Product Catalogue Ladders/Markers/DNA

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1 Product Catalogue Ladders/Markers/DNA geneon.net A good decision...

2 Content COT I Human DNA COT I Human DNA GeneON GmbH Hubertusstraße 20 D Ludwigshafen Phone: Fax: Web: info@geneon.net DNA Ladder 10bp DNA ladder (separate loading dye) bp DNA ladder (no loading dye) bp DNA ladder ready- (2 dyes) One-for-all DNA ladder ready- (1 dye) bp DNA ladder (no loading dye) bp DNA ladder PLUS (no loading dye) bp plus DNA PlusBlue ladder (ready-) bp/1kb DNA ladder (no loading dye) bp/1kb DNA ladder BLUE (ready-) RNA Ladder GENE`s Low Range RNA-Ladder GENE`s High Range RNA Ladder GENE`s ready- Low Range RNA Ladder GENE`s ready- High Range RNA Ladder Protein Ladder Protein Ladder US7 unstained, 7 bands Protein Ladder PS10 prestained, 10 bands Plus Protein Ladder PS11 prestained, 11 bands XXL Protein Ladder prestained, DeLuxe, 10 bands

3 Content DNA Sizer/Marker Classic λ-dna/hindiii Digest (ready-) λ-dna/ecori Digest (ready-) λ-dna/ecor I/ HindIII Digest (ready-) λ-dna/styi Digest (ready-) λ-dna/psti Digest (ready-) λ-dna/bsteii Digest (ready-) pbr322 DNA/HinfI Digest (ready-) puc19 DNA/HpaII (BsiSI) Cloning Vector/Phage DNA pbr322 cloning vector puc18 DNA Phage T7 DNA Phage λ-dna Ladder/DNA COT I Human DNA... 6 DNA Ladder... 9 RNA Ladder Protein Ladder DNA Sizer/Marker Classic Cloning Vector/Phage DNA... 67

4 COT I Human DNA COT I Human DNA Anwendungen: Unterdrückung von Kreuzhybrisierungen menschlicher repetitiver DNA bei: Filter- oder Mikroarray Hybridisierungen In-situ-Hybridisierungen Single-Copy"-Gen Hybridisierungen Die COT I Humane DNA wird ausschließlich aus Plazenten von Frauen gewonnen, die ein männliches, neugeborenes Kind ausgetragen haben. Spezielle, aufwendige Aufreinigungsverfahren reichern die DNA mit repetitiven Elementen an. COT I Humane DNA Fraktion von GeneON enthält mindestens 98 % dieser repetitiven und schnell anlagernden Elemente. Konzentration: > 1,1 mg / ml, in 10 mm Tris-HCl, 1 mm EDTA, ph 7.4 Qualitätskontrolle: Durchschnittliche Fragmentgröße: bp A260/A280: 1.78 Enthaltene genomische DNA (non-repetitive DNA): < 2%. Alle Chargen sind garantiert getestet auf und frei von HIV1,2 RNA, HCV RNA und HBV DNA Applications: In situ suppression (CISS) hybridizations Hybridization to micro-arrays Other In situ hybridizations Filter hybridizations Description: COT I Human DNA is prepared from human placental DNA by shearing, denaturing, and reannealing under conditions that enrich these repetitive elements. The product is prepared from male human placental DNA, exclusively. The COT I DNA fraction of human genomic DNA consists largely of rapidly annealing repetitive elements. These interspersed repetitive sequences (IRS), such as SINEs (small interspersed repetitive elements, e.g., Alu elements) and LINEs (large interspersed repetitive elements, e.g., L1 elements), are distributed ubiquitously throughout the genome. Concentration: > 1,1 mg/ml; Solution in 10 mm Tris-HCl, 1 mm EDTA, ph 7.4 Quality control: Average fragments size: bp; A260/A280 ration: about 1.78; Amount of genomic (non-repetitive DNA): less than 2%. COT I DNA and the raw material is tested for the absence of HIV1,2 RNA, HCV RNA, HBV DNA Kat.-Nr. Cat.-no Beschreibung Description Menge Amount 3001 COT I Humane DNA, conc. Konz. >1,1 > 1,1 mg mg/ml / ml 500 µg 3005 COT I Humane DNA, conc. Konz. >11 > 11 mg mg/ml / ml Auf bulk Anfrage 3001 COT I Human DNA conc. >1,1 mg / ml 500 µg 3005 COT I Human DNA conc. >11 mg / ml bulk 6 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 7

5 DNA Ladder 10bp DNA ladder (separate loading dye) bp DNA ladder (no loading dye) bp DNA ladder ready- (2 dyes) One-for-all DNA ladder ready- (1 dye) bp DNA ladder (no loading dye) bp DNA ladder PLUS (no loading dye) bp DNA ladder PlusBlue (ready-) bp/1kb DNA ladder (no loading dye) bp/1kb DNA ladder BLUE (ready-)

6 10bp DNA Leiter-LowRange LowRange 10bp DNA ladder LowRange Der LowRange 10 bp DNA Marker besteht aus 11 definierten, chromatographisch gereinigten DNA-Fragmenten mit verstärkter 50 bp-bande zur besseren Orientierung. Die DNA Leiter analysiert mittels Elektrophorese kleinste DNA Fragmente im Bereich von 10 bis 300 Basenpaare. Für die Auswertung werden hohe Konzentrationen von Agarose (5%), bzw. Polyacrylamid (8%) Gele benötigt. Die 50 bp Bande ist stärker sichtbar und erleichtert die Auswertung. Anwendung: 1 μl/mm pro Bande Konzentration: 0,5 mg DNA/ml Lagerpuffer: 10 mm Tris-HCl ph 7.6, 1 mm EDTA Ladepuffer: 10 mm Tris-HCl (ph 7.6), 0.03 % Bromophenolblau, 0.03 % Xylenecyanol, 60 % Glycerin und 60 mm EDTA Banden: 300, 200, 150, 100, 75, 50, 35, 25, 20, 15, 10 bp in 11 Fragmenten Auswertung: Das o.g. Gelbild zeigt die qualitative und quantitative Bestimmung der DNA, bei der 0,5 µg Markermischung aufgetragen wurden. Die zu bestimmende DNA und DNA Marker sind im gleichen Verhältnis zu verwenden. GeneON s LowRange DNA-Ladder is composed of 11 chromatography-purified individual DNA fragments which are re-dissolved. GeneON LowRange DNA Ladder I is specially designed for electrophoretic analysis of small DNA fragments in the range of 10 to 300 base pairs on high percentage agarose (5 %) and polyacrylamide (8 10 %) gels. The 50 bp band has a higher DNA content and serves as a size reference for easier orientation. There are no unspecific bands besides the fragments described below. Usage: 1 μl/mm lane Concentration: 0,5 mg DNA/ml Storage Buffer: 10 mm Tris-HCl ph 7.6, 1 mm EDTA Loading buffer: 10 mm Tris-HCl (ph 7.6), 0.03 % bromophenol blue, 0.03 % xylene cyanol, 60 % glycerol and 60 mm EDTA Number of bands: 300, 200, 150, 100, 75, 50, 35, 25, 20, 15, 10 bp in 11 fragments Quantification: See the graph for the percentage of the bands and the amount of DNA per band in ng, relating to 0.5 μg loaded marker. Use the same volume of DNA and marker. Additionally the concentration of loading buffer in samples and marker should be equal. Ethidium bromide migrates contrarily to the DNA during electrophoresis. Therefore the distribution of ethidium bromide in the gel is not constant. To ensure equal distribution of ethidium bromide in the gel add 0.5 mg/l ethidium bromide to electrophoresis buffer or dye the gel after the run bp LowRange DNA-Leiter 50 µg bp LowRange DNA-Leiter 5 x 50 µg bp LowRange DNA-Ladder 50 µg bp LowRange DNA-Ladder 5 x 50 µg 10 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 11

