X + 2 σ ) oder (X + 2 σ ') * Quotient S x / σ ' Standardunsicherheit u X Quotient u X / σ ' Ergebnisse im Zielbereich * Zielbereich aus z-score oder z'-score berechnet In der unteren Tabelle sind die Einzelergebnisse der teilnehmenden Institute aufgeführt : Auswertenummer Messwert Abweichung vom Bezugswert Z-Score Horwitz Z'-Score Horwitz Hinweis Seite 9 von 27
10 4.1 Biotin (in mg/100 g) Vergleichsuntersuchung Kenndaten Anzahl der Meßergebnisse 8 * Anzahl der Ausreißer 1 Mittelwert 0,719 Median 0,603 Robuster Mittelwert (X) 0,633 Robuste Standardabweichung (S x ) 0,131 Zielkenndaten: Zielstandardabweichung σ (Horwitz) 0,077 untere Grenze des Zielbereichs (X - 2 σ ) 0,479 obere Grenze des Zielbereichs (X + 2 σ ) 0,786 Quotient S x / σ 1,7 Standardunsicherheit u X 0,058 Quotient u X / 0,76 Ergebnisse im Zielbereich 6 (75%) * ohne Ergebnisse 5 und 9 mg / 100 g 1,6 1,5 1,4 1,3 1,2 1,1 1,0 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0,0 Ergebnisse / results Biotin > < Auswertenummer / evaluation number Abb. 1: Ergebnisse Biotin (rote Linie = robuster Mittelwert, gelbe Linien = Grenzen des Zielbereichs) Seite 10 von 27
11 Ergebnisse der teilnehmenden Institute Auswertenummer σ Ergebnis Abweichung Z-Score Hinweis [m g/100g] X rob. MW Horw itz 2 0,76 0,127 1,7 4 1,5208 0,888 11,6 Ausreißer Ergebnis vorab ausgeschlossen, Einheitenfehler? 9 < Ergebnis nicht berücksichtigt 10 0,605-0,028-0,4 12 0,601-0,032-0,4 13 0,46-0,173-2,3 14 0,65 0,017 0,2 15 0,597-0,036-0,5 16 0,558-0,075-1,0 3 z-scores Biotin Auswertenummer / evaluation number Abb. 2: Z-Scores Biotin Seite 11 von 27
12 4.2 Nicotinamid (in mg/100 g) Vergleichsuntersuchung Kenndaten Anzahl der Meßergebnisse 15 Anzahl der Ausreißer 2 Mittelwert 173 Median 172 Robuster Mittelwert (X) 172 Robuste Standardabweichung (S x ) 11,5 Zielkenndaten: Zielstandardabweichung σ 8,96 untere Grenze des Zielbereichs 154 obere Grenze des Zielbereichs 190 Quotient S x / σ ' 1,3 Standardunsicherheit u X 3,72 Quotient u X / ' 0,41 Ergebnisse im Zielbereich 12 (80%) Ergebnisse / results Niacin mg / 100 g Auswertenummer / evaluation number Abb. 3: Ergebnisse Nicotinamid (rote Linie = robuster Mittelwert, gelbe Linien = Grenzen des Zielbereichs) Seite 12 von 27
13 Ergebnisse der teilnehmenden Institute Auswertenummer Ergebnis Abweichung Z-Score Hinweis [m g/100g] X rob. MW Horw itz ,7-1, ,3 2, ,4-4,3-0, ,5-0,2 0, ,7-7,3 Ausreißer 6 182,7 11,0 1, ,7-0, ,1 6,4 0, ,7-0, ,32 2,6 0, ,3 0, ,7 3,0 0, ,72-10,0-1, ,8 81,1 9,1 Ausreißer ,7-1, < z-scores Niacin > Auswertenummer / evaluation number Abb. 4: Z-Scores Nicotinamid Seite 13 von 27
14 4.3 Pantothensäure (in mg/100 g) Vergleichsuntersuchung Kenndaten Anzahl der Meßergebnisse 14 Anzahl der Ausreißer 1 Mittelwert 62,5 Median 61,3 Robuster Mittelwert (X) 61,0 Robuste Standardabweichung (S x ) 5,67 Zielkenndaten: Zielstandardabweichung σ (Horwitz) 3,72 untere Grenze des Zielbereichs (X - 2 σ ) 53,6 obere Grenze des Zielbereichs (X + 2 σ ) 68,5 Quotient S x / σ 1,5 Standardunsicherheit u X 1,89 Quotient u X / 0,51 Ergebnisse im Zielbereich 12 (86%) Ergebnisse / results Pantothensäure mg / 100 g Auswertenummer / evaluation number Abb. 5: Ergebnisse Methylparaben (rote Linie = robuster Mittelwert, gelbe Linien = Grenzen des Zielbereichs) Seite 14 von 27
