beta 2-Microglobulin ELISA

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1 Arbeitsanleitung beta 2Microglobulin ELISA Enzymimmunoassay zur direkten quantitativen Bestimmung von β2microglobulin in humanem Serum. DB C I B L I N T E R N A T I O N A L G M B H Flughafenstrasse 52a Phone: +49 (0) IBL@IBLInternational.com D22335 Hamburg, Germany Fax: +49 (0)

2 beta 2Microglobulin ELISA (DB59191) ZWECKBESTIMMUNG Enzymimmunoassay zur direkten quantitativen Bestimmung von β 2Microglobulin in humanem Serum. Nur für invitro diagnostische Zwecke. TESTPRINZIP Kompetitiver Enzymimmunoassay (ELISA). Das nicht markierte Antigen in der Probe, den Standards und den Kontrollen konkurriert mit dem enzymmarkiertem Antigen um die Bindungsstellen des an die Wells der Mikrotiterstreifen gebundenen Antikörpers. Nach der Inkubation wird nicht gebundenes Material durch Waschen entfernt. Danach wird Enzymsubstrat hinzugefügt. Die enzymatische Reaktion wird durch Hinzufügen der Stopplösung abgebrochen. Die Absorption wird mittels eines Messgeräts für Mikrotiterplatten bestimmt. Die Intensität der gebildeten Farbe nach der Substratreaktion ist umgekehrt proportional zur β 2MicroglobulinKonzentration in den Proben. Mehrere Standards werden verwendet, um eine Standardkurve zu erstellen, anhand derer die Ergebnisse der Proben direkt bestimmt werden können. KLINISCHE BEDEUTUNG ß 2Microglobulin (β 2M) besteht aus einer Polypeptidkette aus 100 Aminosäuren und wird auf der Zellmembran aller kernhaltigen Zellen gefunden. β 2Microglobulin wird kontinuierlich ans Kreislaufsystem abgegeben, was zu einem ausgewogenen Serumspiegel führt. Klinische Trends: Eine niedrige glomeruläre Filtrationsrate führt zu einer Erhöhung des β 2Microglobulinspiegels. β 2M ist ein nützlicher Marker bei der Diagnose von Nierenkrankheiten sowie von rheumatoider Arthritis. Patienten mit AIDS weisen einen erhöhten β 2MSpiegel auf. β 2M hat eine geringe Serumkonzentration. Wir haben herausgefunden, dass in einer unspezifischen, normalen Bevölkerung der höchste Serumwert bei 3.8 mg/l liegt. Dafür wurden 92 Serumproben getestet, welche geringe Unterschiede der Normalwerte zwischen Männern sowie prä und postmenopausalen Frauen aufwiesen. Der Durchschnittswert der Proben von Männern lag bei mg/l, von prämenopausalen Frauen bei mg/l, bei postmenopausalen Frauen bei mg/l und bei Kindern und Jugendlichen bei 1.13 mg/l. WARNHINWEISE UND VORSICHTSMASSNAHMEN 1. Benutzer sollten dieses Protokoll vollständig verstanden haben, um diesen Kit erfolgreich zu gebrauchen. Zuverlässige Ergebnisse werden nur erzielt, wenn sich strikt und genau an die zur Verfügung gestellten Anweisungen gehalten wird. 2. Kontrollmaterial und Serumpools sollten in jedem Testlauf einbezogen werden, um die Zuverlässigkeit der Ergebnisse zu prüfen. 3. Zur Verdünnung oder Rekonstitution nur deionisiertes oder bidestilliertes Wasser verwenden. 4. Um den Kontakt mit potenziell schädlichen Substanzen zu reduzieren, sollten während des Gebrauchs der Kitreagenzien und Humanproben Handschuhe getragen werden. 5. Alle Reagenzien dieses Kits sowie alle Proben sollten auf Raumtemperatur gebracht und vor Gebrauch vorsichtig, aber gründlich, gemischt werden. Wiederholte Auftau und Einfriervorgänge der Reagenzien und Proben vermeiden. 