Sapoviren Bedeutung in Deutschland
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- Sabine Langenberg
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1 Sapoviren Bedeutung in Deutschland Marina Höhne Robert Koch-Institut, Berlin Konsiliarlabor für Noroviren , REMMDI 2015
2 Ursachen von Gastroenteritiden in Deutschland, 2001 bis Labor-bestätigte Meldungen, (Übermittlungen nach IfSG) Norovirus Rotavirus Shigellose Giardiasis Kryptosporidien E. coli sonst. Yersiniose Campylobacter Salmonellen
3 Ursachen von Gastroenteritiden in Deutschland, 2001 bis % Labor-bestätigte Meldungen, (prozentualer Anteil) 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% Norovirus Rotavirus Shigellose Giardiasis Kryptosporidien E. coli sonst. Yersiniose Campylobacter Salmonellen 10% 0%
4 Familie Caliciviridae 5 Genera 5 weitere Genera vorgeschlagen: Bavo-, Naco-, Reco-,Valo-, Secav.
5 Sapoviren - Historie erstmalig 1976 in GB in Stuhlproben mittels EM 1982 Prototyp aus GE Ausbruch in Sapporo/ Japan, Sapporo-like virus 1993 erste vollständige NS-Sequenz (Manchester, UK) weltweite Verbreitung zunächst überwiegend als Ursache sporadischer Fälle hauptsächlich bei Kindern zunehmend Nachweise auch bei Ausbrüchen aller Altersgruppen (Kindereinrichtungen, Krankenhäuser, Pflegeheimen, Restaurants, Kreuzfahrtschiffe) z.b. > 600 Fälle in Japan 2010 durch kontaminierte Lunch-Boxen
6 Sapovirusinfektion Klinik: Inkubationszeit: 1-4 Tage fäkal-orale Transmission (Mensch-zu Mensch, kontaminierte Lebensmittel/Wasser, Oberflächen) akute Gastroenteritis starke Übelkeit plötzlich einsetzendes Erbrechen (schwallartig) abdominale Krämpfe einige Tage wässrige Diarrhoe selten Fieber i.d.r. selbstlimitierend Virusausscheidung bei Immunkompetenten 1 4 Wochen Diagnostik aus Stuhlproben real-time PCR RT/PCR ELMI Therapie: symptomatisch Substitution Wasser/Elektrolyt
7 Vergleich Sapoviren-Noroviren Oka et al. Clin. Microbiol. Rev. 2015;28:32-53 Morphologie: nicht umhüllt, typische icosaedrische Calicivirus-Struktur (cup-shaped), 180 Kapsidproteine bilden Kapsid Durchmesser: nm nm Dichte: 1,36 1,41 g/cm 3 1,31 g/cm 3 Stabilität: ph 3 8 ph 3-7
8 Genomvergleich Sapoviren - Noroviren Norovirus 5 Kapsid (VP1) 3 VPg p37 NTPase p20 VPg 3C pro 3D pol VP2 ORF 1 ORF2 ORF3 Poly A Sapovirus 5 VPgp11 p28 NTPase p32 VPg 3C pro 3D pol Kapsid (VP1) ORF 1 VP2 ORF2 3 Poly A Genom: lineare ss-rna, positiver Orientierung ca. 7,1 7,7 kb, 3 -term poly A, 2 ORF 5 Genogruppen: GI, II, IV u. V humane SaV, GIII porcine SaV bisher 17 humane Genotypen (GI.1-7; GII.1-7; GIV; GV.1-2) humane SaV nicht kultivierbar
9 Nachweis Sapoviren real time RT-PCR Sapovirus Typisierung 5 3 VPg p11 p28 NTPase p32 VPg 3C pro 3D pol Kapsid (VP1) ORF 1 VP2 ORF2 Poly A Primer, Sonden für Nachweis humane SaV GI, II, IV u. V (modifiziert nach Oka T., J Med Virol. 2006)
10 Multiplex real time RT-PCR Sapoviren positive Patientenproben (VIC) interne MS2-RNA-Kontrolle (Cy5)
