Gießener Kleintierabend Lymphknotenzytologie

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1 Klinikum Veterinärmedizin Klinik für Kleintiere klinische Laboratoriumsdiagnostik und Pathophysiologie Prof. Dr. A. Moritz Justus-Liebig-Universität Gießen Gießener Kleintierabend Lymphknotenzytologie Constanze Leuser Resident ECVCP Lymphknotenzytologie Indikation: klinisch vergrößerte Lymphknoten Differenzierungi Entzündung lokal Wunden etc. systemisch Pyodermie Leishmaniose Hyperplasie chronische immunologische Stimulation Tumor Metastasen 1

2 Objektträger mit Mattrand Bleistift Feinnadelaspiration Zubehör 5 Spritze Theo (Organ) Kanülen schwarz (Ø 22 gauge x 1,5) gelb (Ø 20 gauge x 1,5) Feinnadelaspiration Technik 1) mit Aspiration Einführen der Kanüle Vakuum erzeugen (5-6 ml Markierung) Vakuum aufheben Nadel entfernen 2) ohne Aspiration (Ausstanzen) Einführen der Kanüle 8-10 x Vor- und Zurückbewegen der Nadel Nadel entfernen Vorteil: weniger Blutkontamination 2

3 Ausstrichtechnik 1) wie Blutausstrich 2) Squash preparation 1 2 cave: nicht zu viel Druck Lufttrocknen der Ausstriche Färbungen May-Grünwald-Giemsa (Pappenheim) Diff Quik Wright Neu Methylenblau Papanicolaou 3

4 Allgemeine Beurteilung I Färbung Präparat auswertbar? Ausstrichqualität Allgemeine Beurteilung II Organ getroffen? Fettgewebe statt Lymphknoten 4

5 normaler Lymphknoten überwiegend: kleine reife Lymphozyten <15%l lymphatische h Blasten vereinzelt: Plasmazellen neutrophile Granulozyten eosinophile Granulozyten Entzündung eosinophile Lymphadenitis > 5% eosinophile Granulozyten allergische Ursachen parasitäre Ursachen Hypereosinophilensyndrom paraneoplastisches Syndrom (Mastzelltumor/) 5

6 Entzündung eosinophile Lymphadenitis > 5% eosinophile Granulozyten Entzündung purulente Lymphadenitis > 10% neutrophile Granulozyten bakterielle Infektion immunvermittelte Erkrankungen Neoplasie 6

7 Entzündung purulente Lymphadenitis > 10 % neutrophile Granulozyten Entzündung granulomatöse Lymphadenitis > 30% Makrophagen Pilzinfektion Leishmaniose Protothekose Mycobakteriose Vaskulitis Hämosiderose 7

8 Entzündung granulomatöse Lymphadenitis > 30% Makrophagen reaktive Hyperplasie Zytologie normales Zellbild oder: erhöhter Anteil an Plasmazellen / lymphatischen Blasten 8

9 Tumor Metastasen Mastzelltumormetastase Tumor Metastasen Melanommetastase 9

10 Tumor Metastasen Plattenepithelkarzinommetastase Tumor > 50% lymphatische Blasten 10

11 prognostische Einschätzung: Staging Staging (Einteilung in Stadien): Stadium I: einzelner Lymphknoten betroffen Stadium II: mehrere Lymphknoten (1 Seite Zwerchfell) Stadium III: Lymphknoten generalisiert betroffen Stadium IV: Stadium III und Hepato- / Splenomegalie Stadium V: Knochenmark betroffen e Substadium a: asymptomatisch Substadium b: symptomatisch prognostische Einschätzung: Staging Knochenmarkinfiltration mit lymphatischen Blasten lymphatische Leukämie 11

12 prognostische Einschätzung: Differenzierung T-Zell oder B -Zell-? morphologische Differenzierung: Größe der lymphatischen Blasten Menge und Färbung des Zytoplasmas Chromatinstruktur Nukleoli immunologische Differenzierung: B - Zell Marker: CD 79b T - Zell Marker: CD 3 morphologische Differenzierung zentroblastisch polymorphes (B-Zell) : mittelgroße Blasten feine Chromatinstruktur randständig gelegene prominente Nukleoli 12

13 morphologische Differenzierung large granular : mittelgroße bis große Blasten durchscheinendes bis basophiles Zytoplasma azurophile intrazytoplasmatische Granula morphologische Differenzierung Small clear (T-Zell): kleine Blasten ausgezogenes Zytoplasma (Handspiegelform) 13

14 immunologische Differenzierung Lymphknotenbiopsie: Kurznarkose Tru-Cut-Nadel Immunhistologie Lymphknotenzytologie minimalinvasiv Immunzytologie Immunzytologie: B-Zell-Marker CD79b 14

15 Immunzytologie: T-Zell-Marker CD3 Lymphknotenzytologie Zusammenfassung einfache Durchführung und Erlernbarkeit Diagnose: Entzündung (eosinophil / purulent / granulomatös) Hyperplasie p Tumor (primär / sekundär) 15

16 Vielen Dank für die Aufmerksamkeit! 16