Treponema pallidum Screen ELISA

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1 Arbeitsanleitung Treponema pallidum Screen ELISA Enzymimmunoassay zur qualitativen Bestimmung von Treponema pallidum spezifischen Gesamtantikörper (TAB) in humanem Serum oder Plasma. RE58821 RE x8 10x12x8 2-8 C I B L I N T E R N A T I O N A L G M B H Flughafenstrasse 52a Phone: +49 (0) IBL@IBL-International.com D Hamburg, Germany Fax: +49 (0)

2 1. ZWECKBESTIMMUNG Enzymimmunoassay zur qualitativen Bestimmung von Treponema pallidum spezifischen Gesamtantikörper (TAB) in humanem Serum oder Plasma. 2. KLINISCHE BEDEUTUNG Bei Treponema pallidum (T. pallidum) handelt es sich um den Erreger der Syphilis (Synonym: Lues), einer chronischen, nur beim Menschen vorkommenden Erkrankung. Neben dem hauptsächlichen Übertragungsweg durch Geschlechtsverkehr besteht das Risiko einer Infektion des Fötus bei Erkrankung der schwangeren Mutter oder der Übertragung bei Bluttransfusionen. Bereits wenige Wochen nach der Infektion sind Syphilis Antikörper nachweisbar. Für die serologische Diagnostik werden 2 Arten von Antikörpertests eingesetzt: nicht-spezifische (anti-cardiolipin, anti-reagin) und spezifische (anti- Treponemen). Einer der Hauptgründe für den anhaltenden Gebrauch von nicht-spezifischen Tests (RPR-, VDRL, CMT etc.) basiert auf der Beobachtung von abnehmendem Titerverlauf bei (antibiotischer) Therapie, das als ausreichendes Kriterium einer Behandlung genommen wird (3,4). Treponemen-spezifische Tests basieren auf der Verwendung selektiver Treponemen Antigene. Vor der HIV-Ära wurden spezifische Tests weitgehend benutzt, um die positiven Ergebnisse zu bestätigen, die durch nichtspezifische Screening-Tests erzielt wurden. Obgleich ältere Treponemen-spezifische Tests (wie MHA-TP und FTA-Abs) im Allgemeinen als zuverlässig für akute oder wiederkehrende Infektionen (unabhängig von der Behandlung) gelten, ist die Spezifität begrenzt, da auswertbare in-vitro-zellkulturtechniken für T. pallidum fehlen (2). Die Verwendung von selektiven rekombinanten Treponemen-Antigenen im Treponema pallidum Screen ELISA führt zu verbesserter diagnostischer Sensitivität und Spezifität in der Routinediagnostik. Der Treponema pallidum Screen ELISA wird in Gesundheits-Einrichtungen und zum Screening in Blutbanken eingesetzt. 3. TESTPRINZIP Das T.pallidum Antigen ist eine Mischung rekombinanter Proteine mit immundominanten Epitopen, welche sich als aussagekräftig für die Routinediagnostik erwiesen haben. Diese Antigene sind auf Mikrotiterstreifen beschichtet. Vorhandene T.-pallidum-spezifische Antikörper in der Probe und Kontrolle binden an die immobilisierten Antikörper der Mikrotiterplatte. Nach einem Waschvorgang zur Entfernung von nicht gebundenem Kontroll- und Probenmaterial wird ein mit Peroxidase markiertes T. pallidum Antigen (Konjugat) zugegeben. Dieses bindet selektiv an die freien Bindungsstellen der T. pallidum Antikörper, die über die Antigene an die Platte gebunden sind (Immunkomplex). Über das so gebundene Emzym Peroxidase erfolgt der indirekte Nachweis der gebundenen humanen T. pallidum Antikörper. Durch einen zweiten Waschvorgang wird ungebundenes Konjugat entfernt. Die gebundenen Immunkomplexe werden nach Inkubation mit chromogener Substratlösung (TMB) nachgewiesen. Die Intensität der gebildeten Farbe ist der Antikörpermenge direkt proportional. Der Gesamtantikörpertest zeigt keine Antikörpergruppen-Abhängigkeit. Es werden alle Immunoglobulinklassen erkannt. Wegen der Empfindlichkeit des Systems, werden positive Proben überwiegend als out of range Signal gemessen. 