6. Eine Standardkurve muss für jeden Testlauf erstellt werden. 7. Die Kitkontrollen sollten in jeden Testlauf einbezogen werden und innerhalb der Konfidenzintervalle liegen. 8. Unsachgemäßer Gebrauch, ungenaues Pipettieren, unvollständiges Waschen sowie unsachgemäße Lagerung der Reagenzien könnten sich darin widerspiegeln, dass die Assaywerte für die Kontrollen von den angegebenen Bereichen abweichen. 9. Beim Lesen der Mikrotiterplatte beeinflussen Blasen in den Mikrowells die optische Dichte (OD). Vorsichtig die Blasen vor der Messung entfernen. 10. Die Substratlösung (TMB) ist lichtsensibel und sollte bei sachgemäßer Lagerung farblos bleiben. Instabilität oder Kontaminierung könnten zur Entwicklung einer bläulichen Farbe führen. Ist dies der Fall, sollte das Reagenz nicht benutzt werden. 11. Zum Pipettieren des Substrats keine Pipetten verwenden, in denen diese Flüssigkeit in Kontakt mit jeglicher Art von Metall kommen könnte 12. Um Kontaminierung der Reagenzien zu vermeiden, müssen für jedes zu pipettierende Reagenz, Probe, Standard und Kontrolle neue Einmalpipettenspitzen verwendet werden. 13. Es dürfen keine Kitkomponenten mit unterschiedlichen Lotnummern in einem Test verwendet werden. Verfallene Reagenzien dürfen nicht verwendet werden. 14. Die Kitreagenzien müssen als gefährlicher Abfall angesehen werden und den nationalen Regeln und Normen entsprechend entsorgt werden. Version 7.0 May 15, /7

3 beta 2Microglobulin ELISA (DB59191) GRENZEN 1. Alle Reagenzien dieses Kits sind für die direkte Bestimmung von β 2M in humanem Serum kalibriert. Der Kit ist nicht für die Bestimmung von β 2M in Saliva, Plasma oder anderen Probenarten humanem oder tierischen Ursprungs kalibriert. 2. Kein hämolysiertes, lipämisches, ikterisches oder unsachgemäß gelagertes Serum verwenden. 3. Proben oder Kontrollseren, die Azid oder Thimerosal enthalten, sind nicht mit diesem Kit kompatibel, da sie zu falschen Ergebnissen führen können. 4. Nur Standard A kann benutzt werden, um hohe Serumproben zu verdünnen. Der Gebrauch eines anderen Reagenz kann zu falschen Ergebnissen führen. 5. Die mit diesem Kit erhaltenen Ergebnisse sollten nie die einzige Grundlage für eine klinische Diagnose sein. Beispielsweise kann das Auftreten heterophiler Antikörper von Patienten, die häufig in Kontakt mit Tieren oder tierischen Produkten stehen, immunologische Tests beeinflussen. Die klinische Diagnose sollte alle Aspekte des Patienten und dessen Hintergrund berücksichtigen, auch die Regelmäßigkeit des Kontaktes mit Tieren/tierischen Produkten, wenn falsche Ergebnisse vermutet werden. 6. Manche Patienten haben Antikörper gegen Mausprotein, was möglicherweise diesen Assay beeinflussen kann. Daher sollten die Ergebnisse von Patienten, die mit Mausantikörpern behandelt wurden, mit Vorsicht interpretiert werden. WARNHINWEISE UND VORSICHTSMASSNAHMEN POTENTIELL BIOLOGISCH GEFÄHRLICHES MATERIAL Humanes Serum, das für die Herstellung der Standards und Kontrollen verwendet wird, wurde nicht reaktiv auf Hepatitis B Oberflächenantigen und negativ auf HCVAntikörper sowie auf HIV getestet. Allerdings kann keine Testmethode vollkommene