7 50bp DNA-Leiter 50bp DNA ladder Die 50 bp DNA Leiter von GeneON ist durch PCR Amplifikation auf Basis von Lambdaphagen-Template-DNA erstellt. Nach Amplifikation wurde die DNA gereinigt, spektroskopisch vermessen und in den angegebenen Mengen in den Marker eingesetzt. Der DNA Marker besteht aus 11 Banden. Der Marker wird für die präzise qualitative Größenbestimmung von doppelsträngiger DNA eingesetzt. Es kann annäherungsweise die DNA Masse ermittelt werden. Zur einfachen Orientierung hat das 500 bp Fragment eine höhere Intensität. Anwendung: 1 µg pro Bande Konzentration: 0,2 µg/µl Lagerpuffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1.0 mm EDTA, 50mM NaCl Ladepuffer: Nicht in der Lieferung enthalten. Fragmente und ungefähre DNA Masse: Basenpaare DNA Masse ng Lademenge: max. 1.2 µg (2-6 µl) pro Spur in % Agarose. Wir empfehlen die Verwendung von 1/10 des Ladepuffers im Verhältnis zur DNA Leiter GeneON s 50 bp DNA Marker is composed of 11 individual DNA fragments which are redissolved in storage buffer. Description: The 50 bp DNA Ladder was designed for precise qualitative and approximately quantification of DNA mass. There are no unspecific bands besides the fragments. For easy use the 500bp fragment is used a reference band. Usage: 1 µg/lane Concentration: 0,2 µg/µl Storage Buffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1.0 mm EDTA, 50mM NaCl Loading dye: No dye Number of bands and approx. DNA Mass: base pairs DNA mass ng Loading: max. 1.2 µg/lane in % Agarose. We recommend to add the loading dye in amount 1/10 from the DNA Ladder volume bp DNA Leiter 50 µg bp DNA Leiter 5x50µg bp DNA Ladder 50 µg bp DNA Ladder 5x50µg 12 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 13

8 50bp DNA Leiter ready-to 50bp DNA ladder ready-to Eine einzigartige Kombination von PCR Produkten und Plasmiden, die durch den Verdau mit Restriktionsenzymen hergestellt wurde. Der Fragmentbereich erstreckt sich von 50 bis 1500 Basenpaare (16 Fragmente). Zur besseren Orientierung besitzt die 200 bp und die 500 bp Bande eine höhere Intensität. Der Marker ermöglicht die qualitative Auswertung von Fragmentlängen und die quantitative Bestimmung der DNA Masse. PCR Produkte und dsdna Fragmente aus Plasmiden und extrahiert in Phenol. Lagerpuffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1mM EDTA. Anwendung: 5 µl/bande Konzentration: 0,1 µg/µl "Tracking" Farbstoffe: Ready- mit Orange G und Xylenecyanol FF Bandenanzahl: 16 Fragmente Lademenge: max. 0.8 µg pro Spur in einem % Agarosegel A unique combination of PCR products and a number of proprietary plasmids digested with appropriate restriction enzymes to yield 16 fragments, suitable for use as molecular weight standards for agarose gel electrophoresis. The DNA includes fragments ranging from 50-1,500 base pairs. The 200 and 500 base pair bands have increased intensity to serve as reference points. The approximate mass of DNA in each band is provided (0.5 μg a load) for approximating the mass of DNA in comparably intense samples of similar size. Preparation: PCR products and double-stranded DNA digested with appropriate restriction enzymes, are phenol extracted and equilibrated to 10 mm Tris-HCl (ph 8.0) and 1mM EDTA. Usage: 5 µl/lane Concentration: 0,1 µg/µl Tracking Dyes: Ready- with Orange G & Xylene cyanol FF tracking dyes Number of bands: 16 fragments Loading: max. 0.8 µg / lane in a % agarose gel bp DNA Leiter (ready-to use) 50 µg/500µl bp DNA Leiter (ready-to use) 5 x 50 µg bp Ladder (ready-to use) 50 µg/500µl bp Ladder (ready-to use) 5 x 50 µg 14 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 15

9 One-for for-all DNA Leiter ready-to One-for for-all DNA ladder ready-to Eine nicht alltägliche Kombination von PCR Produkten und mit Restriktionsenzymen geschnittenen Plasmiden. 19 Fragmente von 100 Basenpaare bis Basenpaare bietet dieser DNA Marker für den Einsatz in der Gel-Elektrophorese. Zu besseren Orientierung haben die Banden 500bp, 1500bp und 3000 bp eine erhöhte Intensität. Der Marker ermöglicht die qualitative Auswertung von Fragmentlängen und die quantitative Bestimmung der DNA Masse. PCR Produkte und dsdna Fragmente aus Plasmiden und extrahiert in Phenol. Lagerpuffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1mM EDTA. Anwendung: 5 µl/bande Konzentration: 0,172 µg/µl "Tracking" Farbstoff: Bromphenolblau Bandenanzahl: 19 Fragmente Lademenge: max. 0.8 µg pro Spur in einem % Agarosegel Description/ An unique combination of a number of proprietary plasmids digested with appropriate restriction enzymes and PCR products to yield 19 fragments, suitable for use as molecular weight standards for agarose gel electrophoresis. The DNA includes fragments ranging from ,000 base pairs. The 500, 1.5K and 3K bands have increased intensity to serve as reference points. The approximate mass of DNA in each band is provided (0.5 μg a load) for approximating the mass of DNA in comparably intense samples of similar size. Preparation: PCR products and double-stranded DNA digested with appropriate restriction enzymes, are phenol extracted and equilibrated to 10 mm Tris-HCl (ph 8.0) and 1 mm EDTA. Usage: 5 µl / lane Concentration: µg/µl Tracking Dye: Containing bromophenol blue as the tracking dye Number of bands: 19 fragments Loading: max. 0.8 µg / lane in a % Agarose Gel DNA Leiter - one for all 86 µg/500µl DNA Leiter - one for all 5 x 86 µg DNA Ladder - one for all 86 µg/500µl DNA Ladder - one for all 5 x 86 µg 16 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 17