4. WARNHINWEISE UND VORSICHTSMASSNAHMEN 1. Nur zum In-vitro-Gebrauch. Nur für den Gebrauch durch Fachpersonal. 2. Vor der Testdurchführung sollte die Arbeitsanleitung vollständig und sorgfältig gelesen werden und verstanden worden sein. Die gültige Version aus dem Kit verwenden. 3. Im Falle einer erheblichen Beschädigung der Testpackung ist IBL bzw. der jeweilige Lieferant innerhalb einer Woche nach Empfang der Ware schriftlich zu benachrichtigen. Beschädigte Komponenten dürfen nicht zur Testdurchführung verwendet werden, sondern sollten solange aufbewahrt werden, bis der Transportschaden endgültig geregelt ist. 4. Chargen-Nummer und Verfallsdatum beachten. Es dürfen keine Reagenzien aus unterschiedlichen Chargen in einem Test verwendet werden. Verfallene Reagenzien dürfen nicht verwendet werden. 5. Gute Laborpraxis und Sicherheitsrichtlinien beachten. Je nach Bedarf sollten Laborkittel, Einmal- Latexhandschuhe und Schutzbrillen getragen werden. Version / 5

3 6. Reagenzien dieses Kits, die Gefahrstoffe enthalten, können Reizungen der Augen und der Haut hervorrufen. Siehe Angaben in KOMPONENTEN DES KITS und auf den Etiketten. Sicherheitsdatenblätter für dieses Produkt sind auf der IBL-Homepage zum Download verfügbar oder auf Anfrage direkt von IBL erhältlich. 7. Chemikalien und vorbereitete oder gebrauchte Reagenzien sind unter Beachtung der jeweiligen nationalen Bestimmungen als Gefahrstoffabfall zu entsorgen. 8. Das Reinigungspersonal ist durch das Fachpersonal bezüglich möglicher Gefahren und Umgang anzuleiten. 9. Kontakt mit Stopplösung vermeiden. Kann Hautreizungen und Verätzungen hervorrufen. 10. Alle Reagenzien dieses Kits, die humanes Serum oder Plasma enthalten, ergaben bei der Prüfung auf anti-hcv, HBsAg bzw. Antikörper gegen HIV I/II-Virus ein negatives Ergebnis. Trotzdem kann das Vorhandensein solcher infektiöser Erreger nicht mit absoluter Sicherheit ausgeschlossen werden. Die Reagenzien sollten deshalb wie potentiell infektiöses Material behandelt werden. 5. LAGERUNG UND HALTBARKEIT Der Kit wird bei Umgebungstemperatur angeliefert und sollte bei 2-8 C gelagert werden. Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. Hinweise zur Lagerung und Haltbarkeit der Proben und vorbereiteten Reagenzien sind den entsprechenden Kapiteln zu entnehmen. Die Mikrotiterplatte ist auch nach dem Öffnen der Verpackung bis zum Verfallsdatum des Kits haltbar, wenn der Beutel sorgfältig wieder verschlossen und bei 2-8 C gelagert wird. 6. PROBENGEWINNUNG UND -AUFBEWAHRUNG Serum, Plasma Die üblichen Vorsichtsmaßnahmen bei der Blutabnahme sind einzuhalten. Die chemische Integrität der Blutproben muss vom Zeitpunkt der Blutabnahme bis zur Testdurchführung erhalten bleiben. Keine hämolytischen, ikterischen oder lipämischen Proben verwenden. Getrübte Proben sollten vor der Testdurchführung zentrifugiert werden, um Partikel zu entfernen. Lagerung: 2-8 C -20 C Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. Haltbarkeit: 2 Tage > 2 Tage Wiederholtes Auftauen und Einfrieren vermeiden. 