15 Ergebnisse der teilnehmenden Institute Auswertenummer Ergebnis Abweichung Z-Score Hinweis [mg/100g] X rob. MW Horwitz 1 67,3 6,279 1, ,021 0,0 3 55,7-5,321-1,4 4 42,85-18,171-4,9 6 61,5 0,479 0,1 7 61,9 0,879 0,2 8 59,9-1,121-0,3 9 58,7-2,321-0, ,2-5,821-1, ,2 6,179 1, ,6 1,579 0, ,75-4,271-1, ,52 38,499 10,4 Ausreißer 16 64,5 3,479 0, z-scores Pantothensäure > Auswertenummer / evaluation number Abb. 6: Z-Scores Pantothensäure Seite 15 von 27
16 4.4 Vitamin C (als Ascorbinsäure in mg/100 g) Vergleichsuntersuchung Kenndaten Anzahl der Meßergebnisse 15 Anzahl der Ausreißer 2 Mittelwert 1091 Median 1087 Robuster Mittelwert (X) 1088 Robuste Standardabweichung (S x ) 54,8 Zielkenndaten: Zielstandardabweichung σ (Horwitz) 42,9 untere Grenze des Zielbereichs (X - 2 σ ) 1002 obere Grenze des Zielbereichs (X + 2 σ ) 1174 Quotient S x / σ 1,3 Standardunsicherheit u X 17,7 Quotient u X / σ 0,41 Ergebnisse im Zielbereich 13 (87%) Ergebnisse / results Vitamin C mg / 100 g Auswertenummer / evaluation number Abb. 7: Ergebnisse vitamin C (rote Linie = robuster Mittelwert, gelbe Linien = Grenzen des Zielbereichs) Seite 16 von 27
17 Ergebnisse der teilnehmenden Institute Auswertenummer Ergebnis Abweichung Z-Score Hinweis [m g/100g] X rob. MW Horw itz ,2 1, ,4 23,6 0, ,8-1, ,2 0, ,8-0, ,2 0, ,5-0,3 0, ,2 0, ,2 4,3 Ausreißer ,5-43,3-1, ,8-1, ,2 1, ,09-7,7-0, ,8-0, ,8-3,2 Ausreißer 5 z-scores Vitamin C Auswertenummer / evaluation number Abb. 8: Z-Scores Vitamin C Seite 17 von 27
18 5. Dokumentation 5.1 Primärdaten Biotin Ergebnis Proben-Nr. A Proben-Nr. B Ergebnis A Ergebnis B [mg/100g] [mg/100g] [mg/100g] % / / / 2 0, ,7 0,82 nicht bestimmt , N/A < , ,604 0,605 entfällt , ,589 0, , ,42 0, , ,64 0, , , ,558 0, Nicotinamid Auswertenummer Wiederfindung Auswertenummer Ergebnis [mg/100g] Proben-Nr. A Proben-Nr. B Ergebnis A [mg/100g] Ergebnis B [mg/100g] Wiederfindung % nicht bestimmt 3 167, ,6 165,2 100,6 / 102, , N/A 6 182, , ,6 181, , ,85 174, , ,9 174, , ,1 163, , ,8 166,0 Seite 18 von 27
19 5.1.3 Pantothensäure Vitamin C Auswertenummer Ergebnis [mg/100g] Proben-Nr. A Proben-Nr. B Ergebnis A [mg/100g] Ergebnis B [mg/100g] Wiederfindung % 1 67, ,9 66, ,7 58,2 nicht bestimmt 3 55, ,8 56,6 115,7 / 113,7 4 42,85 5 N/A N/A N/A N/A 6 61, , ,7 61,2 9 58, , ,04 55, , ,9 67, , ,6 62, , ,92 56, , , ,0 64,9 Auswertenummer Ergebnis Proben-Nr. A Proben-Nr. B Ergebnis A Ergebnis B Wiederfindung [mg/100g] [mg/100g] [mg/100g] % , ,5 1118,3 102,0 / 101, N/A , ,4 1083, entfällt , ,7 1025, , , , ,6 951,8 Seite 19 von 27
20 5.2 Homogenität Homogenitätsuntersuchung des Materials vor der LVU Homogenitätsprüfung anhand der Vitamin C-Bestimmung mittels enzymatischem UV-Test. Wiederholmessungen mg/100g Allgemeiner Mittelw ert 960 Wiederholstandardabw eichung 39 4,1% Wiederholstandardabweichung der Doppelbestimmungen der Teilnehmer Die Wiederholstandardabweichung wurde aus den Daten wie unter für Pantothensäure dokumentiert berechnet. Sie beträgt 2,08 mg/100g = 3,4 % von X. Die Wiederholstandardabweichung wurde aus den Daten wie unter für Vitamin C dokumentiert berechnet. Sie beträgt 18,2 mg/100g = 1,7 % von X Gegenüberstellung der aufsteigenden Probennummern und der betreffenden Einzel-Meßwerte (Vitamin C) Homgenität / homogeneity DLA-Nr. / No. Ergebnis / result (*100) Seite 20 von 27