10 100 bp DNA Leiter 100 bp DNA Marker Die 100 bp DNA Leiter von GeneON ist durch PCR Amplifikation auf Basis von Lambdaphagen-Template-DNA erstellt. Nach Amplifikation wurde die DNA gereinigt, spektroskopisch vermessen und in den angegebenen Mengen in den Marker eingesetzt. Der DNA Marker besteht aus 10 Banden. Der Marker wird für die präzise qualitative Größenbestimmung von doppelsträngiger DNA eingesetzt. Es kann annäherungsweise die DNA Masse ermittelt werden. Zur einfachen Orientierung hat das 500 bp Fragment eine höhere Intensität. Anwendung: 1 µg/bande Konzentration: 0,2 µg/µl Lagerpuffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1.0 mm EDTA, 50mM NaCl Ladepuffer: Nicht in der Lieferung enthalten. Bandenanzahl: 10 Fragmente Fragmente und ungefähre DNA Masse: Basenpaare DNA Masse ng Lademenge: max. 1.2 µg (2-6 µl) pro Spur in % Agarose. Wir empfehlen die Verwendung von 1/10 des Ladepuffers im Verhältnis zur DNA Leiter bp DNA Ladder 50 µg/250 µl bp DNA Ladder 5 x 50 µg GeneON 100 bp DNA Marker is composed of 10 individual DNA fragments which are redissolved in storage buffer. The 100 bp DNA Ladder has a number of proprietary plasmids which are digested to completion with appropriate restriction enzymes to yield 10 bands suitable for use as molecular weight standards for agarose gel electrophoresis. The 100 bp DNA Ladder was designed for precise qualitative and approximately quantification of DNA mass. There are no unspecific bands besides the fragments. The 500bp fragment is used a reference band. Usage: 1 µg/lane Concentration: 0,2 µg/µl Storage Buffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1.0 mm EDTA, 50mM NaCl Tracking Dye: 6X DNA Loading dye required Number of bands: 10 fragments Number of bands and approx. DNA Mass: base pairs DNA mass ng Loading: max. 1.2 µg/ lane in % Agarose. We recommend to add the loading dye in amount 1/10 from the DNA Ladder volume bp DNA Ladder 50 µg/250 µl bp DNA Ladder 5 x 50 µg 18 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 19

11 100bp DNA Marker PLUS 100 bp DNA Marker PLUS Die 100 bp Plus DNA Leiter von GeneON ist durch PCR Amplifikation auf Basis von Lambdaphagen-Template-DNA erstellt. Nach Amplifikation wurde die DNA gereinigt, spektroskopisch vermessen und in den angegebenen Mengen in den Marker eingesetzt. Der DNA Marker besteht aus 11 Banden. Der Marker wird für die präzise qualitative Größenbestimmung von doppelsträngiger DNA eingesetzt. Es kann annäherungsweise die DNA Masse ermittelt werden. Zur einfachen Orientierung hat das 500 bp Fragment eine höhere Intensität. Anwendung: 1 µg/bande Konzentration: 0,2 µg/µl Lagerpuffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1.0 mm EDTA, 50mM NaCl Ladepuffer: Nicht in der Lieferung enthalten. Bandenanzahl: 11 Fragmente Fragmente und ungefähre DNA Masse: Basenpaare DNA Masse ng Lademenge: max. 1.2 µg (2-6 µl) pro Spur in % Agarose. Wir empfehlen die Verwendung von 1/10 des Ladepuffers im Verhältnis zur DNA Leiter GeneON 100 bp DNA PLUS Marker is composed of 11 individual DNA fragments which are re-dissolved in storage buffer. The 100 bp PLUS DNA Ladder has a number of proprietary plasmids which are digested to completion with appropriate restriction enzymes to yield 10 bands suitable for use as molecular weight standards for agarose gel electrophoresis. The 100 bp PLUS DNA Ladder was designed for precise qualitative and approximately quantification of DNA mass. There are no unspecific bands besides the fragments. The 500bp fragment is used a reference band. Usage: 1 µg/lane Concentration: 0,2 µg/µl Storage Buffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1.0 mm EDTA, 50mM NaCl Tracking Dye: 6X DNA Loading dye required Number of bands: 11 fragments Number of bands and approx. DNA Mass: base pairs DNA mass ng Loading: max. 1.2 µg/ lane in % Agarose. We recommend to add the loading dye in amount 1/10 from the DNA Ladder volume bp Plus DNA Leiter, ohne Farbstoff 50 µg/250 µl bp Plus DNA Leiter, ohne Farbstoff 5 x 50 µg bp DNA Ladder PLUS, no stain 50 µg/250 µl bp DNA Ladder PLUS, no stein 5 x 50 µg 20 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 21

12 100bp PlusBlue DNA Leiter 100 bp PlusBlue DNA Ladder Die 100 bp PlusBlue DNA Leiter von GeneON ist durch PCR Amplifikation auf Basis von Lambdaphagen-Template-DNA erstellt. Nach Amplifikation wurde die DNA gereinigt, spektroskopisch vermessen und in den angegebenen Mengen in den Marker eingesetzt. Der DNA Marker besteht aus 11 Banden und ist "ready-", da er optimal mit Bromphenolblau gemischt ist. Der Marker wird für die präzise qualitative Größenbestimmung von doppelsträngiger DNA eingesetzt. Es kann annäherungsweise die DNA Masse ermittelt werden. Zur einfachen Orientierung hat das 500 bp und 1000 bp Fragment eine höhere Intensität. Sofort einsatzbereit durch den Farbstoff Bromphenolblau. Anwendung: max. 1,0 µg/bande Konzentration: 0,1 µg/µl Lagerpuffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1.0 mm EDTA, 50mM NaCl, Bromphenolbau Fragmente und ungefähre DNA Masse: Basenpaare x x DNA Masse ng The DNA marker consists of proprietary plasmids which are digested to completion with appropriate restriction enzymes to yield 11 bands suitable for use as molecular weight standards for agarose gel electrophoresis. The digested DNA includes fragments ranging from base pairs. The 500 bp fragment and the 1000 bp fragment are present at increased intensity to allow easy identification. All fragments are blunt-ended. The 100 PLUS DNA marker was designed for precise qualitative and approximately quantification of DNA mass. There are no unspecific bands besides the fragments. Usage: max. 1.0 µg/lane Concentration: 0,1 µg/µl Storage Buffer/Tracking Dye: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0); 50 mm NaCl; 1 mm EDTA, pre-mixed with optimal blue tracking dye Number of bands: 11 and approx. DNA Mass: base pairs x x DNA mass ng Loading: max. 1.0 µg/ lane in % Agarose Ladepuffer: max. 1.0 µg/bande in % Agarose bp PlusBlue DNA Leiter, ready to use 50 µg/500 µl bp PlusBlue DNA Leiter, ready to use 5 x 50 µg bp DNA PlusBlue Ladder, ready to use 50 µg/500µl bp DNA PlusBlue Ladder, ready to use 5x50 µg 22 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 23

