Studiendesign und analytische Verfahren
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- Bernhard Reuter
- vor 5 Jahren
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1 Dr. Jochen TürkT Institut für Energieund Umwelttechnik e.v. MEWIP Abschlussveranstaltung Studiendesign und analytische Verfahren Hennef,,
2 Übersicht Studiendesign Studienablauf Analytische Methoden LC-MS/MS Bestimmung Probenahme Validierungsergebnisse IUTA - Messwerte (ohne MEWIP) Erste MEWIP - Ergebnisse Fragen und Diskussion Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 2
3 Studiendesign Konzepterstellung BGW / IUTA Fragebogen Interessensbekundung: 254 Rückmeldungen! Verwendete Substanzen Festlegung der untersuchten Substanzen, eines Statistik - Instituts: IMSIE, Probenanzahl und Probenahmeorte, Studienteilnehmer (von 100 auf 130 erhöht) Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 3
4 Fragebogen 1: Zytostatikaeinsatz und Analytik 5 - FU 95% Pt-Zytostatika 86% Cyclophosphamid 76% Gemcitabin 65% Irinotecan Epirubicin Docetaxel Paclitaxel 51% 49% 46% 46% Doxorubicin 43% Etoposid 32% Vinorelbin 29% MTX Vincristin 24% 23% Cytarabin Bendamustin 14% 13% Fludarabin 11% Ifosfam id Mitoxantron Bleom ycin Treosulfan Topotecan Dacarabin Vinoblastin Ganciclovir Melphalan Zoledronsäure Vinotecan Pamidronsäure Foscarnet Na 6% 4% 2% 2% 2% 1% 1% 1% 1% 1% 1% 1% 9% LC-MS/MS Multimethode: MEWIP - Substanzen ICP-MS-Analytik (aus Kostengründen nicht möglich) Nur Einzelstoffanalytik, daher nicht Studienbestandteil Analysenverfahren (noch nicht) vorhanden Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 4 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 10 Zubereitung nach Wirkstoffnamen (ohne Verbrauchsmengenangabe) [ % ]
5 Probenahmeort 1: Arbeitsfläche Vorgabe: Am häufigsten benutzte Arbeitsfläche auswählen! Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 5
6 Probenahmeort 2: Fußboden Vorgabe: Fußboden vor der Zytostatikawerkbank auswählen! Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 6
7 Probenahmeort 3: KühlschranktK hlschranktür Vorgabe: Vorderseite des Kühlschranks (inkl. Türgriff) auswählen! Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 7
8 Studienablauf Projektphasen Zeitraum Partner Jahr Quartal II III IV I II III IV I II III IV 1.Phase: Kontakt zu Apotheken, 1. Fragebogen IUTA, (BGW, IMSIE) 2. Phase: Auswertung 1. Fragebogen IUTA, (BGW, IMSIE) 3. Phase: Vorarbeiten und Erstellung des Versuchsplans BGW, IUTA, IMSIE 4. Phase: Kick-Off- Veranstaltungen BGW, (IUTA, IMSIE) 5. Phase: 2. Fragebogen, Interview, Monitoring IUTA, (BGW, IMSIE) 6. Phase: Auswertung, Rückmeldung an die Apotheken IUTA, IMSIE (BGW) 7. Phase: Erarbeitung von Handlungsanleitungen BGW, IUTA 8. Phase: Abschlussbericht, Abschlussveranstaltung, Publikationen (bis 7/08) BGW, IUTA, IMSIE Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 8
9 Tätigkeiten der Interviewer Terminabsprache mit den Apotheken Besuch der Apotheken Aufnahme des 2. Fragebogens Bereitstellung der Wischprobenahme-Sets Anleitung zur Probenahme und Dokumentation Erklärung des Versandes Eingabe der Daten in eine Datenbank Die Interviewer haben keine Erläuterungen zur Studie gegeben ( BGW, IfAP, IUTA) Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 9
10 Einteilung der Apotheken in zwei Gruppen* Gruppe A: quartalsweise Wischprobennahme, Apotheken erhielten jeweils Rückmeldung mit Messergebnis; (Anzahl: 55 Apotheken) Teilnahme an allen 5 Messzyklen/Wischproben Gruppe B: Wischproben zu Beginn und am Ende der Studie, Apotheken erhielten Informationen über ihre Messergebnisse erst nach Abschluss des Monitorings; (Anzahl: 75 Apotheken) Teilnahme an 1. und 5. Messzyklus/Wischprobe * Die Einteilung erfolgte per Losverfahren mit Stratifizierung (IMSIE) nach Apothekentyp (KH/Offizin) basierend auf der vorab-auswertung des 2. Fragebogens Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 10