Sicherheit bieten, dass keine HIV, HCV, Hepatitis B Viren oder andere infektiöse Agenzien vorhanden sind. Diese Reagenzien sollten als potentiell biologisch gefährlich angesehen werden und nur mit derselben Vorsicht wie bei jeder anderen Blutprobe behandelt werden. CHEMISCHE GEFAHREN Den Kontakt mit Reagenzien, die TMB, Wasserstoffperoxid oder Schwefelsäure enthalten, vermeiden. Bei Kontakt mit reichlich Wasser abwaschen.tmb ist möglicherweise karzinogen. PROBENGEWINNUNG UND AUFBEWAHRUNG Ca. 0,1 ml Serum wird für eine Doppelbestimmung benötigt. 45 ml Blut in einem dafür vorgesehenen und entsprechend markiertem Röhrchen sammeln und das Blut gerinnen lassen. Dies zentrifugieren und die Serumschicht vorsichtig entfernen. Lagerung bei 4 C für bis zu 24 Stunden oder bei 10 C oder niedriger, wenn die Analysen später erfolgen sollen. Alle humanen Proben sind als möglicherweise biologisch gefährliches Material zu behandeln und entsprechende Vorsichtsmaßnahmen zu treffen. PROBENVORBEREITUNG Dieser Assay ist ein direktes Testsystem; es bedarf keiner Probenvorbereitung. ZUSÄTZLICHES MATERIAL (NICHT IM KIT ENTHALTEN) 1. Präzisionspipetten mit 20, 50, 100, 150 and 300 μl 2. Pipettenspitzen 3. Bidest. oder deionisiertes Wasser 4. Orbitalschüttler (600 U/min) (z.b. EAS 2/4, SLT) oder Linearschüttler (200 U/min) 5. Messgerät für Mikrotiterplatten mit einem Filterset bei 450 nm und einem oberen ODLimit von 3,0 oder höher (s. Testdurchführung Schritt 10) Version 7.0 May 15, /7

4 beta 2Microglobulin ELISA (DB59191) KOMPONENTEN DES KITS 1. Maus Antiβ 2M Antikörperbeschichtete Mikrotiterplatte mit abbrechbaren Wells Gebrauchsfertig. Inhalt: Eine 96Well (12x8)Mikrotiterplatte, beschichtet mit monoklonalem Antikörper in einem wiederverschließbaren Beutel mit Trockenmittel. Lagerung: Bei 28 C / Stabilität: 12 Monate oder wie auf dem Etikett angezeigt. 2. β 2M Meerrettichperoxidase (HRP)Konjugat, Konzentrat X50 Inhalt: β2mhrpkonjugat in Proteinpuffer mit quecksilberfreiem Konservierungsmittel Volumen: 0.4 ml/fläschchen Lagerung: Bei 28 C / Stabilität: 12 Monate oder wie auf dem Etikett angezeigt. Vorbereitung: Im Verhältnis 1:50 in Assaypuffer vor Gebrauch verdünnen (bspw. 40 µl Konjugat in 2 ml Assaypuffer). Wenn die ganze Platte benutzt werden soll, 240 µl Konjugat in 12 ml Assaypuffer verdünnen. Reste entsorgen. 3. β 2MStandards Gebrauchsfertig. Inhalt: Sechs Fläschchen mit β2m in Proteinpuffer mit quecksilberfreiem Konservierungsmittel. Hergestellt duch Spiken eines Puffers mit bekannter Menge an β2m. Die Etiketten der Fläschchen für genaue Angaben beachten. *Angabe ungefährer Konzentrationen. Standard Konzentration* Volumen/Fläschchen Standard A 0 mg/l 2.0 ml Standard B 0.2 mg/l 0.5 ml Standard C 0.6 mg/l 0.5 ml Standard D 1.6 mg/l 0.5 ml Standard E 4 mg/l 0.5 ml Standard F 10 mg/l 0.5 ml Storage: Bei 28 C / Stabilität: 12 Monate in ungeöffneten Fläschchen oder wie auf dem Etikett angezeigt. Einmal geöffnet sollten die Standards innerhalb von 14 Tagen verbraucht werden oder aliquotiert und eingefroren werden. Mehrfache Auftau und Einfrierzyklen vermeiden. 