13 1000bp/1kb DNA Leiter 1000 bp/1 kb DNA Marker Die 1000 bp DNA Leiter von GeneON ist durch PCR Amplifikation auf Basis von Lambdaphagen-Template-DNA erstellt. Nach Amplifikation wurde die DNA gereinigt, spektroskopisch vermessen und in den angegebenen Mengen in den Marker eingesetzt. Der DNA Marker besteht aus 13 Banden. Der Marker wird für die präzise qualitative Größenbestimmung von doppelsträngiger DNA eingesetzt. Es kann annäherungsweise die DNA Masse ermittelt werden. Zur einfachen Orientierung haben die Banden: 500 bp, 1000bp und 3000bp eine höhere Intensität. Anwendung: 1 µg pro Bande Konzentration: 0,2 µg/µl Lagerpuffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1.0 mm EDTA, 50mM NaCl Ladepuffer: Nein Bandenanzahl: 13 Fragmente Fragmente und ungefähre DNA Masse: Basenpaare DNA Masse ng Lademenge: max. 1.2 µg (2-6 µl) pro Spur in % Agarose. Wir empfehlen die Verwendung von 1/10 des Ladepuffers im Verhältnis zur DNA Leiter bp / 1 kb DNA Marker from GeneON is composed of 13 individual DNA fragments which are re-dissolved in storage buffer. The 1000 bp/1 kb DNA Ladder has a number of proprietary plasmids which are digested to completion with appropriate restriction enzymes to yield 13 bands suitable for use as molecular weight standards for agarose gel electrophoresis. The 1000 bp / 1 kb DNA Ladder was designed for precise qualitative and approximately quantification of DNA mass. There are no unspecific bands besides the fragments. The 500 bp, 1000 bp and 3000 bp fragment are used as reference band. Usage: 1 µg/lane Concentration: 0,2 µg/µl Storage Buffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1.0 mm EDTA, 50mM NaCl Tracking Dye: 6X DNA Loading dye required Number of bands: 13 fragments Number of bands and approx. DNA Mass: base pairs DNA mass ng Loading: max. 1.2 µg/ lane in max. 2.0 % Agarose. We recommend to add the loading dye in amount 1/10 from the DNA Ladder volume bp (1kb) DNA Leiter 50 µg/250 µl bp (1kb) DNA Leiter 5 x 50 µg bp / 1 kb DNA Ladder 50 µg/250 µl bp / 1 kb DNA Ladder 5 x 50 µg 24 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 25

14 1000bp/1kb DNA Leiter Blue 1000bp/1kb DNA Ladder Blue Die 1000 bp DNA Leiter von GeneON ist durch PCR Amplifikation auf Basis von Lambdaphagen-Template-DNA erstellt. Nach Amplifikation wurde die DNA gereinigt, spektroskopisch vermessen und in den angegebenen Mengen in den Marker eingesetzt. Der DNA Marker besteht aus 13 Banden und ist "ready-", da er optimal mit Bromphenolblau gemischt ist. Der Marker wird für die präzise qualitative Größenbestimmung von doppelsträngiger DNA eingesetzt. Es kann annäherungsweise die DNA Masse ermittelt werden. Zur einfachen Orientierung haben die Banden: 500 bp, 1000bp und 3000bp eine höhere Intensität. Anwendung: max. 1 µg/bande Konzentration: 0,1 µg/µl Lagerpuffer: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1.0 mm EDTA, 50mM NaCl, Bromphenolblau Ladepuffer: Nein Bandenanzahl: 13 Fragmente Fragmente und ungefähre DNA Masse: Basenpaare DNA Masse ng Lademenge: max. 1.2 µg (5-12 µl) pro Spur in % Agarose. Wir empfehlen die Verwendung von 1/10 des Ladepuffers im Verhältnis zur DNA Leiter bp (1kb) DNA Leiter BLUE 50 µg/500 µl bp (1kb) DNA Leiter BLUE 5 x 50 µg 1kb ladder BLUE from GeneON is composed of 13 individual DNA fragments which are re -dissolved in storage buffer. The 1 kb ladder BLUE is a pre-mixed, ready-to-load molecular weight marker containing a dye which serves as visual aids to monitor the progress of migration during agarose gel electrophoresis. The DNA marker consists of proprietary plasmids which are digested to completion with appropriate restriction enzymes to yield 13 bands suitable for use as molecular weight standards for agarose gel electrophoresis that range in size from 250 to base pairs. The bp and bp fragments have increased intensity relative to the other bands on ethidium bromide-stained agarose gels and serve as reference indicators. All fragments are blunt-ended. Usage: max. 1 µg/lane Concentration: 0,1 µg/µl Storage Buffer/Tracking Dye: 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1.0 mm EDTA, 50mM NaCl, optimized blue loading dye Number of bands: 13 fragments Number of bands and approx. DNA Mass: base pairs DNA mass ng Loading: max. 1.0 µg/ lane in max. 2.5 % Agarose bp / 1kb DNA Ladder BLUE 50 µg/500 µl bp / 1kb DNA Ladder BLUE 5 x 50 µg 26 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 27

15 RNA Ladder RNA Ladder LowRange RNA Ladder HighRange RNA Ladder LowRange ready RNA Ladder HighRange ready

16 RNA Leiter LowRange RNA Ladder LowRange Die RNA Leiter eignet sich für die qualitative und quantitative Bestimmung von RNA. Geeignet sind Agarose- und Polyacrylamidgele, die mit Ethidiumbromid oder Sybr-Green II eingefärbt sind. Mischung aus 7 RNA Transkripten aufgenommen in 1 mm EDTA (ph 6,0) als Lagerpuffer. Einsatz findet der RNA Marker in nativen oder denaturierten Agarosegelen (1,7-2,5 %) oder in Polyacrylamidgelen (4-8 %) und kann mit Ethidiumbromid eingefärbt werden. Konzentration: 0,5 mg RNA/ml 2X Tracking Farbstoff: 95 % Formamid, % SDS, % Bromphenolblau, % Xylenecyanol, 0.025% Ethidiumbromid, 0.5 mm EDTA Lagerpuffer: 1 mm EDTA (ph 6.0) Banden: , 800, 600, 400, 300, 200 und 100 Basen Qualitätstests: Frei von Ribonukleasen Bestimmung der RNA Spektralphotometrie Frei von unspezifischer RNA und NTP's Hinweis: Es sollte das gleiche Volumen an RNA-Proben und Marker aufgetragen werden. Die Proben dafür mit 2x Ladepuffer und DEPC-Wasser verdünnen. Zusätzlich muss die Konzentration des Ladepuffers in allen Proben und im Marker gleich sein. Alle Komponenten sollten immer frisch angesetzt werden. Wir empfehlen alle zum Ansatz benötigten Materialien mit DEPC zu behandeln. Alle Vorsichtsmaßnahmen beim Umgang mit RNA und Farbstoffen müssen Beachtung finden! Verkauf nur in Deutschland! RNA Leiter LowRange, b 5 x 10 µg RNA Leiter LowRange, b 15 x 10 µg The ladder is designed for qualitative and quantitative analysis of RNA on agarose gels with ethidium bromide or Sybr-Green II as dyes. Description: Mixture of 7 RNA transcripts from specific templates including λ-sequences and a fragment of the ptz19r poly linker, re-dissolved in 1 mm EDTA (ph 6.0). The RNA-Ladder is suitable for the analysis of RNA in native or denatured agarose gels ( %) and polyacrylamide gels (4 8 %) and can be stained by ethidium bromide. Concentration: 0.5 mg RNA/ml 2X RNA Tracking dye: 95 % formamide, % SDS, % bromphenol blue, % xylene cyanol, 0.025% ethidium bromide and 0.5 mm EDTA Storage Buffer: 1 mm EDTA (ph 6.0) Number of bands: , 800, 600, 400, 300, 200 and 100 bases Quality control/results: Absence of ribunucleases Determination of RNA concentration by spectralphotometer free of degraded RNA and NTP's Note: RNA is sensitive to degradation by ribonuclease. Working with any RNA Ladder of GeneOn all components have to be prepared fresh. All required tools and consumables should be treated with e.g. diethyl pyrocarbonate. Protect your hands with resistant gloves and your eyes with goggles! Sale only in Germany! RNA Ladder LowRange, b 5 x 10 µg RNA Ladder LowRange, b 15 x 10 µg 30 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 31