7. KOMPONENTEN DES KITS Anzahl / Menge Symbol RE58821 RE x 12 x 8 10 x 12 x 8 MTP 1 x 13 ml 2 x 55 ml ENZCONJ 1 x 1.0 ml 3 x 2.0 ml CONTROL + 1 x 1.0 ml 3 x 2.0 ml CONTROL - 1 x 1.8 ml 5 x 1.8 ml CONTROL CO 1 x 100 ml 5 x 100 ml WASHBUF CONC 1 x 15 ml 2 x 55 ml TMB SUBS 1 x 15 ml 2 x 55 ml TMB STOP Komponente Mikrotiterplatte Gebrauchsfertig. Wells einzeln abbrechbar. Beschichtet mit rekombinantes T. pallidum-antigen. Enzymkonjugat Gebrauchsfertig. Rosa gefärbt. konjugiert mit HRP. Enthält: rekombinantes T. pallidum-antigen. Positivkontrolle Gebrauchsfertig. Rot gefärbt. Enthält: Humanserum, Stabilisatoren, Konservierungsmittel, T. pallidum spezifische Antikörper. Negativkontrolle Gebrauchsfertig. Gelb gefärbt. Enthält: Humanserum, Stabilisatoren, Konservierungsmittel. Cut-Off Kontrolle Gebrauchsfertig. Grün gefärbt. Enthält: Humanserum, Stabilisatoren, Konservierungsmittel, T. pallidum spezifische Antikörper. Waschpuffer, Konzentrat (10x) Enthält: Phosphatpuffer. TMB Substratlösung Gebrauchsfertig. Enthält: TMB (Tetramethylbenzidine). TMB Stopplösung Gebrauchsfertig. Enthält: 0.5 M H 2SO 4. Version / 5

4 8. ZUSÄTZLICHES MATERIAL (NICHT IM KIT ENTHALTEN) 1. Pipetten (Multipette Eppendorf oder vergleichbare Produkte, < 3 % VK). Volumina: 10; 100; 200; 1000 µl. 2. Vortex-Mischer 3. Inkubator, 37 C 4. 8-Kanal Mikropipette mit Reagenziengefäßen 5. Waschflasche, automatisches oder halbautomatisches Waschsystem für Mikrotiterplatten 6. Messgerät für Mikrotiterplatten zur Messung der Absorption bei 450 nm (Referenzwellenlänge nm) 7. Bidest. oder deionisiertes Wasser 8. Papiertücher, Pipettenspitzen, Stoppuhr 9. HINWEISE ZUR TESTDURCHFÜHRUNG 1. Fehler bei der Handhabung der Proben oder Abweichungen von der beschriebenen Testdurchführung können die Ergebnisse verfälschen. Die angegebenen Pipettiervolumina, Inkubationszeiten, Temperaturen und Vorbereitungsschritte sind unbedingt gemäß Arbeitsanleitung einzuhalten. Nur kalibrierte Pipetten und Geräte verwenden. 2. Sobald mit der Testdurchführung begonnen wird, sollten alle Arbeitsschritte ohne Unterbrechung durchgeführt werden. Es ist sicherzustellen, dass alle benötigten Reagenzien, Geräte und Hilfsmittel zur rechten Zeit zur Verfügung stehen. Alle Reagenzien und Proben müssen auf Raumtemperatur (18-25 C) gebracht und vor Gebrauch vorsichtig ohne Schaumbildung gemischt werden. 3. Kontaminationen der Reagenzien, Pipetten und Wells/Röhrchen sind zu vermeiden. Neue Einmal- Pipettenspitzen für jede zu pipettierende Komponente und jede Probe verwenden. Die Deckel der Fläschchen nicht vertauschen. Nicht benötigte Fläschchen immer verschlossen halten. Wells/Röhrchen oder Reagenzien dürfen nicht wiederverwendet werden. 4. Es wird empfohlen, Doppelbestimmungen durchzuführen, um eventuelle Pipettierfehler zu erkennen. 5. Es sollte ein Pipettierschema verwendet werden um die Identifikation der Standards und Proben auf der Platte sicherzustellen. 6. Die Inkubationszeiten beeinflussen die Ergebnisse. Bei jedem Pipettierschritt sollten alle Wells in der gleichen Reihenfolge und im gleichen Zeittakt behandelt werden. Die Verwendung einer 8-Kanal- Mikropipette zum Pipettieren in alle Wells wird empfohlen. 7. Die korrekte Durchführung der Waschschritte ist entscheidend. Ungenügend gewaschene Wells ergeben falsche Ergebnisse. Die Verwendung einer Multikanalpipette oder eines automatischen Waschsystems für Mikrotiterplatten wird empfohlen. Zwischen den Inkubationen die Wells nicht austrocknen lassen. Beim Waschen und Ausschütteln dürfen die beschichteten Wells nicht beschädigt werden. Alle Reagenzien müssen daher mit Vorsicht pipettiert werden. Beim Waschvorgang ist es wichtig, dass alle Wells vollständig und gleichmäßig mit Waschpuffer gefüllt werden und nach dem Ausschütteln kein Rückstand an Flüssigkeit zurückbleibt. 