Absorption des Lichtes
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- Carin Albert
- vor 6 Jahren
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1 Absorption ds Lichts Absorption und Strung ds Lichts intrtnd Intnsität Grundrschinungn gstrut Int. S absorbirt Int. Absorption von Licht in inr Lösung A T A: Absorption T: Transmission S: Struung austrtnd Int. Annahm: Dr größt Til ds Lichts wird absorbirt odr durchqurt. Di Struung ist jtzt vrnachlässigbar. rot monokromatisch Lichtqull (lasr, λ = 633 nm) kin Absorption grün monokromatisch Lichtqull (lasr, λ = 532 nm) stark Absorption s gibt in Absorptionsfähigkit di Absorptionsfähigkit hängt von dr Wllnläng ab
2 infachst Situation: shr klin (infintisimal klin) Schichtdick Quantitativ Charaktrisirung dr Absorption Δx +Δ (Paralllstrahl, snkrcht fällt auf in Mdium) : di intrtnd Intnsität Δ : Vrändrung dr Intnsität (<) + Δ : Δ = μ Δx μ : di austrtnd Intnsität diffrnzirt Form ds Schwächungsgstzs charaktrisirt das Mdium (Schwächungsfaktor) infachst Situation: shr klin (infintisimal klin) Schichtdick Quantitativ Charaktrisirung dr Absorption dx +Δ (Paralllstrahl, snkrcht fällt auf in Mdium) : di intrtnd Intnsität d : Vrändrung dr Intnsität (<) + d : di austrtnd Intnsität d μ : = μ dx diffrnzirt Form ds Schwächungsgstzs charaktrisirt das Mdium (Schwächungsfaktor) Δ Δx = μ Vrändrung (gnaur: di Ablitung) inr Funktion (hir: Intnsität) proportional zur Funktion (Intnsität) d dx = μ di Ablitung inr Funktion (hir: Intnsität) ist proportional zur Funktion slbst. Lösung disr Diffrntialglichung: Δ = μ Δx x odr: d dx = ( x) = = μ μx das Schwächungsgstz : di intrtnd Intnsität : di austrtnd Intnsität μ: dr (linar) Schwächungskoffizint (Schwächungsfaktor, Absorptionskoffizint), Einhit: 1/m, 1/cm Graphisch Darstllung ds Schwächungsgstzs ( x) = δ μx x Einhit von μ: 1/m, 1/cm δ=1/μ, δ: in spzill Schichtdick x δ ( x) = δ δ 1 ( δ) = = = δ: di Schichtdick nach wlchr sich di Intnsität dr Strahlung auf dn -tn Til vrmindrt: Eindringtif
3 2 4 ( x) = D 2D Di Halbwrtsdick μx x D: di Schichtdick nach wlchr sich di Intnsität dr Strahlung halbirt μ ( D) = D = 1 2 D 1 μ = = 2 + D μ = 2 2 ln μd = ln 2, μ = = D D ( x) =. 693 x D Optisch Dicht = Extinktion = Absorbanz OD E A Absorption klin ( = ) 1 = 1 % 1 gross (=) Durchlässigkit wichtig Gröss kin Bdutung lg Absorbanc wichtigst Gröss Schwächungskoffizint Δ = μ Δx, N μ = μ ; V μ ( Mdium; Strahlung) = μ Stoffart, λ, Stoffart, N V ; λ = μ μ ( Stoffart,c; λ) ( Stoffart, ρ; λ) bi Lösungn sonst Lambrt-Brschs Gstz für dünn Lösungn: μ ~ c = μx +μx μx = = μ lg = μ x lg = lg c x = ε c x c wo N: Anzahl dr Tilchn di absorbirn könnn (in Volumn V) c: Konzntration dr Lösung λ: Wllnläng ρ: Dicht Gültigkit: für dünn Lösungn dr (dkadisch molar) Extinktionskoffizint: (spktralr Absorptionskoffizint) wichtig: ε hängt von dr Konzntration nicht ab ( Stoff λ) ε = ε ;
4 Absorptionsspktrum wi groß ist di Spitz: quantitativ Analys DNA: wo ist di Spitz: qualitativ Analys Das Mssgrät: Absorptionsspktrophotomtr A Bstimmung ds Saurstoffghalts von Gwb F: Lichtqull (kontinuirlichs Spktrum) Mk: Monokromator (Aufspaltung ds Spktrums dr Lichtqull und Auswahl dr Wllnläng zur Durchluchtung dr Prob) M : Rfrnzlösung (z.b. Lösungsmittl) M: di zu mssnd Lösung D: Dtktor (photolktrisch Umwandlung) El: lktronisch Einhit (Vrstärkung und Hrstllung ds dr Extinktion proportionaln lktrischn Signals) R: Rgistration Charaktrisation di Frisch von Flisch Konz. von Doxy und Oxy-Myoglobin Konz. von NO-Myoglobin... Strilisation Grmizidlamp mittirt wo di DNS absorbirt
5 intrtnd Intnsität Grundrschinungn gstrut Int. S absorbirt Int. Lichtstruung A: Absorption T: Transmission S: Struung A T austrtnd Int. Lichtstruung: Ablnkung ds Lichts an klinn Tilchn odr rauhn Obrflächn (Inhomognitätn) Huygns Frsnl Prinzip Lichtstruung: Ablnkung ds Lichts an klinn Tilchn odr rauhn Obrflächn (Inhomognitätn) homognous inhomognous (Bis jtzt nur gradlinig Ausbritung ds Lichts mit Rflxion an Grnzflächn) Durch Lichtstruung wird grichtts Licht in diffuss Licht vrwandlt.