17 RNA Leiter HighRange RNA Ladder HighRange Die RNA Leiter eignet sich für die qualitative und quantitative Bestimmung von RNA. Geeignet sind Agarose- und Polyacrylamidgele, die mit Ethidiumbromid oder Sybr-Green II eingefärbt sind. Mischung aus 8 RNA Transkripten aufgenommen in 20 mm K-Acetat-Puffer (ph 4.5) als Lagerpuffer. Einsatz findet der RNA Marker in nativen oder denaturierten Agarosegelen (0,8-2 %) oder in Polyacrylamidgelen (3-6 %) und kann mit Ethidiumbromid eingefärbt werden. Konzentration: 500 ng/µl 2X Tracking Farbstoff (inklusive): 95 % Formamid, % SDS, % Bromphenolblau, % Xylenecyanol, 0.025% Ethidiumbromid, 0.5 mm EDTA 1X Ladepuffer (inklusive): 10 mm K-Acetate (ph 4.5), 47.5 % formamide, % SDS, % bromophenol blue, % xylene cyanol, % ethidium bromide und 0.25 mm EDTA Lagerpuffer: 1 mm EDTA (ph 6.0) Banden: , 4000, 3000, 2000, 1500, 1000, 500 und 200 Basen. Qualitätstests: Frei von Ribonukleasen Bestimmung der RNA durch Spektralphotometrie Frei von unspezifischer RNA und NTP's Hinweis: Verkauf nur in Deutschland! The ladder is designed for qualitative and quantitative analysis of RNA on agarose gels with ethidium bromide or Sybr-Green II as dyes. Description: Mixture off 8 RNA transcripts from specific templates, among others some λ-sequences and one part of the ptz19r poly linker, supplied in 1x Loading buffer. The RNA-Ladder is suitable for the analysis of RNA in native or denatured Agarose gels and can be stained by ethidium bromide. The RNA-Ladder is suitable for the analysis of RNA in native or denatured agarose gels (0.8-2 %) and can be stained by ethidium bromide. Concentration: 0.5 mg RNA/ml 2X RNA Tracking dye (included): 95 % formamide, % SDS, % bromphenol blue, % xylene cyanol, 0.025% ethidium bromide and 0.5 mm EDTA 1X Loading buffer (included): 10 mm K-Acetate (ph 4.5), 47.5 % formamide, % SDS, % bromophenol blue, % xylene cyanol, % ethidium bromide and 0.25 mm EDTA Storage Buffer: 1 mm EDTA (ph 6.0) Number of bands: , 4000, 3000, 2000, 1500, 1000, 500 and 200 bases Quality control/results: Absence of ribunucleases Determination of RNA concentration by spectralphotometer free of degraded RNA and NTP's Note: Sale only in Germany! RNA Leiter High Range, b 5 x 10 µg RNA Leiter High Range, b 15 x 10 µg RNA Ladder HighRange, b 5 x 10 µg RNA Ladder HighRange, b 15 x 10 µg 32 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 33

18 RNA Leiter LowRange ready-to RNA Ladder LowRange ready-to Die RNA Leiter eignet sich für die qualitative und quantitative Bestimmung von RNA. Geeignet sind Agarose- und Polyacrylamidgele, die mit Ethidiumbromid oder Sybr-Green II eingefärbt sind. Mischung aus 7 RNA Transkripten und anderen Sequenzen sowie dem ptz19r Poly- Linker in 1X Ladepuffer gelöst. Einsatz findet der RNA Marker in nativen oder denaturierten Agarosegelen (1,7-2,5 %) oder in Polyacrylamidgelen (4-8 %). Konzentration: 0,25 mg RNA/ml 1X Ladepuffer: 10 mm K-Acetat (ph 4.5), 47.5 % Formamid, % SDS, % Bromphenolblau, % Xylencyanol, % Ethidiumbromid und 0.25 mm EDTA 2X Ladepuffer: 95 % Formamid, % SDS, % Bromphenolblau, % Xylenecyanol, 0.025% Ethidiumbromid, 0.5 mm EDTA Lagerpuffer: 1 mm EDTA (ph 6.0) Banden: , 800, 600, 400, 300, 200 und 100 Basen Qualitätstests: Frei von Ribonukleasen Bestimmung der RNA Spektralphotometrie Frei von unspezifischer RNA und NTP's Hinweis: Verkauf nur in Deutschland! The ladder is designed for qualitative and quantitative analysis of RNA on agarose gels with ethidium bromide or Sybr-Green II as dyes. Description: Mixture of 7 RNA transcripts from specific templates including λ-sequences and a fragment of the ptz19r poly linker, re-dissolved in 1 mm EDTA (ph 6.0). The RNA-Ladder is suitable for the analysis of RNA in native or denatured agarose gels ( %) and polyacrylamide gels (4 8 %) and can be stained by ethidium bromide. The ladder is supplied in 1X Loading buffer and is ready-. Concentration: 0.25 mg RNA/ml 2X RNA Tracking dye (included): 95 % formamide, % SDS, % bromphenol blue, % xylene cyanol, 0.025% ethidium bromide and 0.5 mm EDTA 1X Loading buffer (included): 10 mm K-Acetate (ph 4.5), 47.5 % formamide, % SDS, % bromophenol blue, % xylene cyanol, % ethidium bromide and 0.25 mm EDTA Storage Buffer: 1 mm EDTA (ph 6.0) Number of bands: , 800, 600, 400, 300, 200 and 100 bases Quality control/results: Absence of ribunucleases Determination of RNA concentration by spectralphotometer free of degraded RNA and NTP's Note: Sale only in Germany! RNA Ladder LowRange, b, ready- 5 x 40 µl RNA Ladder LowRange, b, ready- 15 x 40 µl RNA Ladder LowRange, b, ready- 5 x 40 µl RNA Ladder LowRange, b, ready- 15 x 40 µl 34 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 35

