Angewandte Zellbiologie

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1 Angewandte Zellbiologie Bt-BZ01: Pflanzenzellen als Bioreaktoren 8 CP (VL + Pr) MENDEL (VL) HÄNSCH (Pr) Bt-BZ02: Zellbiologie der Tiere I 8 CP (VL + Pr) BUCHBERGER WINTER (VL) VAUTI (Pr) Bt-BZ03: Zellbiologie der Tiere II 7 CP (VL + VL) VL: Methoden der Zellbiologie ROTHKEGEL VL: Zellarchitektur KÖSTER Seminar

2 Angewandte Zellbiologie Molekularbiologie in jedem Modul enthalten anwendungsbezogene Grundlagenforschung Relevanz von Biomedizin bis biotechnolog. Wertstoff-Produktion transgene Tiere (fu r Grundlagen- und biomedizin. Fragen) transgene Pflanzen (fu r Grundlagenfragen und zur Wertstoff-Produktion

3 Angewandte Zellbiologie Bt-BZ01: Pflanzenzellen als Bioreaktoren 8 CP (VL + Pr) MENDEL (VL) HÄNSCH (Pr) Bt-BZ02: Zellbiologie der Tiere I 8 CP (VL + Pr) BUCHBERGER WINTER VAUTI Bt-BZ03: Zellbiologie der Tiere II 7 CP (VL + VL) VL: Methoden der Zellbiologie ROTHKEGEL VL: Zellarchitektur KÖSTER Seminar

4 BZ01: Pflanzenzellen als Bioreaktoren Vorlesung: Prof. Dr. Ralf R. Mendel Inst. f. Pflanzenbiologie Zelltechnologie Gentransfer in Pflanzen(zellen) Marker u. Reportergene knock down (antisense, RNAi) und knock out Pflanzen-Promoteren confokale Laserscanning Mikroskopie Protein-targeting in Zellorganellen Recombinante Proteine in Pflanzen pflanzliche Biotechnologie

5 Steriles Arbeiten! In vitro-gewebekultur

6 Zellkulturen in Flüssigmedium Schüttel-Inkubator Glaskolben mit Zellsuspension

7 Gentransfer 1. Gen 2. Transfer-Methode

8 Gentransfer 3. Selektiver Marker 4. Regeneration (Zelltechnologie)

9 Arten des Gentransfers

10 Helium Gun und Selektion von Transformanten

11 Transitpeptid ( As.; wird angespalten!) Chlp. Mito. Perox. Targetingsequenz (wird nicht angespalten!)

12 Laserscanning Mikroskopie

13 Plastiden u. Peroxisomen Endoplasmatisches Reticulum

14 Wertstoff-Farming Neuropeptide Plastik Antikörper Wachstumshormone Vakzine Pharmarohstoffe Kosmetikrohstoffe etc. etc

15 Angewandte Zellbiologie Bt-BZ01: Pflanzenzellen als Bioreaktoren 8 CP (VL + Pr) MENDEL - HÄNSCH Bt-BZ02: Zellbiologie der Tiere I 8 CP (VL + Pr) BUCHBERGER WINTER (VL) VAUTI (Pr) Bt-BZ03: Zellbiologie der Tiere II 7 CP (VL + VL) VL: Methoden der Zellbiologie ROTHKEGEL VL: Zellarchitektur KÖSTER Seminar

16 Zellbiologie der Tiere I Buchberger Winter - Vauti Die Vorlesung vermittelt die molekularen Grundlagen der: - Zellzykluskontrolle - Signalerzeugung und Signalübertragung - Bedeutung von Signalen in der Entwicklung multizellulärer Organismen - Signale und Tumorbiologie

17 Praktische Ausbildung Nachweise molekularer Interaktionen in lebenden Zellen Herstellung von und Umgang mit Stammzellen Anwendung tierischer Stammzellen in vitro und in vivo Blastocyst-Injection Aggregation

18 Targeted mutagenesis in ES cells

19 Generate mouse mutants to unravel gene functions Syndactyly

20 Angewandte Zellbiologie Bt-BZ01: Pflanzenzellen als Bioreaktoren 8 CP (VL + Pr) MENDEL - HÄNSCH Bt-BZ02: Zellbiologie der Tiere I 8 CP (VL + Pr) HOLZ - BUCHBERGER - WINTER Bt-BZ03: Zellbiologie der Tiere II 7 CP (VL + VL) VL: Methoden der Zellbiologie ROTHKEGEL VL: Zellarchitektur KÖSTER Seminar

21 Modul Bt-BZ03 Vorlesung: Methoden der Zellbiologie Kultivierung von Zellen Zelltypen & Gewebe Proliferation & Differenzierung Wachstumsfaktoren Zell-Zell- & Zell-Matrix-Adhäsion Zellmigration Zellzyklus Charakteristika Analyse der Phasen Kontrollpunkte Synchronisation von Zellen Kontaminationen in der Zellkultur Mycoplasmen Konsequenzen für die Zellkultur Nachweismethoden

22 Antikörper in der Zellbiologie Aufbau, Klassifizierung, Funktion Herstellung poly- & monoklonaler Antikörper Nachweisreaktionen Epitopkartierung mittels PepScan-Membranen Immunfluoreszenz- & Immunogold-Techniken ELISA, Immunpräzipitation, FACS Proteine Aufbau und Eigenschaften Nachweisverfahren Gelelektrophorese-Techniken Western Blot (Immunblot) F = 4/3 r 3 ( P M ) 2 r Zellfraktionierung Grundlagen der Zentrifugation Partikeleigenschaften Zentrifugationstypen Form (Dichte Partikel Dichte Medium) Winkelbeschleunigung

23 Mikroskopische Techniken Grundlagen der Mikroskopie Lichtmikroskopie & Kontrastverfahren Fluoreszenzmikroskopie LSM,TIRF, FRAP Elektronenmikroskopie REM, TEM Transfektion tierischer Zellen Vektoren Transfektionsmethoden Reportergene & Nachweis RNA-Interferenz Potein-Protein-Interaktionen Fluorescence Resonance Energy Transfer Bimolecular Fluorescence Complementation Yeast/Mammalian Two Hybrid System Sos Recruitment, Split-Ubiquitin Tandem Affinity Purification

24 BtBz03 Zellarchitektur (intrazellulär) Was passiert in der Zelle zur Regulation ihrer Architektur und Transport? 1) Zytoskelett Aufbau und Struktur: Mikrofilamente Mikrotubuli Intermediärfilamente 2) Motorproteine Aufbau und Funktion: Mikrofilamente Mikrotubuli Intermediärfilamente 3) Kontraktilität und Transport: Cargo-Beladung Transportrichtung Versorgung nach Bedarf

25 BtBz03 Zellarchitektur (interzellulär) Wie interagiert die Zelle mit ihrer Umgebung? Vor Ort bleiben oder Wandern? 4) Umgebung Aufbau und Kontakt: extrazelluläre Matrix Versorgungsspeicher Stabilität und Elastizität 5) Adhäsion und Zell-Zell-Kontakte: Kontakte mit der extrazellulären Matrix Kontakte von Zellen untereinander Adhäsion und Signaltransduktion 6) Polarität und Migration: Kommunikation von aussen nach innen Migrationsrichtung koordinierter Transport von Organellen