8. Feuchtigkeit beeinflusst die beschichteten Wells/Röhrchen. Verpackung nicht öffnen bevor Raumtemperatur erreicht ist. Nicht benötigte Wells/Röhrchen sofort in den wieder verschließbaren Beutel mit Trockenmittel zurückgeben. 10. TESTVORBEREITUNGEN Vorbereitung der Komponenten Der Inhalt des Kits für 96 Bestimmungen kann in 3 Läufe aufgeteilt werden. Die unten angegebenen Volumina sind für einen Lauf mit 4 Streifen (32 Bestimmungen). Verd. / rekonst. Komponente Diluent Verhältnis Bemerkungen Lagerung Haltbarkeit 30 ml WASHBUF CONC 270 ml bidest. Wasser 1:10 Ggf. auf 37 C erwärmen, um Kristalle aufzulösen. 2-8 C 4 Wochen Version / 5

5 11. TESTDURCHFÜHRUNG 1. Je 100 µl von jeder Kontrolle und jeder Probe in die entsprechenden Wells der Mikrotiterplatte pipettieren. Wir empfehlen die Positiv- (rot) und Negativkontrolle (gelb) in Doppelbestimmung und die Cut-Off Kontrolle (grün) in Vierfachbestimmung zu pipettieren. 2. Platte mit Haftklebefolie abdecken. 60 min bei 37 C inkubieren. 3. Folie entfernen. Inkubationslösung verwerfen. Platte 5 x mit je 300 µl verdünntem Waschpuffer waschen. Restliche Flüssigkeit auf Papiertüchern ausklopfen µl Enzymkonjugat in jedes Well pipettieren. 5. Platte mit Haftklebefolie abdecken. 30 min bei 37 C inkubieren. 6. Folie entfernen. Inkubationslösung verwerfen. Platte 5 x mit je 300 µl verdünntem Waschpuffer waschen. Restliche Flüssigkeit auf Papiertüchern ausklopfen. 7. Substrat- und Stopplösung möglichst mit einer 8-Kanal-Pipette pipettieren und Substrat- und Stopplösung in denselben Zeitintervallen zugeben. Mit positivem Vorhub pipettieren, um die Bildung von Luftbläschen zu vermeiden µl TMB Substratlösung in jedes Well pipettieren min bei 37 C inkubieren. Direkte Sonneneinstrahlung vermeiden. 10. Die Substratreaktion durch Zugabe von 100 µl TMB Stopplösung in jedes Well stoppen. Farbumschlag von blau nach gelb. 11. Die optische Dichte mit einem Photometer innerhalb von 10 min nach Zugabe der Stopplösung bei 450 nm messen (Referenzwellenlänge: nm). 12. QUALITÄTSKONTROLLE Die Testergebnisse sind nur gültig, wenn der Test gemäß der vorliegenden Arbeitsanleitung abgearbeitet wurde. Ferner muss der Anwender die GLP-Regeln (Good Laboratory Practice) oder vergleichbare Normen/Gesetze beachten. Anwender und/oder Labor müssen zur Diagnosestellung ein gemäß GLP validiertes System verwenden. Alle Kit-Kontrollen müssen innerhalb der Akzeptanzbereiche, die auf den Etiketten und dem QC-Zertifikat angegeben sind, gefunden werden. Wenn die Kriterien nicht erfüllt sind, sind die Ergebnisse ungültig und der Test sollte wiederholt werden. Jedes Labor sollte darüber hinaus eigene bekannte Proben als weitere Kontrollen mitführen. Es wird empfohlen, an den einschlägigen Ringversuchen teilzunehmen. Bei Abweichungen sind die folgenden Fehlermöglichkeiten zu überprüfen: Haltbarkeit der (vorbereiteten) Reagenzien, Lagerungsbedingungen, Pipetten, Geräte und Hilfsmittel, Inkubationsbedingungen und Waschmethoden. 13. TESTAUSWERTUNG Der Cut-off Wert ergibt sich aus der optischen Dichte (OD) der Cut-off Kontrolle. Der Cut-off Index (COI) wird aus der mittleren optischen Dichte der Probe und der des Cut-offs berechnet. Proben, deren optische Dichte sich nicht mehr als 20% (Graubereich) von der des Cut-off Wertes unterscheidet, sind als grenzwertig zu beurteilen. Darüberliegende Proben sind positiv, darunterliegende negativ zu bewerten. Der Cut-off Index (COI) der Proben wird wie folgt bestimmt: COI. = OD Probe OD Cut-off Kontrolle 14. INTERPRETATION DER ERGEBNISSE Methode Bereich Interpretation