19 RNA Leiter HighRange ready-to RNA Ladder HighRange ready-to Die RNA Leiter eignet sich für die qualitative und quantitative Bestimmung von RNA. Geeignet sind Agarose- und Polyacrylamidgele, die mit Ethidiumbromid oder Sybr-Green II eingefärbt sind. Mischung aus 8 RNA Transkripten und anderen Sequenzen sowie dem ptz19r Poly- Linker in 1X Ladepuffer gelöst. Einsatz findet der RNA Marker in nativen oder denaturierten Agarosegelen (0,8-1,5 %) oder in Polyacrylamidgelen (4-8 %). Konzentration: 0,25 mg RNA/ml 1X Ladepuffer: 10 mm K-Acetat (ph 4.5), 47.5 % Formamid, % SDS, % Bromphenolblau, % Xylencyanol, % Ethidiumbromid und 0.25 mm EDTA 2X Ladepuffer: 95 % Formamid, % SDS, % Bromophenolblau, % Xylenecyanol, 0.025% Ethidiumbromid, 0.5 mm EDTA Lagerpuffer: 1 mm EDTA (ph 6.0) Banden: , 4000, 3000, 2000, 1500, 1000, 500 und 200 Basen Qualitätstests: Frei von Ribonukleasen Bestimmung der RNA Spektralphotometrie Frei von unspezifischer RNA und NTP's Hinweis: Verkauf nur in Deutschland! RNA Ladder HighRange, b, ready- 5 x 40 µl RNA Ladder HighRange, b, ready- 15 x 40 µl The ladder is designed for qualitative and quantitative analysis of RNA on agarose gels with ethidium bromide or Sybr-Green II as dyes. Description: Mixture of 7 RNA transcripts from specific templates including λ-sequences and a fragment of the ptz19r poly linker, re-dissolved in 1 mm EDTA (ph 6.0). The RNA-Ladder is suitable for the analysis of RNA in native or denatured agarose gels (0.8-1,5 %) and polyacrylamide gels (4 8 %) and can be stained by ethidium bromide. The ladder is supplied in 1X Loading buffer and is ready-. Concentration: 0.25 mg RNA/ml 2X RNA Tracking dye (included): 95 % formamide, % SDS, % bromophenol blue, % xylene cyanol, 0.025% ethidium bromide and 0.5 mm EDTA (The 2X RNA Loading Dye contains a denaturing agent formamide. When samples are treated with this agent, RNA molecules separate according to their size both on native and denaturing agarose gels.) 1X Loading (storage) buffer: 10 mm potassium acetate (ph 4.5), 47.5 % formamide, % SDS, % bromophenol blue, % xylene cyanol, % ethidium bromide and 0.25 mm EDTA Storage Buffer: 1 mm EDTA (ph 6.0) Number of bands: , 4000, 3000, 2000, 1500, 1000, 500 und 200 bases Quality control/results: Absence of ribunucleases Determination of RNA concentration by spectralphotometer free of degraded RNA and NTP's Note: Sale only in Germany! RNA Ladder HighRange, b, ready- 5 x 40 µl RNA Ladder HighRange, b, ready- 15 x 40 µl 36 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 37

20 Protein Ladder Protein Ladder US7 unstained, 7 bands Protein Ladder PS10 prestained, 10 bands Plus Protein Ladder PS11 prestained, 11 bands XXL Protein Ladder prestained, DeLuxe, 10 bands

21 Protein Leiter US7 ungefärbt, 7 Banden Protein Ladder US7 unstained,, 7 bands Der Protein Marker besteht aus 7 hochaufgereinigten Proteinen. Er kann direkt auf ein SDS Gel aufgetragen werden. Die exakt definierten Banden können nach der Elektrophorese mit Coomassie Brilliant Blue R-250 sichtbar gemacht werden. Lagerpuffer/Ladepuffer: 62.5 mm Tris-HCl (ph 7.0, 25 C), 1 mm EDTA, 2 % SDS, 50 mm DTT, 30 mm NaCl,1 mm NaN 3, 0.01 % Bromphenolblau und 50 % Glyzerin Konzentration: 0,1-0,2 mg/ml der genannten Proteine Banden: , 18.4, 25.0, 35.0, 45.0, 66.2, kda Ladevolumen Minigel: 5 µl (0,75 mm), 10 μl/spur bei 1,5 mm Standardgel: 10 µl (0,75 mm); 20 μl/spur bei 1,5 mm Hinweis: Protein-Marker ist optimal für Auftrennungen in 12 %igen SDS-PAGE- Gelen (37.5:1 Acrylamid:Bisacrylamid) geeignet. Bei Auftrennungen in 8- bis 15%igen Gelen können die unteren Markerbanden mit der Farbstofffront laufen, während sie bei 12- bis 15 %igen Gelen und Gradientengelen einzeln sichtbar sind. Der Marker wurde für die Färbung mit Coomassie Brilliant Blue R-250 optimiert, kann jedoch auch mit anderen Färbemethoden (z.b. Silber-Färbung) sichtbar gemacht werden. Da diese Methode 10- bis 100fach sensitiver ist als die Coomassie-Färbung, sollte die Menge an aufgetragenem Marker reduziert werden. Da der Marker 2 % SDS enthält, sollte er für die Molekulargewichtsbestimmung auf nativen Polyacrylamidgelen nicht verwendet werden. The Protein Marker US7 is a mixture of 7 purified proteins which are re-dissolved 'ready-to -use' in loading buffer. The proteins resolve into 7 sharp bands in the range of 14.4 kda to kda when analysed by SDS-PAGE and stained with optimized dye. Usage: Mini gel application: 5 10 μl/well Standard gel application: μl/well Storage Buffer/Tracking Dye: 62.5 mm Tris-HCl (ph 7.0, 25 C), 1 mm EDTA, 2 % SDS, 50 mm DTT, 30 mm NaCl, 1 mm NaN 3, 0.01 % bromophenol blue and 50 % glycerol Concentration: mg/ml each protein Number of bands: , 18.4, 25.0, 35.0, 45.0, 66.2, kda Recommended loading volumes Mini Gel: 5 µl/0.75 mm; 10 µl/1,5 mm Standard Gel: 10 µl/0.75 mm; 20 µl/1.5 mm Note: Protein Marker US7 is optimized for runs on 12 % SDS polyacrylamide gels. 8 to 10 % gels may cause proteins with low molecular weights to migrate with the dye front. On 12 to 15 % and gradient gels all bands are visible. The marker is optimized for use with Coomassie Brilliant Blue R- 250, but can also be used with other gel staining methods (e.g. silver staining etc.). As this method is 10 to 100 times more sensitive than Coomassie Blue staining the amount of marker applied should be decreased accordingly. Protein Marker US7 contains 2 % SDS and is therefore not recommended to be used in native polyacrylamide gels for determining native molecular weights of proteins Protein Marker US7 ( kda) * 2 x 1 ml Protein Marker US7 ( kda) 5 x 1 ml Protein Marker US7 ( kda) * 2 x 1 ml Protein Marker US7 ( kda) 5 x 1 ml 40 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 41

