Punktate im Hämatologielabor Margrit Bader, Leitende BMA Hämatologie Zentrum für Labormedizin Kantonsspital Aarau AG Herbstweiterbildung 2013 labmed Sektion Ostschweiz Knochenmark-Kurs Kurs HFP labmed, Bern 05. April 2013 St. Gallen, 26.10.2013 1 Untersuchungsmaterial Liquor cerebrospinales Pleuraerguss Perikarderguss (Herzbeutel) Aszites Bronchoalveoläre Lavage (Spülflüssigkeit) Synovialflüssigkeit (Gelenkpunktat) 2 Präanalytik Antikoagulans EDTA (kein Heparin) Liquor in der Regel nativ (blutig EDTA) Synovialflüssigkeit (nativ für Kristalle) Untersuchung sofort innerhalb 1-2 h (Zellzerfall) Lagerung Zimmertemperatur (für Transport gekühlt) Immer zuerst makroskopische Beurteilung des Materials Für Zytologie Aufarbeitung des gesamten Materials nötig Sterile Probe für Mikrobiologie 3
Pathophysiologie Einstrom von Gewebsflüssigkeit in Körperhöhlen Flüssigkeitsfilm als Gleitmittel für Atem- bzw. Darm- oder Gelenksbewegung Normalerweise keine punktionsfähige Flüssigkeit Jedes Punktat ist pathologisch! Vermehrte Bildung von Gewebsflüssigkeit durch die serösen Häute Aktive Einwanderung der Zellen 4 Fragestellung Traumatischer Erguss Stauungserguss Entzündung Bakteriell Viral Autoimmunprozess Kristalle Harnsäure Calciumpyrophosphat Tumorzellen Chylus 5 Vorgehensweise Zytologische Untersuchung Makroskopische Beurteilung Zellzahl bestimmen Kammerzählung (Hellfeld/Phasenkontrast) Hämatologie-Analyser (Body fluid Modus) Zytopräparate herstellen Pappenheimfärpung (Differenzierung) Spezialfärbungen Kristalle suche (Polarisation) Weitere Untersuchungen Mikrobiologie Immunphänotypisierung Zytologie/Immunzytologie 6
Makroskopische Beurteilung Gerinnsel? Konsistenz? Farbe? Gelb klar Gelb trüb blutig Eitrig Bräunlich (Galle) Milchig (Lymphe) Geruch? xanthochromer Liquor Chylus (Pleurapunktat) 7 Zellzählung / Zytospinnpräparat Zweite Ebene Dritte Ebene Vierte Ebene Fünfte Ebene Neubauer- und Fuchs-Rosenthal Kammer Zytozentrifuge Eppendorf Pipetten Zytogramm 8 Sysmex XN-Serie: Bodyfluid-Modus SFL Erweitertes Zählvolumen: RBC Retikulozyten 10.2 µl BF-Material werden ausgezählt 3.5-faches Volumen im Vergleich zur Fuchs-Rosenthal Zählkammer PLT-O SSC TC-BF (WBC-BF+HF-BF) HF-BF: Makrophagen, Mesothelien, aktivierte Zellen WBC-BF: Differenzierung in PMN- und MN-Zellen RBC-BF: Zählung der Erythrozyten im separaten Messkanal Warnmeldungen bei Interferenzen, z.b. Zelltrümmer, Hochfluoreszierende Zellen SFL: Side Fluorescence SSC: Side Scatter
Ascites mit Bakterien Pleurarguss mit Lymphozyten Pleuraerguss mit Tumorzellen
Mikroskopie Kernhaltige Zellen: Granulozyten, Lymphozyten, etc.? Tumorzellen? Erythrozyten? Kristalle? Bakterien? Blutung, Kristalle und eitriger Erguss werden sofort erkannt! Vorläufige Diagnose innerhalb 5-10 Minuten!! Niedriger technischer Aufwand Wegweisend für Spezialuntersuchungen 13 Diverse Punktate: Zelltypen Neutrophile Granulozyten Eosinophile Granulozyten Basophile Granulozyten Monozyten Lymphozyten Reaktive Lymphozyten Plasmazellen Makrophagen Erythrophagen Siderophagen (Fe-Färbung) Mastzellen Erythrozyten Mesothelzellen Sonstiges Chondrozyten Hirngewebe Bakterien Pilze Parasiten Maligne Zellen Lymphom Zellen Leukämische Blasten Tumorzellen
Liquor cerebrospinalis
Liquor cerebrospinales Referenzbereich Zellzahl Lumbal 0-5 Zellen /µl (Erwachsene) Normal können Lymphozyten und Monozyten (MN) vorkommen Keine Granulozyten (PMN) Keine Erythrozyten Liquor cerebrospinalis: Zellzahl Liquor cerebrospinales
2304070052 Liquor: Haemolysierende Streptokokken A 2207160614 Liquor: Neisseria meningitidis 2207130588 Liquor: Serratia marcescens (Drainage)
2008050608 Liquor bei Borelieninfekt Cryptococctus neoformans bei HIV-Infekt Cryptococctus neoformans mit Lymphozyt Cryptococctus neoformans Liquor: Erythrophagen (8-12h nach Blutung)
Liquor: Makrophagen/Siderophagen (4-5 Tage nach Blutung) Liquor: Makrophagen, Hämatoidin-Kristalle Reaktiv Hasler-Schwarb Paula 211209-0746 Liquor: reaktive Veränderungen
230315-0009 Liquor mit Eosinophilen (z.b. Fremdkörperreaktion) 2304140248 Liquor: Hirngewebe 2302160330 Liquor: Staphylococcus aureus (Verlauf)
2302160330 Liquor: Staphylococcus aureus (Verlauf) 160610-0093 Liquor: T-ALL GIORGIO DOMENICO 12.02.1948 Liquor: B-ALL
230314-0370 Liquor: reifzellige B-Zell-Neoplasie 221204-1046 Liquor: DLBCL MEIER VERENA 04.11.1957 Liquor: myeloische Blasten
220530-1084 Liquor: Mamma-Ca Pleuraerguss Pleurapunktat
Pleuraerguss mit Mesothelzellen Mesothelzellen reaktiv Gleichmässiges Chromatin Gleichmässige Kernmembran runder/ovaler Kern Falls mehrkernig -gleich gross Leichte Vakuolisierung maligne Ungleichmässiges Chromatin unregelmässige Zellmembran Kern zerklüft/polymorph mehrkernig ungleich gross starke Vakuolisierung Chylothorax
220116-0781 Pleuraerguss: T-ALL 220103-0680 Pleuraerguss: MCL-transformiert 211222-0797 Pleuraerguss: MCL
230219-1051 Pleura Erguss: DLBCL 220417-0736 Pleura Erguss: Tumorzellen Pleura Erguss: kleinzelliges Bronchus-Ca
BAL: bei Raucher BAL: Exogen-allergische Alveolitis Mastzelle Mastzelle Flimmerepithelien BAL: Asbestkörperchen
BAL: Pneumocystis jiroveci Ascites Ascites
2310140425 Ascites: bakterielle Peritonitis Ascites: bei Leberzirrhose Synovialflüssigkeit
Synovialflüssigkeit Synovialflüssigkeit: Kristalle Harnsäure Calciumpyrophosphat Harnsäure-Kristalle
Calciumpyrophosphat-Kristalle Cholesterin-Kristalle