Therapeutische Konsequenzen sollten nicht allein aufgrund < 0.8 negativ der mit diesem Test ermittelten Werte getroffen werden, Qualitativ grenzwertig sondern nur unter Berücksichtigung aller klinischen (Cut-off Index, COI) > 1.2 positiv Beobachtungen und weiterer diagnostischer Mittel. Negativ: Keine Antikörper gegen T.pallidum nachgewiesen. Graubereich: Keine eindeutige Einstufung möglich. Um Resultate zu bestätigen, wird empfohlen die Probe in Doppelbestimmung wiederholt zu testen. Finden sich die Ergebnisse erneut innerhalb des Graubereichs, sollte eine zweite Probe geprüft und beurteilt werden. Positiv: Spezifische Antikörper gegen T.pallidum nachgewiesen. Version / 5

6 15. GRENZEN DES VERFAHRENS Die korrekte Durchführung der Probengewinnung und Aufbewahrung ist entscheidend für die Testergebnisse. Näheres siehe PROBENGEWINNUNG UND -AUFBEWAHRUNG. Die folgenden Substanzen haben bis zu der angegebenen Konzentration keinen signifikanten Einfluss auf die Testergebnisse. 16. TESTCHARAKTERISTIKA Analytische Spezifität (Kreuzreaktivität) Es wurden keine Kreuzreaktionen gefunden gegen: Hämoglobin Bilirubin Triglyceride Präzision COI VK (%) Probe Intra-Assay Inter-Assay Inter-Lot Klinische Spezifität 100% (n = 728) Klinische Sensitivität 99% (n = 160) 0.07 mg/ml 1.25 mg/ml 5.70 mg/ml H.pylori, TORCH, EBV, Masern, parvovirus, Borreliose, ds-dna Antikörper, ANA-ANCA, autoimmune Antikörper und Serum von Schwangere Frauen. 17. LITERATUR ÜBER DAS PRODUKT 1. Report of a WHO Scientific group (1982). Treponemal infections. Technical Report Series Fieldsteel A.H., Cox D.L., Moeckli R.A. (1981). Cultivation of virulent Treponema pallidum in tissue culture. Infect. Immun. 32: Baker - Zander S.A., Roddy R.E. (1986). IgG and IgM antibody reactivity to antigens of Treponema pallidum after treatment of syphilis. Sex.Trans.Dis. 13 (4): Schroeter A.L., Lucas J.B. (1972). Treatment for early syphilis and reactivity of serologic tests. JAMA 221 (5): Farshy C., Hunter E. (1984). Double-Conjugate Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Immunoglobulins G and M against Treponema pallidum, J. Clin, Microbiol. 20(6): Lee. J., Larsen S. (1986). Detection of Immunoglobulin M in Cerebrospinal Fluid from Syphilis Patients by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, J. Clin, Microbiol. 24(5): Norris S. J. (1993). Polypeptides of Treponema pallidum: Progress toward understanding their Structural, Functional, and Immunologic Roles, Microbiological Reviews 57(3): Ito F., Larsen S. (1992). Specific Immonofluorescent Staining of Pathogenic Treponemes with a Monoclonal Antibody. J. Clin, Microbiol. 30(2): Larsen S, Steiner B. (1995). Laboratory Diagnosis and Interpretation of Tests for Syphilis, Clinical Microbiology Reviews. 8(1): Zrein M., Maure I. (1995). Recombinant Antigen-Based Enzyme Immunoassay for the Screening of Treponema pallidum Antibodies in Blood Bank Routine. J.Clin.Microbiol. 33(2): Young H., Moyes A. (1998). Novel Recombinant-Antigen Enzyme Immunoassay for Serological Diagnosis of Syphilis. J.Clin.Microbiol. 36 (4): Ijsselmuiden O., Schouls L. (1998). Sensitivity and Specificity of an Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Using the Recombinant DNA-Derived Treponema pallidum Protein TmpA for Serodiagnosis of Syphilis and the Potential Use of TmpA for Assessing the Effect of Antibiotic Therapy, J.Clin.Micobiol. 27(1): Notenboom R., Meddens M. (2006). Evaluation of Trep-Sure; a new first-line enzyme immunoassay for the detection of total anti-treponemal antibodies. Int. J. STD&AIDS. 17(S1): 15 Version / 5