22 Protein Leiter PS10 gefärbt, 10 Banden Protein Ladder PS10 prestained, 10 bands Der Protein Marker besteht aus 10 hochaufgereinigten Proteinen. Er kann direkt auf ein SDS Gel aufgetragen werden. Die exakt definierten Banden können nach der Elektrophorese mit Coomassie Brilliant Blue R-250 sichtbar gemacht werden. Die 40 kb und 90 kb Bande ist zur besseren Orientierung mit einem 2. Farbstoff eingefärbt. Anwendung: Überwachung von Proteinmigration während SDS-Gelelektrophorese Überwachung von Proteintransfer auf Membranen während Western Blots Größenbestimmung von Proteinen auf SDS-Polyacrylamidgelen und Western Blots. Banden: 10 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 90,130, 175 kda Ladevolumen Minigel: 10 µl (0,75 mm), 5 μl/blot Standardgel: 20 µl (0,75 mm); 10 μl/blot Hinweis: Die Protein-Leiter ist optimal für Auftrennungen in 4 20 %- igen SDS-PAGE-Gelen geeignet. Bei Auftrennungen in 8 bis 10 %igen Gelen können die unteren Markerbanden mit der Farbstofffront laufen. Kovalent gebundene Farbstoffe beeinflussen das Laufverhalten von Proteinen. Der Protein- Marker ist deshalb nur für ungefähre Molekulargewichtsbestimmungen geeignet. Jedes Lot des Markers wird gegen einen ungefärbten Standard getestet. Da der Marker 2 % SDS enthält, sollte er für die Molekulargewichtsbestimmung auf nativen Polyacrylamidgelen nicht verwendet werden. The Protein Marker PS10 is a mixture of 10 purified proteins which are re-dissolved 'ready -' in loading buffer. The proteins resolve into 10 sharp bands in the range of kda when analyzed by SDS-PAGE and stained with optimized dyes. The marker is ready. There is no need to boil. Applications Monitoring of protein migration during SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Monitoring of protein transfer onto membranes during Western blotting. Sizing of proteins on SDS-polyacrylamide gels and Western blots. Usage: Mini gel application: 10 μl/well; 5 µl per well blots Standard gel application: 20 μl/well; 10 µl per well for blots Number of bands: 10 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 90,130, 175 kda Note: Protein Marker PS10 is optimized for runs on 12 % SDS polyacrylamide gels. 8 to 10 % gels may cause proteins with low molecular weights to migrate with the dye front. On 12 to 15 % and gradient gels all bands are visible Protein Marker PS10 ( kda) 2x 500 µl Protein Marker PS10 ( kda) 10 x 500 µl Protein Marker PS10 ( kda) 2 x 500 µl Protein Marker PS10 ( kda) 10 x 500 µl 42 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 43

23 Plus Protein Leiter PS11 gefärbt, 11 Banden Plus Protein Ladder PS11 prestained, 11 bands Der Protein Marker besteht aus 11 hochaufgereinigten Proteinen. Er kann direkt auf ein SDS Gel aufgetragen werden. Die exakt definierten Banden können nach der Elektrophorese mit Coomassie Brilliant Blue R-250 sichtbar gemacht werden. Die 10 kb, 40 und 90 kb Bande ist zur besseren Orientierung mit einem 2. Farbstoff eingefärbt. Anwendung: Überwachung von Proteinmigration während SDS-Gelelektrophorese Überwachung von Proteintransfer auf Membranen während Western Blots Größenbestimmung von Proteinen auf SDS-Polyacrylamidgelen und Western Blots Banden: , 14, 22, 29, 42, 51, 62, 70, 95, 130, 175 kda Ladevolumen Minigel: 5 µl (0,75 mm), 2,5 μl/blot Standardgel: 10 µl (0,75 mm); 5 μl/blot Hinweis: Protein-Marker ist optimal für Auftrennungen in 12 %igen SDS-PAGE-Gelen (37.5:1 Acrylamid: Bisacrylamid) geeignet. Bei Auftrennungen in 8- bis 15%igen Gelen können die unteren Markerbanden mit der Farbstofffront laufen, während sie bei 12- bis 15 %igen Gelen und Gradientengelen einzeln sichtbar sind. Der Marker wurde für die Färbung mit Coomassie Brilliant Blue R-250 optimiert, kann jedoch auch mit anderen Färbemethoden (z.b. Silber-Färbung) sichtbar gemacht werden. Da diese Methode 10- bis 100fach sensitiver ist als die Coomassie-Färbung, sollte die Menge an aufgetragenem Marker reduziert werden. Da der Marker 2 % SDS enthält, sollte er für die Molekulargewichtsbestimmung auf nativen Polyacrylamidgelen nicht verwendet werden. Protein Marker PS11 contains 11 proteins that resolve into sharp, tight bands in the range of kda. The Protein Ladder allows to monitor molecular weight separation during electrophoresis, estimate molecular weights The marker is ready-. There is no need to boil. Easy to identify: includes the ~10, ~40 and ~90 kda reference bands coupled with an blue dye Applications Monitoring of protein migration during SDS-polyacrylamide gel electrophoresis Monitoring of protein transfer onto membranes during Western blotting Sizing of proteins on SDS-polyacrylamide gels and Western blots Usage: Mini gel application: 5 μl/well; 2.5 µl per well blots Standard gel application: 10 μl/well; 5 µl per well for blots Number of bands: , 14, 22, 29, 42, 51, 62, 70, 95, 130, 175 kda Note: Protein Marker PS11 is optimized for runs on 15 % SDS polyacrylamide gels. 4 to 12 % gels may cause proteins with low molecular weights to migrate with the dye front. On 12 to 15 % and gradient gels all bands are visible Protein Marker PS11 ( kda) 1 x 500 µl Protein Marker PS11 ( kda) 5 x 500 µl Protein Marker PS11 ( kda) 1 x 500 µl Protein Marker PS11 ( kda) 5 x 500 µl 44 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 45