6 Inhomognitätn in dr Größnordnung dr Wllnläng ds Lichts strun Licht räumlich Inhomognitätn statisch Lichtstruung Tilchn in inr Lösung/Gas Farb von Ggnständn: Absorption + Struung zitlich Inhomognitätn/Fluktuationn dynamisch Lichtstruung Bobachtungsvolumn Bi Nacht sind all Katzn grau. Im Dunkln sind all Küh schwarz. lastisch Lichtstruung ohn Enrgiübrtragung auf das Strutilchn di Photonnnrgi/Wllnläng blibt Rayligh- und Mi- Struung inlastisch Lichtstruung di Photonnnrgi vrklinrt sich, d.h. di Wllnläng vrgrößrt sich (Stoks) Raman-Struung Elastisch Lichtstruung Rayligh-Struung Wchslwirkung mit Tilchn dssn Durchmssr vil klinr als di Wllnläng ist (d <.1 λ). Di gstrut Intnsität ist stark wllnlängabhängig (1/λ 4 ) Mi-Struung Dr Durchmssr dr Partikl ist in dr Grössnordung dr Wllnläng (.1 λ < d < 1 λ) Gustav Mi nicht-slktiv Struung All Wllnlängn wrdn ungfähr glich binflusst Durchmssr dr Partikl ist vil größr als di Wllnläng (d > 1 λ).
7 Rayligh-Struung Licht induzirt in Atomn, Molküln und klinn Tilchn in lktrischs Dipolmomnt, das aufgrund dr Schwingung ds lktrischn Fldvktors dr lktromagntischn Strahlung bnfalls schwingt, wodurch das Molkül slbr lktromagntisch Strahlung mittirt. Dis Rayligh-Struung ist für dn blaun Himml und das rötlich Licht am Morgn und am Abnd vrantwortlich. Ist di Atmosphär dichtr, dann nimmt di Struung zu. Stuungsintnsität (%) Str ~ λ 4 Wllnlang (nm) Mi-Struung Bi größrn Tilchn gilt di Dipolnährung nicht mhr, das hißt das induzirt lktrisch Dipolmomnt kann nicht mhr mit inm Vktor bschribn wrdn. Vilmhr kommt s zur Intrfrnz dr von dn untrschidlichn Struzntrn mittirtn Strahlung, di charaktristisch ist für Durchmssr und Form ds strundn Tilchns (Mi-Struung). Folglich könnn aus dr winklabhängig gmssnn, zitlich gmittltn Strulichtintnsität Information übr Durchmssr und Struktur hinrichnd großr Tilchn gwonnn wrdn. Nicht-slktiv Struung In dism Brich ist di Struung unabhängig von dr Wllnläng. Dshalb siht das gstrut Licht wiss aus, zum Bispil das an Wolkn odr am Nbl gstrut Licht.
8 Statisch Lichtstruung Mssmthod: Dynamisch Lichtstruung Statisch Lichtstruung Di zitlichn Mittlwrt dr Strulichtintnsität wrdn bi inm Winkl bstimmt. Di Struintnsität nimmt mit dr schstn Potnz ds Durchmssrs zu! Bstimmung von Molmassn Str ~d 6 Statisch Lichtstruung Anwndung Di Charaktrisirung dr Mikrostruktur von Mikromulsionn kann mit dr Mthod dr statischn Lichtstruung rfolgn, wnn di Strukturgrößn in dr Größnordnung inigr 1 nm lign. Mssung dr Lichtsruung: Nphlomtri und Turbidimtri (Trübung) Lichtqull Prob Dtktor (Turbidimtri) = τx Str Dtktor (Nphlomtri) Tilchnzählr
9 Dynamisch Lichtstruung Nichtlastisch Struung: Raman-Struung Fourir- Transformation Autokorrlationsfunktion E S 1 Raman Struung Partiklgröss D τ R H Man bstimmt mit dr dynamischn Lichtstruung Diffusionskoffizintn bzw. Vrtilungn von Diffusionskoffizintn. Mit dr Stoks-Einstin-Bzihung lassn sich dann untr dr Annahm, dass sphärisch Tilchn vorlign, aus dn Diffusionskoffizintn di hydrodynamischn Radin dr diffundirndn Tilchn brchnn. Bstimmung dr Partiklgrössnvrtilung Aut.KorrFunkt. τ klin τ gross Zit S UV-VIS IR Absorption Raman Fluorsznz Phosphorsznz T 1 Raman-Struung Bi dr Raman- Struung wrdn Molkül in andr Vibrationszustand vrstzt.. Di Molkül nhmn hirbi inn Til dr Lichtnrgi auf bzw. gbn inn Til ihrr Enrgi ab; di Wllnläng ds rückgstrutn Lichts wird durch di Struung gändrt. E S 1 S Stoks anti-stoks Raman Spktromtr Prob Filtr Dtktor Monokromator Di Intnsität um 2 bis 3 Größnordnungn gringr als bi dr lastischn Struung.
10 Raman-Struung Vibrationszuständ sind spzifisch für di Molkül. Raman Spktroskopi Wirkstoffghalt inr Tabltt -mikroskopi-spktroskopi/raman-spktroskopi-tabltt.html Tragbar Raman Spktromtrn für Stoffidntifizirung
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