11 Sapoviren in Deutschland Zwischen November 2006 und Dezember 2008 retrospektiv 414 Stuhlproben aus NV neg. Ausbrüchen untersucht 38 Sapovirus positive Proben aus 19 Gastroenteritisausbrüchen SaV pos. Patienten 27 % zwischen Jahre alt 73 % zwischen 1-14 Jahre alt 67 % Kindergärten/Schulen 15 % Picknickgruppe 9 % Familie 3 % Krankenhaus
12 number of cases copies/ ml Genotypverteilung SaV positiver Proben in Deutschland, (Polymerase-Gen) 38 SaV pos (19 Ausbrüche), aus 3 Genogruppen (I, II, V), versch. Genotypen überwiegend in den Wintermonaten unknown V II.2 II.1 I.5 I.2 I n = 31 median 10 7 Kopien/ml Stuhlsusp. (zw und Kop./ml) zwischen November 2007 und Januar 2009 erhöhte Sapovirus Aktivität in Niederlanden, Schweden, Slowenien und Ungarn (GI.2)
13 Sapoviren - Gastroenteritisausbruch Juli 08: 36 h nach Grillparty in Rheinland-Pfalz bei 30/50 Gästen Symptome einer Gastroenteritis auf (Diarrhöe, Erbrechen, Bauchkrämpfe, kein Fieber) nach 12 h überwiegend keine Symptome mehr, 1 Patient hospitalisiert keine bakteriellen Gastroenteritiserreger, virale Erreger nicht getestet wahrscheinliche Ursache: Büchsenbier, gekühlt in Wasser aus nahe gelegenem Fluss Ort der Grillparty: unterhalb eines Klärwerksabflusses In Proben des Flusswassers: E.coli O78, O58 (Verotoxin neg) Norovirus neg., 5/5 Stuhlproben Sapovirus positiv
14 Anzahl Fälle Nachweis von Sapoviren in Deutschland, 2006 bis Jan Apr Jul Okt Jan Apr Jul Okt Jan Apr Jul Okt Jan Apr Jul Okt Jan Apr Jul Okt Jan Apr Jul Okt Jan Apr Jul Okt Jan Apr Jul Okt Jan Apr Jul Okt I.1 I.2 I.5 II.1 II.2 IV V I.2/II.4 II.P2/II.4 II.P2/IV unknown - Genotypen aus Genogruppe I, II, IV und V plus rekombinante Genotypen - durchschnittlich 2,5 % SaV positiv : 9% SaV positiv, : 1,5% SaV positiv
15 Vorkommen intra-und intergenogruppen-rekombinanten GIII GV GII.1 GII.2 GIII GII.3 GII.2 GII.1 GII.4 GI.5 GV GIV GI.1 GI.3 GI.2 GI.2 GI.1 GI.5 Polymerase-Gen Kapsid-Gen
16 Rekombinationsort Katayama K. et al., Emerging Infectious diseases 2004, 10; 1874
17 Zusammenfassung große genetische Variabilität der in Deutschland zirkulieren SaV nachgewiesen (4 Genogruppen) Nachweis von Intra und Intergenogruppen-Rekombinanten erhöhte SV-Aktivität 2007/2008 in Deutschland und Europa In Deutschland : 38/414 (9%) SV positiv, 19 Ausbrüche : 38/2557 (1,5%), überwiegend sporadisch multiplex real-time RT-PCR erfasst alle bisher bekannten hu SaV Genotypen
18 Danke!
19
20 SaV-Ausbruch Oktober 2008 Ober-Österreich 33 Patienten/Personal einer Rehabilitationsklinik erkrankt Alter 20 bis 81 Jahre alle Proben NV negativ, Österreich. Agentur f. Gesundheit u. Ernährungssicherheit (AGES) Graz, schickt Proben ins KL NV 9/10 Stuhlproben SaV pos.
21 Genogroup and genotypes of GI, GII, GIII, GIV, and GV sapovirus strains based on complete VP1 nucleotide sequences. Tomoichiro Oka et al. Clin. Microbiol. Rev. 2015;28:32-53
22 Comparative phylogenetic analysis of sapoviruses based on complete RdRp and VP1 nucleotide sequences. Tomoichiro Oka et al. Clin. Microbiol. Rev. 2015;28:32-53
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