21 5.3 Analytische Methoden Angaben der Teilnehmer Biotin Auswertenummer Methodenbeschreibung und weitere Anmerkungen Wiederfindung m it gleicher Matrix Akkreditiert Weitere Hinw eise 1 / / / / 2 USP 21, 3. Suppl., Methode 88, mikrob. Akt. ja 3 4 LC-MS/MS nein nein 5 Biotin nein ja keine 6 7 HPLC-UV nein ja - 8 nicht untersucht 9 HPLC-DAD ja 10 DIN EN Extraktion mit Formiat-Puffer. Bestimmung mit UHPLC-QQQ. ja 13 Vita Fast Biotin (RBiopharm) - ja 14 USP ja 15 mikrobiologisch, in Anlehnung an SLMB Vitafast von r- ja :2008 biopharm 16 Hausmethode LC-MSMS ja Seite 21 von 27
22 5.3.2 Nicotinamid Auswertenummer Methodenbeschreibung und weitere Anmerkungen Wiederfindung m it gleicher Matrix Akkreditiert Weitere Hinw eise 1 HPLC-DAD ja ja / 2 USP 34, Methode 441 (mod.), mikrob. Akt. ja 3 HPLC-DAD ja ja 4 mikrobiologisch nein nein 5 Niacinamid nein ja keine 6 ja ja 7 HPLC-UV nein ja - 8 nein 9 HPLC-DAD ja interne Methode (HPLC-UV) nein 12 Extraktion mit Formiat-Puffer. Bestimmung mit UHPLC-QQQ. ja 13 HPLC nach VDLUFA Methodenbuch III Nr ja 14 USP ja 15 mikrobiologisch, in Anlehnung an SLMB Vitafast von r- ja :2007 biopharm 16 Hausmethode LC-MSMS ja Seite 22 von 27
23 5.2.3 Pantothensäure Auswertenummer Methodenbeschreibung und weitere Anmerkungen Wiederfindung m it gleicher Matrix Akkreditiert Weitere Hinw eise 1 HPLC-DAD ja ja / 2 USP 34, Methode 91, mikrob. Akt. ja 3 HPLC-DAD ja ja 4 mikrobiologisch nein nein 5 N/A N/A N/A N/A 6 ja ja 7 HPLC-UV nein ja - 8 ja 9 HPLC-DAD ja internal method (HPLC-UV) nein 12 Extraktion mit Formiat-Puffer. Bestimmung mit UHPLC-QQQ. ja 13 Vita Fast Pantothensäure (RBiopharm) - ja 14 USP ja 15 mikrobiologisch ja Vitafast von r- biopharm 16 Hausmethode LC-MSMS ja Seite 23 von 27
24 5.2.4 Vitamin C Auswertenummer Methodenbeschreibung und weitere Anmerkungen Wiederfindung m it gleicher Matrix Akkreditiert Weitere Hinw eise 1 HPLC-FLD ja ja / 2 3 HPLC-DAD ja ja 4 HPLC nein ja 5 Vitamin C als Ascorbinsäure nein ja keine 6 ja ja 7 HPLC-UV nein ja - 8 ja 9 HPLC-DAD ja 10 Hausmethode HPLC-DAD ja / nein 11 NF V (HPLC-UV) ja Extraktion in Wasser mit DTT. 12 Bestimmung mittels UHPLC-DAD, ja Wellenlänge: 245 nm 13 Hausmethode HPLC (DAD) ja ja 14 USP ja 15 ASU 64 LFGB L mod. ja 16 Hausmethode HPLC-UV ja Seite 24 von 27
25 6. Verzeichnis der teilnehmenden Institute in alphabetischer Reihenfolge Teilnehmer / Participant Ort / Town Land / Country FRANKREICH ENGLAND Deutschland DÄNEMARK Deutschland Deutschland SCHWEIZ Deutschland Deutschland Deutschland Deutschland Deutschland Deutschland Deutschland SCHWEDEN ESTLAND [Die Adressdaten der Teilnehmer wurden für die allgemeine Veröffentlichung des Auswerte-Berichts nicht angegeben.] Seite 25 von 27