4. Kontrollen Gebrauchsfertig. Inhalt: Zwei Fläschchen mit β2m in Proteinpuffer mit quecksilberfreiem Konservierungsmittel. Hergestellt duch Spiken eines Puffers mit bekannter Menge an β2m. Die Etiketten der Fläschchen für genaue Angaben beachten. Volumen: 0.5 ml/fläschchen Lagerung: Bei 28 C / Stabilität: 12 Monate in ungeöffneten Fläschchen oder wie auf dem Etikett angezeigt. Einmal geöffnet sollten die Standards innerhalb von 14 Tagen verbraucht werden oder aliquotiert und eingefroren werden. Mehrfache Auftau und Einfrierzyklen vermeiden. 5. Waschpuffer Konzentrat X10 Inhalt: Eine Flasche mit Puffer mit nichtionischem Detergens und quecksilberfreiem Konservierungsmittel. Volumen: 50 ml/flasche Lagerung: Bei 28 C / Stabilität: 12 Monate oder wie auf dem Etikett angezeigt. Vorbereitung: Im Verhältnis 1:10 in bidestilliertem oder deionisiertem Wasser vor Gebrauch verdünnen. Wenn die ganze Platte benutzt werden soll, 50 ml des Waschpufferkonzentrats mit 450 ml Wasser verdünnen. 6. Assaypuffer Gebrauchsfertig. Inhalt: Eine Flasche mit Proteinpuffer und quecksilberfreiem Konservierungsmittel. Volumen: 15 ml/flasche Lagerung: Bei 28 C / Stabilität: 12 Monate oder wie auf dem Etikett angezeigt. 7. TMB Substrate Gebrauchsfertig. Inhalt: Eine Flasche mit Tetramethylbenzidin und Wasserstoffperoxid in einem DMFfreien oder DMSOfreien Puffer. Volumen: 16 ml/flasche Lagerung: Bei 28 C / Stabilität: 12 Monate oder wie auf dem Etikett angezeigt. 8. Stopping Solution Gebrauchsfertig. Inhalt: Eine Flasche mit 1M Schwefelsäure. Volumen: 6 ml/flasche Lagerung: Bei 28 C / Stabilität: 12 Monate oder wie auf dem Etikett angezeigt. Version 7.0 May 15, /7

5 beta 2Microglobulin ELISA (DB59191) TESTDURCHFÜHRUNG Probenvorbereitung: Keine. Alle Reagenzien müssen vor Gebrauch Raumtemperatur erreicht haben. Standards, Kontrollen und Proben sollten in Doppelbestimmungen durchgeführt werden. Ist der Test einmal gestartet, sollten alle Schritte ohne Unterbrechung durchgeführt werden. 1. Die Gebrauchslösungen des β 2MHRPKonjugats und des Waschpuffers vorbereiten. 2. Die gewünschte Anzahl an MikrowellStreifen abbrechen. Den Beutel schließen und die restlichen MikrowellStreifen wieder in die Kühlung geben μl jedes Standards, jeder Kontrolle und jeder Probe in entsprechend markierte Wells pipettieren. Doppelbestimmungen durchführen μl der Gebrauchslösung des Konjugats in jedes Well pipettieren. (Wir empfehlen den Gebrauch einer Mehrkanalpipette.) 5. 1 h bei RT auf einem Orbitalschüttler (ca. 600 U/min) oder Linearschüttler (ca. 200 U/min) inkubieren. 6. Die Wells 3x mit 300 μl/well verdünntem Waschpuffer. Die Platte auf Papiertüchern ausklopfen, um sicherzustellen, dass sie trocken ist. (Der Gebrauch eines Waschsystems ist empfohlen.) 7. In gleichen Intervallen 150 μl des TMBSubstrates in jedes Well pipettieren min bei RT (1825 C) auf einem Orbitalschüttler (ca. 600 U/min) oder Linearschüttler (ca. 200 U/min) inkubieren oder bis Standard A eine dunkelblaue Farbe für die gewünschte OD erreicht μl der Stopplösung in jedes Well in den gleichen Intervallen wie in Schritt 7 pipettieren. 