Differentialdiagnostik autoimmuner ZNS-Erkrankungen Teil 1 paraneoplastische Syndrome und Neuromyelitis optica Dr. rer. nat. Jasmin Aldag AG
Autoimmun- Neuropathie Myasthenie- Syndrom Autoimmun- Enzephalitis Zerebelläre Syndrome Antikörper-assoziierte Syndrome Erkrankungen mit Demyelinisierung Stiff-Person- Syndrom
Autoantikörper in der Neurologie Intrazelluläre Antigene Hu, Yo, Ri, CV2, Ma, SOX1, Zic4, ANNA-3, PCA-2, GAD Zelloberflächen-/Synapsenantigene NMDAR, AMPAR, GABA B R, VGKC, LGI1, CASPR2, mglur1, mglur5, GlyR, DPPX, D2R, AQP4, Tr, AChR Abbildung modifiziert nach Lancaster and Dalmau, Nat Review Neurol 2012
Paraneoplastische neurologische Syndrome (PNS) Erkrankungen des ZNS und PNS, die in unmittelbarem Zusammenhang mit einem Tumorleiden auftreten. Nicht direkt durch den Tumor, seine Metastasen oder Therapie und Bestrahlung verursacht.
Klinische Bedeutung paraneoplastischer Syndrome Antikörper können bis zu 5 Jahre vor einem Tumornachweis auftreten Regelmäßige Tumorsuche mittels PET-Scan (2-4/Jahr für 4 Jahre) erforderlich Wikipedia Ziel: Frühzeitige (kurative) chirurgische Resektion des Tumors
Paraneoplastische neurologische Syndrome - Gut charakterisierte onconeuronale Antikörper - anti-hu (ANNA-1) anti-yo (PCA-1) anti-ri (ANNA-2) anti-amphiphysin anti-cv2 (CRMP5) anti-ma1 (PNMA1) anti-ma2/ta (PNMA2) anti-recoverin SCLC, Neuroblastom Ovar, Mamma, Uterus Mamma, SCLC Mamma, SCLC SCLC, Thymom Mamma, Various Testis SCLC Graus et al., J. Neurol. Neurosurg. 2004; Leypold et al., Akt Neurol 2012
Paraneoplastische neurologische Syndrome - Teilcharakterisierte onconeuronale Antikörper - anti-tr (PCA-Tr) anti-zic4 anti-sox-1 (AGNA) anti-pca-2 anti-anna-3 Hodgkinlymphom, NHL SCLC SCLC SCLC SCLC Wahrscheinlichkeit für Tumor bei positivem Befund: >95% Graus et al., J. Neurol. Neurosurg. 2004; Leypold et al., Akt Neurol 2012
Klassische Paraneoplastische Syndrome Subakute sensorische Neuronopathie (25%) Subakute Kleinhirndegeneration (25%) Enzephalomyelitis (11%) Limbische Enzephalitis (10%) Opsoklonus-Myoklonus Syndrom (2%) Hu, Amphiphysin, CV2, Ma Hu, Yo, CV2, Ma, Ri, Tr, Amphiphysin etc. Hu, CV2, Amphiphysin, Ma Hu, Ma, CV2 etc. Ri, Hu, Ma, NMDAR Leypold et al., Akt Neurol 2012
Laboratoriumsdiagnostik von Antikörpern gegen intrazelluläre Antigene
Paraneoplastische neurologische Syndrome - Strategie zur Antikörperbestimmung - Methoden: Indirekte Immunfluoreszenz Westernblot, Linienblot Yo (PCA-1) Zielsetzung: Nachweis und Bestätigung paraneoplastischer Antikörper Graus et al., J. Neurol. Neurosurg. 2004; Leypold et al., Akt Neurol 2012
Paraneoplastische neurologische Syndrome - Strategie zur Antikörperbestimmung - 1.) Indirekter Immunfluoreszenztest: Färbemuster auf neuronalem Gewebe Primatenkleinhirn Amphiphysin Hu, Ri Ma Yo CV2
Amphiphysin CV2 PNMA2 Ri Yo 2.) Bestimmung der Reaktivität mit den spezifischen Zielantigenen: Membran-basierte Testsysteme (Linienblot, Westernblot) Hu Recoverin SOX Titin Zic4 GAD65 Tr Control Befundbericht: Immer Ergebnis der IIFT und Blotuntersuchung berücksichtigen!