26 7. Verzeichnis relevanter Literatur 1. DIN EN ISO/IEC 17043:2010; Konformitätsbewertung Allgemeine Anforderungen an Eignungsprüfungen / Conformity assessment General requirements for proficiency testing 2. Verordnung / Regulation 882/2004/EU; Verordnung über amtliche Kontrollen / Regulation on official controls 3. DIN EN ISO/IEC 17025:2005; Allgemeine Anforderungen an die Kompetenz von Prüf- und Kalibrierlaboratorien / General requirements for the competence of testing and calibration laboratories 4. Richtlinie / Directive 1993/99/EU; über zusätzliche Maßnahmen im Bereich der amtlichen Lebensmittelüberwachung / on additional measures concerning the official control of foodstuffs 5. ASU 64 LFGB : Planung und statistische Auswertung von Ringversuchen zur Methodenvalidierung 6. DIN ISO 13528:2009; Statistische Verfahren für Eignungsprüfungen durch Ringversuche / Statistical methods for use in proficiency testing by interlaboratory comparisons 7. The International Harmonised Protocol for the Proficiency Testing of Ananlytical Laboratories ; J.AOAC Int., 76(4), (1993) 8. The International Harmonised Protocol for the Proficiency Testing of Ananlytical Chemistry Laboratories ; Pure Appl Chem, 78, (2006) 9. Evaluation of analytical methods used for regulation of food and drugs;w. Horwitz; Analytical Chemistry, 54, (1982) 10.A Horwitz-like funktion describes precision in proficiency test; M. Thompson, P.J. Lowthian; Analyst, 120, (1995) 11.Protocol for the design, conduct and interpretation of method performance studies; W. Horwitz; Pure & Applied Chemistry, 67, (1995) 12.Recent trends in inter-laboratory precision at ppb and sub-ppb concentrations in relation to fitness for purpose criteria in proficiency testing; M. Thompson; Analyst, 125, (2000) 13.EURL Evaluation Report on Analytical Methods D(+)Biotin, European Reference Laboratory Feed Additives, Rychlik M, Fortified Foods with Vitamins: Analytical Concepts to Assure Better and Safer Products, John Wiley & Sons, Brause et al., Determination of Total Vitamin C in Fruit Juices and Related Products by Liquid Chromatography: Interlaboratory Study, J AOAC Int 86(3): , Heudi et al., Separation of water-soluble vitamins by reversed-phase high performance liquid chromatography with ultra-violet detection: application to polyvitaminated premixes, J Chromatogr A. 1070(1-2):49-56 (2005) 17.Ministry of Health and Welfare, JSM, Japan Blake CJ (2007), Analytical procedures for water-soluble vitamins in foods and dietary supplements: a review. Anal Bioanal Chem 389(1): Blake CJ (2007) Status of methodology for the determination of fat-soluble vitamins in foods, dietary supplements, and vitamin premixes. J AOAC Int 90(4): EN 14130:2003; Untersuchung von Lebensmitteln: Bestimmung von Vitamin C mit HPLC (zurückgezogen) 21.EN 15607:2009; Untersuchung von Lebensmitteln: Bestimmung von D-Biotin mit HPLC 22.EN 15652:2009; Untersuchung von Lebensmitteln: Bestimmung von Niacin mit HPLC Seite 26 von 27
27 DLA-30/ Nahrungsergänzungsmittel II Alle 15 Teilnehmer haben mindestens ein Ergebnis eingereicht. Die Auswertung erfolgte hinsichtlich der Parameter Biotin, Niacin, Pantothensäure und Vitamin C. Die Ergebnisse wurden quantitativ ausgewertet. Es lagen 75, 80, 86 und 87% der Teilnehmer im jeweiligen Zielbereich. Details zu den einzelnen Parametern sind dem Auswertebericht zu entnehmen. 6 Teilnehmer hatten ihren Sitz im Europäischen Ausland (Dänemark, Estland, Frankreich, Großbritannien, Schweden, Schweiz) Gedruckt auf 100% Recycling-Papier Seite 27 von 27
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