10. Die optische Dichte mit einem Messgerät für Mikrotiterplatten bei 450 nm innerhalb von 20 Minuten nach Zugabe der Stopplösung messen. * Wenn die OD das obere Detektionslimit überschreitet oder wenn kein 450 nmfilter verwendet werden kann, kann dieser durch einen 405 nmfilter oder 415 nmfilter ausgetauscht werden. Die optischen Dichten werden geringer sein, was aber nicht die Ergebnisse der Patientenproben/Kontrollen beeinflusst. TESTAUSWERTUNG 1. Die optische Dichte jeder Standarddoppelbestimmung berechnen. 2. Eine Standardkurve auf semilogpapier mit den durchschnittlichen Werten zur optischen Dichte auf der yachse und den Standardkonzentrationen auf der xachse zeichnen. Wenn eine Immunoassay Software benutzt wird, wird eine 4ParameterKurve empfohlen. 3. Die durchschnittliche optische Dichte jeder ProbenDoppelbestimmung berechnen. 4. Die Werte der Proben direkt von der Standardkurve ablesen. 5. Haben die Proben eine Konzentration höher als 10 mg/l, diese mit Standard A in einem Verhältnis kleiner als 1:20 verdünnen. Das erhaltene Ergebnis muss mit dem Verdünnungsfaktor multipliziert werden. TYPISCHE STANDARDKURVE (Beispiel. Nicht zur Testauswertung verwenden.) Standard OD 1 OD 2 Mittelwert OD Wert (mg/l) 2.1 A B C D E F Probe OD 450nm B 2 M (mg/l) Version 7.0 May 15, /7

6 beta 2Microglobulin ELISA (DB59191) TESTCHARACTERISTIKA SENSITIVITÄT Das untere Detektionslimit wird anhand der Standardkurve berechnet, indem die durchschnittliche optische Dichte des Standards A (basierend auf 10 wiederholten Analysen) minus 2 SD bestimmt wird. Die Sensitivität des beta 2Microglobulin ELISA Kit 0.1 mg/l. SPEZIFIZITÄT (KREUZREAKTIONEN) Folgende Komponenten wurden im Hinblick auf Kreuzreaktionen mit dem beta 2Microglobulin ELISA Kit mit einer Kreuzreaktion mit β 2M von 100% getestet. Untersuchter Stoff % Kreuzreaktion β 2Microglobulin 100 Human IgG < INTRAASSAY PRÄZISION Drei Proben wurden zehn Mal untersucht, jede auf derselben Standardkurve. Die Ergebnisse (in mg/l) sind unten aufgeführt: Probe Durchschnitt SD CV % INTERASSAY PRÄZISION Zwei Proben wurden zehn Mal über eine Zeitspanne von vier Wochen untersucht. Die Ergebnisse (in mg/l) sind unten aufgeführt: Probe Durchschnitt SD CV % WIEDERFINDUNG Gespikte Proben wurden durch Hinzufügen bestimmter Mengen β 2M zu zwei Serumproben (1:1) hergestellt. Die Ergebnisse (in mg/l) sind unten aufgeführt: Probe 1 nicht gespiket nicht gespiket Gemessenes Ergebnis Erwartetes Ergebnis Wiederfindung % LINEARITÄT Zwei Serumproben wurden mit Standard A verdünnt. Die Ergebnisse (in mg/l) sind unten aufgeführt: Probe 1 1:5 1:10 1:20 2 1:5 1:10 1:20 Gemessenes Ergebnis Erwartetes Ergebnis Wiederfindung % Version 7.0 May 15, /7

7 beta 2Microglobulin ELISA (DB59191) ERWARTETE NORMALWERTE Wie für alle klinische Assays sollte jedes Labor Daten sammeln und einen eigenen Bereich für erwartete Normalwerte erstellen. Gruppe Männer (Alter 2470) Frauen (Alter 1945) N Durchschnitt (mg/l) Bereich (mg/l) Postmenopausale Frauen Kinder/Jugendliche und Frauen (Alter 317) Version 7.0 May 15, /7