11 Anzahl der Wischproben und Analysenwerte Projektplanung: Gruppe A 3 Probenahmeorte x 5 Zyklen x 55 Apotheken = 825 Wischproben Gruppe B 3 Probenahmeorte x 2 Zyklen x 75 Apotheken = 450 Wischproben Projektverlauf: Summe: Wischproben eine Apotheke der Gruppe B wurde geschlossen, alle anderen Apotheken haben die Proben zurückgesandt: Wischproben Einzelwerte Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 11
12 Analytik Eingesetzte Zytostatika: ca. 95, davon ca. 25 analysierbar Stand der Zytostatika-Analytik - Einzelstoffanalytik mittels GC/MS & LC-MS/MS - Multimethoden mittels LC-MS/MS - Gesamt-Platin mittels ICP-MS oder Voltametrie - Neu: Pt-Spezies-Analytik mittels HPLC-ICP-MS Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 12
13 Analytische Bestimmung: MEWIP-Methode Methode Intensität [cps] 1,9e5 1,8e5 1,7e5 1,6e5 1,5e5 1,4e5 1,3e5 1,2e5 1,1e5 1,0e5 9,0e4 8,0e4 7,0e4 6,0e4 5,0e4 4,0e4 3,0e4 2,0e4 1,0e4 0,0 1, Zeit [min] Fluorouracil 2 Gemcitabin (3 Chlorambucil) 4 Methotrexat 5 Ifosfamid 6 Cyclophosphamid 7 Etoposid 8 Paclitaxel 9 Docetaxel 8 9 Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 13
14 Bestimmungsgrenzen IDL* [ng/ml] BG [ng/probe] BG [ng/cm 2 ] 5-Fluorouracil 0,3 9,9 0,011 Gemcitabin 0,2 6,6 0,0073 Methotrexat 0,1 3,3 0,0037 Ifosfamid 0,1 3,3 0,0037 Cyclophosphamid 0,1 3,3 0,0037 Etoposid 0,1 3,3 0,0037 Paclitaxel 0,5 17 0,018 Docetaxel 1,0 33 0,037 *IDL: Instrumentelle Nachweisgrenze Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 14
15 Probenahme I 1. Probenahme-Set auspacken 2. Dokumentationsblätter ausfüllen 3. Fläche markieren, Dokumentation 4. (Probengefäße beschriften) 5. Wischtücher aus dem PE-Gefäß entnehmen 6. 1 ml der Probenahmelösung auf ein Wischtuch geben 7. Fläche gleichmäßig in eine Richtung abwischen 8. Tuch in das Probenahmegefäß zurückgeben Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 15
16 Probenahme II Wischvorgang mit den beiden anderen Tüchern wiederholen, dabei Wischrichtung variieren! 10. Handschuhe nach jeder Probenahme wechseln 11. Nächste Probenahme durchführen (s. Punkte 4-9) 12. Gefrorenen Kühlakku zusammen mit den Proben und den Dokumentationsblättern in die Transportbox geben 13. Proben sicher verpackt und gekühlt am selben Tag per Kurierdienst an IUTA senden (ggf. über Nacht einfrieren und dann gekühlt versenden) Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 16
17 Laborwiederfindungsraten ng/probe 500 ng/probe 2000 ng/probe 5000 ng/probe WDF [%] FU Gem MTX CP IF Eto Doc Pac Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 17
18 Probenehmereinfluss (n = 28) 140 WDF [%] FU Gem MTX CP IF Eto* Doc Pac Wiederfindungsraten: Probenahme durch 28 verschiedene Personen (n=112, c= 10 ng/cm 2 ) *Etoposid: Messwerte von 13 Personen (n=50) Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 18
19 Materialeinfluss (n=9, c= 10 ng/cm 2 ) Glas Stahl Arbeitsplatte PVC lackierte Edelstahloberfläche WDF [%] FU Gem MTX CP IF Eto Doc Pac Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 19
20 Substanzstabilität t im PN-Set bei 4 C 60 1 Tag 2 Tage 7 Tage 14 Tage 28 Tage 50 Substanzabbau [%] FU Gem MTX CP IF Eto Doc Pac Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 20
21 Substanzstabilität t im PN-Set bei -18 C 30 1 Tag 2 Tage 1 Woche 2 Wochen 4 Wochen 8 Wochen 12 Wochen 25 Substanzabbau [%] FU Gem MTX CP IF Eto Doc Pac Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 21
22 Versandeinfluss auf die Labor-WDF WDF [%] h Wo 1, 24 h 48 h FU Gem MTX CP IF Eto Doc Pac Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 22
23 Einzelmessungen IUTA (ohne MEWIP) n CP 5-FU Eto MTX IF Gem Pac Doc Platin % pos Perz. 30,3 0,136 23,5 0,30 6,0 0,061 7,0 0,006 16,1 0,033 22,0 0,126 11,0 0,146 5,5 0,058 45,3 0,137 c [ng/cm 2 ] ,1 0,01 0,001 Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 23
24 Erste MEWIP - Ergebnisse 777; 61% 495; 39% negative Wischproben positive Wischproben 1669; 16% 8483; 84% negative Analysenergebnisse positive Analysenergebnisse Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 24
25 Fragen und Diskussion Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit!!! Weitere Informationen: Dr. Jochen Türk MEWIP - Abschlussveranstaltung 25
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