24 XXL Protein Leiter gefärbt, 10 Banden XXL Protein Ladder prestained, 10 bands Der Protein-Marker XXL DeLuxe ist eine Mischung aus 10 rekombinant in E.coli hergestellten und hochaufgereinigten Proteinen im Größenbereich von etwa 10 kda bis 260 kda, aufgenommen 'ready-' in Ladepuffer. Er kann somit direkt auf SDS- Polyacrylamidgele aufgetragen werden. Die RNA Leiter verwendet vier Farbstoffe (siehe Gelbild).). Bei der Verwendung bilden sich scharf definierte Banden, die ohne zusätzliche Färbung sichtbar sind. Der Protein Marker ist bestens geeignet zur ungefähren Größenbestimmung von unbekannten Proteinen und zur Kontrolle und Beobachtung während der SDS-PAGE oder des Western Transfers. Anwendung: Überwachung von Protein Migration während SDS-Gelelektrophorese Überwachung von Protein Transfer auf Membranen während Western Blots Größenbestimmung von Proteinen auf SDS-Polyacrylamidgelen und Western Blots Lademenge: Minigel (0,75mm): 5 μl/spur; 5 µl/blot Standardgel: 10 μl/well; 10 µl/blot Ladepuffer: 62.5 mm Tris-H 3 PO 4 (ph 7.5, 25 C), 1 mm EDTA, 2 % SDS, 10 mm DTT, 1 mm NaN 3 und 33 % Glyzerin Banden: , 135, 95, 72, 52, 42, 34, 26, 17, 10 kda Hinweis: Protein-Marker XXL Deluxe ist optimal für Auftrennungen in 4 20 %igen SDS-PAGE-Gelen geeignet. Bei Auftrennungen in 8 bis 10 %igen Gelen können die unteren Markerbanden mit der Farbstofffront laufen. Kovalent gebundene Farbstoffe beeinflussen das Laufverhalten von Proteinen. Die Protein-Leiter VI ist deshalb nur für ungefähre Molekulargewichtsbestimmungen geeignet. Da der Marker 2 % SDS enthält, sollte er für die Molekulargewichtsbestimmung auf nativen Polyacrylamidgelen nicht verwendet werden Protein Marker XXL DeLuxe ( kda) 2 x 250 µl Protein Marker XXL DeLuxe ( kda) 10 x 250 µl Protein Marker XXL DeLuxe is a mixture of 10 coloured proteins. These proteins are recombinantly produced in E.coli, highly purified and supplied 'ready to use' in loading buffer. The protein concentrations are optimized to yield well-defined bands directly visible in SDS-polyacrylamide gels. The marker is ready-. There is no need to boil. Applications Monitoring of protein migration during SDS-polyacrylamide gel electrophoresis Monitoring of protein transfer onto membranes during Western blotting Sizing of proteins on SDS-polyacrylamide gels and Western blots Usage: Mini gel application: 5 μl/well; 2.5 µl per well blots Standard gel application: 10 μl/well; 5 µl per well for blots Loading buffer: 62.5 mm Tris-H 3 PO 4 (ph 7.5, 25 C), 1 mm EDTA, 2 % SDS, 10 mm DTT, 1 mm NaN 3, 33% glycerol Number of bands: , 135, 95, 72, 52, 42, 34, 26, 17 and 10 kda Note: The protein marker can be used for approximate size estimation of unknown proteins, however for precise determination of molecular weights the use of 'unstained' protein markers is recommended. The prestained marker is well suited for monitoring the progression of the gel run and the Western transfer efficiency. Protein Marker XXL DeLuxe is optimized for runs on 4-20 % SDS polyacrylamide gels. 8 to 10 % gels may cause proteins with low molecular weights to migrate with the dye front. Covalently coupled chromophores affect protein mobility. The prestained marker protein marker should be used only for approximate molecular weight determination. Each batch of prestained protein marker is calibrated against unstained standards; apparent molecular weight is shown in the graph. Protein Marker XXL DeLuxe contains 2 % SDS and is therefore not recommended to be used in native polyacrylamide gels for determing native molecular weights of proteins Protein Marker XXL DeLuxe ( kda) 2 x 250 µl Protein Marker XXL DeLuxe ( kda) 10 x 250 µl 46 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 47

25 DNA Sizer/Marker Classic λ-dna/hindiii Digest (ready-) λ-dna/ecori Digest (ready-) λ-dna/ecori/hindiii Digest (ready-) λ-dna/styi Digest (ready-) λ-dna/psti Digest (ready-) λ-dna/bsteii Digest (ready-) pbr322 DNA/HinfI Digest (ready-) puc19 DNA/HpaII (BsiSI)

26 λ-dna/hindiii verdaut, ready-to λ-dna/hindiii Digest, ready-to Ready- geliefert in 6X Ladepuffer Phagen-DNA (c1857 Sam 7) wurde vollständig mit HindIII verdaut, phenolextrahiert, alkoholgefällt und anschließend in 10 mm Tris-HCl (ph 8.0), 1 mm EDTA und in 6X Ladepuffer aufgenommen. Der Marker ist ready-. Lademenge: 0,5 µg/spur Konzentration: 0.2 µg/µl Banden: *, 9416, 6557, 4361*, 2322, 2027, 564, 125. Quantifizierung: Das Gelbild zeigt die Verteilung der Banden und die DNA Menge bei der Verwendung von 0,5 µg Marker. Es sollte das gleiche Volumen an DNA und Marker aufgetragen werden. Zusätzlich muss die Konzentration des Ladepuffers in allen Proben und im Marker gleich sein. Ethidiumbromid wandert während des Gellaufes entgegengesetzt zur DNA, so dass die Ethidiumbromidverteilung im Gel nicht mehr gleichmäßig ist. Um dennoch eine gleichmäßige Verteilung des Ethidiumbromids zu gewährleisten, sollte dem verwendeten Elektrophoresepuffer ebenfalls 0.5 mg/l Ethidiumbromid zugefügt oder überhaupt erst nach dem Lauf gefärbt werden. Hinweis: Die Enden (kohäsive 12 b 'cos sites' des Bakteriophagen l) der beiden bp und 4361 bp großen Fragmente können 'annealen' und eine zusätzliche Bande bilden. Durch Erhitzen des Markers auf 65 C (5 Min) und anschließendes Abkühlen auf Eis (3 Min) können die Fragmente wieder getrennt werden Phagen Lambda DNA HindIII 2 x 100 µg Phagen Lambda DNA HindIII 5 x 100 µg Supplied in 6X Loading buffer The HindIII digest of phage-dna yields the following 8 discrete fragments. Lambda DNA was completely digested by HindIII, phenol extracted, ethanol precipitated, dissolved in 10 mm Tris-HCl (ph 8.0) and 1 mm EDTA. The marker is ready-. Usage: 0,5 µg/lane Concentration: 0.2 µg/µl Number of bands: *, 9416, 6557, 4361*, 2322, 2027, 564, 125. Quantification: See the graph for the percentage of the bands and the amount of DNA per band in ng, relating to 0.5 μg loaded marker. Use the same volume of DNA and marker. Additionally the concentration of loading buffer in samples and marker should be equal. Note: The ends (cohesive 12 b 'cos sites' of bacteriophage l) of the bp and the 4361 bp fragment can anneal and compose an additional band. This fragment can be separated by heating the marker to 65 C (5 min) and subsequent cooling on ice (3 min). Ethidium bromide migrates contrarily to the DNA during electrophoresis. Therefore the distribution of ethidium bromide in the gel is not constant. To ensure equal distribution of ethidium bromide in the gel add 0.5 mg/l ethidium bromide to electrophoresis buffer or dye the gel after the run Phage Lambda DNA HindIII 2 x 100 µg Phage Lambda DNA HindIII 5 x 100 µg 50 P h o n e : w w w. g e n e o n. n e t 51

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