7 Symbols / Symbole / Symbôles / Símbolos / Símbolos / Σύµβολα REF LOT Cat.-No.: / Kat.-Nr.: / No.- Cat.: / Cat.-No.: / N.º Cat.: / N. Cat.: / Αριθµός-Κατ.: Lot-No.: / Chargen-Bez.: / No. Lot: / Lot-No.: / Lote N.º: / Lotto n.: / Αριθµός -Παραγωγή: Use by: / Verwendbar bis: / Utiliser à: / Usado por: / Usar até: / Da utilizzare entro: / Χρησιµοποιείται από: No. of Tests: / Kitgröße: / Nb. de Tests: / No. de Determ.: / N.º de Testes: / Quantità dei tests: / Αριθµός εξετάσεων: CONC Concentrate / Konzentrat / Concentré / Concentrar / Concentrado / Concentrato / Συµπύκνωµα LYO IVD Lyophilized / Lyophilisat / Lyophilisé / Liofilizado / Liofilizado / Liofilizzato / Λυοφιλιασµένο In Vitro Diagnostic Medical Device. / In-vitro-Diagnostikum. / Appareil Médical pour Diagnostics In Vitro. / Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro. / Equipamento Médico de Diagnóstico In Vitro. / Dispositivo Medico Diagnostico In vitro. / Ιατρική συσκευή για In-Vitro ιάγνωση. Evaluation kit. / Nur für Leistungsbewertungszwecke. / Kit pour évaluation. / Juego de Reactivos para Evaluació. / Kit de avaliação. / Kit di evaluazione. / Κιτ Αξιολόγησης. Read instructions before use. / Arbeitsanleitung lesen. / Lire la fiche technique avant emploi. / Lea las instrucciones antes de usar. / Ler as instruções antes de usar. / Leggere le istruzioni prima dell uso. / ιαβάστε τις οδηγίες πριν την χρήση. Keep away from heat or direct sun light. / Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. / Garder à l abri de la chaleur et de toute exposition lumineuse. / Manténgase alejado del calor o la luz solar directa. / Manter longe do calor ou luz solar directa. / Non esporre ai raggi solari. / Να φυλάσσεται µακριά από θερµότητα και άµεση επαφή µε το φως του ηλίου. Store at: / Lagern bei: / Stocker à: / Almacene a: / Armazenar a: / Conservare a: / Αποθήκευση στους: Manufacturer: / Hersteller: / Fabricant: / Productor: / Fabricante: / Fabbricante: / Παραγωγός: Caution! / Vorsicht! / Attention! / Precaución! / Cuidado! / Attenzione! / Προσοχή! Symbols of the kit components see MATERIALS SUPPLIED. Die Symbole der Komponenten sind im Kapitel KOMPONENTEN DES KITS beschrieben. Voir MATERIEL FOURNI pour les symbôles des composants du kit. Símbolos de los componentes del juego de reactivos, vea MATERIALES SUMINISTRADOS. Para símbolos dos componentes do kit ver MATERIAIS FORNECIDOS. Per i simboli dei componenti del kit si veda COMPONENTI DEL KIT. Για τα σύµβολα των συστατικών του κιτ συµβουλευτείτε το ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΥΛΙΚΑ. IBL AFFILIATES WORLDWIDE IBL International GmbH Flughafenstr. 52A, Hamburg, Germany IBL International Corp. 194 Wildcat Road, Toronto, Ontario M3J 2N5, Canada Tel.: + 49 (0) Fax: IBL@IBL-International.com WEB: Tel.: +1 (416) Fax: Sales@IBL-International.com WEB: LIABILITY: Complaints will be accepted in each mode written or vocal. Preferred is that the complaint is accompanied with the test performance and results. Any modification of the test procedure or exchange or mixing of components of different lots could negatively affect the results. These cases invalidate any claim for replacement. Regardless, in the event of any claim, the manufacturer s liability is not to exceed the value of the test kit. Any damage caused to the kit during transportation is not subject to the liability of the manufacturer Symbols Version 3.5 /