Blutgruppenserologische Untersuchungen und. Transfusion

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1 Teil I Ernst-Moritz-Arndt-Universität, Praktikum Transfusionsmedizin Blutgruppenserologische Untersuchungen und Transfusion Blutgruppenbestimmung, Antikörperscreening serologische Verträglichkeitsprobe (Kreuzprobe) ABO-Identitätstest ("Bedside-Test") Transfusion ggf. Nachuntersuchungen (z. B. nach Transfusionsreaktionen, D-inkompatiblen Transfusionen)

2 Antigene und Antikörper Alle Körperzellen tragen genetisch determinierte Oberflächenmerkmale. Werden diese Moleküle vom Immunsystem als fremd erkannt, bezeichnet man sie als Antigene. Antigen IgM-Antikörper IgG-Antikörper Eine spezifisch gegen Fremdantigene gerichtete Immunantwort ist die Bildung von Antikörpern.

3 1. Aufgabe: Blutgruppenbestimmung Unbekannte Antigene (Patientenerythrozyten) bekannte Antikörper (Antiserum) Erythrozytenagglutination ja nein Antigen vorhanden Antigen nicht vorhanden

4 Bestimmung der ABO-Antigene 1. Beschriftung des Filterpapiers mit Patienten-Nr. 2. Trennung des Plasmas von den Pat.erythrozyten 3. Herstellung einer 5%igen Erythrozytenaufschwemmung 4. Auftragen der Antiseren 5. Auftagen der Patientenerythrozyten Anti-A Pat.Ery Anti-B Pat.Ery Anti-AB Pat.Ery NaCl-Aufschwemmung der Pat.- erythrozyten Agglutination??

5 Bestimmung der Isoagglutinine (Serumgegenprobe) Unbekannte ABO-Antikörper (Patientenplasma) bekannte Antigene (Testerythrozyten) Anti-A Erythrozytenagglutination ja Antikörper vorhanden nein Antikörper nicht vorhanden Anti-B

6 Bestimmung der Isoagglutinine 1. Auftragen des Patientenplasmas 2. Auftragen der Testerythrozyten bekannter Blutgruppe A1- Zellen A2- Zellen B- Zellen O- Zellen Pat.- Plasma Pat.- Plasma Pat.- Plasma Pat.- Plasma Agglutination??

7 Ergebnisinterpretation Ernst-Moritz-Arndt-Universität, Praktikum Transfusionsmedizin

8 Häufigkeit in Mitteleuropa Ernst-Moritz-Arndt-Universität, Praktikum Transfusionsmedizin

9 Klinisch relevante Rhesusantigene D, C, c, [C w ], E, e dd bedeutet, daß D nicht vorhanden ist.

10 2. Aufgabe: Bestimmung des Rhesus D -Phänotyps 1. Beschriftung der Röhrchen D1 -K D2 -K Negative Kontrolle D1 K D2 K Positive Kontrolle 2. Tropfen der Antiseren D1 und D2 und Rh-Kontrolle D1 Pat. D2 Pat. Rh-contr. D1 D2

11 2. Aufgabe: Bestimmung des Rhesus D -Phänotyps 3. Tropfen der Patientenerythrozyten d-ery d-ery Negative Kontrolle Kontrollen 4. Tropfen der D-positiven Testerythrozyten 5. Tropfen der D-negativen (d)-testerythorzyten D-Ery D-Ery Positive Kontrolle Pat. Pat. Pat. D1 D2

12 2. Aufgabe: Bestimmung des Rhesus D -Phänotyps Agglutinationen?? Phenotyp?? -K -K Negative Kontrolle K K Positive Kontrolle Pat. Pat. Pat. D1 D2

13 Direkter Antihumanglobulintest = direkter Coombstest Es wird untersucht, ob in vivo eine Beladung der Patientenerythrozyten mit Antikörpern erfolgt ist. (z.b. Morbus hämolyticus neonatorum, Autoimmunhämolytische Anämie, verzögerte hämolytische Transfusionsreaktion) Antihumanglobulin (Coombsserum)

14 3. Aufgabe: Direkter Coombstest 1. Beschriftung der Röhrchen AHG1 -K AHG2 -K Negative Kontrolle 2. 1 Tropfen der Patientenerythrozyten 1 AHG1 K AHG2 K Positive Kontrolle und Tropfen der K und K- AHG1 Pat.2 AHG2 Pat.2 Testerythrozyten 4. 2 Tropfen der AHG1 Pat.1 AHG2 Pat.1 AHG-Seren 1 und 2 AHG1 AHG2

15 3. Aufgabe: Direkter Coombstest Agglutination?? AHG1 -K AHG2 -K Negative Kontrolle AHG1 K AHG2 K Positive Kontrolle AHG1 Pat.2 AHG2 Pat.2 AHG1 Pat.1 AHG2 Pat.1

16 Kreuzprobe/ Antikörperscreening Unbekannte irreguläre Antikörper (Patientenplasma) bekannte Antigene (3 Testerythrozyten) unbekannte Antigene (Spendererythrozyten) Anti-A AK-screening Kreuzprobe Erythrozytenagglutination? ja Antikörper vorhanden nein Antikörper nicht vorhanden Anti-B

17 Gel- oder Partikelkartenteste Aufbau Reaktionskammer Antihumanglobulin Gel- oder Partikelschicht Zellsediment nach Zentrifugation Verschieden starke Agglutinationen

18 Teil II Ernst-Moritz-Arndt-Universität, Praktikum Transfusionsmedizin Prätransfusionsvorbereitung auf Station Name, Vorname, Geburtsdatum beim Patienten erfragen oder mit Patientenarmband vergleichen Vergleich der Konservenbegleitdokumente: Blutgruppe Patient, Blutgruppe Konserve, Verfallsdatum der Konserve, Konserven-Nr. Durchführen des Bedside-Testes, Kompatibilität des EK sichern Transfusion starten, Patient überwachen Transfusion patientenbezogen dokumentieren, Transfusionsreaktionen berichten

19 Kompatible Konstellationen für die Transfusion von Erythrozytenkonzentraten

20 Teil III Ernst-Moritz-Arndt-Universität, Praktikum Transfusionsmedizin Gewebe-/HLA-Typisierung HLA-Typisierung Struktur und Funktion der HLA-Genprodukte Nomenklatur und Genetik HLA-Frequenzen und Kopplungsungleichgewicht Klinische Bedeutung des HLA-Systems Die klassische Methode der Gewebetypisierung Isolierung der Lymphozyten aus dem peripheren Blut Trennung von T- und B-Lymphozyten Lymphozytotox-Test Siehe Textdatei: HLA-Typisierung