8 beta 2Microglobulin ELISA (DB59191) LITERATUR 1. Ling TGI, Mattiasson B. A General Study of the Binding and Separation in Partition Affinity Ligand Assay. Immunoassay of Beta 2Microglobulin. J of Immunol Methods. 1983; 59(3): Evrin PE, et al. A Turbidimetric lmmunochemical Method for Determination of Serum ß2Microglobulin Using a Centrifugal Analyzer. Clinica Chemica Acta. 1986; 155(2): Curry R, et al. Rapid SemiQuantitative Isolation of Beta2Microglobulin From Urine. J of Immunol Methods. 1981; 47(3): Francioli P, et al. Beta 2Microglobulin and Immunodeficiency in a Homosexual Man. New Engl J Med. 1982; 307(22): MartinezBru C, et al. Beta 2Microglobulin and Immunoglobulins Are More Useful Markers of Disease Progression in HIV Than Neopterin and Adenosine Deaminase. Ann Clin Biochem. 1999; 36: Tachibana K, et al. A TwoSite Sandwich Radioimmunoassay of Beta 2Microglobulin With Monoclonal Antibodies. J of lmmunol Methods. 1984; 75(1): Uotila M, et al. TwoSite Sandwich Enzyme Immunoassay With Monoclonal Antibodies to Human AlphaFetoprotein. J of lmmunol Methods. 1981;42(1) Brodsky FM, et al. Characterization of a Monoclonal AntiBeta 2Microglobulin Antibody and its Use in the Genetic and Biochemical Analysis of Major Histocompatibility Antigens. Eur J lmmunol. 1979; 9(7): Nilsson K, et al. Involvement of Lymphoid and Nonlymphoid Cells in the Production of ß2Microglobulina Homologue of the Constant Domains of lgg. Nature. 1973; 244: Leclair K, et al. A Rapid Method for Isolation of Antigenically Active Human Cell Surface Antigens Associated with Beta 2Microglobulin Using a Monoclonal Antibody. J of lmmunol Methods. 1981; 41(2): O' Reilly D, et al. A Simple, Precise and Sensitive Nephelometric Assay for Beta 2Microglobulin in Body Fluids. J of lmmunol Methods. 1983; 57(13): Revillard JP, etal. Lyon Medical.1979; 241: Wibell L, et al. Serum 2 Microglobulin in Renal Disease. Nephron. 1973; 10(5): Burnett RW. Accurate Estimation of Standard Deviations for Quantitative Methods Used in Clinical Chemistry. Clin Chern. 1975; 21 (13): Sonnerborg AB, et al. Elevated Neopterin and Beta 2Microglobulin Levels in Blood and Cerebrospinal Fluid Occur Early in HIV1 Infection. AIDS. 1989; 3(5): Domingo P, et al. Prognostic Value of Serum Beta 2Microglobulin in HIV Infection. Lancet. 1992; 340: Lacey JN, et al. Serum Beta 2Microglobulin and Human Immunodeficiency Virus Infection. AIDS. 1987; 1 (2): Shalla RB, et al. Abnormally High Concentrations of Beta 2 Microglobulin in Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS) Patients. Clin Chern. 1983; 29(8): Lambin P, et al. Neopterin and Beta 2Microglobulin in Serum of HIVSeropositive Subjects During a TwoYear FollowUp. Clin Chern. 1988; 34(6): Fahey JL, et al. The Prognostic Value of Cellular and Serologic Markers in Infection with Human Immunodeficiency Virus Type 1. New Eng/ J Med. 1990; 322(3): Check JH, et al. Falsely Elevated Steroidal Assay Levels Related to Heterophile Antibodies Against Various Animal Species. Gynecol Obstet Invest. 1995; 40(2): Version 7.0 May 15, /7

9 Symbols / Symbole / Symbôles / Símbolos / Símbolos / Σύμβολα REF LOT CONC LYO IVD Cat.No.: / Kat.Nr.: / No. Cat.: / Cat.No.: / N.º Cat.: / N. Cat.: / ΑριθμόςΚατ.: LotNo.: / ChargenBez.: / No. Lot: / LotNo.: / Lote N.º: / Lotto n.: / Αριθμός Παραγωγή: Use by: / Verwendbar bis: / Utiliser à: / Usado por: / Usar até: / Da utilizzare entro: / Χρησιμοποιείται από: No. of Tests: / Kitgröße: / Nb. de Tests: / No. de Determ.: / N.