Empfehlungen zur Diagnostik eines PNS
Leitlinien der DNG zur Diagnostik eines PNS Aktuelle Neurologie 2012; 39: 60 73
Laboranforderung: Serum oder Liquor? Serum: Hu, Yo, Ri, Ma, CV2, Amphiphysin, Recoverin, SOX1, Zic4, Tr, PCA-2, ANNA-3 Intrazelluläre-Antigene Liquor und Serum: NMDAR, GABA B R, AMPAR, LGI1, CASPR2, GAD Oberflächen-Antigene
Neuromyelitis Optica (NMO) Rezidivierende entzündliche Erkrankung, die zur Zerstörung der schützenden Nervenummantelung der Sehnerven und des Rückenmarks führt. C C A Eugène Devic (1858-1936)
Neuromyelitis Optica (NMO) Rezidivierende entzündliche Erkrankung, die zur Zerstörung der schützenden Nervenummantelung der Sehnerven und des Rückenmarks führt. akute Sehstörungen (Erblindung) Muskelschwäche bzw. Lähmung Kontrollverlust von Darm- und Harnblase C C A Eugène Devic (1858-1936)
Neuromyelitis Optica (NMO) Patienten mit NMO sprechen auf Plasmapherese und immunosuppressive Medikamente an! C C A Eugène Devic (1858-1936) B
Neuromyelitis Optica (NMO) Patienten mit NMO sprechen auf Plasmapherese und immunosuppressive Medikamente an! C C A Autoantikörper Marker: NMO-IgG (Lennon et al. 2004), gerichtet gegen Eugène Devic (1858-1936) Aquaporin-4 (AQP-4) (Lennon et al 2005). B Überarbeitete diagnostische Kriterien für NMO (Wingerchuk et al. 2006) geben den Antikörpern eine bedeutende Rolle.
Identifizierung von Autoantikörpern bei NMO mittels indirekter Immunfluoreszenz Immunofluorescence pattern of bound NMO-IgG in mouse CNS Lennon et al., Lancet 2004
Laboratoriumsdiagnostik von Antikörpern gegen AQP4/ NMO-IgG
Recombinant Cell IIFT (RC-IIFT) Synthese von DNS Insertion ins Plasmid Antigen DNS Plasmid mit DNS Transfektion von Zellen Bestimmung von Aak mit IIFT Expression des Antigens Transfizierte Zelle
Serologische Diagnose von NMO NMO-IgG: (Muster) Anti-AQP-4: HEK (rek. AQP4) Sehnerv Kleinhirn HEK Sensitivität NMO (Wingerchuk-Kriterien): 78% (RC-IFT), 73% (IHC) Spezifität (vs. MS, ADEM, SLE etc.): 100%
Aquaporin-4: Testsysteme P.J. Waters, V.A. Lennon, A. Vincent et al. Neurology 2012 Serumproben: - 35 NMO - 25 NMO Spektrum-Erkrankungen (NMOSD) - Kontrollen: 39 schubförmig remittierende MS, 25 verschiedene autoimmune Erkrankungen, 22 gesunde Blutspender Sechs Testmethoden: Tested at Mayo Clinic IIF for NMO-IgG (in house) ELISA for AQP4 (RSR) FIPA-M (in house) CBA-E () Tested at Oxford University FIPA-O (in house) CBA-O (in house) FACS CBA-E ()
Aquaporin-4: Testsysteme P.J. Waters, V.A. Lennon, A. Vincent et al. Neurology 2012 Cohort n IIFT FACS CBA-O CBA-E ELISA FIPA-M/ FIPA-O NMO 35 17 25 24 21 18 16/ 16 NMOSD 25 12 21 20 20 18 16/ 16 Sensitivity 60 48.3% 76.7% 73.3% 68.3% 60.0% 53.3% Controls 86 0 0 0 0 0 2/ 0 Specificity 86 100% 100% 100% 100% 100% 97.7%/ 100% Assays basierend auf AQP4 transfizierten HEK293 Zellen zeigten die besten Sensitivitäten! CBA-E eignet sich sehr gut als Test für die Routinediagnostik!
Laboranforderung: Serum oder Liquor? Serum: Hu, Yo, Ri, Ma, CV2, Amphiphysin, Recoverin, SOX1, Zic4, Tr, PCA-2, ANNA-3 Intrazelluläre-Antigene AQP4 Oberflächen-Antigen
Zusammenfassung o Diagnostikstrategie: klassische PNS Antikörper IIFT (Gewebe) und Immunblot Antikörper gegen AQP4 IIFT (RC-IIFT (oder Gewebe)) o Untersuchungsmaterial: Serum (klassische PNS Ak, AQP4) Liquor und Serum (GAD)
Zusammenfassung o Antineuronale Ak können mit verschiedenen neurologischen Syndromen assoziiert sein o Ak gegen klassische intrazelluläre Antigene sind oft das erste Anzeichen eines zugrundeliegenden Tumors o Serologische Differenzierung prognostisch schlechterer NMO von klassischer MS mittels Anti-AQP4
Danke für Ihre Aufmerksamkeit