º de Testes: / Quantità dei tests: / Αριθμός εξετάσεων: Concentrate / Konzentrat / Concentré / Concentrar / Concentrado / Concentrato / Συμπύκνωμα Lyophilized / Lyophilisat / Lyophilisé / Liofilizado / Liofilizado / Liofilizzato / Λυοφιλιασμένο In Vitro Diagnostic Medical Device. / InvitroDiagnostikum. / Appareil Médical pour Diagnostics In Vitro. / Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro. / Equipamento Médico de Diagnóstico In Vitro. / Dispositivo Medico Diagnostico In vitro. / Ιατρική συσκευή για InVitro ιάγνωση. Evaluation kit. / Nur für Leistungsbewertungszwecke. / Kit pour évaluation. / Juego de Reactivos para Evaluació. / Kit de avaliação. / Kit di evaluazione. / Κιτ Αξιολόγησης. Read instructions before use. / Arbeitsanleitung lesen. / Lire la fiche technique avant emploi. / Lea las instrucciones antes de usar. / Ler as instruções antes de usar. / Leggere le istruzioni prima dell uso. / ιαβάστε τις οδηγίες πριν την χρήση. Keep away from heat or direct sun light. / Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. / Garder à l abri de la chaleur et de toute exposition lumineuse. / Manténgase alejado del calor o la luz solar directa. / Manter longe do calor ou luz solar directa. / Non esporre ai raggi solari. / Να φυλάσσεται μακριά από θερμότητα και άμεση επαφή με το φως του ηλίου. Store at: / Lagern bei: / Stocker à: / Almacene a: / Armazenar a: / Conservare a: / Αποθήκευση στους: Manufacturer: / Hersteller: / Fabricant: / Productor: / Fabricante: / Fabbricante: / Παραγωγός: Caution! / Vorsicht! / Attention! / Precaución! / Cuidado! / Attenzione! / Προσοχή! Symbols of the kit components see MATERIALS SUPPLIED. Die Symbole der Komponenten sind im Kapitel KOMPONENTEN DES KITS beschrieben. Voir MATERIEL FOURNI pour les symbôles des composants du kit. Símbolos de los componentes del juego de reactivos, vea MATERIALES SUMINISTRADOS. Para símbolos dos componentes do kit ver MATERIAIS FORNECIDOS. Per i simboli dei componenti del kit si veda COMPONENTI DEL KIT. Για τα σύμβολα των συστατικών του κιτ συμβουλευτείτε το ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΥΛΙΚΑ. COMPLAINTS: Complaints may be submitted initially written or vocal. Subsequently they need to be filed including the test performance and results in writing in case of analytical reasons. WARRANTY: The product is warranted to be free from material defects within the specific shelf life and to comply with product specifications delivered with the product. The product must be used according to the Intended use, all instructions given in the instructions for use and within the product specific shelf life. Any modification of the test procedure or exchange or mixing of components of different lots could negatively affect the results. These cases invalidate any claim for replacement. LIMITATION OF LIABILITY: IN ALL CIRCUMSTANCES THE EXTENT OF MANUFACTURER S LIABILITY IS LIMITED TO THE PURCHASE PRICE OF THE KIT(S) IN QUESTION. IN NO EVENT SHALL MANUFACTURER BE LIABLE FOR ANY INCIDENTAL OR CONSEQUENTIAL DAMAGES, INCLUDING DAMAGES FOR LOST PROFITS, LOST SALES, INJURY TO PERSON OR PROPERTY OR ANY OTHER INCIDENTAL OR CONSEQUENTIAL LOSS. IBL International GmbH Flughafenstr. 52A, Hamburg, Germany Tel.: + 49 (0) Fax: 11 IBL@IBLInternational.com WEB: Symbols Version 4.5 /